心肌梗死大鼠非梗死区心肌细胞的凋亡及机制探讨

目的:探讨心肌梗死后不同阶段非梗死区心肌细胞凋亡的变化及其发生机制。方法:雌性Wistar大鼠,通过结扎左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型。术后24h、1周、2周及4周随机从各组中各取10～12只大鼠,行病理组织学检查及非梗死区心肌组织的TNF-α、caspase-3、AngⅡ、凋亡细胞检测、透射电镜、Bcl-2及p53的mRNA检测。结果:大鼠梗死范围为24%～33%。术后1～4周,可见心梗组大鼠心肌组织凋亡细胞增多,凋亡细胞指数升高;AngⅡ水平逐渐升高;心肌间质可见明显TNF-α表达;p53mRNA上升,Bcl-2mRNA下降。术后2～4周,caspase-3阳性染色产物的心肌细胞数量增多。结论:(1)大鼠心梗2周后非梗死区心肌发生细胞凋亡改变。(2)局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)激活、TNF-α上调及caspase-3活化可能与非梗死区细胞凋亡有关。(3)非梗死区细胞凋亡与凋亡基因p53及Bcl-2相关。     

螺内酯和氯沙坦及二者合用对大鼠急性心肌梗死早期愈合的影响

目的 探讨螺内酯和氯沙坦对急性心肌梗死(AMI)大鼠早期愈合的影响.方法 随机将60只大鼠分为假手术组(Sham组n=12)与AMI组(n=48).通过结扎左冠状动脉前降支造成AMI大鼠模型.再将术后72 h存活大鼠随机分为AMI组、AMI 螺内酯组(S组)、AMI 氯沙坦组(L组)、AMI 螺内酯 氯沙坦组(SL组),用氯胺T法观察梗死区与梗死周围非梗死区的胶原含量,观察各组梗死周围非梗死区毛细血管密度,利用逆转录-PCR技术的方法,观察AMI早期大鼠心肌基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA的表达.结果 组间梗死区与梗死周围区胶原含量差异并无显著性;AMI用药组梗死周围区毛细血管密度均高于AMI组;螺内酯和氯沙坦及2者合用组在心肌梗死后2周时MMP-13mPNA的表达均明显升高.结论 螺内酯和氯沙坦及2者合用并不延缓心肌梗死后早期组织修复.     

药物对大鼠急性心肌梗死RAS的影响

目的：观察氯沙坦、培多普利对大鼠急性心肌梗死(AMI)后循环和组织RAS的影响。方法：结扎左冠状动脉法制作大鼠AMI模型，随机分为对照组(C)；氯沙坦组(L)；培多普利组(P)；两药合用组(LP)；假手术组(S)。术后3天、1和6周观察循环PRA、AngⅠ、AngⅡ、ACE、ALD和心肌组织AngⅡ、ACE的变化。结果：AMI后3天和1周，C组血浆AngⅡ和ALD水平显增高，而6周时恢复到与S组没有显差异。L组血浆AngⅡ水平在三个时间点都显增高：P和LP组血浆PRA活性在3天时显增高，血浆ACE、AngⅡ和ALD水平则显降低；在1周和6周，血浆PRA和AngⅠ显升高，血浆ACE、AngⅡ和ALD水平则显降低。C和L组非梗死区心肌组织AngⅡ含量在三个时间点均显增高；P和LP组心肌组织AngⅡ和ACE水平均显降低。结论：RAS参与了心肌梗死的病理生理过程，且氯沙坦、培多普利能有效阻断AngⅡ所诱导的负面作用，最终改善心功能。     

卡维地洛对急性心肌梗死大鼠左室重构的影响

目的建立大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)模型,观察AMI后卡维地洛早期处理对心梗后左室重构的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组(n=15)、AMI组(n=15)、低剂量卡维地洛组(n=15)和高剂量卡维地洛组(n=15)。建模后2周心肌组织取材,HE、Masson染色病理学检查;免疫组织化学测定心肌组织中毛细血管及抗凋亡、凋亡蛋白表达;建模前1 d及建模后2周心脏超声检查;采用Elisa法对建模前及建模后2周血浆脑钠肽(BNP)水平测定。结果建模后2周,与AMI组比较,卡维地洛组梗死面积减小,梗死区存活心肌细胞数增加,替代性纤维化面积减小,抗凋亡蛋白bcl-xl表达增强,凋亡蛋白Bax表达降低,P<0.05;梗死区及梗死旁区心肌组织中幼稚毛细血管密度增加,上述改变在高剂量药组明显;心脏超声左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、室间隔厚度(IVS)直线小,心率(HR)减慢,左室射血分数(EF)值增加(P<0.05);血浆BNP水平较AMI组明显降低(P<0.05)。结论大鼠AMI后早期应用卡维地洛处理,可减少心肌细胞的凋亡及丢失,减轻AMI后心肌梗死程度,减轻左心室重构,改善AMI后左室功能,延缓心力衰竭的发生。     

高血压合并急性心肌梗死早期血压变化及其原因探讨

目的研究高血压合并急性心肌梗死早期血压变化和原因及其临床意义.方法60例AMI患者,分A组(伴高血压史)、B组(无高血压史).通过观察AMI前后血压变化、LVH情况、AMI后2周内UCG测定LVEF、E/A比值、泵功能、血清心肌酶峰CPK、CK-MB测定、血浆AngⅡ、β-EP和CGRP水平的测定,及梗死后心脏事件等.结果A组血压下降明显,并与基础血压、LVH、泵功能有关;A组发生AMⅠ后AngⅡ、β-EP、CGRP及CPK、CK-MB水平均高于B组;血压下降者EF及E/A显著低于血压未下降组,A组泵功能Ⅲ～Ⅳ级发生率高于B组,心脏事件及死亡率也高于B组.结论高血压是冠心病的重要危险因素,高血压发生AMI后70%血压下降,这与心功能恶化、LVH、梗死面积大以及血浆AngⅡ、β-EP、CGRP水平增高有关.     

大鼠急性心肌梗死的组织病理学变化及干细胞治疗

目的 动态观察大鼠急性心肌梗死(AMI)的组织病理学变化,针对性的探讨骨髓干细胞(BMSC)治疗AMI的最佳时机和定位.方法 结扎冠状动脉制作AMI模型,对术后1、2、4、6、8、10d大鼠心脏切片行HE染色,进行动态的对比观察,对心肌细胞变性坏死、急慢性炎症等病理现象做出半定量的评估.结果 AMI后的细胞浸润主要集中在梗死周围区.AMI后4d内,中性粒细胞在梗死周围区的浸润显著.AMI后4d起,梗死周围区出现大量的新生毛细血管.缺血区域的心内膜下和血管周围,AMI后可以先后观察到液化性细胞溶解和残存心肌细胞存活的现象.各切片心肌组织中均未见波纹纤维.结论 大鼠心脏在AMI后发生的组织病理学变化具有明显的时间和区域变化规律.AMI后的4d内,中性粒细胞显著浸润,此时的心肌局部微环境可能不适合干细胞治疗.而具有显著炎症细胞浸润和血管增生的梗死周围区,对BMSC治疗可能有特殊重要的意义.     

5-氮胞苷诱导的心脏成纤维细胞移植修复心肌损伤

目的 探讨5-氮胞苷诱导的大鼠心室成纤维细胞(CFs)植入急性心肌梗死(AMI)区的心肌损伤修复作用.方法 取SD大鼠乳鼠心室CFs体外培养、扩增,取第三代细胞加5-氮胞苷10 μmol/L诱导,并行5-溴脱氧尿嘧啶核仟(BrdU)标记,收集(0.8～1.2)×106个细胞用于移植.SD大鼠20只,结扎冠状动脉前降支建立大鼠AMI模型,2周后,治疗组(10只)将诱导后的CFs注入梗死区及周边,对照组(10只)予等量不含CFs的培养液接种.6周后处死所有动物,获取心肌标本,HE,及免疫组化染色观察CFs分化和转归.结果 治疗组HE染色梗死区可见敞在带横纹的肌肉组织,电镜下移植细胞及移植细胞与宿主细胞之间均未见闰盘连接;免疫绀化染色这些细胞BrdU、β肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白Ⅰ(cTn1)及连接蛋白43(Cx43)呈阳性;对照组梗死区为均匀一致的纤维瘢痕组织.结论 5-氮胞苷诱导的CFs植入AMI区可分化、转归为带横纹肌细胞,修复心肌损伤.     

骨髓干细胞动员疗法对心肌梗死大鼠心肌的促血管生成作用

目的探讨骨髓干细胞动员疗法对心肌梗死大鼠冠状动脉新生血管形成的影响。方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死（AMI）模型,人参皂甙Rg1联用辛伐他汀动员自体骨髓干细胞,建模后第24h、1周和4周时杀死大鼠,取出心脏,HE染色检测梗死面积,免疫组化方法观察心肌梗死灶、边缘区和正常心肌组织CD34阳性细胞及Ⅷ因子表达。结果人参皂甙Rg1联用辛伐他汀治疗后,治疗组大鼠心肌梗死区可见CD34阳性细胞浸润;治疗组大鼠梗死面积明显减小;治疗组大鼠梗死灶及周围组织中微血管密度明显高于AMI组及假手术对照组。结论在大鼠AMI模型中,人参皂甙Rg1联用辛伐他汀治疗,可动员骨髓干细胞归巢于缺血心肌,有效促进微血管形成,促进缺血心脏功能恢复。     

ERAANPS测定在急性心肌梗死中的应用及意义

目的探讨急性心肌梗死（AMI）患者血浆内皮素肾素血管紧张素心钠素系统（ERAANPS）的变化及其临床意义。方法应用放射免疫法检测32例AMI患者血浆内皮素（ET）、肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AⅡ）、心钠素（ANP）的浓度,并与梗死部位、范围及心功能状态进行相关分析。结果与对照组相比,AMI患者血浆ET、PRA、AⅡ、ANP明显升高（P〈0．01）;不同部位（前和／或间壁、下和／或后壁）梗死及透壁与非透壁性梗死时ERAANPS变化无显著性差异（P〉0．05）;但大面积与小面积梗死时其差别具有显著性意义（P〈0．05）;ERAANPS变化随心功能减退呈上升趋势。结论AMI后ERAANPS活性明显增高并与梗死范围、心功能状态明显相关。     

阿托伐他汀对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

目的观察阿托伐他汀对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响。方法41只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（14例）和AMI组（27例）,AMI组通过结扎左冠状动脉前降支（LAD）制作AMI模型。AMI组再随机分为AMI对照组（13例）和阿托伐他汀干预组（14例）。阿托伐他汀干预组每天给予阿托伐他汀灌胃（5mg／kg）,持续4周,假手术组和AMI对照组每天给予等量生理盐水灌胃。利用Real TimePCR法扩增并以GAPDH作为内对照相定量检测心肌营养素．1（CT．1）在各组样品中的表达量差异,采用免疫组织化学染色检测心肌Ⅰ型胶原产生。结果AMI组非梗死区炎性细胞因子CT-1mRNA表达、Ⅰ型胶原及左心室质量指数均高于假手术组,阿托伐他汀于预组显著低于AMI对照组（P〈0．05）。AMI对照组和阿托伐他汀干预组非梗死区心肌组织中CT-1mRNA与Ⅰ型胶原的变化呈正相关,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论阿托伐他汀可能通过抗炎作用来抑制心肌梗死后心肌纤维化。     

血浆中降钙素基因相关肽与糖尿病大鼠早期肾损害的相关性研究

目的：观察糖尿病大鼠血浆中CGRP的含量变化与24h尿微量白蛋白的关系，为早期防治DN提供理论依据。方法：Wistar大鼠，体重160-200g，于造成糖尿病大鼠模型后第6、8、10、12、14周测定血浆中的CGRP和24h尿微量白蛋白。结果：血浆中的CGRP在造模后第6周无明显改变，第8周开始呈进行性下降，并与24h尿微量白蛋白呈显著负相关，结论：动物观察血浆中CGRP的变化对于DN的早期发现及分析病情有重要意义。     

高压氧对颅脑损伤鼠内皮素及降钙素基因相关肽的影响

目的观察高压氧(HBO)治疗急性颅脑损伤大鼠血浆和损伤皮层内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量的变化。方法32只SD大鼠,随机为分正常组,急性颅脑损伤组(分颅脑损伤后6、24、48h组),高压氧治疗组(分颅脑损伤后6、24、48h组),常氧高氮处理组(分颅脑损伤后6、24、48h组)。每组各8只大鼠。各组动物出舱后按时间要求尽量在安静状态下快速断头取血及损伤皮层,采用放免法测定血浆及损伤皮层ET及CGRP含量。结果SD大鼠急性颅脑损伤后,其血浆和损伤皮层组织ET含量有不同程度的升高,而CGRP含量有不同程度的降低;高压氧治疗后,各组血浆及损伤皮层组织ET含量均有不同程度地降低,而血浆及损伤皮层CGRP含量亦有不同程度升高。结论急性颅脑损伤的发生发展与血浆和损伤皮层组织ET含量升高和CGRP含量降低有关;高压氧治疗可能通过降低ET含量和升高CGRP含量,从而起到治疗急性颅脑损伤的作用     

腹主动脉缩窄大鼠模型血浆血管紧张素Ⅱ的改变

目的通过建立腹主动脉缩窄大鼠模型,观察腹主动脉缩窄大鼠血浆中血管紧张素Ⅱ（an-giotensinⅡ,AngⅡ）浓度的改变。方法30只雄性SD大鼠随机分为假手术组（14只）和模型组（16只）。模型组根据Doering等的方法,用银夹造成腹主动脉部分狭窄（银夹内径0.7mm）。8周后计算左心室心肌质量指数,HE染色观察心肌病理形态,放射免疫法测定血浆AngⅡ表达。结果造模8周时模型组左心室心肌病理形态HE染色心较模型组有明显改变;模型组左心室质量指数及血浆AngⅡ水平较假手术组显著升高（P〈0.01）。结论腹主动脉缩窄大鼠造模8周时心肌符合纤维化改变,该变化可能与AngⅡ浓度增高有关。     

降钙素基因相关肽、一氧化氮对糖尿病肾病的意义

目的探讨在2型糖尿病（DM）大鼠早期肾损害过程中血浆中降钙素基因相关肽（CGRP）、一氧化氮（NO）含量的变化规律,为早期防治糖尿病肾病（DN）提供理论依据。方法采用链脲菌素（STZ）造成大鼠糖耐量异常,然后喂以高糖．高脂肪饲料10周,造成2型糖尿病模型,分别测成型前4周、2周、成型时、成型后2周、4周血浆中CGRP、NO含量的变化。结果成型前4周血浆CGRP、NO无明显改变,而成型前2周、成型时、成型后2周、4周血浆中CGRP进行性下降,同时血浆中NO含量明显增加。结论CGRP、NO相互作用共同参与DM肾损害的发生、发展。动态观察CGRP、NO的变化,对于早期发现DN及分析病情有重要意义。     

氯沙坦和哌唑嗪调节早期高血压大鼠体内降钙素基因相关肽反应的差异

目的：探讨高血压早期大鼠体内降钙素基因相关肽（CGRP）的变化,并观测两类降压药物,氯沙坦或哌唑嗪在降压过程中对CGRP的反应差异。方法：采用经典的两肾一夹型高血压大鼠（Goldblatt,2K1C）为研究模型,夹尾法测定大鼠清醒状态下血压,通过公式计算出平均动脉压;放射免疫法血浆内CGRP和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的含量。反转录聚合连反应（RT-PCR）测定脊髓背根神经节中CGRP mRNA的表达。结果：收缩压、平均动脉压在结扎肾动脉10d后较对照组快速升高（P〈0．01）,给予氯沙坦或哌唑嗪治疗5d后,血压明显降低（P〈0．01）;实验末,高血压未治疗组血浆中AngⅡ、CGRP浓度（P〈0．01,P〈O．01）和脊髓背根神经节中的CGRP mRNA的表达明显升高（P〈0．05）,高血压氯沙坦治疗组可进一步升高大鼠血浆中AngⅡ、CGRP浓度（P〈0．01,P〈0．01）和脊髓背根神经节中的CGRP mRNA的表达（P〈0．05）;但在高血压哌唑嗪治疗组大鼠血浆中AngⅡ变化不显著（P〉0．05）,但CGRP浓度和脊髓背根神经节中的CGRP mRNA的表达与未治疗组相比显著降低（P〈0．05,P〈0．01）。结论：在肾血管性高血压早期含CGRP感觉神经功能存在代偿性增高,氯沙坦或哌唑嗪的不同降压机制也可能与其影响体内CGRP合成和释放差异有关。     

急性心肌梗死患者重组葡萄球菌激酶对血管再通的影响

目的 :通过测定血浆降钙素基因相关肽 ( CGRP)、内皮素 ( ET- 1)和血清一氧化氮 ( NO)不同时间的含量变化 ,研究重组葡萄球菌激酶溶栓对急性心肌梗死 ( AMI)血管再通的影响。方法 :采用放免法及比色分析法对再通组 3 5例 ,未通组 2 5例及正常组 3 0例的 CGRP,ET- 1和 NO含量进行测定。结果 :再通组溶栓后 1h血浆 CGRP浓度 ( 2 2 0 .87± 3 5 .98) ng/ L达峰值 ,是溶栓前的 4倍以上 ;未通组各时间点 CGRP含量均低于再通组 ,溶栓后 1,3 h与再通组比较差异有高度统计学意义 ( P均 <0 .0 1) ;2处梗死者的 CGRP浓度峰值 ( 10 2 .3 3± 3 4 .89) ng/ L 较 1处梗死者 ( 14 5 .79± 4 5 .69) ng/ L 明显降低 ( P<0 .0 5 ) ;再通组 ET浓度较未通组明显升高 ( P<0 .0 5 )。结论 :AMI溶栓早期 CGRP和 ET浓度明显升高可能与梗死相关动脉再通有关     

银杏内酯上调CGRP对大鼠脑缺血再灌注损伤产生保护作用

目的　研究银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用与降钙素基因相关肽 (CGRP)的关系。方法　大脑中动脉线栓法 (MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。 6 0只SD♂大鼠随机分为假手术组 (sham)、脑缺血再灌注模型组 (MCAO)、溶媒对照组 (MCAO +vehicle)、银杏内酯低剂量 (MCAO +ginkgolide 10mg·kg-1)、中剂量(MCAO +ginkgolide 2 0mg·kg-1)和高剂量 (MCAO +ginkgolide 4 0mg·kg-1)治疗组 ,每组 10只大鼠。术后对大鼠进行神经缺陷评分 ,并取脑组织测量梗死体积。另 6 0只大鼠 ,分组、实验方法及步骤同上 ,术后取梗死侧脑组织制成匀浆 ,放射免疫法测量脑组织降钙素基因相关肽和内皮素(ET)含量。结果　银杏内酯能明显改善缺血再灌注损伤大鼠神经缺陷症状 ,缩小脑梗死体积 ,剂量依赖性升高缺血脑组织中已降低的CGRP含量和CGRP/ET值。结论　银杏内酯升高缺血脑组织中CGRP含量 ,使缺血脑组织中比例失衡的CGRP/ET值向正常恢复 ,可能是银杏内酯对缺血脑组织产生保护作用的机制之一     

牛磺酸对烫伤大鼠血浆及心肌组织肿瘤坏死因子和血管紧张素Ⅱ含量的影响

目的 :观察牛磺酸对大鼠严重烧伤后心肌损害的影响。方法 :用健康Wistar大鼠 ,随机分为对照组、烧伤组 (造成 30 %TBSAⅢ度烫伤 )和治疗组 (烧伤后腹腔注射牛磺酸 ,剂量 4 0 0mg·kg-1体重 )。于伤后 1、3、6、12和 2 4h检测血浆TNF α、AngⅡ和TnT含量与心肌中TNF α、AngⅡ含量。结果 :烧伤大鼠烧伤后 3h血浆cTnT呈显著升高 ,12h达峰值 ,2 4h显著高于对照组 ;烫伤后 6h血浆和心肌组织TNF α含量显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,12h达峰值 ;伤后1h血浆AngⅡ含量呈显著升高 ,伤后 2 4h血浆及心肌中AngⅡ高于对照组 ;牛磺酸治疗组血浆cTnT、TNF α和AngⅡ水平较烧伤组均有显著性降低。血浆TNF α、AngⅡ含量与血浆cTnT变化密切相关。结论 :牛磺酸对严重烫伤后心肌损伤有较好的保护作用。     

大鼠急性心肌梗死早期HGF基因表达

目的观察大鼠急性心肌梗死早期肝细胞生长因子（HGF）基因表达的变化。方法SD大鼠随机分为对照组与急性心肌梗死（AMI）组：结扎左冠状动脉前降支,操作结束后1、2、4、6、12h处死大鼠。应用伊文思蓝及氯化三苯硝基四氮唑红（TFC）染色,测定心肌梗死范围;应用RT—PCR测定各组心肌缺血区HGF基因动态表达情况。结果冠状动脉左前降支结扎术后20rain内心电图ST段、T波进行性抬高;左心室心肌经伊文思蓝和TTC染色后见蓝色正常区、砖红色缺血区和灰白色坏死区;缺血12h称量梗死心肌范围占危险区心肌重量百分比为（66．44±19．24）％。心肌梗死后随时间延长HGFmRNA表达逐渐上升（P〈0．05）。结论HGF基因水平增高参与急性心肌梗死旱期心肌组织损伤。     

降钙素基因相关肽对心肌肥厚影响机制的研究

<正>降钙素基因相关肽(calcitonin gene related protein,CGRP)是迄今为止发现的最强的一种内源性舒血管物质~([1]),对心血管系统具有重要的生理调节作用,但对肥厚心肌有无逆转作用目前尚未阐明。本研究采用外源性CGRP干预心肌肥厚大鼠,观察干预后心肌肥厚程度的变化和心肌组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、内皮素(endothelin,ET)含量的变化,进一步探讨CGRP对心肌肥厚的影响及可能机制。