耐甲氧西林金黄色葡萄球菌femA调控基因的研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的辅助基因femA是否存在调控基因,以进一步揭示其耐药机制。方法用最低抑菌浓度法（MIC）筛选对苯唑西林高耐株、低耐株、敏感株;用头孢色芬纸片法（Nitrocephin）筛选出不产β-内酰胺酶菌株;用PCR筛选出含mecA的菌株。将含mecA不产酶的高耐株、低耐株、敏感株纳入进一步研究中;PCR扩增femA及femA5？上游基因;提取细菌总蛋白;生物素标记DNA探针;滞留电泳检测调控基因。结果滞留电泳检测对苯唑西林高度耐药不产β-内酰胺酶含mecA基因菌株均出现滞留条带。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的辅助基因femA有调控基因存在。     

438株金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的 了解金黄色葡萄球菌感染的耐药情况，指导临床合理使用抗生素。方法 采用琼脂筛选法检测金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药情况，β-内酰胺酶采用产色头孢菌素法测定，药敏试验按K-B纸片扩散法进行。结果 438株金黄色葡萄球菌中，β-内酰胺酶阳性菌占401株，产酶率为91．55％，检出MRSA236株，占53．88％，β-内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌的耐药率高于阴性金黄色葡萄球菌耐药率，耐苯唑西林金黄色葡萄球菌的耐药率高于对苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌。未检出耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。 结论 金黄色葡萄球菌是临床感染的主要病原菌之一；分析金黄色葡萄球菌耐药情况，可以指导临床合理选用抗生素。     

多重聚合酶链反应用于检测、鉴定耐甲氧西林葡萄球菌的研究

目的 建立一种快速的多重聚合酶链反应(PCR)方法，用于检测葡萄球菌对甲氧西林的耐药性，同时对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的种进行鉴定。方法 对临床分离的武汉地区金黄色葡萄球菌80株。表皮葡萄球菌70株，其余凝固酶阴性葡萄球菌60株，提取其基因组DNA，针对金黄色葡萄球菌独有的femA基因，表皮葡萄球菌的种特异性序列，决定葡萄球菌对甲氧西林耐药性的mecA基因，和细菌共有的16srRNA基因的保守序列设计四对引物。同时加入PCR体系中对相应片段进行扩增。结果 在210株葡萄球菌中，mecA基因检测结果与苯唑西林敏感试验结果的一致率为96．2％。mecA基因阳性但苯唑西林敏感的5个菌株，通过由低到高浓度的苯唑西林筛选培养后。均表现出耐药性。mecA基因阴性但苯唑西林耐药的3个菌株，经过对阿莫西林-克拉维酸敏感性试验后，被证明是β-内酰胺酶的高产株。结论 此多重PCR方法不仅可以对临床分离葡萄球菌菌株的甲氧西林耐药性作出判断。同时还可以对金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌做出种的鉴定，是一种高效、敏感、特异性高的检测技术。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药表型与femB基因表达水平关系研究

目的 了解金黄色葡萄球菌femB基因表达水平与其对苯唑西林不同耐药表型的关系.方法 从临床送检标本中分离71株非重复金黄色葡萄球菌,琼脂对倍稀释法测定苯唑西林的最低抑菌浓度,产色头孢菌素纸片法测定菌株产β-内酰胺酶情况;将28株非产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌株按对苯唑西林的最低抑菌浓度分为敏感组、低耐组、高耐组,采用实...     

金黄色葡萄球菌耐药表型与femA表达水平关系研究

目的 探讨不同表型金黄色葡萄球菌femA基因的表达.方法 用琼脂对倍稀释法和产β-内酰胺酶纸片法筛选出来不同表型(苯唑西林敏感、低水平耐药、高水平耐药)、非产酶金黄色葡萄球菌临床株共15株以及瑞士捐赠的实验株4株,提取RNA,进行电泳分析及实时荧光定量PCR检测femA表达,实验株BB270的femA表达量设为100%,其他菌株值与之相比.结果 所有的菌株均检测到femA的表达,femA缺失株BB308表达量为37.82%,重组株BB586表达量为240.50%,同质性耐药株COL表达量为862.61%.4株敏感株表达量介于0.00353%～29.92%,4株低耐株表达量介于0.00554%～310%,7株高耐株表达量介于13.88%～55000%,3组间femA表达水平不全相同,苯唑西林敏感组与低水平耐药组之间femA表达量的差异无统计学意义(P1=0.83),高水平耐药组与敏感组及低水平耐药组之间femA表达量的差异均有统计学意义(P2=0.006、P3=0.01)).结论 非产酶金黄色葡萄球菌femA的表达水平在甲氧西林高水平耐药组中高于低水平耐药组和敏感组,femA是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌高水平耐药表达的必需因子.     

41株金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的：了解从中日友好医院临床分离出的金黄色葡萄球菌的耐药状况。方法：对41株金黄色葡萄球菌进行药敏试验并对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）作β－内酰胺测试，然后进行耐药分析。结果：41株金黄色葡萄球菌中有35株MRSA，占85．4％；有6株对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA），占14．6％。所有样本对呋西地酸、呋喃妥因、原始霉素、替考拉宁和万古霉素耐药率均为0；MRSA对24种抗生素的耐药率均在50％以上，其中耐药率为100％的有16种；而MSSA对抗生素耐药率超过50％的只有7种，耐药率为0的有20种；金黄色葡萄球菌的产β－内酰胺酶的产酶率为63．4％，MRSA和MSSA产酶率分别为60％和83．3％。结论：该院MRSA检出率非常高，其对万古霉素、呋西地酸、呋喃妥因、原始霉素和替考拉宁非常敏感；β－内酰胺酶的产酶率MSSA高于MRSA。     

金黄色葡萄球菌的分布及耐药性研究

目的为金黄色葡萄球菌临床合理用药提供参考。方法对186株金黄色葡萄球菌进行药敏试验计分析。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MBSA）检出率为73．4％,万古霉素100％敏感,未发现耐药,MESA对阿莫西林／克拉维酸、头孢噻肟．苯唑西林,青霉素均100％耐药,MESA中利福平的敏感率39．8％。MSSA中左氧沙星,利福平,复方新诺明、环丙沙星的耐药率均保持在较低水平。MESA与MSSA对青霉素．苯唑西林、阿奇霉素,庆大霉素,复方新诺明,环丙沙星的耐药性差异具有显著性（P〈0．05）。结论金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物多重耐药,应加强检测。     

PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因

[摘要] 目的 应用mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。方法 对临床分离的84株金黄色葡萄球菌,应用mecA基因PCR扩增法鉴定MRSA,并与苯唑西林纸片扩散法和头孢西丁纸片扩散法进行比较。结果 84株金黄色葡萄球菌中, 41株金黄色葡萄球菌的mecA基因扩增呈阳性,其中有1株表现为对苯唑西林敏感;苯唑西林纸片扩散法检出42株阳性，其中有2株mecA基因呈阴性. 头孢西丁纸片扩散法与PCR扩增法的试验结果完全符合。结论 mecA基因PCR扩增法可以准确、快速判定MRSA。     

耐甲氧西林葡萄球菌耐药性分析

耐甲氧西林葡萄球菌是引起医院内感染的重要致病菌。为了解该菌的耐药情况，进而为临床预防与治疗提供依据，我们对８８株葡萄球菌进行了耐甲氧西林及耐其它１４种常用抗生素和产β－内酰胺酶的测定。结果：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为５６％，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌检出率为４７．６％；耐甲氧西林敏感葡萄球菌对１４种常用抗生素的耐药性及多重耐药性均高于甲氧西林敏感葡萄球菌；产β－内酰胺酶最高的是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，产酶率为９２．９％，最低的是甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌，为３９．４％，说明产酶与耐药之间有一定关系。耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素、呋喃妥因敏感，提示这２种药可作为临床治疗该类菌的首选药物。     

院内外环境分离金黄色葡萄球菌的耐药性及毒素基因检测

目的检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）耐药基因及毒素基因,了解其分布情况。方法采用多重聚合酶链反应（multiplex polymeras chain reaction,PCR）技术分别检测耐药基因mecA、femA与毒素基因TSST、PVL。结果 83株金黄色葡萄球菌,仅3株（3.61%）菌检出mecA基因,22株菌（26.50%）检出femA基因,15株菌（18.07%）同时检出mecA与femA基因。医院样本检出12株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）,3株甲氧西林耐药凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant and coagulasenegative Staphylococcus aureus,MRCNS）。83株分离自医院及环境样本SA,2株分离自咽拭子的样本检出TSST基因,检出率4.54%（2/44）;1株分离自血液的样本检出PVL基因,检出率2.27%（1/44）,其余菌株未检出毒素基因。结论院内样本中,部分菌株携带mecA基因,环境样本未发现携带mecA菌株,两者存在差异。83株SA菌,毒素基因携带率较低。检测耐药、毒素基因携带率,为临床治疗及院内感染控制,食物中毒溯源提供依据。     

替考拉宁对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和敏感菌药敏实验的研究

目的 探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA )和敏感葡萄球菌(MSSA)临床分离株对替考拉宁药物的敏感性.方法 金黄色葡萄球菌临床分离株18株,采用PCR检测耐药 mecA基因,琼脂稀释法测定替考拉宁对金黄色葡萄球菌体外MIC值.结果 9/18株为MRSA,9/18株为MSSA对替考拉宁均为敏感.替考拉宁对MRSA和...     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗生素耐药和耐药基因的检测

目的探讨北京地区社区感染和院内感染中金黄色葡萄球耐药情况变化。方法用琼脂稀释法检测了471株从北京地区收集的金黄色葡萄球菌对11种抗生素的敏感水平(其中422株菌株从1993年至2000年门诊脓疱疮患儿分离获得,49株从2000年烧伤病房住院患者分离获得)。用聚合酶链反应方法对上述菌株进行了mecA耐药基因的检测。结果引起社区感染的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的比率由1993年的12.2%上升至2000年的29.8%,对甲氧西林均表现为低度耐药。引起院内感染的金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药率为63.3%,表现为高度耐药。所有的金黄色葡萄球菌对青霉素100%耐药,对红霉素、四环素、克林霉素和氯霉素的耐药率分别约80%、70%、60%和50%。引起社区感染的金黄色葡萄球菌中未发现庆大霉素和利福平耐药菌株,对环丙沙星的耐药率由1993年的2.4%上升至2000年的21.3%;引起院内感染的金黄色葡萄球菌中对庆大霉素、环丙沙星和利福平的耐药率分别为63.3%、63.3%和57.1%。所有的金黄色葡萄球菌均对夫西地酸和万古霉素敏感。2000年分离的多重耐药菌株比例较1993年有所增加。PCR对mecA耐药基因的测定结果显示,所有对甲氧西林高度耐药的金黄色葡萄球菌mecA耐药基因均呈阳性;对甲氧西林低度耐药的金黄色葡萄球菌mecA耐药基因均呈阴性。结论在本实验所及范围内,北京地区金黄色葡萄球菌的耐药率逐渐上升,mecA耐药基因测定是筛选耐药MRSA菌株的快速、简易手段。     

压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究

目的：探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法：收集临床64株葡萄球菌标本，对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测，并以PCR电泳检测作参照，与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果：传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致，而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA为阴性，2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA)的mecA为阳性，1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌（MRCNS）的mecA为阴性；2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）的mecA为阳性。结论：以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因，既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌，又可判断其耐药类型，能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。     

多重PCR法检测金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因

目的：了解金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）耐药基因及所携带致病毒素基因PVL与TSST-1的特点。方法：应用多重PCR法检测mecA基因、TSST-1基因及Py￡基因。结果：84株金 葡球经多重PCR法对其mecA基因进行检测．检出率为58．3％（49／84）。PVL基因阳性菌株的分离率为23．8％（20／84）,州￡阳性的MRSA为13株（13／49,26．5％）,PyL阳性的MSSA为7株（7／35,20．O％）,差异无统计学意义（P〉0．05）;未检出TSST-1基因。结论：金葡菌的耐药性呈上升趋势,且金葡菌可产生多种毒素,在分离金葡菌的同时,应加强其耐药基因及毒素基因的检测。     

145株金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的了解临床金黄色葡萄球菌（SA）的感染情况及其对常用抗生素的耐药情况,以便指导临床合理用药。方法对我院2008年7月。2010年6月间从临床分离的SA进行MRSA鉴定,并分析其是否产生β-内酰胺酶及其对一些常用抗生素的敏感性。结果共分离到145株SA,其中MRSA101株,占sA的69．6％;145株SA中有80株产生β-内酰胺酶,占55．17％,MRSA产生β-内酰胺酶的百分率明显高于MSSA（P〈0．05）;101株MRSA对青霉素G、氨苄青霉素、头孢塞吩、头孢唑啉的耐药率均为100％;MRSA对红霉素、庆大霉素、阿奇霉素、氯霉素、四环素和利福平的耐药率明显高于MSSA（P〈0．05）。环丙沙星和万古霉素对MRSA和MSSA都有较好的抗菌活性。结论MRSA已成为医院感染的重要病原菌,且MRSA对多种抗生素具有较高的耐药性,环丙沙星和万古霉素是临床治疗MRSA和MSSA感染的首选药物。     

无菌部位金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学特征

目的:了解无菌部位分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性及分子流行病学特征,为临床预防和控制其感染以及合理使用抗菌药物提供实验依据。方法:收集2011年8月至2012年6月某三甲医院无菌部位分离的非重复金黄色葡萄球菌50株。VITEK-2微生物分析系统进行菌株鉴定,PCR检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)杀白细胞毒素(PVL)基因,多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型。结果:在18种抗菌药物中,青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为90.0%和62.0%;尚无对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、达托霉素的耐药菌株。50株金葡菌中,MRSA 15株(30.0%),MSSA35株(70.0%),MRSA对12种抗菌药物的敏感率明显低于MSSA。15株MRSA中,SCCmecⅢ型11株(73.3%),SCCmecⅣ型4株(26.7%),PVL基因扩增均为阴性。结论:该院无菌部位分离的金黄色葡萄球菌以MSSA为主;MRSA对抗菌药物呈多重耐药性,且以SCCmecⅢ型为主。     

成人耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的临床特征和耐药性分析

目的 分析成人耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的临床特征和耐药性,为临床感染控制和合理用药提供依据。方法 回顾性分析2018年1—12月厦门市某三甲医院住院患者中137例成人金黄色葡萄球菌感染,按甲氧西林耐药性分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的MRSA组和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)的MSSA组,分析两组的临床资料和耐药性。结果 MRSA组以外科系统、重症监护病房检出为主,送检标本以呼吸道标本居多(P=0.000);MRSA组合并神经系统疾病、侵入性操作、感染前抗生素使用情况(超过2种)、合并感染明显高于MSSA组;MRSA组病死率高于MSSA组(P均0.05);合并神经系统疾病、实施侵入性操作是MRSA感染的独立危险因素;MRSA组对克林霉素、红霉素、环丙沙星、庆大霉素、利福平、妥布霉素、四环素、左氧氟沙星、美满霉素的耐药率明显高于MSSA组,差异有统计学意义(P均0.05)。结论 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染病死率高;合并神经系统疾病、实施侵入性操作是MRSA感染的危险因素,MRSA菌株对多种抗生素耐药,临床应加强监测,根据药敏合理选择治疗药物。     

金黄色葡萄球菌耐药性的研究

目的:监测金黄色葡萄球菌(SA)的耐药状况,为临床治疗SA感染提供依据。方法:对浙江省中医院2001年6月至2002年5月临床分离出的122例金黄色葡萄球菌进行药敏试验和临床资料分析。结果:临床分离的葡萄球菌在病区、标本分布方面以重症监护病房和痰标本多见。耐苯唑西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占70.5％(86/122);苯唑西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)占29.5％(36/122)。耐万古霉素金黄色葡萄球菌占3.3％(4/122)。结论:耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌表现为多重耐药性,且对12种抗生素的耐药率明显高于苯唑西林敏感的葡萄球菌,P<0.01。发现4株耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。     

Preliminary molecular epidemiology of the Staphylococcus aureus in lower respiratory tract infections: a multicenter study in China

Background  Staphylococcus aureus (S. aureus) remains as an important microbial pathogen resulting in community and nosocomial acquired infections with significant morbidity and mortality. Few reports for S. aureus in lower respiratory tract infections (LRTIs) have been documented. The aim of this study was to explore the molecular epidemiology of S. aureus in LRTIs in China.

Methods  A multicenter study of the molecular epidemiology of S. aureus in LRTIs was conducted in 21 hospitals in Beijing, Shanghai and twelve other provinces from November 2007 to February 2009. All the collected S. aureus strains were classified as minimum inhibitory concentration (MIC), mecA gene, virulence genes Panton-Valentine Leukocidin (PVL) and γ-hemolysin (hlg), staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) type, agr type, and Multilocus Sequence Typing (MLST).

Results  Totally, nine methicillin-sensitive S. aureus (MSSA) and 29 methicillin-resistant S. aureus (MRSA) strains were isolated after culture from a total of 2829 sputums or bronchoalveolar lavages. The majority of MRSA strains (22/29) had a MIC value of ≥512 µg/ml for cefoxitin. The mecA gene acting as the conservative gene was carried by all MRSA strains. PVL genes were detected in only one S. aureus strain (2.63%, 1/38). The hlg gene was detected in almost the all S. aureus (100% in MSSA and 96.56% in MRSA strains). About 75.86% of MRSA strains carried SCCmec III. Agr type 1 was predominant (78.95%) among the identified three agr types (agr types 1, 2, and 3). Totally, ten sequence type (ST) of S. aureus strains were detected. A new sequence type (ST1445) was found besides confirming ST239 as the major sequence type (60.53%). A dendrogram generated from our own MLST database showed all the bootstrap values ≤50%.

Conclusion  Our preliminary epidemiology data show SCCmec III, ST239 and agr type 1 of S. aureus as the predominant strains in LRTIs in Mainland of China.