实时荧光定量PCR技术及其在生命科学领域中的应用(二)

实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)技术是在PCR定性技术基础上诞生起来的用不同荧光定量核酸的技术,具有敏感性高、重复性好、速度快、操作简便和污染少等优点。本文综述了FQ-PCR技术的原理、特点、目前常用FQ-PCR仪、定量方法、实验条件及实验中的主要影响因素及FQ-PCR技术在生命科学领域中的应用和研究进展。     

实时荧光定量PCR技术及其在生命科学领域中的应用(一)

实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)技术是在PCR定性技术基础上发展起来的用不同荧光定量核酸的技术,具有敏感性高、重复性好、速度快、操作简便和污染少等优点。本文综述FQ-PCR技术的原理、特点、目前常用FQ-PCR仪、定量方法、实验条件及实验中的主要影响因素及FQ-PCR技术在生命科学领域中的应用和研究进展。     

荧光定量PCR仪的边缘效应与实验误差分析

目的:探讨荧光定量PCR分析仪边缘效应及实验误差的原因.方法:通过比较部分国外知名品牌荧光定量PCR仪的光路系统及加热模块设计原理,分析边缘效应及实验误差产生的原因.结果:传统荧光定量PCR仪光路设计缺陷和加热模块的孔间温度均一性不足会导致边缘效应和实验误差,是影响荧光定量PCR结果重复性的重要原因.结论:了解不同品牌荧光定量PCR仪的检测原理,选购性能优良的荧光定量PCR仪,尽量避免实验误差,以保证实验结果的准确性.     

荧光定量PCR仪的选购

荧光定量PCR技术已成为临床分子检测的重要手段之一,其以敏感性、特异性而被越来越多的科研人员所看好,荧光定量PCR仪的性能与检测结果的准确性密切相关.现将PCR仪选购过程中需注意的几点问题做一简单介绍.     

实时荧光定量 PCR 仪原理与技术关键点分析

本文主要阐述实时荧光定量PCR技术的基本构成、测量原理,以及实时荧光定量PCR仪的部件构成、质量控制和影响其检测精密度的因素.     

ABI-7000 PCR仪对血清HBV DNA含量的定量分析

目的检验ABI-7000荧光定量PCR仪对血清HBV DNA检测的灵敏性和重复性,探讨HBV DNA定量与血清标志物的关系,比较荧光定量PCR与定性PCR的敏感性差异。方法对乙肝标志物已明确的305例血清进行HBV DNA定量检测,其中67例同时做HBV DNA定性,并对结果进行统计分析。结果ABI-7000荧光定量PCR仪检测HBV DNA的灵敏性高,可检测低至1000copies/ml血清,批内及批间cv值分别为9.16%及12.66%;各种血清标志物组合HBV DNA含量分布情况表明:HBeAg阳性组HBV DNA阳性率高于其它组合(p<0.05);荧光定量PCR组HBV DNA阳性率与定性PCR组比较,有显著性差异(p<0.05)。结论ABI-7000PCR仪定量检测HBV DNA,灵敏度高,重复性好,优于传统定性PCR;HBV DNA定量可准确反映体内HBV复制情况,具有重要临床意义。     

晶芯@RT-Cycler636实时荧光定量PCR仪

仪器简介：博奥生物有限公司暨生物芯片北京国家工程研究中心自主研发的晶芯@RT-Cycler636实时荧光定量PCR仪是致力于生命科学研究和分子诊断应用领域的新型产品。它采用离心式实时荧光检测方式，通过热循环PCR对特异性的靶基因进行扩增并定量。该仪器具有适用范围广，准确性高，体积小巧，操作简便等特点。     

罗氏Lightcycler PCR仪离心式控温系统原理及常见故障维修

0引言荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术是在常规PCR的基础上加入荧光标记探针,把核酸扩增、杂交及光谱技术结合在一起,实现对目的基因的准确定量检测[1]。我院的罗氏Lightcycler荧光定量PCR仪体积小、实验成本低,检测通道为3通道,可装32位孔数的20μL的玻璃毛细管,主要用于病毒的测定及疾病诊断等工作。     

应用荧光定量PCR检测生殖道沙眼衣原体

目的 探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测技术在泌尿生殖道沙眼衣原体的应用.方法 用荧光定量PCR法和抗原检测法对怀疑有沙眼衣原体感染的65例门诊患者分别进行检测.结果 两种方法阴性符合率为97.73%,阳性符合率为76.19%,差异有统计学意义.结论 荧光定量PCR法作为一种核酸定量技术,具有高特异性、高敏感性的特点,不仅可以准确诊断,而且其定量技术可指导临床用药,值得推广.     

荧光定量PCR仪检测HBV DNA结果比对分析

目的:探讨分析应用荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的结果。方法:选取2018年8月~2019年9月本院收治的30例乙型肝炎患者,按数字法随机分两组,各15例,对照组仪器采用RLC480仪检测,观察组仪器采用荧光定量PCR仪检测,通过对患者HBV DNA水平的测定,对比分析不同仪器检测的结果。结果:RLC480型荧光定量PCR仪器和ABI7500型荧光定量PCR仪器两种仪器测定结果未出现离群值;两台仪器的检测HBV DNA结果的相关性良好(r>0.975);两台PCR检测仪器检测结果的偏倚度百分比为3.18%(<7.51%),一致性良好,且系统误差在可接受的范围内。结论:ABI7500型荧光定量PCR仪器和RLC480型荧光定量PCR仪器检测HBA DNA的一致性极高,误差小,测算乙型肝炎DNA结果偏倚度在可控范围内,两种仪器运用于乙型肝炎的测量结果可用于以后的临床检测中。     

X线机专利技术分析

目的:通过对X线机专利技术进行分析,使X线机技术领域人员以及相关企业了解该领域的专利申请状况,为国内申请人在该领域的技术开发以及进行专利申请提供参考。方法:结合国际专利分类号和关键词检索出国内外涉及X线机的专利,并对所检索的专利申请量、区域分布、主要申请人以及重点技术专利进行分析。结果:获得了全球X线机技术领域的历年专利申请量、专利技术的国家和地区分布、重点申请人的专利申请情况以及在中国申请的X线机技术的专利申请状况信息。结论:X线机技术领域中的专利申请量在全球和中国范围内均呈现逐年上升趋势,我国企业在专利数量、专利的有效性及布局的完整性等方面与国外大公司相比存在较大差距。     

现代医学监护仪器的应用特点及发展趋势

现代医学监护仪的广泛应用。为临床医学诊断和治疗提供了有力帮助。并已成为各级各类医院临床科室之必备设备；科学技术的发展，也推动和促进了现代医学监护技术的发展，为现代医学监护仪的发展提供了广阔空间，本文简要介绍现代医学监护仪的一些应用特点和未来的发展动态及发展趋势。     

两种新冠病毒核酸检测系统检测结果的比对分析

目的 对不同新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测方法进行比较和分析,探讨核酸提取扩增检测一体化的实时荧光定量PCR系统的应用价值。方法 2020年1月—10月于新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)复核样本库中随机抽取确诊病例和排除病例的灭活咽拭子标本,共计10份。采用盲法随机编号,同时使用全自动医用PCR分析系统GeneXpert DX system和ABI QuantStudio Dx实时定量PCR检测系统进行检测,每组均进行平行检测,利用四格表法对结果进行一致性分析。结果 检测结束后揭盲,所有样本纳入统计分析,无剔除数据。经检测,两种方法对8例新冠病毒确诊病例咽拭子检测结果均为阳性,2例排除病例咽拭子检测结果均为阴性;两种方法检测结果一致性好(Kappa系数=1,P值=0.002);使用方法A检测前处理时间为30秒,结果报告时间为48分钟;在核酸检测过程中检测人员与样本接触时间短,气溶胶危险较低,试剂盒全程密封,实验完成后标本处理安全性高。结论 方法A与方法B在新型冠状病毒核酸检测中结果一致,方法A具备操作环节简单、生物安全风险系数小、检测更为快速等优点。     

新型液相芯片系统在食源性致病菌快速检测中的应用研究

目的:评估一种新型液相芯片系统应用于食源性致病菌进行快速检测的可行性。方法:使用荧光多重PCR技术以及液相芯片检测系统对食源性致病菌进行快速检测。结果:荧光多重PCR技术结合液相芯片检测系统能够对多种食源性致病菌在8 h内实现定性和半定量检测,其灵敏度、特异性、抗干扰能力明显优于传统方法。结论:基于荧光多重PCR技术的液相芯片系统操作简便、干扰少、检测结果准确可靠,能够应用于食源性致病菌快速检测。     

PCR仪与测序仪应用于丙型肝炎病毒基因型检测的临床效果观察

目的:观察PCR仪与测序仪在丙型肝炎病毒(HCV)基因型检测中的应用。方法:选择2018年1月~2018年12月收治的134例HCV感染患者为研究对象,给予患者PCR仪检测、测序仪检测。结果:测序仪检测134例均可分型,PCR仪检测130例患者可分型,4例未能分型。PCR检测结果:134例HCV感染患者中,1b型59例,2a型47例,3a型6例,3b型15例,6a型3例,4例为分出型别。基因测序结果:134例均可分型:1型59例,2a型40例,2i型7例,3a型6例,3b型15例,6a型3例,6n型4例。PCR仪检测法检测符合率97.0%。结论:PCR仪测序仪检测用于丙型肝炎病毒基因型检测,操作便捷,但其只能检测探针覆盖的型别,个别罕见型别不能分型。     

仿真技术在基因芯片杂交仪微流路设计中的应用

目的：为了加快基因芯片技术的推广和应用,研制一种集基因芯片清洗、温育、杂交等于一体的新型仪器,使整个过程可在计算机控制下自动完成。方法：借助计算机辅助设计（computeraideddesign,CAD）技术,针对基因杂交仪微流路模块进行建模;借助计算流体力学（computationalfluiddynamics,CFD）技术,应用CFX软件建模分析得到不同流路方式的液流情况;对固架承载结构进行静强度分析,得到其承载分布情况;对电加热模块进行热-固耦合分析,得到微流路模块热应力情况。结果：仿真技术为微流路设计提供了参考和依据,从而更高效地设计出了满足实验流程的基因芯片杂交、清洗微流路模块,避免了结构工艺因素的影响,使得到的实验数据更加科学可信。结论：运用仿真技术完成对微流路模块的设计研究,可以有效地缩短开发周期、节省试验成本,对于该类产品的试制与性能测试具有一定的参考意义。     

射波刀及其临床应用

介绍了新型立体定位放射外科治疗设备———射波刀的发展情况,详细阐述了射波刀的机械臂、定位系统、呼吸追踪系统、脊柱定位系统和治疗床等5个组成部分的功能及操作方法,分析了射波刀治疗肿瘤相比常规手术治疗肿瘤和普通放疗治疗肿瘤的优势,并针对脑部、胸部和脊柱等部位肿瘤治疗介绍了射波刀在临床上的应用。     

旋转式荧光定量PCR在临床应用中的价值

目的：探讨旋转式荧光定量PCR仪在检测临床标本中的应用价值。方法：通过旋转荧光定量-PCR技术鉴定1132株临床分离株,进行结核分枝杆菌的菌种鉴定和定量分析,同时进行抗酸染色和培养法。结果：总阳性检出率为48.64%,其中菌阳检出率为96.56%（253/262）,阴性符合率为77.85%（369/474）,菌种鉴定特异性实验符合率为100%。结论：旋转氏荧光定量PCR仪改进后更加快速、敏感,与其配套使用的试剂特异性强,是在检测结核分枝杆菌复合群的同时,又能进行非结核分枝杆菌鉴定辅助诊断的好方法。     

基于单片机的数字化中医穴位疗法治疗仪的功能与原理

本治疗仪是将现代科技与中医穴位疗法结合在一起,利用单片机进行控制,实现了集中医拔罐疗法、热疗、磁疗、针刺疗法、电针疗法等多种疗法多位一体的新型穴位疗法治疗仪。本文对穴位疗法治疗仪的主要功能和工作原理进行了阐述。     

加强医疗器械的信息化管理

介绍了信息化技术的应用解决了传统医疗器械管理中存在的和无法解决的问题，实现了医疗器械的全流程动态管理和监控，对推动医疗器械的规范化管理起到了积极的作用。