青藤碱对类风湿关节炎CCP-AST分泌IFN-γ及IL-4水平的影响

目的:观察青藤碱(SN)对类风湿关节炎(RA)患者外周血环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞(CCP-AST)分泌γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。方法:体外分离、培养RA患者外周血淋巴细胞,分为四组,空白组:不加任何干预药物;环胍氨酸肽(CCP)组:仅加CCP干预(CCP终浓度为20μg/ml);甲氨喋呤(MTX)对照组:同时加CCP与MTX干预(CCP与MTX终浓度均为20μg/ml);SN组:同时加CCP与SN干预(SN与CCP终浓度均为20μg/ml);体外培养72 h后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4分泌水平。结果:CCP干预后,RA患者外周血(PBL)淋巴细胞分泌的IFN-γ水平升高(P<0.05),IL-4水平下降(P<0.05);加入SN后,RA患者PBL源CCP-AST分泌的IFN-γ水平下调,IL-4水平升高,有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。结论:SN可抑制RA患者CCP-AST分泌IFN-γ水平,上调IL-4的表达,这可能是SN治疗RA的免疫机制之一。     

三七总皂苷对类风湿关节炎环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞分泌干扰素-γ及白细胞介素-4的影响

目的 环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide, CCP)抗原与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的发病及致病过程密切相关,是RA原发致病靶抗原.文中通过观察三七总皂苷(panax notoginseng saponins, PNS)对RA患者外周血CCP抗原特异性T细胞(antigen special T cell,AST)分泌干扰素(interferon, INF)-γ、白细胞介素-4(interleukin-4, IL-4)水平的影响,进一步阐明PNS治疗RA的机制. 方法 体外分离培养24例RA患者外周血淋巴细胞,分为4组处理观察,分别是RA空白对照组、RA CCP组、RA甲氨喋呤(MTX)对照组及RA PNS组.各组细胞体外培养72h后,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞培养上清中INF-γ及IL- 4水平. 结果 与RA空白对照组相比,RA CCP组分泌的INF-γ升高(P<0.05),IL-4降低(P<0.05),INF-γ/IL-4升高(P<0.01).经PNS作用后,与RA CCP组相比,INF-γ有所下降(P<0.05),IL-4升高(P<0.05). 结论 PNS可抑制RA患者外周血CCP-AST分泌Th1型细胞因子INF-γ,促进Th2型细胞因子IL- 4的分泌,对Th1/Th2型细胞因子网络失衡状态有一定调节作用,可能在治疗RA中发挥重要作用.     

青藤碱对环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞体外增殖的影响

目的青藤碱(Sinomenine,SN)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)治疗中有较好的临床疗效,对SN相关免疫机制的研究也越来越受到关注。但关于SN在抗原特异性T细胞(antigen special T cell,AST)机制的研究少见报道。文中观察了SN对RA患者环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)AST体外增殖的影响,探讨SN治疗RA的相关免疫机制。方法体外分离、培养RA患者外周血淋巴细胞,分别设对照组:不加任何干预药物;CCP组:仅加CCP干预,终浓度为20μg/ml;甲氨喋呤(Methotrexate,MTX)组:同时加CCP与MTX干预,终浓度均为20μg/ml;SN低剂量组:同时加CCP与SN干预,SN终浓度为10μg/ml,CCP终浓度为20μg/ml;SN高剂量组:同时加CCP与SN干预,终浓度均为20μg/ml;体外培养72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度(A)值水平。结果 CCP可体外诱导RA患者外周血淋巴细胞增殖(P<0.01),在此基础上加入不同浓度的SN后,CCP诱导的淋巴细胞增殖被显著抑制(P<0.01),SN高剂量组较之SN低剂量组的抑制程度更为明显(P<0.01)。结论 SN可抑制RA患者CCP-AST的体外活化、增殖,这可能是SN临床治疗RA的免疫机制之一。     

三七总皂苷对类风湿关节炎患者CCP/AST增殖及分泌INF-γ的影响

[目的]观察三七总皂苷(PNs)对类风湿关节炎(RA)患者环瓜氨酸肽(CCP)抗原特异性T细胞(CCP/AST)体外增殖及分泌干扰素-γ(INF-γ)的影响.[方法]体外分离培养24例RA患者外周血淋巴细胞,分为空白对照组、CCP组、甲氨喋呤(MTX)对照组及PNS组.体外培养72 h后,采用CCK-8法测定T细胞增殖...     

Th1/Th2细胞因子谱在类风湿关节炎患者外周血和关节积液中的表达及意义

目的 鉴定类风湿关节炎患者外周血和关节积液中Th1/Th2细胞因子谱的表达并探讨其在炎症中的意义.方法 采用微量样本多指标流式蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测41例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者(2006年1月至2007年12月西南医院风湿病中心首诊病例)血清和关节积液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ的表达.对照组(n=5)为西南医院健康查体人员.结果 与对照组和/或RA患者外周血比较,RA患者关节积液中IL-2、IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-10的表达显著增高(P<0.01),IFN-γ和IL-6的表达在RA患者外周血中也显著增高(P<0.01),TNF-α的表达在RA患者关节积液和外周血中也增高(P<0.05),并且在关节积液中IFN-γ/IL-4比例显著增高(P<0.01).与抗环瓜氨酸肽抗体(cyclic citrullinated peptide,CCP)阴性的患者相比,CCP抗体阳性的患者关节积液中IL-2、IL-6表达增高(P<0.05),TNF-α和IFN-γ的表达显著增高(P<0.01).结论 Th1/Th2极化失衡是RA炎症损伤的主要免疫病理机制,在关节局部是以Th1极化诱导的炎症反应为主,并且CCP抗体阳性患者关节炎症程度明显高于CCP抗体阴性患者.     

中药方剂对不同证型荨麻疹患者PBMC中细胞因子IL-4、IFN-γ表达的影响

目的 探讨消风散、玉屏风散、当归饮子对三型荨麻疹患者外周血单个核细胞(PBMC)中白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响.方法 采集68例荨麻疹患者及24例正常人静脉血,加入不同浓度10-1～10-7 g/ml中药或RPMI-1640进行体外孵育,采用双抗体夹心ELISA方法检测IL-4、IFN-γ水平.结果 荨麻疹各型患者IL-4细胞因子水平均高于正常人;IFN-γ细胞因子水平均低于正常人;各型荨麻疹患者PBMC经各代表方剂干预后IFN-γ的含量升高,且差异有统计学意义(P＜0.05);IL-4的含量较空白组略改变,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 各中药方剂可能通过提高IFN-γ水平,使相应证型荨麻疹患者Th1/Th2失衡状态均得到一定程度的纠正,从而达到治疗作用.     

氨茶碱对哮喘患儿TH2/TH1细胞因子的调节作用

目的探讨氨茶碱治疗哮喘的抗炎作用机理.方法采集20例缓解期过敏性哮喘患儿PBMCs与氨茶碱共同培养,按不同浓度(0、5、10、20mg/L)分为哮喘对照组(ACG)、处理组1(ATG1)、ATG2和ATG3,同时设立正常对照组(NCG).采用ELISA检测培养24h后各组PBMCs上清液中白细胞介素4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)浓度和血清IgE浓度,采用ELISPOT检测培养5h后PBMCs内合成IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分比,同时作外周血EOS计数.结果哮喘缓解期患儿静脉血EOS和血清IgE水平均明显高于NCG(P<0.01和P<0.05);ACG PBMCs合成和分泌IL-4明显高于NCG,而合成和分泌IFN-γ明显低于NCG,IL-4/IFN-γ比值和IL-4阳性细胞/IFN-γ阳性细胞比值明显高于NCG;20mg/L氨茶碱能显著抑制PBMCs合成和分泌IL-4,促进IFN-γ的分泌,显著降低IL-4/IFN-γ比值和IL-4阳性细胞/IFN-γ阳性细胞比值.结论哮喘缓解期患儿仍然存在TH2/TH1亚群失衡,20mg/L氨茶碱能纠正TH1和TH2细胞因子的失衡状态,这可能是临床治疗浓度氨茶碱抗炎症作用的主要机制.     

子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1、Th2型细胞因子功能变化研究

目的研究子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1/Th2细胞因子功能变化.方法子痫前期患者29例,正常妊娠妇女15例,分离外周血单个核细胞,体外培养72小时,ELISA方法检测培养上清液中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平.结果子痫前期组PBMC培养上清液中,Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平(259.4±90.5)pg/mL,(452.0±122.6)=pg/mL与正常妊娠组(140.3±73.2)pg/mL,(307.5±106.4)pg/mL相比,显著升高,分别为P＜0.01,P＜0.05;Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平(28.8±7.7)pg/mL,(178.9±98.6)pg/mL与正常妊娠组(41.9±11.4)pg/mL,(316.1±284.6)pg/mL相比,显著下降,分别为P＜0.01,P＜0.05.结论子痫前期患者外周血单个核细胞分泌Th1型细胞因子功能增强,分泌Th2型细胞因子功能减弱.     

急性脑出血患者早期外周血干扰素-γ分泌水平与预后关系的研究

目的 观察急性脑出血患者早期外周血干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平与病情预后的关系.方法 选取2015年7月至2016年8月在该院急诊科住院的急性脑出血患者66例作为试验组,体检中心健康人群60例作为空白对照组,分离其外周血单个核淋巴细胞(PBMC)及血浆,ELISA检测辅助T细胞(Th) 1/Th2类细胞因子[IFN-γ、白细胞介素(IL)-2、11-4及IL-10];流式细胞术检测胞内细胞因子;NIHSS量表分析试验组发病第1天及第30天病情变化;分析细胞因子与第30天NIHSS量表评分预后的关系.结果 两组外周血中IFN-γ差异有统计学意义(P＜0.05),IL-2、IL-4、IL-10差异无统计学意义(P＞0.05).试验组早期外周血IFN-γ分泌水平与预后之间存在正向相关(P＜0.05).结论 早期外周血IFN-γ水平增高与急性脑出血的预后不良相关.     

内毒素休克性肺损伤与IFN-γ/IL-4失衡

目的:探讨内毒素休克肺损伤与TH1/TH2平衡的关系.方法:采用颈静脉注入LPS复制大鼠急性肺损伤模型,用ELISA法检测其外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值.结果:与正常对照组相比,急性肺损伤组外周血PBMC产生IFN-γ水平,IFN-γ/IL-4比值明显升高(P＜0.05;P＜0.001),而IL-4水平差异无显著性(P＞0.05),肺组织病理切片显示大鼠发生ALI.结论:LPS休克肺损伤时,体内存在Th1/Th2类细胞因子水平失衡.     

1,25-二羟基维生素D3干预前后糖尿病肾病患者外周血单核细胞促炎细胞因子的表达情况

目的 探讨1,25-二羟基维生素D3(VD3)干预前后糖尿病肾病患者外周血单核细胞促炎细胞因子的表达情况.方法 纳入2型糖尿病合并糖尿病肾病(DN)患者(DN组)及健康对照者(对照组)各15例,分别检测两组外周血单核细胞培养上清液在VD3干预和非干预条件下白介素(IL)-17A、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)及IL-2水平.结果 VD3干预前,两组IL-17A水平比较差异无统计学意义(P>0.05),DN组IFN-γ、TNF和IL-2水平均高于对照组(P<0.05);VD3干预后,两组IL-17A、IFN-γ、TNF和IL-2水平均低于干预前,且DN组IL-17A、IFN-γ和IL-2水平仍高于对照组,但TNF水平低于对照组(均P<0.05).结论 相关促炎细胞因子可能在DN发生中起促进作用,VD3对DN患者外周血单核细胞相关促炎因子具有抑制作用.     

小细胞肺癌患者抑郁状态与Th1/Th2型细胞因子相关性的初步研究

目的:探讨小细胞肺癌患者抑郁状态与辅助性T细胞(Th)1/Th2型细胞因子之间的关系.方法:选择小细胞肺癌患者91例,按照汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分标准分为抑郁组41例和无抑郁组50例,并设立健康对照组.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者外周血中Thl型细胞因白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)的浓度.结果:小细胞肺癌患者外周血中IL-2、IFN-γ水平较健康组明显下降,IL-4、IL-10水平较健康组显著升高.而与无抑郁组比较,抑郁组外周血中IL-2、IFN-γ水平下降更为明显,IL-4、IL-10水平升高更为显著.结论:小细胞肺癌患者外周血中的Thl/Th2型细胞因子明显失衡,细胞免疫功能低下,尤其是伴有抑郁障碍者细胞免疫功能低下更为显著.因此,尽早识别和治疗小细胞肺癌伴抑郁障碍者具有重要意义.     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)水平,探讨SLE患者的发病与Th1/Th2优势活化状态之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定35例SLE患者和15名健康志愿者PBMC培养上清IL-4、IL-10、IL-2、IFN-γ水平。结果活动期SLE患者IL-4、IL-10水平明显高于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。活动期SLE患者IL-2水平明显低于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。IFN-γ水平3组间差异无显著性(P>0.05)。结论Th2型细胞因子介导的免疫应答在活动期SLE的发病机制中占主导地位。活动期SLE患者存在分泌型Th1细胞因子的细胞活化减弱。     

反复自然流产患者外周血IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β1的检测

目的 检测反复自然流产(RSA)患者外周血IFN-γ,IL-4,IL-17,TGF-β1细胞因子变化,探讨其在反复自然流产发病中的作用.方法 采集反复自然流产患者和正常妊娠妇女外周血各30例,用ELISA法检测IFN-γ,IL-4,IL-17,TGF-β1细胞因子水平.结果 与正常妊娠组比较,RSA组的IFN-γ和IL-17水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);而IL-4和TGF-β1水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.001).结论 RSA发生时不仅存在Th1/ Th2平衡失调,也存在TH17/Treg平衡失调.     

类风湿性关节炎患者外周血白细胞介素-37及可溶性PD-1分子的检测价值分析

目的 研究类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血抗炎性因子及可溶性PD-1(soluble PD-1,SPD-1)分子的检测价值.方法 选择2015年1月至2016年12月四川省雅安市人民医院收治的RA患者68例纳入病例组,选择同期健康人68例纳入对照组,以酶联免疫吸附试验检测两组外周血白细胞介素-37(IL-37)、白细胞介素-1(IL-1)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及SPD-1等细胞因子水平,评价病例组患者RA诊断得分,并判断病例组IL-37、SPD-1与RA诊断得分、IL-1、IFN-γ、TNF-α水平的相关性.结果 病例组外周血IL-37、SPD-1、IL-1、IFN-γ、TNF-α水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).病例组外周血IL-37、SPD-1和RA诊断得分呈正相关性(P<0.05);病例组外周血IL-37与IL-1、IFN-γ、TNF-α均呈正相关性(P<0.05);病例组外周血SPD-1与IL-1、IFN-γ、TNF-α均呈正相关性(P<0.05).结论 RA患者外周血IL-37、SPD-1与RA的严重程度及其他多种炎性因子密切相关,在RA的临床检测中具有较高应用价值.     

霉酚酸对21例系统性红斑狼疮患者细胞因子释放及Th细胞亚群的作用研究

目的：研究霉酚酸(MPA)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血Th细胞亚群平衡的作用。方法：分离2l例SLE患者及14例健康对照的外周血单个核细胞(PBMCs)，分别加或不加MPA培养48h，用ELISA法测培养上清中IL-10、IL-12和IFN-γ的水平，用三色流式细胞术检测培养细胞中CD4^ IFN-γ^ IL-10-T细胞、CD4^ IFN-γ-IL-10^ T细胞及CD4^ IFN-γ-IL-10^ T细胞百分率。结果：SLE患者PBMCs培养上清中IL-10、IL-12、IFN-γ等细胞因子水平显著升高，MPA可使SLE患者PBMCs自发产生或PHA刺激产生的IL-10、IL-12和IFN-γ的水平显著降低；SLE患者培养的PBMCs中CD4^ IFN-γ^ IL-10^ T细胞亚群和CD4^ IFN-γ^ IL-10^ T细胞亚群百分率显著增高，而MPA可导致用或未用PHA刺激培养的PBMCs中CD4^ IFN-γ^ IL-10-T细胞、CD4’IFN-γ-IL-10^ T细胞及CD4^ IFN-γ^ IL-10^ T细胞阳性率下降，尤其是可使SLE异常升高的CD4^ IFN-γ-IL-10^ T细胞亚群和CD4^ IFN-γ^ IL-10^ T细胞亚群百分率显著降低。结论：MPA治疗SLE的疗效作用可能与抑制IL-10、IL-12和IFN-γ等细胞因子的异常释放及抑制CD4^ IFN-γ^ IL-10-T细胞、CD4^ IFN-γ-IL-10 T细胞及CD4^ IFN-γ^ IL-10^ T细胞亚群的活化增殖有关。     

温肺散寒法对毛细支气管炎患儿细胞因子IFN-γ和IL-4水平的影响

[目的]探讨温肺散寒法对毛细支气管炎患儿细胞因子IFN-γ和IL-4比值的影响。[方法]将60例毛细支气管炎患儿,随机分成温肺散寒法治疗组和γ-干扰素对照组,每组30例。检测毛细支气管炎患儿治疗前后血清细胞因子IFN-γ、IL-4水平。[结果]治疗组和γ-干扰素对照组治疗后血清细胞因子IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4差异均无显著性意义(P0.05)。[结论]温肺散寒法治疗毛细支气管炎与γ-干扰素有相同的疗效,能使TH1水平上升,调节TH1/TH2的失衡,对于治疗毛细支气管炎有一定的疗效。     

IL-4和IFN-γ在分泌性中耳炎患者外周血及中耳积液中的表达及意义

目的：探讨白细胞介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）在分泌性中耳炎患者（OME）外周血及中耳积液中的表达及意义。方法：选择本院耳鼻喉科收治的45例分泌性中耳炎患者（观察组）和45例同时期健康对照人群（对照组）,分别采用流式细胞技术和流式微球分析法检测OME患病人群和健康人群外周血及中耳积液之间IL-4和IFN-γ表达水平及比值变化。结果：观察组IL-4、IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;急性OEM患者IL-4、IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值分别高于慢性组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组外周血与中耳积液IL-4、IFN-γ表达水平和IFN-γ/IL-4比值间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：分泌性中耳炎患者外周血和中耳积液中IL-4和IFN-γ的变化规律对于了解OME情况有着积极的作用,IFN-γ/IL-4平衡失衡,可能是OME发病的重要基础。     

辅助性T细胞9相关细胞因子在类风湿性关节炎患者血清中的表达

目的探讨辅助性T细胞(Th)9相关细胞因子在类风湿性关节炎(RA)中表达的改变及可能机制。方法采集15例健康人(健康对照组)和15例RA患者外周血,以酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素(IL)-9、IL-4、转化生长因子-β(TGF-β)和干扰素-γ(IFN-γ)水平,分析这些因子在Th9分化中的作用。结果 RA患者血清IL-9水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);RA患者血清TGF-β水平较健康对照组显著减低,差异有统计学意义(P<0.01);RA患者血清IL-4水平较健康对照组有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ水平在5例RA患者外周血中可以检出,其余低于可检出浓度,健康对照组均低于可检出浓度。结论 RA患者外周血Th9细胞的促分化因子降低,抑分化因子升高,导致Th9细胞缺乏分化的微环境,由此推测循环血Th9细胞不参与RA的发病环节。     

恶性肿瘤患者淋巴细胞活性及Th1/Th2细胞因子的测定

目的通过对晚期恶性肿瘤患者外周血NK细胞、B细胞、T淋巴细胞亚群活性及其分泌的细胞因子Th1型细胞因子(IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4)的检测,探讨其对恶性肿瘤患者免疫功能的影响。方法分组对照研究,其中恶性肿瘤患者44例,健康者43例,取外周血,用流式细胞仪检测CD3 、CD4 、CD8 等T细胞亚群及NK细胞、B细胞,定量分析CD4 、CD8 分泌的Th1型细胞因子(IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4),并与对照组比较,进行统计学分析研究。结果恶性肿瘤患者NK细胞活性和Th1型细胞因子(IFN-γ)的分泌明显低于对照组(p<0.05),而其CD3 、CD4 、CD8 、B细胞和Th2型细胞因子(IL-4)与对照组相比无显著差异(p>0.05)。结论恶性肿瘤患者Th1、Th2细胞因子的失衡可能是导致免疫偏移的原因,检测NK细胞、T淋巴细胞亚群及其分泌的细胞因子可反映患者的免疫水平,对指导治疗有一定价值。