小鼠透明带溶解液诱导人精子顶体反应

目的 研究小鼠透明带溶解液诱导人精子顶体反应的效果，建立人精子顶体反应模型，方法正常生育力人精子经ＢｉｇｇｅｒｓＷｈｉｔｔｅｎａｎｄＷｈｉｔｔｉｎｇｈａｍｍｅｄｉｕｍ（ＢＷＷ）获能５～６ｈ后，分别用小鼠透明带溶解液（ｍＺＰＳ），ｍＺＰＳ的缓冲液ｈａｌｏｇｅｎｂｕｆｆｅｒ（ＨＢ），Ｃａ＾２＋载体Ａ２３１８７处理１ｈ，对实验和对照组精子用经典的豌豆凝集素（ＰＳＡ）法检测顶体反应。结果 ｍＺＰＳ组的顶体     

利血平对人精子顶体反应的影响

用间接免疫荧光法对利血平作用后的人精子顶体反应进行了观察和分析。结果表明:利血平对由ionophore A23187(A23187)诱导的人精子顶体反应有明显的抑制作用,其抑制强度随利血平浓度的降低而减弱。提示利血平有希望成为一种新的外用避孕药。     

对人精子顶体反应率在优选及冷冻前后变化的实验研究

目的 旨在了解人精子顶体反应率优先及冷冻前后的变化。方法 应用甘油、甘油－卵黄、柠檬酸钠（GYC）及甘油－卵黄－柠檬酸钠－L－谷氨酰胺（GYCG）三种冷冻保护剂及上游法、Percoll密度梯度离心法及双曲管优选法，检测冻贮前后及优选前后人精子顶体反应率。结果 （1）人精子冻融后其顶体反应率在GYCG组无显著改变，而在甘油组、GYC组则明显下降；（2）在上游法、Percoll密度梯度离心法及双曲管优选法优选后顶体反应率均有显著增加。结论 冷冻复温使人类精子顶体反应率下降，GYCG对人类精子的顶体反应率有较好的保护作用；本研究中的三种优选方法均可增加精子顶体反应率。     

IL-1对冷冻复温人精子顶体反应的影响

目的：研究复温温度和白细胞介素－1（IL－1）对冷冻精子复温后存活率和顶体反应率的影响。方法：采用精液速冻法，不同浓度IL－1作用于解冻后的精液，以三色染色法检测顶体反应率。结果：对冻融精子37℃水浴复温效果优于41℃，10ng/ml,50ng/ml IL-1可减少精子存活率和顶体反应率。结论：一定剂量IL－1可降低精子存活率和顶体反应率，可能是由于IL－1可使Na^ -K^ -ATP酶活性降低，而对丙二醛（MDA）无影响。     

人精子顶体反应与孵育时间的关系

以人新鲜及冷冻精子在不同孵育时间内及不同Ａ２３１８７浓度下进行实验。采用低渗溶液处理以观察精子的死活及顶体反应情况，比较不同条件下，精子顶体反应的变化。结果表明：（１）新鲜及冷冻精子均可受Ａ２３１８７诱发，而出现顶体反应；（２）Ａ２３１８７可使部分精子在极短时间内出现顶体反应；（３）一定范围内延长孵育时间，可提高Ａ２３１８７的诱发效率；（４）人精子间存在明显不均一性。     

整合素VLA-5介导人精子激活作用的研究

目的　探讨人精子膜上的整合素 VL A- 5是否参与了人精子的激活。方法　采用整合素 VL A - 5的特异性配体纤连蛋白 ( Fn)作用于生育组和不育组人精子 ,以三色法染色观察 Fn作用前后顶体反应 ( AR)率的变化 ;预先用 Fluo- 3 /AM负载人精子 ,用流式细胞仪检测 Fn作用前后精子 [Ca2 + ]i 荧光强度的变化。结果　生育组 10 0nmol/L的 Fn作用于人精子后 AR率由 8.64 %± 2 .5 6%增高到 16.0 9%± 3 .18% ( P<0 .0 1) ,钙离子的荧光强度值由静息状态的 5 .73± 2 .45升高到 6.61± 2 .40 ( P<0 .0 1)。不育组 Fn作用前后 AR率由 7.0 9%± 0 .94%增高到10 .44 %± 2 .3 0 % ( P<0 .0 5 ) ,钙离子的荧光强度值无显著改变。结论　人精子膜上的整合素 VL A - 5参与了人精子的激活过程     

抗人精子单克隆抗体HZ4对人精子的作用

用人精子抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠制备抗人精子单克隆抗体。对其中ＨＺ４株进行抗生育作用测试。ＨＺ４使Ｉｏｎｏｐｈｏｒｅ诱导的人精子顶体反应率由７３．３％降至２８．５％；使人精子仓鼠卵穿透率由２４％降至０；但对精子免疫制动、精子顶体蛋白酶活性无影响。     

17β-雌二醇在体外诱导人胆管上皮细胞增殖的研究

目的：研究利用雌激素诱导人胆管上皮细胞的增殖作用,并探讨其临床作用。方法：用17β-雌二醇作用于人胆管上皮细胞,CCK8方法检测17β-雌二醇对人胆管上皮细胞生长的影响,Westernblot胆管上皮细胞的雌激素受体（ER-a,ER—β）表达水平,并通过ELISA检测上述两种培养条件下胆管上皮细胞培养上清中表皮细胞生长因子（epidermal growth factor,EGF）的分泌水平。结果：17β-雌二醇可以促进人胆管上皮细胞增殖,雌二醇组的人胆管上皮细胞ER-a,ER-p表达水平明显高于对照组（P〈0．05）,用ELISA检测两组的上清中表皮细胞生长因子（epidermal growthfactor,EGF）无显著性差异（P〉0．05）。结论：17β-雌二醇可以诱导人胆管上皮细胞增殖,主要通过胆管上皮细胞的雌激素受体表达水平上升,而不是表皮细胞生长因子的通路来实现的。     

The Relationship between Some lons and Acrosome Reaction of Human Sperm

Ｔｈｅ　Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｓｏｍｅ　ｌｏｎｓ　ａｎｄ　Ａｃｒｏｓｏｍｅ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｕｍａｎ　ＳｐｅｒｍＷａｎｇＣｈｕｎ－ｍａｎ（王春年）；ＸｉｅＷｅｎ－ｙｉｎｇ（谢文英）；ＸｕＳｈｅｎｇ（徐胜）ａｎｄＷａｎｇＹ...     

雌激素,胎盘生乳素,钙,磷与妊高征的关系

目的：探讨雌激素，胎盘生乳素，钙在妊高征发病中的作用及其相互关系，方法：采用放射免疫法及离心分析钙试剂，测定了４２例妊高征患者血清雌二醇，胎盘生乳素，钙，磷及尿钙，磷的含量，３４例同期门诊正常孕妇作为对照组，结果：轻度妊高征患者血清雌二醇明显增加（Ｐ〈０．０５）。重度妊高征患者血清胎盘生乳素显著减少（Ｐ〈０．０５），轻，中，重度妊高征患者血钙，尿钙含量显著降低（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．     

雌激素对人正常皮肤成纤维细胞的影响

目的:探讨雌激素对人正常皮肤成纤维细胞的影响,为进一步探讨雌激素抗皮肤衰老的机制和开发抗衰老护肤品提供新思路。方法:采集正常成人皮肤标本,分离培养真皮成纤维细胞;以流式细胞术检测17β-E2作用前后成纤维细胞内活性氧(ROS)水平的改变,以及检测丙二醛(MDA)含量和三种抗氧化酶(SOD,GSH-px,Cat)的活性。结果:①雌激素浓度为1×10-6-1×10-10mol/L(生理浓度至药理浓度范围之内)时,可促进人皮肤成纤维细胞的增殖;②雌激素浓度为1×10-7-1×10-10mol/L时,可以减少人正常皮肤成纤维细胞内MDA的生成,加速三种抗氧化酶的产生;③1×10-6-1×10-10mol/L雌激素作用于人皮肤成纤维细胞后,可以降低细胞内活性氧(ROS)的产生。结论:雌激素在一定浓度时具有改善人正常皮肤成纤维细胞生物学特性的作用,且药物浓度与对人皮肤成纤维细胞的作用密切相关。     

磷酸二酯酶抑制剂己酮可可碱对人精子受精力的影响

为进一步证明己酮可可碱(pentoxifylline,PF)对精子受精力的影响,对29例临床送检标本进行精液常规分析及体外受精实验.结果:6例精液常规及受精率均低于正常;14例精液常规正常, 但受精率低;9例精液常规及受精率均正常.所有标本均提取上游精子, 其中部分经体外获能后用作对照,部分用1mg/ml PF,37℃, 孵育0.5小时后再行体外获能.获能精子与去透明带金黄地鼠卵行异种体外受精,然后观察受精率,受精指数,及每个卵表面附着的精子平均数,结果提示PF对精液常规正常但受精力低下的精液标本有明显增强精子受精力的作用,这类患者精子经PF体外处理可能提高人工助孕技术的成功率.     

纤连蛋白抗血清对人精子受精能力的影响

采用体外异种穿卵试验的方法，研究纤连蛋白抗血清对人精子受精能力的影响，统计不同浓度的纤连蛋白抗血清作用下的穿卵率变化。结果发现：低浓度的纤连蛋白抗血清能使人精子穿透去透明带金黄地鼠卵的穿卵率有所提高；高浓度的纤连蛋白抗血清则对人精子的穿卵率无影响。     

雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道的作用

目的 研究雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流的影响.方法 用急性酶分离法分离人肠系膜平滑肌细胞,采用单通道膜片钳技术记录该细胞上的钙激活钾通道电流.结果 雌激素浓度依赖性的不可逆性的激活人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道.在细胞贴附式膜片(cell-attached patch)下,膜电位为 50 mV时,10、70、150、200、300 μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0214±0.0112分别增加到0.0385±0.0146(n=8,P＜0.05)、0.0425±0.0251(n=8,P＜0.01)、0.0614±0.0152(n=8,P＜0.01)、0.1263±0.0346(n=8,P＜0.01)、0.2636±0.1046(n=8,P＜0.01).在内面向外式膜片(inside-out patch)下,膜电位为 50 mV时,10、70、150、200、300 μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0342±0.01024分别增加到0.0454±0.0231(n=8,P＜0.01)、0.0617±0.0137(n=8,P＜0.01)、0.0980±0.0202(n=8,P＜0.01)、0.1203±0.0153(n=8,P＜0.01)、0.3149±0.0851(n=8,P＜0.01).随着雌激素浓度的增加,通道活动逐步被激活,这种作用冲洗后不可逆.结论 雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流有一定激活作用,提示雌激素对人肠系膜阻力血管有一定的舒张作用.     

重组人透明带3肽段rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发顶体反应及其机制

目的探讨大肠杆菌重组表达的rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348生物学特性和功能，研究rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348能否诱发人精子顶体反应及其相关机制。方法rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发人精子顶体反应用金霉素染色法进行评价，同时研究了G特异蛋白抑制剂白日咳毒素（PTX）、钙离子螯合剂EGTA和T型钙通道抑制剂pimozide对rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发人精子顶体反应的影响；同时用荧光分光光度计监测rhuZP3a^22-176或rhuZP3b^177-348刺激获能精子胞内钙（[Ca^2＋]i）浓度的变化。结果不同浓度的rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348均能诱导人精子AR，其中rhuZP3a^22-176诱导人精子AR呈浓度依赖方式。PTX、EGTA和pimozide可以分别抑制rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发的顶体反应。rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348诱发的顶体反应是由于刺激获能人精子[Ca^2＋]i升高所致，但rhuZP3a^22-176诱发[Ca^2＋]i升高的方式与rhuZP3b^177-348诱发[Ca^2＋]i升高方式不尽相同，rhuZP3a^22-176只能引起[Ca^2＋]i升高，而rhuZP3b^177-348既有[Ca^2＋]i升高，又伴有持续升高。上述精子[Ca^2＋]i升高可被EGTA和pimozide抑制。结论rhuZP3a^22-176和rhuZP3b^177-348通过激活G蛋白使胞外钙通过T型钙通道内流促使[Ca^2＋]i上升，从而引起精子顶体反应，这与人类天然ZP3诱导顶体反应作用相似。     

雌激素对正常人精子受精能力的影响及其机制初探

目的 研究雌激素物质17β-雌二醇(E2)对正常生育男性体外受精能力的影响,并初步探讨其可能的机制.方法 精子悬液中分别加入不同浓度的E2及非透膜性交联物雌二醇一牛血清白蛋白(E2-BSA),获能4h后行体外受精,观察卵子受精率(FR)和受精指数(FI)的变化;进一步去除培养液中钙离子(Ca2+),再次观察无钙环境下E2对人精子FR和n的影响.结果 一定浓度的E2(1μmol/L、10μmol/L)可显著提高人精子的FR和FI(P＜0.05),较低和较高浓度的E2(0.1μmol/L、100μmol/L)则对人精子FR和FI无显著影响(P＞0.05);另外,非透膜性大分子物质E2-BSA(2mg/L)也可明显提高人精子的FR和FI(P＜0.05).去除获能液中的Ca2+后,E2对人精子FR和FI无显著影响(P＞0.05).结论 培养液中加入一定浓度的E2可提高人精子的体外受精率,其作用机制可能是通过与精子膜上的雌激素受体或雌激素结合位点相互作用后促进胞外Ca2+内流而实现的.