缺氧性肾小管细胞损伤机制及丹参的保护作用

目的:探讨缺氧性肾小管细胞损伤机制及丹参的保护作用。方法:将人近曲肾小管上皮细胞随机分为对照组、模型组和丹参组,每组均设立6个时间点包括缺氧4、12、24 h和缺氧24 h后复氧4、12、24 h进行观察,其中丹参组设立0.10%、0.20%、0.30%、0.40%0、.50%5个浓度(生药浓度);采用倒置相差显微镜观察各组细胞生长状况及形态学改变,MTT法活细胞计数检测细胞成活率,放射免疫分析法检测培养细胞上清液TNF-α含量。结果:与对照组比较,模型组随缺氧时间延长,细胞数量逐渐减少,并伴形态改变,24 h达高峰,复氧后细胞数量增加,形态改变不明显;浓度0.10%丹参组细胞损伤改善最明显;TNF-α在缺氧/复氧各时间点均降低。结论:TNF-α参与了缺氧性肾小管细胞损伤病理过程;丹参对缺氧性肾小管细胞损伤具有保护作用。     

1,6-二磷酸果糖联合复方丹参注射液治疗新生儿缺氧性心肌损伤

缺氧性心肌损伤常见于有宫内窘迫或生后窒息的新生儿，我科应用1，6-二磷酸果糖联合复方丹参注射液治疗新生儿缺氧性心肌损伤，疗效满意，现报告如下。[第一段]     

丹参对心肌梗死的缺血损伤保护作用研究进展

心肌梗死的主要病理基础是心肌缺血缺氧、血液黏度增高、血小板凝集、动脉粥样硬化，心肌缺血损伤的主要产生机理为氧供／需失衡、自由基生成增多、细胞内钙超载、血液流变学异常、微血管损伤和白细胞的作用。     

丹参单体 IH764-3对马兜铃酸致人肾小管上皮细胞损害的保护机制研究

目的：探讨丹参单体IH764-3在马兜铃酸（aristolochic acid,AA）导致人肾小管上皮细胞系（HK-C）损害中的保护作用及机制。方法以含体积分数0．10胎牛血清的DMEM培养液培养HK-C细胞72 h。实验分为3大组（8小组）,AA组在培养液中加入浓度为20 mg／L的AA;观察组在培养液中加入浓度为20 mg／L的AA和不同浓度丹参单体IH764-3;对照组培养液中不加AA。培养24、48、72 h后,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各细胞培养液中转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）、金属蛋白酶2（MMP-2）;采用MTT法观察HK-C细胞活性,实时荧光定量PCR技术检测凋亡蛋白Caspase-3mRNA的表达情况。结果 AA刺激后,诱导TGF-β1、TIMP-1、PAI -1表达增加,MMP-2表达减少（ P ＜0．05）。经丹参单体IH764-3干预后,TGF-β1、TIMP-1、PAI-1表达减少,MMP-2表达增加,其中以IH764-380 mg／L效果最佳（ P ＜0．05）。 AA组及观察组较对照组HK-C细胞的活性均受到抑制,细胞的凋亡率增加,Caspase3-mRNA表达增高（ P ＜0．05）。观察组较AA组细胞活性明显增高,细胞的凋亡率明显下降,Caspase-3mRNA表达降低,观察组中以丹参单体IH764-380 mg／L效果最佳（ P ＜0．05）。结论丹参单体IH764-3可明显提高HK-C细胞抵抗AA导致细胞损伤的能力,保护HK-C细胞,其具体途径可能与抑制TGF-β1、TIMP-1、PAI-1、Caspase-3mRNA,升高MMP-2的表达而发挥作用。     

达格列净对高糖诱导的人近端肾小管细胞损伤的保护作用

目的 研究达格列净对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞（HK-2）损伤的保护作用。方法 将HK-2细胞随机分为空白组、对照组、模型组和实验组。空白组不进行任何干预;对照组加入5μmol·L^-1达格列净;模型组加入25 mmol·L^-1葡萄糖;实验组加入25 mmol·L^-1葡萄糖和5μmol·L^-1达格列净,各组细胞培养24 h后进行后续检测。用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖情况,用酶生化法和荧光显微镜法检测各组细胞内丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）水平,用酶联免疫吸附法检测各组细胞内超氧化物歧化酶（SOD）和转化生长因子-β1（TGF-β1）、肝细胞生长因子（HGF）水平。结果 空白组、对照组、模型组和实验组HK-2细胞的凋亡率分别为（4.73±0.46）%,（4.46±0.61）%,（35.42±2.37）%和（19.55±1.87）%;细胞增殖光密度值分别为0.52±0.09,0.49±0.07,0.13±0.03和0.29±0.05;细胞内MDA水平分别为...     

当归和丹参对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察丹参、当归及当归加丹参对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法:结扎兔冠状动脉左室支中段,制成急性缺血再灌注模型.缺血10min时,分别iv丹参注射液、当归注射液和当归注射液加丹参注射液,观察在急性缺血及再灌注状态下心功能及血浆肌酸磷酸激酶(CPK)和丙二醛(MDA)变化.结果:丹参、当归及丹参加当归都可以使模型兔心电图Ⅱ导联∑ST段压低;LVSP,±dp/dt_(max)和增强,血浆CPK和MDA降低.结论:尽管3种治疗对心肌缺血再灌注心肌损伤都有保护作用,但当归丹参1:1配伍应用与两单位药单用比较并无统计学差异,说明中药配伍的严格性.     

骨桥蛋白在狼疮性肾炎患者肾小管间质损伤中的作用

目的：观察狼疮性肾炎（LN）肾组织中骨桥蛋白（OPN）的表达，探讨其在LN患者肾小管间质病变中的作用，方法：采用微波免疫组化双重染色方法：观察40例狼疮肾炎和10例正常肾组织中OPN蛋白和KP1表达，用原位杂交检测LN及正常肾组织OPNmRNA表达，结果：狼疮性肾炎肾小管OPN mRNA和蛋白表达明显升高，并与间质巨噬细胞及肾间质病变明显相关，结论：OPN在导致LN间质巨噬细胞浸润及肾小管间质损伤中有重要作用。     

丹参联合缺血预适应对缺血性心肌损伤的保护作用

目的：研究丹参（SM）联合缺血预适应（IP）对缺血性心肌损伤的保护作用。方法：以整体麻醉SD大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎／松开作为缺血／再灌注动物模型，观察对心律失常程度和心肌梗塞范围的影响。结果：IP能减轻复灌性心律失常的严重程度，缩小心肌梗塞范围；SM能缩小心肌梗塞范围；SM联合IP与单纯P比较，心肌梗塞范围进一步缩小；SM联合IP与单纯SM比较，心律失常严重程度和心肌梗塞面积均进一步减小。结论：SM能加强IP的心肌保护作用。     

丹参联合厄贝沙坦治疗早期慢性肾衰的疗效

目的 探讨丹参对早期慢性肾功能衰竭(CRF)患者的肾保护作用.方法 63例CRF患者随机分为埘照组(31例)和治疗组(32例),对照组用厄贝沙坦治疗,治疗组用丹参+厄贝沙坦洽疗,疗程均为6个月.检测并比较治疗前后的血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Cr)、总胆同醇(TC),甘油三酯(TG)和尿蛋白.结果 两组患者的肾功能、尿蛋白和血脂均有明显改善,治疗组明显优于对照组.结论 丹参能够有效的降低CRF患者的尿蛋门水平,改善血脂代谢紊乱.     

丹参冻干粉针治疗稳定型心绞痛临床观察

目的：观察丹参冻干粉针治疗稳定型心纹痛的临床疗效。方法采用随机对照原则将我院134例冠心病稳定型心纹痛患者分为实验组和对照组,其中对照组采用常规治疗,给予阿司匹林、辛伐他汀及单硝酸异山梨酯注射液静点;实验组在对照组的用药基础加用丹参冻干粉针静点,两组均每天1次静点,治疗10d后统计疗效。结果实验组疗效显著,其临床疗效,心电图疗效和心肌梗死发生率与对照组相比较具差异有统计学意义（P＜0.05）。结论丹参冻干粉针治疗稳定型心绞痛疗效显著,作用安全,可有效减轻患者临床症状及干预患者预后,值得临床推广应用。     

Preexistence of chronic tubular damage in cases of renal cell cancer after long and high exposure to trichloroethylene

 Substantially more cases of tubular damage were found among renal cell carcinoma patients who had been exposed to high levels of trichloroethylene over many years than among renal cell carcinoma patients who had not been exposed to trichloroethylene. This supports the hypothesis (Goeptar et al. 1995) that chronic tubular damage may be regarded as a necessary precondition for trichloroethylene to exert a nephrocarcinogenic effect. The findings also indicate that the urine protein patterns identified with SDS-PAGE may represent a valuable parameter for effect biomonitoring of persons exposed to high levels of trichloroethylene over many years. Received: 20 June 1995/Accepted: 21 August 1995     

肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤在肾间质纤维化中的病理学机制研究

目的：研究肾小管上皮细胞线粒体氧化损伤在肾间质纤维化中的病理学机制。方法：80只雄性大鼠随机平分为假手术组和UUO模型组,每组40只,行大鼠左侧输尿管结扎术,假手术组游离左侧输尿管但不予结扎,其余手术与UUO模型组相同。分别于术后d3、d7、d10、d14、d21每组处死8只,取大鼠左侧肾脏。①检测并比较假手术组和UUO模型组大鼠线粒体相关基因的表达水平;②检测两组大鼠肾脏组织COX和SOD含量变化;③检测两组大鼠肾脏组织RIF指数变化;④检测并比较肾体比、肾功能和肾组织Hyp含量动态变化。结果：与假手术组大鼠相比,①UUO模型组大鼠的线粒体相关基因的表达水平显著升高（P＜0.05）,包括线粒体mtDNA、再生基因（PGC1a、NRF1和Tfam）、断裂基因（Mfn1、Mfn2和Opa1）和融合基因（Drp1和Fis1）;②UUO模型组大鼠在造模后10d、14d和21d,肾脏组织中的COX水平显著升高（P＜0.05）,SOD水平显著降低（P＜0.05）,造模时间越长,UUO模型组大鼠COX水平越高（P＜0.05）,SOD水平越低;③UUO模型组大鼠造模后10d、14d和21d,肾脏组织RIF指数均显著升高（P＜0.05）;④UUO模型组大鼠肾体比明显升高且一直维持在较高水平（P＜0.05）,造模时间越长,模型大鼠血清Scr和BUN水平及肾组织Hyp含量水平逐渐升高,与假手术组相比均具有显著差异（P＜0.05）。结论：与假手术组大鼠相比,UUO模型组大鼠肾组织中的线粒体更活跃,线粒体基因、再生基因、断裂基因和融合基因含量升高,COX含量升高,SOD含量降低,RIF指数升高,肾体比、血清Scr和BUN和肾组织Hyp水平显著升高。     

肾小管上皮细胞原代培养及鉴定

目的探讨肾小管上皮细胞体外培养及鉴定方法。方法①采用机械分离结合酶消化法获取肾小管,原代培养肾小管上皮细胞。②利用动态观察、细胞化学染色法及细胞的透射电镜扫描进行鉴定。结果①肾小管段不同换液时间24h、48h、72h、96h、120h,贴壁率分别为:0.1378±2.048E-02、0.3300±7.969E-02、0.5411±3.919E-02、0.5344±2.506E-02、0.4389±3.018E-02,以72小时首次换液最佳。②肾小管上皮细胞成功原代培养并于第4～7天处于对数生长期。细胞碱性磷酸酶染色均呈阳性,透射电镜扫描见细胞面向液层的刷状缘有大量微绒毛形成。结论采用机械结合酶消化法可分离到较纯的肾小管,肾小管段培养72h首次换液细胞贴壁最佳,肾小管上皮细胞用化学结合形态学及鉴定。     

低分子右旋糖酐和丹参注射液对造影剂肾损伤的保护作用

目的 探讨低分子右旋糖酐和丹参注射液对经皮冠脉介入(PCI)治疗后造影剂肾损伤的保护作用和预防肾功能损伤的效果.方法 将行PCI术的120例患者随机分为低分子右旋糖酐和丹参注射液治疗组与对照组各60例,治疗组在常规治疗基础上加用低分子右旋糖酐250 ml和丹参注射液16 ml应用7d.两组均在治疗前及术后第1天、第6天检测血尿素氮、肌酐、β2微球蛋白及24h蛋白尿.结果 两组造影剂应用后第1天血尿素氮、肌酐、β2微球蛋白及24h蛋白尿均升高,第6天恢复至基线水平,治疗组明显低于对照组(均P＜0.05).结论 围手术期应用低分子右旋糖酐和丹参注射液治疗可有效减轻造影剂对肾脏的损害,减低肾功能不全的发生率.     

Rofecoxib对肾间质纤维化大鼠TGF-及肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨Rofecoxib对肾间质纤维化大鼠的肾脏保护机制。方法以UUO建立肾间质纤维化大鼠模型,随机分为假手术组、UUO组及Rofecoxib干预组,检测不同时间点肾脏COX-2、TGF-1及肾小管上皮细胞凋亡的表达。结果与假手术组相比,UUO组随着模型时间延长,TGF-β、COX-2蛋白表达明显增加,可检测到较多的凋亡细胞（P〈0．01）,用药组与UUO组平行相比TGF-β,、COX-2蛋白表达明显减少（P〈0．01）,凋亡细胞明显减少（P〈0．01）。结论特异性COX-2抑制剂Rofecoxib可能通过阻断UUO大鼠肾组织COX-2活性,下调TGF-的蛋白合成,减少肾小管细胞的过度凋亡,起到肾脏保护的作用。     

雷帕霉素对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨雷帕霉素对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外培养肾小管上皮细胞(HK-2细胞),选择100, 200, 400, 800 ng/ml雷帕霉素作用于HK-2细胞24、48、72h。利用 MTT实验分析雷帕霉素对HK-2细胞增殖的影响,并计算各浓度及不同时间的增殖抑制率优化雷帕霉素作用的浓度和时间;选择最佳的作用浓度和作用时间处理HK-2细胞,通过流式细胞分析技术,分析雷帕霉素对HK-2细胞的凋亡的影响。结果 MTT实验显示不同浓度的雷帕霉素,对增殖有抑制作用,且表现浓度依赖性和时间依赖性;RAPA可以促进HK-2细胞的凋亡。结论 通过HK-2细胞模型研究,发现雷帕霉素可抑制肾小管上皮细胞增殖、促进细胞凋亡。     

Gentamicin and sisomicin — Induced renal tubular damage

Summary Early signs of aminoglycoside — induced renal tubular damage were detected in 26 patients given gentamicin and 23 given sisomicin. The urinary elimination of 3 low molecular weight proteins (LMWP) — beta 2 microglobulin, retinol binding protein and lysozyme (LZM), and the urinary activity of 2 enzymes — alanine aminopeptidase and N-acetylbeta-glucosaminidase — was measured before, during and after treatment. In gentamicin — treated patients LMWP elimination increased, especially LZM which rose markedly during treatment and returned to normal values after its end. Enzyme activities also rose while gentamicin was being given. Sisomicin produced smaller changes. As neither the mean serum creatinine nor the mean urinary elimination of transferrin were increased, glomerular function was probably not affected. However, tubular damage was detected, as shown by the LMWP output (especially LZM) and increased enzyme activity. Urinary LMWP and enzyme measurements are presented as sensitive and reliable methods to monitor early aminoglycoside — induced tubular impairment. It is suggested that the different renal toxicities of gentamicin and sisomicin are related to differences in their accumulation in the renal cortex.