贵州省汉族人群类风湿关节炎患者TRAF1/C5基因多态性研究

目的：探讨肿瘤坏死因子受体相关因子1（TRAF1）／补体5（C5）单核苷酸多态性与类风湿关节炎（RA）的相关性。方法提取300例 RA 患者（RA 组）和300例健康者 DNA（对照组）,实时荧光定量 PCR 方法检测 TRAF1／C5基因 rs3761847和rs10818488的单核苷酸多态性。结果TRAF1／C5存在基因多态性,但 RA 组与对照组比较基因多态性位点的单倍体基因型和等位基因频率的差异均无统计学意义（P ＞0．05）。连锁不平衡分析发现 rs3761847与 rs10818488之间存在强连锁不平衡。rs3761847位点 A 等位基因与类风湿因子（RF）阴性（P ＝0．001,OR ＝0．57,95％CI ：0．41～0．79）,抗 CCP 抗体（抗-CCP）阴性（P ＝0．001,OR＝0．51,95％CI ：0．35～0．76）及抗 Sa 抗体阴性均相关（P ＝0．02,OR ＝0．72,95％CI ：0．55～0．94）;rs10818488位点 G 等位基因仅与 RF 阳性相关（P ＝0．01,OR＝1．40,95％CI ：1．09～1．81）。结论TRAF1／C5基因多态性可能与贵州汉族人群 RA 的遗传易感性无关。     

miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223在类风湿关节炎患者外周血中检测的临床意义

目的研究miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达水平与健康人群的差异,探讨这3项指标的临床意义。方法收集68例RA确诊患者(RA组)及20例健康志愿者(健康对照组)的空腹静脉血,采用实时荧光定量PCR技术检测研究对象外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miR-223的相对表达水平;比较RA患者与健康志愿者外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的相对表达水平差异,Pearson分析RA患者血清这3项指标与类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、DAS28评分的相关性;构建miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的ROC曲线并计算曲线下面积(AUC),进而比较各指标单独及联合检测的灵敏度和特异度。结果 RA组患者外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的相对表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)。根据DAS28评分,进一步将RA患者分为缓解组和活动组,发现活动组患者外周血中miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223相对表达水平高于缓解组和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-16的表达水平与CRP、DAS28呈正相关(r=0.470、0.446,P<0.05),miRNA-146a的表达水平与CRP、DAS28呈正相关(r=0.408、0.407,P<0.05)。miRNA-223的表达水平与RF、CRP呈正相关(r=0.527、0.518,P<0.05)。miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223的AUC分别为0.63、0.75、0.89,灵敏度分别为68.70%、85.24%、87.63%,特异度分别为55.39%、63.57%、90.35%。三者联合使用作为RA标志物作ROC曲线,得到AUC为0.91,灵敏度为89.34%,特异度为91.56%。结论 miRNA-16、miRNA-146a、miRNA-223与RA发生、发展存在密切关系,联合检测具有更高的灵敏度和特异度,适用于临床早期诊断RA。     

白细胞介素23受体的基因多态性与类风湿关节炎的相关性

目的 探讨白细胞介素23受体(interleukin 23 receptor,IL23R)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)易感性之间的关系。方法 采用病例对照研究,以228例RA患者和228例正常对照为研究对象,从Hapmap中国人群数据库中选取IL23R基因的标签SNPs(tag-SNPs)。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)对IL23R基因的14个tag-SNPs位点进行基因分型,分析其等位基因分布频率及位点间的交互情况。结果 所检测的14个tag-SNPs中,共有3个位点rs10489628、rs10889675和 rs10889677的基因型频率分布在RA组和对照组之间差异有统计学意义(P<0.05)。各类型的单倍体在两组间的分布差异均无统计意义(P>0.05)。结论 IL23R基因的rs10489628、rs10889675和 rs10889677与RA之间存在相关性。     

类风湿关节炎患者关节液中miRNA表达谱研究及其临床意义

目的检测类风湿关节炎(RA)患者与健康对照者关节液中miRNA表达谱差异及临床意义。方法应用miRNA芯片技术检测3例RA患者和3例正常人关节液中miRNAs表达情况,筛选出表达差异显著的miRNAs,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。进一步研究候选miRNA与RA临床和实验室指标的相关性。结果 RA患者关节液miRNA表达谱中23个miRNA较健康对照者发生显著改变。qRT-PCR检测结果与芯片结果相符。RA患者与健康对照者关节液中miR-146a的表达差异最为显著。Pearson相关分析显示,RA患者关节液中miR-146a的表达与类风湿因子(RF)和DAS28评分呈正相关。ROC曲线分析结果显示,miR-146a曲线下面积(AUC)为0.71,关节液miR-146a预测RA的灵敏度为85.29%,特异度为61.54%。结论 RA患者关节液与健康人关节液存在表达差异显著的miRNAs。miR-146a在RA患者关节液中表达显著升高,其水平与RA的临床和实验室指标存在显著相关性。     

中国河北地区汉族健康人与RA患者padi4_94单核苷酸多态性的研究

目的研究中国河北地区汉族人群PADI4基因padi4_94位点多态性及其分布特征。方法选取河北地区汉族健康个体106例和类风湿关节炎(RA)患者115例,采用直接测序法对padi4_94位点单核苷酸多态性进行分析,探讨此位点SNP与抗CCP抗体产生的关系。结果本地区汉族人群padi4_94位点存在AA、AG和GG等3种基因型,健康组与RA组的基因频率及等位基因频率无明显区别,且这种SNP并不对RA患者抗CCP抗体的存在产生影响。结论中国河北地区汉族人群padi4_94位点存在多态性,但可能不影响RA的易感性以及抗CCP抗体的产生。     

类风湿关节炎遗传多态性及NSAID药物临床疗效的研究

目的研究中国汉族人群中类风湿关节炎(RA)发生危险因素与环氧合酶2(COX-2)rs5275基因多态性的关系,以及非甾体抗炎药(NSAID)的临床疗效。方法采用以医院为基础的病例-对照研究,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析214例类风湿关节炎患者和478例对照COX-2 rs5275(8473 T>C)基因基因多态性,计算各种基因型的RA发生风险及其95%可信区间,其中60例的RA患者给予NSAID药物治疗,并随访治疗3个月后的疗效,根据治疗前后的DAS28评分,分析NSAID药物的疗效。结果 COX-2 rs5275基因多态3种基因型TT、TC、CC在RA组和对照组的频率分别为62.5%(TT)、32.7%(TC)、4.8%(CC)和67.5%(TT)、28.0%(TC)、4.5%(CC),Logistic回归发现与携带COX-2 rs5275 TT基因型的个体相比较,携带COX-2 rs5275 CC等位基因型与RA的发病风险无明显相关。60例RA患者药物治疗后的DAS28评分较治疗前有明显下降。结论 COX-2 rs5275基因多态性可能不是RA发生的危险因素,需要进一步研究证实,NSAID药物对RA疗效显著。     

TGF-β1-509 C/T基因多态性与类风湿性关节炎相关性研究

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎(RA)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析90例RA患者及95例正常对照组的TGF-β1基因启动子-509C/T多态性.结果 RA组与正常对照组-509C/T基因型频率分布有显著差异(P＜0.05),-509 CC基因型RA组高于对照组(33.3%vs 21.1%),而-509TT型明显低于正常对照组(21.1%vs 36.8%);RA患者组-509位点的等位基因频率与正常对照组也有显著差异(P＜0.01),RA组C等位基因频率显著高于对照组(56.1%vs42.1%),T等位基因频率低于对照组(43.9%vs 57.9%).结论 TGF-β1基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎显著相关.     

A novel CD209 polymorphism is associated with rheumatoid arthritis patients in Taiwan

Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the promoter region of CD209 (cluster of differentiation 209) may influence expression levels, and higher expression of CD209 on immune cells correlate with severity of cartilage destruction in patients with rheumatoid arthritis (RA). Due to the lack of a comprehensive study, this study aimed to investigate the CD209 promoter variants and haplotypes in a Taiwanese population and the association with RA development. Deoxyribonucleic acid (DNA) of peripheral blood mononuclear cells from 126 RA patients and 124 healthy controls was purified, and the CD209 gene promoter was amplified by polymerase chain reaction and analyzed by Sanger sequencing. Results showed that a novel variant −96C>A polymorphism in CD209 promoter was identified in the Taiwanese population, and the frequency was significantly higher in RA patients than in controls (11.51% vs. 2.42%, P < .0001). The odds ratio (OR) for the development of RA was 5.88 (95% CI 2.35–14.74, P < .0001). Other known variants were also evaluated; for instance, −1180 T/T (rs7359874) was increased in RA patients, and the OR for the development of RA was 3.26, 95% CI 0.85–12.52, P = .07). Besides, the haplotype frequencies were calculated; −1180A‐939C‐871 T‐336 T‐139 T‐96A and −1180 T‐939 T‐871C‐336 T‐139C‐96A were increased in RA patients (P = .004 and 0.05, respectively). In summary, CD209‐96A variant could be an important factor for the development of RA in the Taiwanese population.     

FRAX评估类风湿关节炎患者骨质疏松性骨折风险的临床应用

目的探讨骨折危险性评估工具(FRAX)评估类风湿关节炎(RA)患者骨质疏松性骨折风险的临床应用。方法选择本院就诊RA患者54例,采集患者骨折危险因素等临床资料,应用FRAX,使用或不使用骨密度(BMD)分别计算出未来10年髋部骨折及主要骨质疏松性骨折的概率,对结果进行分析比较。结果 54例RA患者,未使用BMD未来10年髋部骨折概率0~20%,主要骨质疏松性骨折概率2.5%~24%;使用BMD计算的骨折概率高于未使用BMD计算的骨折概率,差异有统计学意义(P<0.01);糖皮质激素疗程≥1年的患者使用BMD计算的骨折概率高于未使用BMD计算的骨折概率,差异有统计学意义(P<0.01);按骨折风险分组,中高危组与低危组在类风湿因子、抗ccp、c反应蛋白水平方面的差异有统计学意义(P<0.01)。结论 FRAX可作为评估RA患者骨质疏松性骨折风险的一种切实可行的方法,若联合BMD可更准确地评估骨折风险。类风湿因子、抗ccp、C反应蛋白高水平的RA患者更应注重骨质疏松的防治。     

miR-146a靶向调控MIF基因对胶质瘤细胞增殖的影响

目的研究微小RNA-146a(miR-146a)靶向调控巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因对胶质瘤细胞增殖的影响。方法回顾性收集2017年6月至2019年7月济南市人民医院收治的经手术病理证实的胶质瘤患者36例,取胶质瘤组织和癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miR-146和MIF表达水平。体外培养U87胶质瘤细胞系,检测U87中miR-146a水平,并将U87细胞株分为转染miR-146a模拟物组(miR-146a mimic组)和miR-146阴性对照组(NC组)。采用双荧光素酶检测系统和集落形成实验分析miR-146a与MIF 3’UTR基因靶向关系。采用RT-PCR检测U87细胞转染miR-146a mimic和NC后,MIF mRNA和蛋白表达水平。结果脑胶质瘤组织miR-146a水平为0.30±0.13,显著低于癌旁组织(0.63±0.19),MIF水平为0.54±0.08,显著高于癌旁组织(0.41±0.15),差异均有统计学意义(P <0.05)。miR-146a mimics+pGL3-MIF 3’UTR-Wt共转染组荧光信号为0.43...     

Genetic variants in the angiopoietin-2 gene are associated with increased risk of ARDS

Objective  Angiopoietin-2 (Ang-2) is a potent regulator of vascular permeability and inflammation in acute lung injury and acute respiratory distress syndrome (ARDS). Genetic variants in the Ang-2 gene may lead to altered activities of Ang-2 (or ANGPT2) gene. The aim of this study was to assess if genetic variants of Ang-2 are associated with the risk of ARDS. Design  Unmatched, case-control study nested within a prospectively enrolled cohort. Setting  Intensive care units (ICU) of an academic medical center. Patients  About 1,529 critically ill patients with risk factors for ARDS consecutively admitted to the ICUs from 1999 to 2006. Cases were 449 patients who developed ARDS and controls were 1,080 subjects who did not developed ARDS. Intervention  None. Measurements and results  Nine tagging SNPs (tSNPs) spanning the entire Ang-2 gene were genotyped in all patients. The results were analyzed using logistic regression models, adjusting for covariates. The variant T allele of one tSNP (rs2515475) was significantly associated with increased risk of ARDS (OR_adjusted = 1.28; P = 0.042). This association was stronger in subjects with extrapulmonary injuries (OR_adjusted = 1.79; P = 0.004). Haplotype TT in block 2 containing the T allele of the rs2515475 was also significantly associated with higher risk of ARDS (OR_adjusted = 1.42; P = 0.009), particularly in subjects with extrapulmonary injuries (OR_adjusted = 1.90; P = 0.004). Conclusion  Common genetic variation in the Ang-2 gene may be associated with increased risk of ARDS, especially among patients with extrapulmonary injuries. Electronic supplementary material  The online version of this article (doi:) contains supplementary material, which is available to authorized users. L. Su and R. Zhai contributed equally to this work.     

类风湿关节炎患者蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22基因多态性的研究

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(the protein tyrosine phosphatage nonreceptor 22,PTPN22)基因1123G＞C(rs2488457)单核苷酸多态性(SNP)与类风湿关节炎(RA)的关系.方法 采用实时荧光定量PCR对200例RA患者,100例其他风湿病患者,200名健康体检者PTPN22基因进行分型.用SPSS 11.0软件进行统计学分析和行×列表X2检验.结果 RA组PTPN22 CC基因型频率(0.120)与其他风湿病组(0.020)及健康对照组(0.015)比较差异有统计学意义(X2 值分别为18.708和24.337,P均＜0.01),而其他风湿病组与健康对照组比较,差异无统计学意义(X2值为1.066,P＞0.05);RA组C等位基因频率(0.360)明显高于其他风湿病组(0.190)及健康对照组(0.215),且差异有统计学意义(P＜.005).结论 PTPN22基因可能是RA的易感基因和RA等自身免疫病治疗的靶基因之一.     

微小RNA-146a在脂多糖诱导肺泡巨噬细胞中的表达

目的 观察脂多糖(LPS)诱导对NR8383肺泡巨噬细胞微小RNA-146a(miRNA-146a)表达的影响.方法 将体外培养的肺泡巨噬细胞株NR8383分成LPS刺激组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,培养6 h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测细胞miRNA-146a的表达.结果 LPS刺激组细胞培养上清液中TNF-α含量(ng/L)较PBS对照组明显升高(650.26±40.53比6.23±1.76,P<0.01),细胞miRNA-146a表达水平较PBS对照组上调了约(5.33±0.81)倍(P<0.01).结论 LPS刺激后,miRNA-146a在NR8383细胞中表达增高,其可能参与了NR8383肺泡巨噬细胞的炎症反应调控.     

贵州汉族类风湿性关节炎白细胞介素18基因的多态性与类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体的相关性研究

目的探讨贵州汉族人群白细胞介素18（interleukin-18,IL-18）基因启动子单个核苷酸多态性与类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的发生是否存在关联,以及对类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体产生的影响。方法采用序列特异性引物的聚合酶链反应技术分析107例RA患者和100例健康体检者的IL-18基因启动子在-607/-137位点的单个核苷酸多态性;分别采用乳胶凝集试验、酶联免疫吸附测定检测RA患者的类风湿因子和抗环瓜氨酸肽抗体。结果 RA患者组与健康对照组在IL-18基因-607位点的等位基因频率的分布及基因型频率的分布比较差异均有统计学意义（χ2=7.651、4.968,P〈0.05）,两组在-137位点的等位基因频率及基因型频率的分布比较均无统计学意义（χ2=1.439、1.833,P〉0.05）;在RA患者中,类风湿因子阳性率为69.2%,抗环瓜氨酸肽抗体阳性率为83.2%,IL-18基因-607位点的基因型在抗环瓜氨酸肽抗体阳性组与阴性组间的频率分布差异无统计学意义（χ2=0.709,P〉0.05）,而在类风湿因子阳性组与阴性组间的基因型频率分布差异有统计学意义（χ2=6.859,P〈0.05）。结论贵州地区汉族人群IL-18基因启动子-607位点的多态性与RA的易感性显著相关;IL-18基因启动子-607位点的多态性与RA患者类风湿因子存在关联。     

14847例就诊患者类风湿关节炎相关自身抗体检测结果分析

目的：探讨就诊人群中抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、抗角蛋白抗体（AKA）、抗 RA33抗体、磷酸6葡萄糖异构酶（GPI）、类风湿因子（RF）等类风湿关节炎相关抗体的阳性分布趋势,及其在不同疾病中的分布与临床应用价值。方法用固相酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗 CCP 抗体、抗 RA33抗体、磷酸6葡萄糖异构酶（GPI）、用间接免疫荧光法检测 AKA,用免疫比浊法检测 RF。结合患者临床资料分析这些自身抗体在不同年龄、性别和疾病中的阳性分布趋势及临床应用价值。结果抗 CCP 抗体、AKA、抗 RA33抗体、GPI、RF 例就诊人群的阳性率分别为26．22％、6．65％、7．13％、41．19％、32．95％;女性中抗 RA33抗体阳性率高于男性,男性抗 CCP 抗体阳性率高于女性（P ＜0．05）。在 RA 患者组各种抗体阳性率明显高于其他组,且抗体滴度也明显高于其他组。结论抗 CCP 抗体、AKA、抗 RA33抗体、GPI、RF 主要见于类风湿关节炎患者,但是也可出现在其他疾病中,但滴度较低。因此在临床诊疗过程需综合分析,应避免片面根据自身抗体检查结果所致误诊。     

类风湿关节炎患者肺部感染的临床特点及其危险因素分析

目的 探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）患者合并肺部感染的临床特点及危险因素。方法 回顾性研究合并肺部感染RA住院患者52例和未合并感染RA住院患者200例临床资料,其中严重感染21例,分析RA合并肺部感染及肺部严重感染的临床特点及危险因素。结果 RA患者中合并肺部感染52例,痰培养送检阳性率为36.54%,检出25株病原菌,其中细菌10株,支原体3株,真菌12株;肺部感染相关危险因素分析提示年龄＞60岁、病程≥10年、吸烟、慢性肺疾病、激素治疗为独立危险因素,抗风湿药物（DMARDs）治疗为保护因素。肺部严重感染相关危险因素分析提示病程≥10年、吸烟、慢性肺疾病、激素治疗、补体C4降低为独立危险因素,DMARDs治疗为保护因素。结论 RA患者肺部感染的致病菌主要是真菌和细菌,当RA患者病程≥10年、吸烟、合并慢性肺疾病、激素治疗、补体C4降低时应注意肺部严重感染风险,DMARDs治疗可以降低RA患者肺部感染的风险。     

类风湿关节炎患者天然、氧化脂蛋白(a)水平

目的分析类风湿关节炎(RA)患者天然、氧化脂蛋白(a)[Lp(a)]水平及其与炎症的关系,探讨Lp(a)在RA患者心血管病发生中的意义。方法选择RA患者56例,其中活动性24例,非活动性32例;正常对照60例。对受检者天然、氧化Lp(a)水平以及炎症指标进行检测。结果活动性RA患者天然、氧化Lp(a)水平均高于非活动性RA患者和对照组,而非活动组和对照组间无变化。血沉和C反应蛋白均分别与天然、氧化Lp(a)呈正相关。结论RA患者天然、氧化Lp(a)水平发生显著变化,炎症反应对Lp(a)代谢具调节作用,参与动脉粥样硬化的发生、发展。