不同干预方法对麻醉机通气系统病原微生物的影响

目的观察麻醉机通气系统病原微生物的定植特点,探讨不同干预途径下对麻醉机通气系统病原微生物的影响。方法选择择期全麻插管手术患者150例,按随机数字表法分为未干预组（A组）、麻醉消毒机组（B组）及呼吸过滤器组（C组）,每组各50例,B组在麻醉开始前使用麻醉消毒机消毒麻醉机内部回路,C组在气管导管与一次性呼吸回路之间放置呼吸过滤器。麻醉前后采集呼吸环路及呼吸过滤器标本进行细菌培养;并对患者进行术后随访,观察肺部感染发生情况。结果麻醉机呼吸环路定植的主要为条件致病菌。麻醉结束后,B组麻醉机吸气端、呼气端及储气囊端口的病原菌阳性检出率明显低于A组（P〈0.05）,C组各端口的检出率与A组相似（P〉0.05）,C组呼吸过滤器患者面菌落阳性率明显高于呼吸环路面（P〈0.05）。B组、C组术后肺部感染发生率均低于A组（P〈0.05）。结论使用麻醉消毒机或呼吸过滤器均可降低全麻插管患者术后呼吸道感染发生率。     

不同测序方法在病原微生物鉴定中应用的研究进展

快速准确的微生物鉴定有利于指导临床治疗用药和控制传染病流行。传统病原微生物鉴定耗时且应用范围有限,越来越多测序方法被用于病原微生物研究。现从16S rRNA测序在细菌鉴定分析中的应用、18S rRNA和转录间隔区序列（internally transcribed spacer sequences, ITSs）在真菌或寄生虫等真核微生物鉴定分析中的应用、全基因组测序（whole genome sequencing, WGS）在可分离培养的单个微生物鉴定中的应用、宏基因组测序（metagenomic sequencing,MGS）在未知感染的微生物检测中的应用进行综述,以期为病原微生物的鉴定方法提供参考。     

核酸检测中两种核酸提取方法的比较

为了提高输血安全，有效缩短EIA的“窗口期”，检出病毒变异株，降低血源性病毒的传播，深圳市血液中心除按献血法要求对血液进行常规检测外，还对常规检测结果合格的血液标本进行核酸检测。     

血清HCV RNA不同提取方法的对比研究

目的:探讨不同方法提取丙型肝炎患者血清HCV RNA ,比较每种方法提取的RNA用于RT-PCR荧光定量检测的敏感度.方法: 分别采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法、固相吸附法、柱式总RNA抽提法提取7例疑似 HCV感染者血清标本中的HCV RNA,采用实时荧光定量PCR法进行检测.结果:采用异硫氰酸胍-酚氯仿法、蛋白酶K-酚氯仿法提取HCV RNA用于核酸检测有漏检现象,而采用固相吸附法和柱式总RNA抽提法,敏感度均可达到100%.结论采用固相吸附法和柱式总RNA抽提法提取血清HCV RNA具有较高的敏感度,在实时荧光定量PCR法检测中具有重要的临床价值.     

不同核酸提取方法检测HIV病毒载量和耐药基因的研究

目的比较5种核酸提取法提取HIV RNA的效率。方法收集2015年HIV病毒感染者血样,使用不同核酸提取方法平行检测Ct值及载量值,分析检测的检出率、敏感性、变异系数、稳定性,并进行耐药扩增。结果 5种提核酸方法检出率国产磁珠法最高,5种方法差异无统计学意义(χ2=7.98,P=0.09);Ct值从小到大顺序为:国产磁珠法≥离心柱法大批量法≥进口磁珠法试剂盒自带法;重复性比较表明国产磁珠法检测结果较稳定;核酸胶显示国产磁珠法提取RNA浓度最高;提取方法不影响耐药关键位点检测。结论 5种核酸提取方法均能检测HIV信息,国产磁珠法提取病毒核酸进行检测,敏感性和稳定性均较高。     

实验动物皮肤病原真菌核酸鉴定方法的建立

目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌.方法选取真菌CHS1基因中一段序列设计皮肤真菌通用引物和选取一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应（PCR）扩增三种动物皮肤病原真菌标准株：须毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌.结果两种引物扩增产物片段大小在三种真菌之间有明显不同.结论本实验方法可快速特异性检测实验动物皮肤病原真菌.     

四种腺病毒核酸提取方法的比较

目的通过蛋白酶K法、苯酚法、病毒DNA/RNA提取试剂盒、腺病毒荧光PCR检测试剂盒等四种腺病毒核酸提取方法的比较,为进一步研究腺病毒的分子生物学特性选择合适的方法提供参考。方法以腺病毒感染的A549细胞为样品,分别以蛋白酶K法、苯酚法、病毒DNA/RNA提取试剂盒、腺病毒荧光PCR检测试剂盒等四种方法提取核酸,核酸经紫外分光光度计检测A260/A280的比值后,用荧光定量PCR方法检测核酸中腺病毒拷贝数浓度,并记录四种腺病毒核酸提取方法所需的操作时间。结果蛋白酶K法、苯酚法、病毒DNA/RNA提取试剂盒、腺病毒荧光PCR检测试剂盒等四种方法提取核酸的A260/A280的比值依次为1.85532、1.7377、1.81474和1.43934,核酸中腺病毒拷贝数浓度依次为4.9×105copies/mL、3.94×103copies/mL、2.66×106copies/mL和6.15×106copies/mL,提取核酸所需的时间分别为1.5、15、0.5和0.5h。结论四种腺病毒核酸提取方法中,蛋白酶K法简单快捷、成本低廉,适合一般实验室使用;苯酚法适合用于提取细胞培养上清中病毒的核酸;病毒DNA/RNA试剂盒...     

利用M-RAPD技术绘制不同病原微生物基因指纹图

目的探讨一种多重随机引物PCR方法(M-RAPD)对不同种株病原微生物进行鉴定的可能性。方法将10个碱基的随机引物进行随机组合,利用三条组合的随机引物在较高的退火温度下对不同种株病原微生物染色体。DNA进行扩增,通过15g／L琼脂糖凝胶电泳获得不同种株病原微生物的扩增图谱,并用软件Gelworks 1d Intermediate进行分析。结果初步实验表明,M-RAPD技术可以得到稳定的种株特异的DNA指纹图谱,其条带清晰、数目较多、片段大小分布均匀。三引物的扩增产物包含了其中任意两引物的绝大多数扩增产物,大、小片段均可出现增减,但小片段更易增加;对同一种病原微生物三引物所提供的基因信息要远多于两引物所提供的信息,增加的信息量约为原来的50％;不同耐药菌株问及其与相应标准株问差异亦很明显,但同种不同株问相同的扩增产物要多于不同的扩增产物。软件Gelworks 1d Intermediate的分析数据亦支持我们的实验结果。结论M-RAPD技术对不同种株病原微生物染色体DNA扩增时,能获取较丰富的遗传信息,可迅速、简便地鉴定不同种株的病原微生物。     

手足口病不同标本类型病原检出率对比分析

目的对比分析手足口病患儿咽拭子和肛周拭子标本的病原检出率。方法采用实时荧光定量PCR技术对310例手足口病患儿的咽拭子和肛周拭子标本进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)、肠道通用型病毒检测。结果 310例患儿的咽拭子、肛周拭子标本中,肠道通用型病毒阳性率分别为73.87%、89.68%,EV71阳性率分别为14.52%、20.00%,Cox A16阳性率分别为6.45%、9.35%。两种类型标本中肠道病毒通用型、肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒Cox A16型阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论手足口病患儿肛周拭子病原标本检出率高,提倡及时优先采集肛周拭子标本。     

五味子不同提取工艺提取有效成分的对比研究

五味子为木兰科植物五味子[Schisandm chinensis（Turcz．）Baill．]的干燥成熟果实，被中国药典2000年版收载（习称北五味子）。北五味子主产地为辽宁、黑龙扛、吉林等。本草中均列为上品，认为有益气、明目、补不足、养五脏、壮筋骨等作用。中医作为收敛、滋补强壮药使用^[1]。现代研究证明，[第一段]     

白术挥发油中苍术酮不同提取方法的薄层对比

比较不同的提取方法对白术挥发油中苍术酮的提取效果，对提取后的样品经薄层色谱鉴别并与对照品比较，发现超临界流体萃取法和渗漉法得到的提取液有效成分较为完全。     

不同核酸提取法对HCMV-DNA准确定量的影响

目的 评价不同核酸提取法对人巨细胞病毒核酸(HCMV-DNA) 荧光定量PCR准确定量的影响.方法 含HCMV AD169株病毒颗粒的病毒培养物,以不同浓度分别与10份健康人HCMV-DNA阴性血浆标本混合;另取15份临床移植患者HCMVpp65抗原血症阳性血浆样本,上述2种标本分别用碱裂解吸附法、沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿抽提法提取病毒核酸模板,随后运用荧光定量聚合酶链反应对样本进行定量分析,并作评价.结果 15例临床检测阳性血浆标本中,酚-氯仿法提取效率为最高(P＜0.05),换算后其相对提取效率为100%,而沉淀煮沸裂解法为90%,碱裂解吸附法为65%;此外,沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿法的重复性均好于碱裂解吸附法,变异系数(CV)值分别为0.26、0.30和0.39.结论 经典、传统的酚-氯仿抽提法仍不失为实验室首选的核酸提取方法.     

不同核酸提取法对HCMV-DNA准确定量的影响

目的评价不同核酸提取法对人巨细胞病毒核酸(HCMV-DNA)荧光定量PCR准确定量的影响。方法含HCMVAD169株病毒颗粒的病毒培养物,以不同浓度分别与10份健康人HCMV-DNA阴性血浆标本混合;另取15份临床移植患者HC-MVpp65抗原血症阳性血浆样本,上述2种标本分别用碱裂解吸附法、沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿抽提法提取病毒核酸模板,随后运用荧光定量聚合酶链反应对样本进行定量分析,并作评价。结果15例临床检测阳性血浆标本中,酚-氯仿法提取效率为最高(P<0.05),换算后其相对提取效率为100%,而沉淀煮沸裂解法为90%,碱裂解吸附法为65%;此外,沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿法的重复性均好于碱裂解吸附法,变异系数(CV)值分别为0.26、0.30和0.39。结论经典、传统的酚-氯仿抽提法仍不失为实验室首选的核酸提取方法。     

一些新的病原微生物

近十年来,由于培养方法的改进,一些难于培养的病原微生物相继被发现,还有一些过去被忽略了的微生物引起了人们的重视。本文对军团病菌、新弧菌、亲水气单胞菌、空肠弯曲菌、艰难梭菌和爱滋病病毒作一概述。一、军团病菌(Legionnaire's disease bacteria, LDB) 1976年美国宾夕乏尼亚洲退伍军人协会在费城一饭店开会的会员中,暴发了一次病死率高的肺炎,其病原菌为一新菌属称军团病菌。几年来许多国家和地区都有此菌发现,在我国南京1983年首次从一例肺炎病人分离到此菌。在南京地区调查自然人群嗜肺军团菌抗体,发现在人群中分布较普遍,提示有军团菌隐性感染的存     

病原微生物基因组学研究

阐明病原微生物致病基因及其产物对于了解其致病性至关重要.由于致病机制复杂,因此有必要了解微生物细胞内哪些基因与体内定居有关、哪些与体内持续感染有关、哪些与毒力有关.如果能对病原微生物进行全基因测序,配合现代生物信息软件对基因顺序加以分析,就能对致病基因及产物、病原菌与宿主的关系以及病原菌引起的临床后果作出准确快速的判断.     

不同病原微生物所致的成人感染性心内膜炎的抗生素治疗

随着心脏介入治疗及心脏外科手术 (如球囊介入扩张术、人工瓣膜置换等 )的进一步开展 ,近几年感染性心内膜炎的患病率有增加的趋势。由于致病微生物耐药菌株的不断增加 ,给临床用药选择增加了困难 ,下面就感染性心内膜炎常见不同的致病微生物 :草绿色链球菌、牛链球菌、肠球菌、葡萄球菌以及ＨＡＣＥＫ类微生物 (副流感嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、伴放线放线杆菌、人心杆菌、腐蚀埃肯和金氏村菌 ) ;临床治疗抗生素的选择阐述如下。1　草绿色链球菌和牛链球菌1.1　对青霉素高度敏感的草绿色链球菌或牛链球菌　　此类致病菌所致的感染性心内膜炎…     

临床常见的病原微生物

病原微生物主要包括细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等,本文介绍几种在I临床工作中可以经常见的细菌、病毒和真菌。     

对比分析不同微生物检验的阳性率结果

目的对不同临床微生物检验阳性率的结果进行探讨,以为临床诊断和治疗提供有价值的依据。方法研究资料是本院在2014-2015年收集的200份临床检验的标本,按照时间段(2014年整年和2015年整年)分为两组,每个阶段为100份,依据标本的不同类型进行分类,依据标准化进行操作,检验微生物的阳性率,并统计出准确的阳性率结果。结果比较在两个时间段的呼吸道、尿液等的微生物检验阳性率,差异有显著的统计学意义(P0.05)。对不同时间段内的粪便标本阳性率进行对比,无明显的统计学意义(P0.05)。结论在不同的时间段内检验标本微生物的阳性率,能够较好的为临床的诊断、治疗提供科学、有效的病学信息,值得在临床中推广应用。     

探析婴幼儿腹泻病原微生物的检测方法及结果

目的研究婴幼儿腹泻病原微生物的检测方法,并分析检测结果。方法选取本院2017年10月至2018年9月收治的90例腹泻患儿作为研究对象,采集患儿的粪便标本进行病原微生物检测,统计病原微生物检出率。结果 90例腹泻患儿中共检出病原微生物54例(60.00%),轮状病毒感染、致病菌感染比例分别为45.56%、14.44%,数据对比差异具有统计学意义(P0.05);6个月-3岁患儿的轮状病毒阳性检出率高于6个月以下、3岁以上的患儿,差异具有统计学意义(P0.05);轮状病毒、致病菌高发期分别为9-2月份、6-8月份;致病菌中大肠埃希菌所占比例(46.15%)最高。结论经常规细菌培养法显示,轮状病毒为腹泻患儿的主要病原微生物,临床应加强对病原微生物的检测,并根据检测结果制定针对性的治疗方案。     

四种提取单纯疱疹病毒核酸模板方法比较

<正>单纯疱疹病毒(HSV),目前实验室常用检测方法多为PCR方法。但对于标本的处理及应材无统一标准,影响结果。因此本室收集387