美托洛尔下调CaMKIIδC-p38通路对异丙肾上腺素诱导心力衰竭的保护机制

目的研究美托洛尔下调CaMKIIδC—p38通路对异丙肾上腺素诱导心力衰竭的保护机制。方法40只SD大鼠随机分成四组，正常对照组（Control）、异丙肾上腺组（Iso）、异丙肾上腺＋美托洛尔组（Iso＋Meto）和美托洛尔组（Meto），每组10只，所有动物均自由进食进水。（1）Iso组大鼠背部皮下注射Iso5my／（kg·d），连续10d；对照组背部皮下注射相同体积的生理盐水；Iso＋Meto组大鼠背部皮下注射Iso5mg／（kg·d）．连续10d，在背部皮下注射Iso前1天开始Meto10mg／（kg·d）灌胃，连续4固；Meto组给予10mg／（kg·d），连续4周灌胃；（2）所有大鼠饲养4周后，采用MillarP-V Loop导管经颈动脉插管至左心室，使用Powerlab生理记录系统测量血流动力学相关指标；统计各组大鼠心脏重量和心脏重量／体重比值；（3）TUNEL法和Caspase-3活性检测心肌细胞凋亡；（4）ELISA分析CAMKII活性；（5）Westernblot检测CaMKIl8、p-CaMKIIδ、CaMKIIδC和MAPKs家族（p-38、JNK、ERK）、和凋亡相关基因Bcl-2／Bax的蛋白表达水平。结果40只sD大鼠实验过程精神状态好，进食进水正常，无呼吸困难及水肿。（1）Iso和Meto干预SD大鼠心脏重塑和血流动力学指标有显著改变，与Control组相比．Iso组心脏重量和心脏重量指数明显增加（P〈0．05）；而Iso＋Meto组心脏重量和心脏重量指数明显低于Iso组（P〈0．05）；大鼠体重、肝重和肺重四组间也无明显差异。大鼠血流动力学指标心率（HR）、平均动脉血压（MBP）和亢事舒张末压（LVEDP）Iso组明显高于Control组；但左室压力变化速率（LV±dp/dt max）Iso组明显低于Control组（P〈0．05）；而Iso＋Meto组HR、MBP和LVEDP明显低于Iso组（P〈0．05），但Iso＋Meto组±dp／dtmax明显高于Iso组（P〈0．05）；（2）Iso组SD大鼠心肌细胞TUNEL阳性细胞数和Caspase-3活性明显高于Control组（P〈0．05）；Western杂?     

美托洛尔下调CaMKⅡδC-p38通路对异丙肾上腺素诱导心力衰竭的保护机制

目的研究美托洛尔下调CaMKⅡδC-p38通路对异丙肾上腺素诱导心力衰竭的保护机制。方法40只SD大鼠随机分成四组,正常对照组(Control)、异丙肾上腺组(Iso)、异丙肾上腺 美托洛尔组(Iso Meto)和美托洛尔组(Meto),每组10只,所有动物均自由进食进水。(1)Iso组大鼠背部皮下注射Iso 5 mg/(kg·d),连续10 d;对照组背部皮下注射相同体积的生理盐水;Iso Meto组大鼠背部皮下注射Iso 5 mg/(kg·d),连续10 d,在背部皮下注射Iso前1天开始Meto 10 mg/(kg·d)灌胃,连续4周;Meto组给予10 mg/(kg·d),连续4周灌胃;(2)所有大鼠饲养4周后,采用Millar P-V Loop导管经颈动脉插管至左心室,使用Powerlab生理记录系统测量血流动力学相关指标;统计各组大鼠心脏重量和心脏重量/体重比值;(3)TUNEL法和Caspase-3活性检测心肌细胞凋亡;(4)ELISA分析CAMKⅡ活性;(5)Western blot检测CaMKⅡδ、p-CaMKⅡδ、CaMKⅡδC和MAPKs家族(p-38、JNK、ERK)、和凋亡相关基因Bcl-2/Bax的蛋白表达水平。结果40只SD大鼠实验过程精神状态好,进食进水正常,无呼吸困难及水肿。(1)Iso和Meto干预SD大鼠心脏重塑和血流动力学指标有显著改变,与Control组相比,Iso组心脏重量和心脏重量指数明显增加(P<0.05);而Iso Meto组心脏重量和心脏重量指数明显低于Iso组(P<0.05);大鼠体重、肝重和肺重四组间也无明显差异。大鼠血流动力学指标心率(HR)、平均动脉血压(MBP)和左室舒张末压(LVEDP)Iso组明显高于Control组;但左室压力变化速率(LV±dp/dt max) Iso组明显低于Control组(P<0.05);而Iso Meto组HR、MBP和LVEDP明显低于Iso组(P<0.05),但Iso Meto组±dp/dtmax明显高于Iso组(P<0.05);(2)Iso组SD大鼠心肌细胞TUNEL阳性细胞数和Caspase-3活性明显高于Control组(P<0.05);Western杂交分析检测Iso组抗凋亡蛋白bcl-2表达明显低于Control组(P<0.05),而促抗凋亡蛋白Bax表达明显高于Control组;(3)CaMKⅡ活性分析结果显示Iso组明显高于Control组(P<0.05)。说明Iso诱导了明显的心肌细胞凋亡,并且心肌细胞凋亡和CaMKⅡ活性明显正相关;(4)CaMKⅡδ异构体、MAPKs家族在β1-AR持久兴奋的SD大鼠心肌表达情况,我们用Western blot方法分析结果显示Iso组CaMKⅡδC和p-CaMKⅡδ、p38 MAPK、JNK蛋白表达明显高于Control组(P<0.05),但与Control组比较,Iso组ERK蛋白表达明显减少(P<0.05)。与Iso组相比,β1-AR阻滞剂Meto可减少CaMKⅡδC和p-CaMKⅡδ、p38 MAPK、JNK蛋白表达,增加ERK蛋白表达(P<0.05)。结论(1)持久兴奋β1-AR激活CaMKⅡδC-p38通路诱导心肌细胞凋亡,导致心肌重塑、心力衰竭;(2)β1-AR阻断剂美托洛尔可阻断β1-AR持久激活CaMKⅡδC—p38导致心肌细胞凋亡途径,对心脏有保护效应。     

益母草注射液对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡和增殖活性的作用研究

目的 探讨中药益母草注射液（LHS）对链脲佐霉素（STZ）制备的糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞凋亡和增殖活性的作用。方法 2004年3月至2004年9月于汕头大学医学院第二附属医院内分泌科建立STZ诱导DCM的大鼠模型，将实验大鼠随机分为未治疗组、LHS治疗组和正常对照组。16周龄时处死。观察心肌细胞的凋亡百分数（TUNEL法）、Fas、FasL、Bax、Bcl-2、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达（免疫组化法）、心肌细胞超微结构的改变（电镜）。结果 与DCM组相比。DCM给药组大鼠心肌肌节对位仅见少部分错位，肌原纤维无溶解，线粒体结构完整；心肌细胞中促凋亡因子Fas、FasL和Bax的表达降低，抑制凋亡的Bcl-2／Bax比值增加，心肌细胞凋亡百分数降低，差异均有显著性（P〈0．05）；PCNA阳性细胞数增多．差异有显著性（P〈0．05）。结论 LHS治疗后，心肌细胞凋亡比未治疗组明显减少．而增殖活性明显增强．LHS能有效防治大鼠DCM．改善超微结构的异常。     

卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠CT-1及凋亡相关基因表达的影响

目的研究卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌营养素1及凋亡相关基因表达的影响。方法将Wistar雄性大白鼠随机分为3组：对照组、Iso损伤组、Cap预处理组;用TUNEL方法检测心肌细胞凋亡,用免疫组化方法检测Fas、Bcl-2和Bax表达,用Western blot方法检测心肌组织CT-1表达。结果 Cap预处理组与Iso损伤组比较,心肌细胞凋亡指数减少,Fas和Bax表达降低,Bcl-2和CT-l表达增高（P〈0.01或〈0.05）。结论卡托普利预处理可能通过促进CT-1的表达,来调节凋亡相关基因的表达,并发挥心肌保护作用。     

金属硫蛋白和a-硫辛酸对糖尿病大鼠心肌作用的研究

目的 研究金属硫蛋白及旷硫辛酸对糖尿病大鼠心肌细胞形态学的影响及对凋亡的干预。方法32只SD大鼠分为正常对照（NC）组,STZ诱导糖尿病（DM）组,糖尿病＋金属硫蛋白（MT）组和糖尿病＋硫辛酸（ALA）组。比较各组心脏重量／体重比值,透射电镜下观察各组心肌细胞超微结构,TUNEL法检测心肌组织凋亡。结果与NC组相比,DM组心脏重量明显下降（P〈0．01）,MT组上升（P〈0．05）,TUNEL法显示DM组阳性染色细胞数最多,NC组阳性染色细胞数最少（P〈0．01）,MT组阳性染色细胞数较DM组明显减少（P〈0．05）。结论金属硫蛋白对糖尿病大鼠心肌组织保护作用优于旷硫辛酸,可能通过抑制心肌细胞凋亡起作用。     

钙敏感受体与缺血/再灌注损伤诱发心肌细胞凋亡的线粒体途径的关系

目的探讨钙敏感受体（CaR）参与心肌缺血／再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制。方法Langendorff离体灌流的方法复制心脏缺血／再灌注模型。观察缺血／再灌注和加入CaR激动剂时CaR的表达情况。TUNEL染色观察不同组别细胞凋亡,应用激光扫描共聚焦显微镜观察大鼠心肌细胞的线粒体膜电位的变化。Western blot检测心肌组织线粒体中细胞色素C及Bcl-2的表达。结果心肌缺血／再灌注和加入CaR激动剂时CaR的表达明显高于对照组（P均〈0．01）。TUNEL染色发现缺血／再灌注组和激动剂组细胞凋亡率明显增加（P均〈0．05）,同时此两组的线粒体膜电位下降明显（P均〈0．05）,线粒体细胞色素C与Bcl-2的表达也明显下降（P均〈0．05）。结论CaR激活在缺血／再灌注时通过诱发线粒体损伤,促进细胞凋亡。     

竹叶总黄酮抗大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

目的研究竹叶总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响。方法用在体左冠状动脉前降支穿线结扎法制备心肌缺血再灌注模型。将60只SD大鼠分为6组：假手术组，缺血再灌注组，竹叶总黄酮高、中、低剂量组，阳性对照组每组10只。缺血30min，再灌注240min。采用缺口末端标记法（TUNEL）以及免疫组化法，检测心肌细胞凋亡千分率、Bcl-2、Bax、Cyt-c和caspase-3基因蛋白表达。结果TUNEL实验表明竹叶总黄酮能明显降低心肌组织凋亡的发生；与假手术组比较，缺血再灌注组Bax、Cyt-c、Bcl-2和caspase-3阳性表达增强（P〈0．01）；与缺血再灌注组比较，竹叶总黄酮明显抑制了Bax、Cyt-c和caspase-3表达但没有抑制Bcl-2表达。结论竹叶总黄酮对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

虫草菌丝对非酒精性脂肪肝病大鼠肝细胞凋亡的作用及其相关机制

目的（1）证实肝细胞凋亡的异常增多存在于非酒精性脂肪性肝病中。（2）观察虫草菌丝对肝细胞凋亡异常增多的影响，并探讨可能的分子机制。方法通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的模型，同时设立正常饮食对照组，病理对照组（NASH组），虫草菌丝干预组（CS组）。肝组织切片HE染色观察肝脏病理改变；检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性；TUNEL检测肝组织肝细胞凋亡情况；免疫组织化学染色观察肝组织Bax、Bcl-2、Caspase-3、NF-κB P65蛋白表达情况。结果（1）与正常对照组相比，病理对照组大鼠肝组织广泛弥漫肝细胞脂肪变性，炎性细胞浸润、坏死、局部有纤维组织增生；肝脏SOD活性显著降低（P〈0．01）；TUNEL法检测肝细胞凋亡显著增多（P〈0．01）；免疫组化染色显示Bax、Caspase-3蛋白表达增加（P〈0．01），而Bcl-2无显著变化（P〉0．05）；（2）与病理对照组相比，虫草菌丝组大鼠肝组织有广泛肝细胞脂肪变性，炎性细胞浸润，可见灶性及点状坏死，未见纤维组织增生；肝组织SOD活性高于病理对照组（P〈0．05）；TUNEL法检测凋亡的肝细胞显著减少（P〈0．01）；免疫组化染色显示Bax、Caspase-3蛋白表达也明显降低（分别为P〈0．05、P〈0．01），而Bcl-2、NF-κB P65蛋白表达增加（P〈0．01）。结论（1）NASH时肝细胞凋亡异常增多。（2）虫草菌丝可以通过增加超氧化物歧化酶（SOD）活性来减少活性氧含量，降低Bax表达，增加Bcl-2表达和活化NF-κB P65减轻NAFLD中肝细胞凋亡从而在一定程度上具有保护肝脏功能的作用，对延缓或阻止脂肪肝病变的进展起到一定的作用。     

卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨卡托普利预处理对急性心肌损伤大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法 将Wistar雄性大白鼠随机分为3组:对照组、异丙基肾上腺素损伤组(Iso损伤组)、卡托普利预处理组(Cap预处理组).用TUNEL方法检测心肌细胞凋亡,用免疫组化方法检测Fas、FasL、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 Cap预处理组与Iso损伤组比较,心肌细胞凋亡指数减少,Fas、FasL和Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达增高(P＜0.01或P＜0.05).结论 卡托普利可通过减少心肌细胞凋亡及降低凋亡相关基因的表达发挥心肌保护作用.     

刚地弓形虫感染对孕鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨刚地弓形虫对孕鼠胎盘细胞凋亡及其相关基因bax、bcl-2表达的影响。方法 建立刚地弓形虫感染的孕鼠模型，采用胎盘组织压片及病理切片，观察胎盘组织的损伤情况；采用DNA缺口末端标记技术（TUNEL）检测胎盘细胞的凋亡情况；采用免疫组织化学法（SP法）观察细胞凋亡调控基因bax和bcl-2在胎盘细胞中的表达。结果 与对照组相比，随着感染时间的延长，感染组胎盘组织压片中可见弓形虫虫体逐渐增加，HE染色可见有大量的淋巴细胞浸润及凋亡小体；TUNEL证实感染组胎盘滋养层细胞凋亡显著增强（P〈0．05）；免疫组织化学结果显示，感染组胎盘滋养层细胞凋亡相关基因bax表达显著增强、bcl-2表达减弱（P〈0．05）。结论 刚地弓形虫侵入胎盘组织，可通过上调滋养层细胞bax基因表达，下调bcl-2基因表达而诱导胎盘滋养层细胞凋亡增加，从而影响胎盘组织结构和功能，导致不良妊娠。     

依达拉奉对大鼠心肌再灌注抗凋亡作用的机制

目的：观察大鼠心肌缺血再灌注时依达拉奉抗凋亡作用的机制。方法：采用体外结扎大鼠左前降支制备大鼠心肌缺血再灌注模型。将Wistar大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组、依达拉奉组（再灌注即刻经尾静脉注射依达拉奉3mg／kg）。分别用TUNEL染色法及免疫组化法检测心肌细胞凋亡、心肌凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果：（1）凋亡检测结果示,对照组无细胞凋亡,依达拉奉组较缺血再灌注组凋亡细胞数明品减少[（13．11±1．58）比（24．33±1．38）,P〈0．01];（2）免疫组化结果示,依达拉奉组与缺血再灌注组Bcl-2、Bax蛋白表达均明显高于对照组（P〈0．01）;依达拉奉组较缺血再灌注组Bcl-2蛋白表达明显升高[（0．2300±0．0218）比（0．0924±0．0152）],而Bax蛋白表达明显降低[（0．0249±0．0042）比（O．1312±0．0173）],P均〈0．01;缺血再灌注组Bcl-2／Bax比值较对照组明显降低[（0．6906±0．0035）比（1．1632±0．0212）],依达拉奉组Bcl-2／Bax比值（7．4752±0．5573）较缺血再灌注组和对照组明显升高（P〈0．01）。结论：依达拉奉能够减少心肌细胞凋亡,心肌细胞凋亡的减轻与下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达以及Bcl-2／Bax比值有关。     

阿托伐他汀通过PPARβ／δ信号通路下调衰老心肌TNF-α表达的研究

目的：观察阿托伐他汀下调老年大鼠心肌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的作用及其与过氧化物酶体增殖物激活型受体β／δ（PPARβ／δ）信号通路之间的关系。方法：分离培养24个月龄大鼠的心肌细胞,将心肌细胞分为空白对照组、溶剂对照组、阿托伐他汀组、阿托伐他汀＋PPARβ／δ拮抗剂GSK0660组。各组细胞分别加入细胞培养液、二甲基亚砜（DMSO）、阿托伐他汀、阿托伐他汀＋GSK0660处理。用RT—PCR方法检测各组大鼠衰老心肌细胞的TNF-αmRNA表达水平,用westernblot方法检测各组TNF-α蛋白含量。结果：（1）与空白对照组相比,溶剂对照组大鼠衰老心肌细胞的TNF-α mRNA和蛋白水平均无显著差异;（2）与空白对照组相比,阿托伐他汀组的TNF-α mRNA和蛋白水平含量均显著降低（P〈0．01）;（3）阿托伐他汀＋GSK0660组的TNF-α mRNA表达水平及蛋白含量均显著高于阿托伐他汀组,但仍低于空白对照组（P〈0．05）。结论：阿托伐他汀可通过激活PPARβ／δ信号通路下调衰老心肌细胞TNF—d的表达。     

吡格列酮对缺血再灌注心肌细胞凋亡影响的实验研究

目的观察吡格列酮对大鼠在体心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响。方法实验动物随机分为2组,一为缺血30 min再灌注30 min组,进一步分为假手术组（n = 5）、模型组（即溶剂对照组,n = 6）和吡格列酮组（3mg／kg,n = 7）,测定心肌梗死面积;另一为缺血30 min再灌注2h组,然后进一步分为假手术组（n = 5）、模型组（n = 6）及吡格列酮0．3mg／kg组（n = 6）、1mg／kg组（n = 7）和3mg／kg组（n = 6）,各用药组于缺血前30 min静脉注射给药。然后,取心脏标本,石蜡包埋后切片,免疫组化检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、PPARy蛋白质表达,原位杂交方法检测PPARymRNA表达。TUNEL法和DNA凝胶电泳观察心肌细胞凋亡。结果（1）与模型组比较,吡格列酮组梗死面积与缺血区面积之比减少28％（P 〈 0．01）,梗死面积与左室面积之比减少32％（P 〈 0．01）;（2）免疫组化和原位杂交结果示：吡格列酮0．3、1、3mg／kg可呈剂量依赖性减少Bax、Caspase-3,增加Bcl-2、PPARy蛋白质以及PPARymRNA表达;（3）TUNEL法检测吡格列酮可减少心肌细胞凋亡指数,3组作用均显著（P 〈 0．05）,但DNA凝胶电泳模型组、吡格列酮0．3、1mg／kg可见到DNA梯带,假手术组和吡格列酮3mg／kg则无DNA梯带。结论吡格列酮预处理可通过减少心肌细胞凋亡和梗死面积起到抗缺血再灌注损伤的作用。     

促红细胞生成素预处理在心肌缺氧复氧损伤中对凋亡相关基因表达影响的研究

目的：观察促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）预处理在大鼠心肌缺氧复氧损伤（hypoxia/reoxygenation,H/R）中的抗凋亡效应以及对凋亡相关基因bcl-2及bax表达的影响。方法：Wistar成年雄性大鼠60只,分为2组,分别为对照组,EPO预处理组（EPO组）,每组30只,EPO组大鼠经腹腔注射5000U/kg重组人促红细胞生成素（Recombinant human erythropoietin,RHuEPO）,对照组注射同体积生理盐水。2组各15只大鼠于给药24h后,检测各项指标,其余15只大鼠置于常压缺氧环境中（O27%）12h后,移至常压常氧环境中2h,予H/R损伤,之后采取心肌标本,DNA末端转移酶标记法（TUNEL法）检测心肌细胞凋亡,免疫组化检测凋亡效应酶胱天蛋白酶-3（caspase-3）、凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2）及B细胞淋巴瘤/白血病相关x蛋白（Bcl-associated x protein,bax）蛋白表达水平,计算bcl-2/bax比值。结果：H/R损伤前2组心肌细胞凋亡率,caspase-3以及bax蛋白表达水平无显著性差异（P〉0.05）,EPO组bcl-2蛋白表达水平、bcl-2/bax比值显著高于对照组（P〈0.01）。H/R损伤后2组心肌细胞凋亡率,caspase-3、bax及bcl-2蛋白表达水平显著高于损伤前（P〈0.01）,而bcl-2/bax比值显著低于损伤前（P〈0.01）,EPO组的心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达水平显著低于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,而bcl-2蛋白表达水平以及bcl-2/bax比值显著高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,2组bax蛋白表达水平差异无显著性（P〉0.05）。结论：EPO预处理在心肌H/R损伤中具有显著的抗凋亡效应;这一效应与其上调抗凋亡基因bcl-2的表达有关。     

IGF-1对MC3T3-E1细胞凋亡及凋亡调控蛋白Bax、Bcl-2表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对小鼠前成骨样MC3T3-E1细胞凋亡基因相关蛋白Bax／Bcl-2表达的影响。方法 MC3T3-E1细胞分组培养，应用4个浓度的IGF-1（1ng／mL、10ng／mL、30ng／mL、50ng／mL）干预24h。观察MC3T3-E1细胞动态生长状况：流式细胞技术检测细胞凋亡率；免疫组织化学法检测凋亡蛋白Pax／Bcl-2的表达水平。结果 与正常血清对照组相比，无血清对照组MC3T3-E1细胞凋亡率增加（P〈0．05）；与无血清组相比，IGF-1组MC3T3-E1细胞凋亡率降低（P〈0．05），Bax表达减弱（P〈0．05），Bcl-2表达增强（P〈0．05）；各浓度组间比较，（1～50）ng／mL浓度范围内MC3T3-E1细胞凋亡率随IGF-1浓度加大而逐渐降低（P〈0．05），Bax表达逐渐减弱（P〈0．05），50ng／mL浓度组Bcl-2表达明显增强（P〈0．01），Bcl-2／Bax灰度比与细胞凋亡率呈显著正相关（r=0.917，P〈0．01）。结论 一定浓度的IGF-1同时调节Bax和Bcl-2表达，抑制无血清培养诱导的细胞凋亡。并存在剂量依赖性效应。     

吡格列酮对大鼠缺血再灌注诱导的内质网应激相关的心肌保护作用

目的观察吡格列酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）时JNK、p-JNK及caspasc-12蛋白表达的影响,探讨吡格列酮通过JNK通路对内质网应激途径的心肌保护作用。方法Wistar大鼠40只随机分为假手术组（sham组）、缺血再灌注组（I／R组）、I／R＋Pio（吡格列酮）组及I／R＋Pi0＋sP600125组各10只。制作大鼠MIRI模型;TUNEL检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学检测各组caspase-12表达变化,westernBlot法检测各组JNK、P-JNK的表达。结果吡格列酮预处理组大鼠心肌细胞凋亡、JNK磷酸化率及caspase-12蛋白表达水平明显比I／R组降低（P〈0．05）,加用JNK抑制剂（SP600125）后上述指标进一步下降,与吡格列酮组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论缺血再灌注损伤可激活JNK通路,诱导过度的ERS,增加ER凋亡信号介导的细胞凋亡。吡格列酮预处理可减少ER凋亡信号介导的细胞凋亡,JNK信号途径在吡格列酮预处理抑制ER凋亡信号分子活化的机制中发挥重要作用。     

慢性间歇性低氧对大鼠左心功能的影响及作用机制研究

目的了解慢性间歇性低氧对大鼠左心室功能的影响,及心肌细胞凋亡在其中的作用。方法SD雄性大鼠16只,随机分为慢性间歇性低氧组（CIH组,间歇性低氧舱内饲养8h／d,共5周）和正常对照组（NC组,空气饲养）。实验结束时测量体重、血压、心率,心导管测定平均动脉压、左室舒张末压,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,Westernblot检测心肌组织caspase3、caspase8、Fas、Bax、Bcl-2蛋白水平。结果实验结束时CIH组左心室占体重的比值高于NC组（3．04±0．24‰和2．53±0．16％o,P〈0．001）,CIH组血压较NC组明显升高（136．3±6．8mmHg和122．3±4．1mmHg,P〈0．001）,两组间心率无明显差异。心导管检查显示CIH组左室舒张末压较NC组升高（13．6±1．0mmHg和5．7±O．5mmHg,P〈0．001）。TUNEL结果显示CIH组凋亡指数明显高于NC组（17．5％和1．9％,P〈0．001）,左室舒张末压与心肌细胞凋亡指数呈正相关（r=0．807,P〈0．001）。Westernblot检测结果显示与NC组相比,CIH组caspase3、Fas、caspase8表达增加,Bcl-2表达降低（P〈0．001）,Bax无明显差异（P=0．213）。结论慢性间歇性低氧可引起大鼠平均动脉压增高,左心室收缩和舒张功能降低,可能与慢性间歇性低氧诱导大鼠心肌细胞凋亡增加相关。     

缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax的影响

目的：观察缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及其调控基因Bcl-2、Bax的影响。方法：随机选择15只SD雄性大鼠，以高糖高脂饲料喂养6周后，腹腔注射STZ30mg／kg；2周后血糖升高≥16mmol／L者12只，随机又分为2型糖尿病组（n=6）和2型糖尿病缬沙坦治疗组（简称治疗组，n=6），治疗8周，另选6只健康SD雄性大鼠为空白对照组，查内生肌酐清除率（Ccr），24h尿白蛋白的排泄率（Uaer）。流式细胞术检测大鼠肾脏细胞凋亡率。免疫组化法检测Bcl-2、Bax的表达。结果：8周后，糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生，部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张，上皮细胞肿胀，胞浆内可见脂肪空泡变性，但治疗组较糖尿病组病变减轻。细胞凋亡率糖尿病组较治疗组高（26．54±2．67VS20．05±2．03，P〈0．05）；Ccr糖尿病组较治疗组低（O．021±0．001VS0．065±0．004ml／min，P〈0．05），Uaer糖尿病组高于对照组和治疗组（O．150±0．004VS0．081±0．001，0．086±0．002mg，P〈0．05）。治疗组和糖尿病组肾小管均较对照组的Bcl-2和Bax阳性表达高（P-40．05），治疗组肾小管Bcl-2较糖尿病组的阳性表达高，而Bax阳性表达低（P〈O．05）。结论：缬沙坦通过增加Bcl-2／Bax在肾小管的比例，使糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡率减低，保护肾功能。     

洛沙坦对高血压大鼠血管平滑肌细胞凋亡及凋亡基因Bax和Bcl-2的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ ATI-R阻滞剂洛沙坦对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡及凋亡基因Bax、Bcl-2的影响。方法末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡及RT—PCR、免疫组化方法分别检测Bax、Bcl-2基因及其蛋白的表达。结果从（12～24）周龄，SHR VSMC凋亡逐渐减低，24周龄时，凋亡指数（APOI）低于同周龄正常血压大鼠（WKY）（P〈0.05）；洛沙坦应用8周和12周。使APOI增加71％、35％（P〈0．05）。随大鼠周龄增加，SHR胸主动脉Bax基因表达逐渐下调。与APOI变化趋势一致。洛沙坦降压治疗可使SHR胸主动脉Bax蛋白表达上调。Bcl-2蛋白下调。结论洛沙坦长期降压治疗促进Bax蛋白表达和／或抑制Bcl-2蛋白表达，其机制可促进VSMC凋亡。     

调控自噬对H9c2心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响

目的探讨调控自噬水平对H9c2心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤的影响及意义。方法将H9c2心肌细胞缺氧2h／复氧4h,建立H／R损伤模型。以3-甲基腺嘌呤（3-MA）为自噬特异抑制剂和雷帕霉素为自噬增强剂,试验随机分为四组：正常对照组（C组）、H／R组、H／R＋100mol／L3-MA组（M＋H／R组）、H／R＋100nmol／L雷帕霉素（R＋H／R组）,应用MTT法检测细胞活力,透射电镜检测心肌细胞自噬小体,流式细胞技术检测细胞凋亡比例,Westernblot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin1,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及下游活性片段Caspase-9、Caspase-3蛋白表达。结果H／R组明显诱导H9c2心肌细胞自噬发生、细胞活力下降、凋亡增加（P〈O．01）．Westernblot检测发现,Bax、Caspase-9、Caspase-3活性片段蛋白表达明显增加,Bcl-2表达明显抑制,Bax／Bcl-2比值、活化蛋白Caspase-3、Caspase-9表达增加（P〈O．01）;M＋H／R组H／R损伤作用明显减弱,线粒体凋亡通路及下游蛋白表达抑制（P〈O．01）;而R＋H／R组线粒体凋亡通路进一步激活,促进细胞凋亡发生（P〈O．01）。结论自噬在H9c2心肌细胞H／R损伤中起到致命性作用,抑制自噬可保护心肌细胞H,R氧化应激损伤,其机制与抑制线粒体凋亡通路有关。