腰椎穿刺移植自体骨髓间充质干细胞治疗脑梗死后遗症6例

背景：骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,而且取材方便,扩增迅速,免疫原性低,在移植过程避免了免疫排斥等反应,是治疗脑梗死等神经系统疾病的理想种子细胞。 目的：探讨自体骨髓间充质干细胞培养后经腰穿治疗脑梗死后遗症的安全性、可行性及疗效。 方法：6例脑梗死后遗症患者进行自体骨髓间充质干细胞移植,骨穿采集自体骨髓单个核细胞,体外分离培养骨髓间充质干细胞4 d后经腰椎穿刺移植蛛网膜下腔,移植后观察疗效及并发症。 结果与结论：培养后骨髓间充质干细胞数量明显增多,患者手术前后肌力和NIHSS评分通过统计分析有显著性差异(P < 0.05),总体症状改善较术前有明显改善;移植后无严重不良事件发生。结果提示,自体骨髓间充质干细胞培养后移植治疗可使脑梗死后遗症患者症状明显改善,治疗安全有效且不良反应小。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗颅脑创伤后神经功能障碍的护理

目的：探索自体骨髓间充质干细胞移植治疗颅脑创伤后神经功能障碍的护理措施。方法选取颅脑创伤后神经功能障碍患者76例,分别实施常规治疗和自体骨髓间充质干细胞移植治疗,通过对比2组患者治疗前、治疗后6个月神经功能缺损程度（NIHSS）和日常生活能力评分（Barthel指数）,评价治疗和护理效果。结果所有患者均治疗成功出院,移植组较对照组术后6个月NIHSS评分显著降低（P＜0.001）,Barthel指数显著升高（P＜0.001）。结论自体骨髓间充质干细胞移植治疗能促进患者神经功能恢复,提高患者生活能力,治疗前心理护理,移植后严密观察病情变化、不良反应,持之以恒的功能康复计划是促进患者康复的重要保障。     

富血小板血浆诱导骨髓间充质干细胞结合化学萃取去细胞神经修复坐骨神经缺损

背景：周围神经损伤早期许旺细胞尚未大量分裂增殖,此时由于解剖连续性的中断,通过轴浆逆向运输提供的营养因子骤减,缺乏神经营养因子支持的神经元有可能死亡,从而使周围神经不能再生或再生乏力。 目的：观察植入经富血小板血浆诱导的骨髓间充质干细胞结合去细胞神经修复坐骨神经缺损的效果。 方法：取新西兰大耳白兔制备坐骨神经缺损模型,随机抽签法分成4组：去细胞神经组,移植同种异体去细胞神经;骨髓间充质干细胞组,移植同种异体骨髓间充质干细胞结合化学萃取的同种异体去细胞神经：经诱导骨髓间充质干细胞组,移植经富血小板血浆诱导的同种异体骨髓间充质干细胞结合化学萃取的同种异体去细胞神经;自体神经组,移植自体神经。术后进行形态学观察与靶肌肉肌湿质量恢复率、运动神经传导速度、轴突直径和髓鞘厚度的检测。 结果与结论：经富血小板血浆诱导的骨髓间充质干细胞结合化学萃取的去细胞神经移植修复神经的靶肌肉肌湿质量恢复率、运动神经传导速度、轴突直径和髓鞘厚度及形态学观察明显优于移植单纯化学萃取的去细胞神经与骨髓间充质干细胞结合化学萃取的去细胞神经的效果,而与移植自体神经修复结果相似。说明经诱导后的骨髓间充质干细胞在体内具有许旺细胞的部分功能,可作为组织工程化外周神经的种子细胞,用于周围神经缺损的修复。     

骨髓间充质干细胞尾静脉移植脊髓损伤大鼠脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达

背景：骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤有治疗作用,但其机制尚不完全清楚。 目的：应用免疫组织化学方法观察骨髓间充质干细胞静脉移植损伤脊髓局部脑源性神经营养因子及神经生长因子的表达,分析骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的作用途径。 方法：运用改良Allen法制备T10脊髓外伤性截瘫大鼠模型,假手术组6只,脊髓损伤组24只随机分为对照组和骨髓间充质干细胞移植组。骨髓间充质干细胞移植组、假手术组接受骨髓间充质干细胞单细胞悬液1 mL(1×106 cells)自大鼠尾静脉缓慢注射移植,对照组静脉注射PBS 1 mL。 结果与结论：脊髓损伤后损伤局部的脑源性神经营养因子、神经生长因子表达增加,骨髓间充质干细胞静脉注射移植后能促进脊髓损伤局部脑源性神经营养因子、神经生长因子更进一步的表达,这可能是促进神经结构及神经功能恢复的因素之一。     

HRP逆行示踪评价复合骨髓间充质干细胞的无细胞神经移植物

背景：作者前期将无细胞神经移植物与骨髓间充质干细胞复合培养,成功构建了组织工程人工神经。 目的：应用辣根过氧化物酶(HRP)神经逆行示踪技术对无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建的神经移植复合体桥接大鼠坐骨神经缺损后运动神经元的保护作用进行评价。 方法：成年清洁级健康雄性SD大鼠,随机分成3组：①实验组：采用复合骨髓间充质干细胞的无细胞神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损。②空白对照组：采用无细胞神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损。③自体神经对照组：采用自体神经移植桥接大鼠坐骨神经缺损。术后12周应用辣根过氧化物酶神经逆行示踪技术对脊髓前角运动神经元的再生进行评价。 结果与结论：术后12周脊髓前角运动神经元再生评价结果显示：实验组优于无细胞神经移植物组,而与自体神经移植物组相比差异无显著性意义。证实无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经修复大鼠坐骨神经缺损,对大鼠脊髓运动神经元具有保护作用,可能达到与自体神经移植相似的效果。 关键词：无细胞神经移植物;骨髓间充质干细胞;辣根过氧化物酶;神经移植;大鼠     

骨髓间充质干细胞修复损伤脊髓的实验及临床应用短期随访

背景：骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究已经逐渐由动物实验过渡到临床,但其作用机制还不完全清楚。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤大鼠脊髓功能的修复作用,并通过临床应用观察短期疗效。 方法：采用改良Allen's打击法造成Wistar大鼠脊髓损伤模型,将体外分离培养的骨髓间充质干细胞分别经尾静脉及损伤局部移植,应用改良Tarlov评分评定大鼠行为学变化,在光镜下对损伤脊髓病理切片进行对比分析。对5例脊髓损伤患者通过损伤原位注射、腰穿、静脉输注的方式行人自体骨髓间充质干细胞移植,并行神经功能及生活能力评定。 结果与结论：治疗后15 d,骨髓间充质干细胞尾静脉及损伤局部移植组大鼠运动功能评分较模型对照组显著提高;移植后7,15,30 d,脊髓病理切片显示骨髓间充质干细胞尾静脉及损伤局部移植组大鼠较模型对照组有显著恢复。临床患者骨髓间充质干细胞移植后半年神经功能及生活能力均有改善。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗终末期肝病39例

目前肝脏移植是治疗终末期肝病的惟一有效手段,但仍存在一些问题,尤其是供体短缺、价格昂贵及免疫排斥反应,自体骨髓间充质干细胞移植可避免以上缺点。 目的：探讨自体骨髓间充质干细胞移植对失代偿期肝硬化和慢性重症患者改善作用。 方法：纳入纳入终末期肝病患者39例,肝炎肝硬化失代偿期患者32例,慢性重肝衰竭患者7例。分离其自体骨髓间充质干细胞,行肝动脉插管自体干细胞移植治疗。移植后1,2,4,8周进行生化检测,并观察其移植后临床症状改善情况及术后不良反应。根据实验室检查结果和临床,分别计算出CTP和终末期肝病模型评分,观察各个时间段分值的变化。 结果与结论：移植后1,2,4,8周,37例(93%)患者丙氨酸转氛酶逐渐降低,白蛋白、胆碱脂酶活力、胆固醇、凝血酶原活动度均升高(P < 0.01)。患者临床症状有明显改善:移植后8周内腹水减轻32例(80%),食欲改善34例(85%),乏力好转37例(93%),腹胀减轻34例(85%)。CTP-B级和CTP-C级评分、终末期肝病模型评分均降低。所有移植患者中未发现严重不良反应及并发症。提示,自体骨髓间充质干细胞移植作为治疗慢性肝衰竭的一种新的安全有效的治疗措施。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血

目的探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗对脑出血患者外周血中内皮祖细胞活化度及神经功能的影响。方法选择2014-06—2016-06南阳南石医院86例脑出血患者,依据治疗方案不同分为2组各43例。对照组仅采取常规微创血肿清除术治疗,观察组在对照组基础上联合自体BMSCs移植治疗,统计对比2组治疗后1周、2周、3周、4周外周血内皮祖细胞活化度与治疗后3周、4周神经功能缺损评分、日常生活能力评分及神经营养因子[神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)]水平。结果观察组治疗后1周、2周、3周、4周内皮祖细胞活化度较对照组提高,差异具有统计学意义(P0.05);观察组治疗后3周、4周神经功能缺损评分较对照组降低,日常生活能力评分均较对照组提高,差异具有统计学意义(P0.05);观察组治疗后3周、4周NGF、BDNF水平均较对照组提高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论对脑出血患者应用自体骨髓间充质干细胞移植治疗效果显著,可明显减轻患者神经功能损伤,提高内皮祖细胞与神经营养因子水平,促进其神经功能恢复,提升其日常生活能力。     

自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗高血压脑出血临床观察

目的：观察自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗高血压脑出血的疗效。方法将102例高血压脑出血患者随机分为治疗组（自体骨髓间充质干细胞移植＋高压氧治疗组）和对照组（高压氧治疗组）,比较2组患者治疗前和治疗后6个月的神经功能缺损程度评分（NIHSS）和日常生活活动能力评分（Barthel指数）,治疗后6个月格拉斯哥预后评分（GOS）及远期生活质量评估量表评分（KPS）。结果治疗后6个月与对照组比较,NIHSS评分均有显著降低Barthel指数均有显著升高（P＜0·05）,治疗组GOS及KPS评分显著好于对照组（P＜0·05）。结论自体骨髓间充质干细胞移植辅助高压氧治疗能显著促进高血压脑出血患者神经功能恢复,提高患者生存率和生活质量。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血的疗效观察

目的探讨自体骨髓间充质干细胞治疗脑出血近期有效性和安全性。方法 2009-01—2012-01我院神经外科收治的脑出血患者45例。移植组20例通过蛛网膜下腔注射方式行自体骨髓间充质干细胞移植,选择同期入院但未行干细胞移植的25例作为对照组。分别于移植前和移植后6个月进行神经功能缺损程度评定(NIHSS评分)和日常生活活动能力评定(Barthel指数)。同期随访血常规、生化全项、肿瘤标记物以观察其安全性。结果移植前2组NIHSS评分及Barthel指数基本相似。与对照组比较,移植后6个月治疗组NIHSS评分显著降低(P<0.05),Barthel指数显著升高(P<0.05)。与移植前比较,治疗组在移植后6个月NIHSS评分显著降低(P<0.05),BaRhel指数显著升高(P<0.05)。2例患者在移植后出现一过性发热,予对症处理后症状缓解。随访各项血液检查结果无明显异常。结论采用自体骨髓间充质干细胞治疗脑出血临床疗效安全有效,近期临床疗效明显,远期治疗效果有待观察。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗早期股骨头缺血性坏死44例

股骨头缺血性坏死患者股骨头内间充质干细胞数量减少,成骨分化能力降低是不能实现有效自身修复的细胞病理原因,坏死区周围的硬化带阻碍了骨修复的实现。对于早期股骨头缺血性坏死,自体骨髓间充质干细胞移植结合髓芯减压改善坏死区的血运及促进骨修复的治疗结果分析尚缺乏系统报告。 目的：根据随访结果分析自体骨髓间充质干细胞移植结合髓芯减压治疗早期股骨头缺血性坏死的效果。 方法：2005-05/2008-09共治疗早期股骨头缺血性坏死患者44例,所有接受细胞移植股骨头坏死均为ARCO1或2期,共76髋。采用浓缩自体骨髓细胞悬液回注坏死股骨头内并结合髓芯减压,剩余骨髓血洗涤回输。其中ARCO1期患者仅行干细胞悬液注射,ARCO2期患者移植后行髓芯减压,以Harris评分评价髋关节功能状态。 结果与结论：至2009-03,共随访(22.3±4.2)个月。至随访终期,66髋较细胞移植前疼痛缓解或无明显进展,功能改善,占86.9%;10髋疼痛加重,ARCO分期进展至3或4期,其中3髋行人工关节置换。提示自体骨髓间充质干细胞移植结合髓芯减压是治疗早期股骨头缺血性坏死的有效方法,在早期股骨头缺血性坏死的各种治疗方法中,与其他减压及手术方法相比更符合针对病因的治疗,进一步扩大应用有可能获得更佳的临床效果。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血32例：是否安全、可行及有效？

背景：大量动物实验证实骨髓间充质干细胞在适宜条件下能够定向分化为神经细胞,但目前其应用于临床治疗神经系统损伤性疾病的报道较少。 目的：观察自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血的近期疗效。 方法：以2007-11/2009-01聊城市脑科医院神经外科收治的32例脑出血患者作为治疗组,根据患者一般状况及血肿量大小,分别行钻孔引流或开颅血肿清除,均留置血肿腔引流管,退至血肿腔边缘,通过引流管注射自体骨髓间充质干细胞悬液3.5 mL。选择同期入院但未行干细胞移植的40例患者作为对照组。分别于移植前和移植后6个月进行神经功能缺损程度评定(NIHSS评分)和日常生活活动能力评定(Barthel指数),行颅脑MRI、血生化指标、肿瘤标记物检查,监测干细胞移植的安全性。 结果与结论：移植前两组患者NIHSS评分及Barthel指数基本相似。与对照组比较,移植后6个月治疗组NIHSS评分显著降低(P < 0.01),Barthel指数显著升高(P < 0.01)。与移植前比较,治疗组在移植后6个月NIHSS评分显著降低(P < 0.01),Barthel指数显著升高(P < 0.01)。治疗组2例患者在移植后出现一过性发热,予对症处理后症状缓解。移植后6个月随访,除1例患者因肺癌导致肿瘤标记物CA-153升高外,颅脑MRI及血生化指标均未出现明显异常,说明自体骨髓间充质干细胞移植治疗脑出血是安全可行的,且在近期内疗效确定,远期疗效尚待进一步观察。     

Chitosan-collagen porous scaffold and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for ischemic stroke

In this study, we successfully constructed a composite of bone marrow mesenchymal stem cells and a chitosan-collagen scaffold in vitro, transplanted either the composite or bone marrow mesenchymal stem cells alone into the ischemic area in animal models, and compared their effects. At 14 days after co-transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells and the hitosan-collagen scaffold, neurological function recovered noticeably. Vascular endothelial growth factor expression and nestin-labeled neural precursor cells were detected in the ischemic area, surrounding tissue, hippocampal dentate gyrus and subventricular zone. Simultaneously, a high level of expression of glial fibrillary acidic protein and a low level of expression of neuron-specific enolase were visible in Brd U-labeled bone marrow mesenchymal stem cells. These findings suggest that transplantation of a composite of bone marrow mesenchymal stem cells and a chitosan-collagen scaffold has a neuroprotective effect following ischemic stroke.     

Update on Therapeutic Mechanism for Bone Marrow Stromal Cells in Ischemic Stroke

Cerebral ischemia is a major cause of morbidity and mortality in the aged population, as well as a tremendous burden on the healthcare system. Despite timely treatment with thrombolysis and percutaneous intravascular interventions, many patients are often left with irreversible neurological deficits. Bone marrow stromal cells (BMSCs), also referred to as mesenchymal stem cells (MSCs), are a type of nonhematopoietic stem cells which exists in bone marrow mesh, with the potential to self-renew. Unlike cells in the central nervous system, BMSCs differentiate not only into mesodermal cells, but also endodermal and ectodermal cells. Moreover, it has been reported that BMSCs develop into cells with neural and vascular markers and play a role in recovery from ischemic stroke. These findings have fuelled excitement in regenerative medicine for neurological diseases, especially for ischemic stroke. There is now preclinical evidence to suggest that BMSCs grafted into the brain of ischemic models abrogate neurological deficits. Based on the overwhelming evidence from animal studies as well as in clinical trials, BMSC transplantation is considered a promising strategy for treatment of ischemic stroke. The goal of this review is to present an integrated consideration of molecular mechanisms in a chronological fashion and discuss an optimal BMSC delivery route for ischemic stroke.     

Generation of neural stem cell-like cells from bone marrow-derived human mesenchymal stem cells

Under appropriate culture conditions, bone marrow (BM)-derived mesenchymal stem cells are capable of differentiating into diverse cell types unrelated to their phenotypical embryonic origin, including neural cells. Here, we report the successful generation of neural stem cell (NSC)-like cells from BM-derived human mesenchymal stem cells (hMSCs). Initially, hMSCs were cultivated in a conditioned medium of human neural stem cells. In this culture system, hMSCs were induced to become NSC-like cells, which proliferate in neurosphere-like structures and express early NSC markers. Like central nervous system-derived NSCs, these BM-derived NSC-like cells were able to differentiate into cells expressing neural markers for neurons, astrocytes, and oligodendrocytes. Whole-cell patch clamp recording revealed that neuron-like cells, differentiated from NSC-like cells, exhibited electrophysiological properties of neurons, including action potentials. Transplantation of NSC-like cells into mouse brain confirmed that these NSC-like cells retained their capability to differentiate into neuronal and glial cells in vivo. Our data show that multipotent NSC-like cells can be efficiently produced from BM-derived hMSCs in culture and that these cells may serve as a useful alternative to human neural stem cells for potential clinical applications such as autologous neuroreplacement therapies.     

重组人粒细胞集落刺激因子干预后自体骨髓移植对骨折愈合的影响

背景：自体骨髓经皮移植促进骨折愈合已经成为临床一种治疗手段,其中骨髓间充质干细胞在局部微环境下所起到的作用已经得到共识。但是如何提高其在移植骨髓中的含量仍是目前面临的难题。已经有研究报道重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)可动员外周骨髓间充质干细胞快速增殖。 目的：探讨rhG-CSF干预的自体骨髓移植对兔桡骨骨折愈合的促进作用。 方法：制备桡骨中段3 mm宽骨折模型白兔56只,随机分为4组,每组14只。术后1 h,rhG-CSF组,自体骨髓组与PBS对照组均在白兔背部皮下注射rhG-CSF,1次/d,连续5 d。模型组皮下注射相应体积的生理盐水。术后5 d,自体骨髓组抽取自体骨髓经皮回植骨折部位,PBS对照组在骨折处注射相应体积的生理盐水。术后14,28 d取材进行影像学、组织学、组织形态计量学检测与分析。 结果与结论：rhG-CSF,自体骨髓,PBS对照组新生血管、骨小梁形成、4种骨痂记分、外骨痂厚度均优于模型组,尤以自体骨髓组效果最显著(P < 0.01或P < 0.05)。说明rhG-CSF干预能够促进骨折愈合,结合自体骨髓移植促进骨折愈合的效果更佳。     

慢性粒细胞白血病肿瘤干细胞的免疫功能

背景：研究认为间充质干细胞可能是骨髓造血微环境的免疫保护位点。由于慢性粒细胞白血病存在造血微环境异常和免疫异常,所以推测间充质干细胞可能在慢性粒细胞白血病的病理过程中扮演了一个重要角色。 目的：观察慢性粒细胞白血病骨髓来源的肿瘤干细胞的免疫学特征,比较其与正常人来源的间充质干细胞是否存在免疫功能的异常。 方法：分离正常人和慢性粒细胞白血病患者的骨髓间充质干细胞,分别检测它们对T细胞周期、活化、抑制和增殖的作用。 结果与结论：慢性粒细胞白血病和正常志愿者骨髓来源的间充质干细胞形态和表型没有差异,慢性粒细胞白血病患者来源的间充质干细胞抑制T细胞增殖的作用减弱,抑制T细胞周期及活化的能力减弱,慢性粒细胞白血病患者抑制T细胞凋亡的作用增强。提示慢性粒细胞白血病患者骨髓来源的间充质干细胞存在明显的免疫调节功能缺陷,如果使用慢性粒细胞白血病患者自体的间充质干细胞移植治疗可能不是一种很好的选择,对于骨髓增生异常综合征患者最好是选用异基因的间充质干细胞移植。     

Induced pluripotent stem cell-derived neural stem cell therapies for spinal cord injury

The greatest challenge to successful treatment of spinal cord injury is the limited regenerative capacity of the central nervous system and its inability to replace lost neurons and severed axons following injury. Neural stem cell grafts derived from fetal central nervous system tissue or embryonic stem cells have shown therapeutic promise by differentiation into neurons and glia that have the potential to form functional neuronal relays across injured spinal cord segments. However, implementation of fetal-derived or embryonic stem cell-derived neural stem cell therapies for patients with spinal cord injury raises ethical concerns. Induced pluripotent stem cells can be generated from adult somatic cells and differentiated into neural stem cells suitable for therapeutic use, thereby providing an ethical source of implantable cells that can be made in an autologous fashion to avoid problems of immune rejection. This review discusses the therapeutic potential of human induced pluripotent stem cell-derived neural stem cell transplantation for treatment of spinal cord injury, as well as addressing potential mechanisms, future perspectives and challenges.