细胞间黏附分子-1在桥本甲状腺炎中的表达及其影响因素

目的 检测桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中细胞间黏附分子-1(CD54)的表达和离体的甲状腺滤泡上皮细胞在不同刺激因子作用下CD54表达水平的变化.方法 对41例桥本甲状腺炎组织采用免疫组化S-P法染色,图像分析系统对染色强度进行定量分析测定CD54在甲状腺组织中阳性表达率和表达面积.经过分离培养的甲状腺细胞,在不同浓度IL-1β和NaI干预下,采用流式细胞仪检测其CD54表达的变化.结果 桥本甲状腺炎CD54阳性表达率明显高于正常对照组(P＜0.05);其阳性面积也明显高于正常对照组(P＜0.05).离体的桥本甲状腺炎甲状腺细胞CD54表达水平虽然较正常对照高,但并无显著差异;桥本甲状腺炎细胞在不同干预因素下CD54表达水平都明显高于正常对照组(P＜0.05);在IL-1β干预下,发现高水平的IL-1β可以使正常甲状腺细胞CD54的表达明显升高,但桥本甲状腺炎甲状腺细胞对IL-1β的敏感性更强,低剂量的IL-1β可以显著增加CD54的表达,加入NaI后CD54表达明显增加.结论 CD54在桥本甲状腺炎中的升高可能是一种继发反应,与IL-1β和NaI有关,在桥本甲状腺炎的发病机制中起重要作用.     

桥本甲状腺炎甲状腺组织中白细胞介素10的表达

目的研究桥本甲状腺炎甲状腺组织中白细胞介素10(IL-10)的表达情况.方法采用免疫组化法研究9例桥本甲状腺炎甲状腺组织手术标本中IL-10的表达水平和分布情况,同时以11例结节性甲状腺肿及7例甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织标本作为对照.结果①9例桥本甲状腺炎甲状腺组织中IL-10均有表达,其中弱阳性3例,中度阳性4例,强阳性2例;②IL-10的表达部位主要在甲状腺滤泡细胞的胞浆中,淋巴细胞浸润明显的区域内滤泡细胞的阳性率较高,甲状腺内浸润淋巴细胞中偶见表达;③结节性甲状腺肿及甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织中几乎无IL-10表达.结论 IL-10在桥本甲状腺炎甲状腺组织中有不同程度表达;在非自身免疫性疾病的结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤旁正常组织中几乎无表达.甲状腺滤泡细胞可能是桥本甲状腺炎甲状腺产生IL-10的主要部位.IL-10在桥本甲状腺炎的发生发展中可能具有重要意义.     

cNOS mRNA在格雷夫斯病和桥本甲状腺炎的表达及意义

目的：研究cNOSmRNA在格雷夫斯病（GD）和桥本甲状腺炎（HT）甲状腺组织中的表达及与血管形成的关系。方法：应用原位杂交技术检测46例GD、41例HT和15例正常甲状腺组织中cNOSmRNA的表达情况,并用免疫组织化学CD34染色测量组织的微血管密度。结果：GD和HT中甲状腺上皮细胞、血管内皮细胞及单核／吞噬细胞上均可见cNOSmRNA表达,阳性表达率明显高于正常甲状腺组织。GD在甲状腺上皮细胞cDODmRNA表达,阳性表达率明显高于正常甲状腺组织。GD在甲状腺上皮细胞cNOSmRNA的表达明显高于HT。GD和HT中血管内皮细胞上cNOSmRNA的表达与微血管密度呈正相关。结论：GD和HT甲状腺组织中cNOSmRNA的表达与血管形成有关,cNOS可能参与GD和HT的发病机制。     

桥本甲状腺炎中Fas和FasL的表达

目的　了解细胞凋亡相关蛋白 Fas和 Fas L 的表达在桥本甲状腺炎发病机制及病理变化中的作用及意义 .方法　采用免疫组织化学方法和图像分析 ,检测 1 7例桥本甲状腺炎患者甲状腺标本中 Fas和 Fas L的表达及分布 .结果　在桥本甲状腺炎的甲状腺滤泡细胞中 Fas和 Fas L的免疫染色阳性率和免疫染色强度均显著高于非毒性甲状腺组 (P<0 .0 1 ) .桥本甲状腺炎中 Fas和 Fas L免疫染色强阳性甲状腺滤泡细胞多分布于浸润淋巴滤泡附近 ,浸润淋巴细胞中 Fas,Fas L 免疫染色较弱 .结论　桥本甲状腺炎中 Fas,Fas L 在甲状腺滤泡细胞中呈有特征性分布的高表达 ,浸润淋巴细胞 Fas,Fas L表达较少 ,提示甲状腺滤泡细胞可能通过自身表达 Fas和Fas L产生凋亡 ,致甲状腺滤泡萎缩、破坏 ,也可能是形成淋巴滤泡的主要原因之一     

髓相关蛋白14过表达对人甲状腺上皮细胞增殖的影响

目的: 探讨髓相关蛋白14（myeloid related protein 14,MRP14）过表达对人甲状腺上皮细胞增殖及分泌甲状腺激素的影响。方法: 免疫组织化学染色方法检测 MRP14蛋白在单纯性甲状腺肿和桥本甲状腺炎（HT）患者甲状腺组织中的表达;将MRP14基因过表达质粒pcDNA3.1 MRP14或对照质粒pcDNA3.1瞬时转染入人甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori 3-1,构建MRP14过表达甲状腺滤泡上皮细胞系;转染48 h后收集细胞及培养上清液,实时定量PCR检测 MRP14的转染效果;MTT法检测细胞增殖,化学发光免疫法检测细胞培养上清液中游离甲状腺素（FT4）浓度。结果： 与单纯性甲状腺肿患者相比,桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中MRP14蛋白表达明显增多;MRP14基因转染成功后,MRP14过表达组Nthy-ori 3-1细胞存活率较对照组明显降低（P＜0.01）,培养上清液中 FT4浓度较对照组明显降低（P＜0.01）。结论： 成功构建MRP14过表达甲状腺滤泡上皮细胞系;MRP14蛋白可能通过抑制甲状腺细胞增殖和甲状腺激素的分泌参与桥本甲状腺炎的发生发展。     

CD56、CD54在甲状腺病变中的表达及意义

目的：检测CD56、CD54在甲状腺病变组织中的表达情况,探讨CD56、CD54的表达在甲状腺病变鉴别诊断中的作用。方法分别收集海南医学院附属医院病理科73例甲状腺乳头状癌、64例良性病变组织蜡块。将137例石蜡标本制做组织芯片。应用免疫组织化学技术检测CD56、CD54蛋白在甲状腺病变组织中的表达情况。结果 CD56在甲状腺乳头状癌组织中大多表达缺失,表达率为14%,在良性甲状腺病变组织中表达率高(92.2%),两者间表达率差异具有显著统计学意义(P<0.01)。CD54在甲状腺乳头状癌及桥本氏甲状腺炎组织中表达增高(69.9%vs 75.0%),呈弥漫阳性表达,这两组间表达差异无统计学意义(P>0.05);在其他良性甲状腺组织包括结节性甲状腺肿和滤泡性腺瘤中,CD54表达较低(3.8%),主要呈散在弱阳性表达,与甲状腺乳头状癌组织相比,其表达差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论 CD56在甲状腺乳头状癌中表达缺失,在甲状腺良性病变组织中表达增高;CD54在甲状腺乳头状癌及桥本氏甲状腺炎中高表达,联合检测CD56、CD54对甲状腺病变的鉴别诊断具有重要作用。     

Cx26在桥本甲状腺炎甲状腺上皮细胞中的表达

目的探讨Cx26在桥本甲状腺炎甲状腺上皮细胞中的表达,探索其在自身免疫性甲状腺疾病的发病机制、转归及预后中所起的作用。方法采用二步法免疫组织化学技术(S-P法),测定甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织(对照)16例和桥本甲状腺炎(HT)30例甲状腺滤泡上皮细胞中Cx26的分布及表达情况。结果①对照组和HT组甲状腺滤泡上皮细胞均有Cx26的表达,两者既定位于甲状腺滤泡上皮细胞的细胞质中,又定位于细胞膜上;②对照组和HT组甲状腺上皮细胞Cx26表达阳性率,分别为68.75%(11/16)、20.00%(6/30)。表达强度明显低于对照组(Z值为3.123,P<0.001)。结论Cx26可在人甲状腺滤泡上皮细胞上表达;Cx26在AITD的表达强度存在异质性,这种缝隙连接蛋白表达的异质性可能与AITD的发生、发展及预后有关。     

滤泡状甲状腺肿瘤中CD57、EMA的表达

目的：观察CD57、EMA在滤泡状甲状腺 癌（FTC）和滤泡状甲状腺腺瘤（FTA）中的表达。方法：采用免疫组化SP法，检测FTC（25例），FTA（50例），瘤旁正常甲状腺组织（16例）中CD57及EMA的表达。结果：①16例瘤旁正常甲状腺组织无CD 57、EMA表达；②CD57在FTC、FTA上的阳性表达率分别为88％（22／25）、28％（14／50），EMA在FTC、FTA上的阳性表达率分别为76％（19／25）、24％（12／25）；CD57及EMA在FTC与FTA间的阳性表达差异均有统计学意义（P＜0．001）。结论：CD57及EMA均可作为鉴别FTC与FTA的较好指标。     

子宫球蛋白相关蛋白1在甲状腺疾病中的表达及其临床意义

目的:探讨子宫球蛋白相关蛋白1(uteroglobin-related protein 1,UGRP1)在甲状腺疾病中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学方法(Envision二步法),检测18例正常甲状腺、23例结节性甲状腺肿、35例甲状腺腺瘤、64例桥本甲状腺炎、43例Graves病和32例甲状腺癌组织中的UGRP1表达.结果:结节性甲状腺肿和甲状腺癌组织的UGRP1均不表达.正常甲状腺、甲状腺腺瘤和Graves病组织中的UGRP1表达阳性率分别为5.56%、2.86%和9.30%,它们之间表达阳性率均无统计学意义(P＞0.05).桥本甲状腺炎组织中UGRP1表达阳性率为71.88%,显著高于其它各种甲状腺疾病的表达阳性率(P＜0.01).结论:UGRP1在正常甲状腺、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、Graves病和甲状腺癌组织中不表达或低表达,而在桥本甲状腺炎组织中高表达.UGRP1可能是通过免疫炎症反应参与桥本甲状腺炎的发病过程,在桥本甲状腺炎疾病的诊断和鉴别诊断中起重要作用.     

桥本甲状腺炎甲状腺组织中共刺激分子的表达

目的:探讨共刺激分子在桥本甲状腺炎(HT)发病中的免疫病理作用。方法:采用免疫组织化学法检测20例HT和20例甲状腺瘤旁正常组织(对照组)CD40/CD40L、B7-1/CD28、GL50、CD4和CD8分子的表达,进行分析。结果:(1)HT甲状腺滤泡细胞(TFC)B7-1表达明显高于对照组,CD40表达明显低于对照组,且有显著性差异(P<0.01);(2)HT组织浸润细胞CD28、GL50、CD4和CD8表达明显高于对照组,且有显著性差异(P<0.01),但CD40L表达无显著性差异(P>0.05)。结论:CD40/CD40L、B7/CD28、GL50等共刺激分子表达异常以及局部CD4+和CD8+/T淋巴细胞浸润异常可能与HT甲状腺滤泡细胞破坏和功能减退有关。     

甲状腺髓样癌CD44V6表达与颈淋巴结转移的关系

目的 探讨甲状腺髓样癌CD44V6表达与颈淋巴结转移的关系。方法 应用免疫组Envision法对36例伴颈淋巴结转移的甲状腺髓样癌（MTC＋LNM）、13例无颈淋巴结转移的甲状腺髓样癌（MTC）、甲状腺滤泡型癌（FTC）和正常甲状腺组织（NT）各21例进行CD44V6检测。结果 正常甲状腺组织中无CD44V6表达,甲状腺髓样癌和甲状腺滤泡型癌中均有CD44V6表达,但MTC＋LNM组的CD44V6阳性表达明显高于MTC组和FTC组（P＜0．05,P＜0．01）。结论 CD44V6在甲状腺髓样癌中有异常表达,且伴有颈淋巴结转移的甲状腺髓样癌CD44V6高表达,说明CD44V6阳性表达与其颈淋巴结转移关系密切,对颈淋巴结转移起促进作用。     

T细胞共刺激分子在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

目的 探讨T细胞共刺激分子CD54、CD40和B7—1分子在自身免疫性甲状腺疾病（AITD）中的作用。方法 采用免疫组化法观察48例桥本甲状腺炎（HT）、51例Graves病（GD）和50例非毒性结节性甲状腺肿（NTG）的甲状腺组织中CD54、CD40和B7—1的表达，应用Mias99图像分析系统进行定量分析。结果 ①3种T细胞共刺激分子CD54、CD40和B7—1在HT患者的甲状腺组织中呈阳性表达，强阳性染色区域主要分布在甲状腺滤泡细胞胞膜和细胞质；在GD患者的甲状腺组织中大部分呈弱阳性表达，少数病例在浸润的淋巴细胞区呈强阳性表达；在NTG的甲状腺组织中呈阴性表达。②CD54、CD40和B7—1的阳性颗粒面积、平均吸光度及积分吸光度值比较：HT组明显高于GD组，而GD组明显高于NTG组，3组组间差异均有极显著性意义（均P〈0．01）。结论 T细胞共刺激分子CD54、CD40和B7—1的异常表达可能与AITD的发病有关。     

正常人和自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺细胞对碘致抗原表达的不同敏感性

目的探讨碘对体外培养的Graves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)、正常人甲状腺滤泡上皮细胞(TEC)抗原表达的影响.方法分离培养正常、GD和HT TEC,给予不同浓度NaI干预,免疫组化检测各组TEC CD54、HLA-DR表达的水平,流式细胞仪检测各组细胞CD80水平的变化,同时放免测定培养液中细胞因子TNF-α、IL-1β水平;观察加碘前后抗原表达的变化.结果 NaI可以使GD、HT患者TEC表达的CD54和HLA-DR增加HT的CD80表达增加(P<0.05),并使培养液中细胞因子TNF-α、IL-1β分泌增加(P<0.05);但NaI不能使正常TEC表达上述抗原(P>0.05).结论 CD54、CD80和HLA-DR在AITD的免疫学发病机制中起重要作用;碘可以作为一个重要的环境因子,通过与局部环境中的细胞因子及其它免疫炎症介质的协同作用间接影响作为抗原提呈细胞(antigen present cell, APC)而激活的TEC,碘不是AITD的始发因素,但在AITD的易感个体或者已有早期免疫功能紊乱的隐性患者,碘可能增加甲状腺局部细胞因子如IL-1β等分泌,使相应抗原表达上调,导致AITD的发生.     

自身免疫性甲状腺病患者外周血T淋巴细胞CTLA-4和CD40L的表达

目的:通过检测自身免疫性甲状腺病(AITD)患者外周血T淋巴细胞表面细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4,CD152)和CD40配体(CD40L,CD154)的表达,阐明共刺激分子在自身免疫性甲状腺病发生中的作用.方法:对30例Graves病(GD),20例桥本甲状腺炎(HT)患者和20例健康对照者采用流式细胞仪分析了共刺激分子在外周血T淋巴细胞上的表达.结果:与正常对照相比,外周血T淋巴细胞表达CTLA-4的百分数在GD患者中升高,在HT患者中降低.GD患者表达CTLA-4百分数与TSAb滴度呈正相关.结论:AITD外周血T淋巴细胞呈现共刺激分子的异常表达,某些分子的表达与自身抗体水平有相关性,提示共刺激分子参与了AITD的免疫发病机制.     

桥本甲状腺炎甲状腺组织细胞凋亡与凋亡调节蛋白表达的研究

目的：探讨细胞凋亡与桥本甲状腺炎（Hashimoto's thyroiditis,HT)发病机制的关系。方法：采用TUNEL法检测了41例HT、10例正常甲状腺组织细胞凋亡水平，同时采用免疫组化S－P法检测凋亡调节蛋白Fas、FasL、Bcl-2、Bax表达及分布，应用Mias99图象分析系统对免疫组化结果进行定量分析。结果：HT组甲状腺细胞凋亡率及甲状腺组织Fas、FasL、Bcl-2、Bax阳性颗粒面积，平均光密度和积分光密度均显高于正常组（P＜0．01）；HT组中甲状腺组织结构破坏较重区域中小滤泡及失去正常滤泡结构的腺上皮细胞凋亡率高于其他区域，其Fas、FasL、Bax表达高于其他腺上皮，滤泡结构较完整的区域Bcl-2表达较高。结论：甲状腺细胞凋亡增高是HT甲状腺滤泡结构破坏和功能异常的重要机制之一；凋亡基因Fas、FasL、Bcl-2、Bax的异常表达与HT甲状腺细胞凋亡增高密切相关。     

CK19与TPO蛋白表达对甲状腺肿瘤病理诊断价值

目的分析甲状腺肿瘤的诊断方法,探讨CK19与TPO蛋白表达在甲状腺肿瘤病理诊断中的意义。方法选取我院200例甲状腺肿瘤患者作为研究对象,其中甲状腺乳头状癌130例,滤泡性癌10例,髓样癌5例,滤泡性腺癌30例,结节性甲状腺肿16例,桥本甲状腺炎9例,所有患者均采用免疫组化En Vision二步法对CK19、TPO蛋白进行检测。结果CK19在甲状腺乳头状癌、滤泡性癌、髓样癌、滤泡性腺癌、结节性甲状腺肿、桥本甲状腺炎中表达的阳性率分别为：99.2%、40%、40%、10%、12.5%、0%,甲状腺乳头状癌的阳性率明显高于滤泡性腺癌,滤泡性癌的阳性率也明显高于滤泡性腺癌（P〈0.05）。TPO在甲状腺乳头状癌、滤泡性癌、髓样癌、滤泡性腺癌、结节性甲状腺肿、桥本甲状腺炎中表达的阳性率分别为：6.9%、60%、0%、100%、100%、100%,滤泡性癌的阳性率明显低于滤泡性腺瘤（P〈0.05）。结论通过CK19和TPO蛋白的表达,可以有效地对甲状腺肿瘤进行诊断,特别对甲状腺乳头状癌是标志性的诊断标准。     

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺滤泡细胞HLA-DR抗原免疫组化研究

目的探讨Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）和桥本甲状腺功能亢进（ＨＴＸ）、桥本甲状腺炎（ＨＴ）三者在病因学上的联系。方法用ＡＢＣ免疫组化法，检测１３例ＧＤ、７例ＨＴＸ、１０例ＨＴ和６例正常对照（ＮＣ）甲状腺滤泡上皮细胞（ＴＦＣ）膜ＨＬＡ－ＤＲ（ＤＲ）的表达。结果ＨＴ组表达最强，ＨＴＸ组次之，ＧＤ组最弱，ＮＣ组ＴＦＣ不表达。３０例患者ＴＦＣ膜ＤＲ表达强度与血清甲状腺微粒体抗体水平、甲状腺淋巴细胞浸润程度及其活性间呈正相关。结论ＴＦＣ异常表达ＤＲ的现象在自身免疫性甲状腺疾病中虽普遍存在，但表达程度不同，其表达的强弱与自身免疫反应的强度相关，推测也与甲状腺组织的破坏程度有关。     

凋亡相关蛋白HSP90α和Clusterin在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

目的 探讨凋亡相关蛋白HSP90α、Clusterin的表达与自身免疫性甲状腺疾病发生发展的关系.方法 应用免疫组织化学SP法检测26例Graves病(GD)、15例桥本甲状腺炎(HT)患者甲状腺组织标本和11例正常甲状腺组织中HSP90α、Clusterin的表达,并分析两者之间的相关性.结果 HSP90α在甲状腺滤泡上皮细胞胞质、胞核均有表达.HSP90α在GD、HT均以胞浆表达为主.Clusterin在GD、HT主要表达在甲状腺滤泡上皮细胞的胞浆和胞膜.GD和HT中HSP90α、Clusterin的表达均明显高于正常甲状腺组织.结论 HSP90α和Clusterin在GD中异常高表达可能主要通过抑制部分甲状腺细胞凋亡,间接促进甲状腺组织的增生;HSP90α和Clusterin在HT中甲状腺滤泡上皮的高表达可能是机体在病理情况下的一种代偿现象,能阻止部分甲状腺细胞凋亡,对机体产生保护作用.HSP90α、Clusterin的表达可能在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发生发展过程中起重要作用.     

Integrinα5β3及CD44v6在甲状腺滤泡状良恶性肿瘤中的表达差异

目的研究integrinα5β3、CD44v6在甲状腺滤泡状良、恶性肿瘤中的表达差异及其临床意义。方法采用免疫组化法检测60例甲状腺滤泡状癌（A组），60例甲状腺滤泡状腺瘤（B组），以及60例正常甲状腺（C组）组织标本中integrinα5β3、CD44v6的表达。结果在A组中integrinα5β3阳性率为56．67％，CD44v6的阳性率为58．33％；B组中integrinα5β3阳性表达率为11．67％，CD44v6阳性表达率为10．00％；A、B两组比较，integrinα5β3、CD44v6阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）；C组中无阳性表达。结论integrinα5β3、CD44v6在甲状腺滤泡状良、恶性肿瘤中的表达差异有统计学意义，这有助于临床上甲状腺滤泡状良、恶性肿瘤的鉴别诊断，对临床手术方式选择具有指导性意义。     

CD10在甲状腺肿瘤组织中的表达及检测临床意义

目的:研究甲状腺肿瘤组织中CD10表达情况及意义。方法:收集137例手术切除的甲状腺结节的石蜡标本,其中男性98例,女性39例;年龄24～75岁,平均年龄50岁。包括9例腺瘤性甲状腺肿(AG)、13例甲状腺髓样癌(MTC)、16例甲状腺滤泡性腺瘤(FTA)、11例甲状腺滤泡癌(FTC)、48例甲状腺乳头状癌(PTC)和40例甲状腺未分化癌(ATC)。应用免疫组织化学(IHC)检测CD10在上述组织中的表达情况。结果:几乎所有的ATC上皮成分中显示CD10的弥散性和强阳性。伴有鳞状化生和嗜酸细胞化生的腺瘤性甲状腺肿、滤泡腺瘤和分化型癌的上皮细胞CD10表达呈局灶阳性表达。一些甲状腺乳头状癌(PTC),以及一些含有乳头状癌的未分化癌,在其成纤维细胞样基质细胞和纤维组织中显示CD10阳性。结论:甲状腺癌的组织亚型可根据CD10的表达情况来判定。尤其是在排除转移后,CD10对于ATC的诊断具有极大意义。