胃癌碱性磷酸酶同工酶组织化学,光镜和电镜观察

采用光间和电镜酶组织化学技术对胃癌和胃良性病变碱性磷酸酶同工酶的活性和分布进行观察，结果表明：Ｎａｇａｏ，Ｒｅｇａｎ和Ｋａｓａｈａｒａ同工酶在正常胃粘膜和非癌病变中均无表达，可作为胃癌的肿瘤标志；肠化上皮仅表达小肠型ＡＬＰ，是肠化上皮分化成熟的标志。从ＡＬＰ同工酶基因表达角度来看，两次突变假说和隐性基因突变假和说适用于胃癌。     

碱性磷酸酶同工酶组化染色法在胃癌研究中的应用

肿瘤组织碱性磷酸酶(ALP同工酶谱的研究主要采用生化电泳法,用组化法进行定位研究的文献报道不多,其方法不统一,步骤繁锁,影响因素多,难度较大。我们经反复摸索建立的ALP同工酶组化染色方法简     

碱性磷酸酶与钙化

在生物学钙化中，碱性磷酸酶（ＡＫＰ）的作用存在争议，即ＡＫＰ对于钙化的启动是否起关键性作用。ＡＫＰ如何发生作用，ＡＫＰ在什么条件下促使钙化发生。在钙化过程中，ＡＫＰ发生什么变化。本文对这系列问题进行了讨论，并对生物瓣的缓钙化问题进行了探讨。     

老年人骨质疏松 碱性磷酸酶升高

本病例临床资料,影像学检查照片及说明,讨论发言稿刊登在本刊2卷3期第221～222页,2卷4期,第300～304页,我们对本病例作了随诊.患者于1997年3月在省人民医院核医学科检查结果:核素全身骨显像:1 颅骨、右盆骨和右肩胛骨(扁骨)大片状活动性骨质病变,拟畸形性骨炎改变,建议病理组织学进一步检查.2 双侧膝关节区骨关节炎症影像改变.3 L3～5椎体压缩性骨折病变.骨密度测定:骨影尚清晰,骨皮质,骨松质形态结构正常,腰椎局部骨彤增强,亦见部分减弱,髋关节及前臂骨骨影有减弱现象.骨钙密度(BMD)、骨钙含量(BMC)与同性别、同骨峰值年龄之健康人比,全身,腰椎测量均值及其BMD未见明显减低,但髋关节之股骨颈.大转子Ward’s区,前臂骨之测量均值<2±,BMD、BMC减低,其各部位BMD值低于骨折危险阈值.意见:1骨质增生.2髋关节、前臂骨BMD、BMC有减低提示有骨质疏松改变.(腰椎可能因增生所致影响骨密度之观察)再复习了病史体征及2期所载讨论发言,结合最近核素骨检查,拟提出以下3个概念性诊断.——骨质疏松综合征——Milkman S.(假性骨折Pseuto—fracture综合征)——变形性骨炎(即Paget’s综合征)     

碱性磷酸酶免疫斑点法的应用

免疫斑点法(Dot Immunobinding As-say,DIBA)近年来已广泛用于免疫学上的各种测定。其原理是利用硝酸纤维膜(NC)为固相支持物,进行抗原抗体反应。结合在NC上的抗体——酶结合物通过将底物分解成不溶性产物而沉积,形成斑点。待测抗体(或抗原)含量的高低可通过斑点颜色的深浅判断。近年来常用的是辣根过氧     

附睾碱性磷酸酶分布的探讨

目的：探讨附睾碱性磷酸酶的分布及作用．方法：雄必习附睾恒冷箱切片,碱性磷酸酶钙钴法染色。结果：附睾头部的附睾管上皮细胞游离缘碱性磷酸酶呈强阳性反应,附睾体部酶反应阴性,附睾尾部的附睾管上皮细胞基底部基膜碱性磷酸酶反应阳性。结论：附睾头、体、尾三部分的碱性磷酸酶分布有明显的区域判别附睾中碱性磷酸酶可能参与了精子成熟发育和分化中的物质代和物质交换及生化血附睾屏障的形成。     

骨形态发生蛋白7诱导骨膜细胞碱性磷酸酶的表达

背景：关于骨形态发生蛋白7作为刺激因子诱导细胞成骨的报道目前较少见。 目的：观察骨膜细胞经骨形态发生蛋白7诱导后碱性磷酸酶的表达。 方法：取材于成人胫骨骨膜,常规细胞培养法行骨膜细胞体外培养,分为实验组和对照组,分别加入骨形态发生蛋白7加成骨细胞培养辅助剂和单纯成骨细胞培养辅助剂,相差显微镜观察骨膜细胞形态特征及超微结构。每组分别在第7,14,21天设3个时间点,每个时间点设3个样本,采用碱性磷酸酶试剂盒法检测成骨细胞特异性标志物碱性磷酸酶表达情况。 结果与结论：骨膜细胞经分组培养后,第7天时,实验组和对照组骨膜细胞均有明显增殖,碱性磷酸酶的可被检测出,但量不多,细胞外形为梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量稍多;第14天时,实验组及对照组骨膜细胞均显著增殖,细胞外形由梭形变为宽梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量明显增多。第21天时,实验组及对照组骨膜细胞均增殖,其中实验组细胞增殖明显,细胞外形为宽梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量显著增多。经过统计学分析由骨形态发生蛋白7诱导的骨膜细胞的成骨标志物碱性磷酸酶阳性率明显高于对照组(P < 0.01)。提示骨膜细胞具有良好的成骨和再生能力, 骨形态发生蛋白7能诱导骨膜细胞加强碱性磷酸酶的表达,能诱导骨膜细胞向成骨细胞转化。     

全反式维甲酸诱导小鼠碱性磷酸酶基因启动子区染色体重构

背景：碱性磷酸酶基因是成骨细胞分化和骨形成的重要标志。在C3H10T1/2细胞中,全反式维甲酸可通过核受体上调小鼠碱性磷酸酶的表达,与MAPK通路无关。 目的：从染色体结构调控方面揭示全反式维甲酸上调碱性磷酸酶表达的分子机制。 方法：10^-6 mol/L全反式维甲酸处理C3H10T1/2细胞0,1,6,12 h,DNA酶Ⅰ超敏感实验确定全反式维甲酸调控区域的位置,染色质免疫共沉淀实验检验全反式维甲酸处理细胞后一系列转录相关因子与全反式维甲酸调控区域结合的量效关系以及时相分布。 结果与结论：DNA聚合酶Ⅰ超敏感实验表明,小鼠碱性磷酸酶启动子转录起始位点上游约520 bp附近为潜在的全反式维甲酸调控区域;染色质免疫共沉淀实验表明,全反式维甲酸对小鼠碱性磷酸酶的上调作用是通过一系列转录相关因子的时序性共同作用来实现。表明全反式维甲酸诱导小鼠碱性磷酸酶基因转录的过程中伴随着染色质重构和组蛋白的修饰作用。     

老年人全身性骨质疏松 碱性磷酸酶升高

病史摘要 患者男性，79岁．1988年始觉右膝关节痛，多于活动后出现，可忍受，休息后缓解．1992年X线示“膝关节退行性变”．间用中药治疗，症状反复，渐出现左膝关节痛，伴双下肢胫前汗毛脱落，间有腰，肩酸痛，无外伤，无发热，与气候变化无关，1993年4月ALP（碱性磷酸酶）567u/L，     

骨碱性磷酸酶的检测及临床意义

骨碱性磷酸酶的检测及临床意义朱平安，严辉邵阳市中心医院检验科１对象和方法１．１对象在受检的１００例患儿中，门诊患者３８例，住院患者６２例；１岁组佝楼病发病率最高，占其受检人数约６６．７％，这可能与患者基础疾患，混合喂养，幼儿吸收不良，维生素Ｄ。缺乏等...     

孕妇血清中钙、磷、碱性磷酸酶与全血骨碱性磷酸酶检测结果分析

目的通过检测孕妇血清中钙（Ca）、磷（P）、碱性磷酸酶（ALP）、全血骨碱性磷酸酶（BALP）,早期预防婴幼儿佝偻病的发生。方法对2005年12月－2007年10月来我院就诊的孕早、中、晚期的孕妇采血进行Ca、P、ALP、BALP的测定。结果与结论孕妇血清中Ca、P、ALP、BALP血清水平在不同孕期存在差异。     

利用内源性碱性磷酸酶显示胆小管

胆小管是两个相邻肝细胞膜细胞膜凹陷成槽并相互对接而成的微细管道 ,由于肝细胞胆小管面含有丰富的碱性磷酸酶 ,应用组化方法如钙—钴法等经典方法均能显示胆小管 [1 ,2 ,3 ] 。但由于这些方法步骤多 ,染色时间长 ,所需试剂较多 ,且容易褪色 ,因而有一定的局限性 ,我们利用原位分子杂交实验中碱性磷酸酶的显示剂 (硝基四氮唑蓝 ,简称 NBT与5 -溴 - 4-氯 - 3-吲哚基 -磷酸 ,简称 BCIP,以下统称 NBT/ BCIP显色系统 )直接对肝组织中存在的内源性碱性磷酸酶进行显色 [4] ,从而显示胆小管 ,取得良好效果。1　方法和结果成年雄性 Wister大…     

胍变性人胎盘碱性磷酸酶复性的研究

目的:检测胍变性人胎盘碱性磷酸酶复性过程中活力与构象的变化,探讨其折叠机制.材料与方法:应用分光光度法测定复性酶活力,荧光法检测其内源荧光发射光谱.结果:盐酸胍变性平衡态酶用直接稀释法及空气氧气法进行复性,其最适复性条件是:胍稀释浓度0.5 mol/L,温度4℃,复性液pH9.0,时间24小时.在此条件下,测得不同浓度盐酸胍变性酶经稀释复性后的酶活力及其内源荧光光谱显示:变性中间态酶复性后的酶活力及内源荧光光谱可恢复至天然态,而变性酶只能部分恢复,且随胍浓度的增加,恢复愈加困难,当胍浓度为6.0 mol/L时,变性态酶经复性后的酶活力与内源荧光光谱则完全不能恢复.结论:变性中间态酶可完全复性,而变性态酶仅部分复性,且与复性条件有关.     

低磷酸酶血症一家系组织非特异性碱性磷酸酶TNSALP基因突变分析

 目的 对1例儿童型低磷酸酶血症（HPP）患者及家系进行临床分析及基因突变检测,以探讨HPP的致病机制。方法 针对1例罕见的HPP患者的典型临床特点,进行实验室检验及影像学检查。进而收集患者及其亲属外周血,提取基因组DNA。针对ALPL基因12个外显子及附近内含子区合成引物,经PCR扩增后,直接对产物测序检测突变。结果 显示患者血碱性磷酸酶水平显著降低,骨骼具有佝偻病样改变;患者ALPL基因存在c.18delA及c.G407C两种突变。前者所致移码突变使得翻译提前终止,形成的截短蛋白 (p.V7Yfs18X)丧失了发挥酶活性及骨骼矿化作用的重要区域;而c.G407C导致其编码的氨基酸由精氨酸变为脯氨酸（R136P）。进一步检索PubMed及ALPL基因突变数据库,以上突变在国内外均未见报道。临床表现正常的患者母亲及祖母、父亲分别携带c.18delA和c.G407C突变,该家系符合常染色体隐性遗传。结论 ALPL基因c.18delA和c.G407C两种新突变,与HPP临床表现密切相关。     

婴儿型低碱性磷酸酶血症1例

1临床资料 患儿，男，20个月，汉族，主诉“咳嗽10d余，发热5d”，于2006年5月28日收入中国医科大学盛京医院（我院）呼吸科病房，经抗炎治疗好转后于2006年6月8日出院。出院1周后又出现咳嗽，门诊治疗未见好转于2006年6月18日再次收入我院。     

单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的制备

目的：制备单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白。方法：把碱性磷酸酶编码区插入pSTE2-8E5质粒DNA，用scFvC66的重链和轻链可变区DNA取代scFv-8E5的重链和轻链可变区DNA，构成表达载体pSTE2-C66-Ap在大肠杆菌中表达，用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法分析产物活性。结果：获得一个分子量为75kD的scFvC66-Ap融合蛋白，可结合来自KGla细胞裂解物中的一个分子量约60kD的蛋白质带，其结合功能可通过其碱性磷酸酶活性直接测定。结论：建立了一个用大肠杆菌制备单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的方法，它可能取代常规的碱性磷酸酶标记方法而用于免疫检测。     

孕产妇孕期锌缺乏对胎盘碱性磷酸酶的影响

目的探讨孕产妇孕期锌缺乏对胎盘碱性磷酸酶影响的组化特征.方法选择17例锌缺乏的孕妇与57名血清锌正常的孕妇做为对照,AKP的组化染色采用钙-钴显示法,血清锌用血浆蛋白-原子吸收分光度法,来检测锌及AKP的活性.结果锌缺乏(<90μg/dl)的孕妇分娩后胎盘碱性磷酸酶含量明显低于对照组.结论孕产妇孕期锌缺乏导致胎盘碱性磷酸酶的活性降低,从而影响胎盘的正常代谢.     

骨碱性磷酸酶对婴幼儿佝偻病早期诊断的临床研究

目的探讨骨碱性磷酸酶（BALP）在婴幼儿佝偻病早期诊断中的临床意义。方法对123例维生素D（VitD）缺乏性佝偻病患儿进行BALP检测并设立正常对照组，对BALP≥250u／L者，结合临床进行血清钙（Ca）、磷（P）、碱性磷酸酶（AKP）和X线比较分析。结果BALP检测具有敏感、特异、简单、快速、经济等优点。结论BALP是目前佝偻病早期诊断有价值实验方法，值得普及和推广。     

人胎盘碱性磷酸酶复性效率的影响因素探讨

目的:研究人胎盘碱性磷酸酶(HPAP)在盐酸胍变性态酶复性过程中加入巯基乙醇对其复性的影响,旨在探讨变性态酶的最适复性条件.方法:应用分光光度法和荧光法进行HPAP的盐酸胍变性及其加入巯基乙醇后变性态酶的复性.结果:在HPAP变性态酶复性过程中加入巯基乙醇,变性中间态酶仍可完全复性:变性态酶的复性率有明显的提高.复性率由27%增加到了68.5%,荧光发射波长由358 nm进而蓝移到347.5nm.结论:巯基乙醇可以提高HPAP胍变性酶的复性效率,从而更深入地阐明了HPAP结构与功能的关系.