白细胞介素-17在口腔扁平苔藓病损组织的表达研究

目的检测白细胞介素（IL）-17在口腔扁平苔藓（OLP）病损局部组织的表达情况．初步探索Th17细胞在OLP发病过程中的作用。方法26例OLP活检组织和6例健康颊黏膜组织制成匀浆,ELISA测定IL-17浓度,应用BCA总蛋白检测方法测定总蛋白浓度．根据IL—17相对含量（pg／mg）=细胞因子（pg／ml）／总蛋白（mg／ml）,计算IL-17相对含量;应用免疫组化方法检测组织中IL-17表达的组织分布。结果在所有标本中均能检测出IL-17的表达．对IL-17相对含量结果进行非参数秩和检验,与对照组相比差异无统计学意义,IL-17阳性染色主要在固有层呈散在分布．在表皮不完整的糜烂处及上皮下疱处,阳性细胞明显增多,上皮内极少见阳性染色。高倍镜下IL-17阳性染色主要分布在胞浆,部分细胞的胞外间隙也可见弱阳性染色。结论IL-17在OLP病损组织中均有表达,但与对照组相比,其表达水平差异无统计学意义;IL-17在OLP中的作用仍需进一步探讨。     

曲安奈德外用治疗口腔黏膜病的研究进展

为了解曲安奈德外用治疗口腔黏膜病的情况,检索国内外曲安奈德外用治疗口腔黏膜病的文献,并对其外用治疗口腔黏膜病的进展进行综述。共检索到相关文献21篇,涉及口腔扁平苔藓(17篇)、复发性阿弗他溃疡(3篇)和白塞病(1篇)3种口腔黏膜病的治疗,曲安奈德单独或辅助其他药物外用治疗此3种口腔黏膜病均有良好疗效,短期外用无明显不良反应,不良反应仅见于少数长期使用患者。因此,曲安奈德外用适于治疗口腔扁平苔藓、复发性阿弗他溃疡和白塞病,对其他与变态反应或免疫功能异常有关的口腔黏膜病的疗效,有待更多的相关研究证实。     

复发性阿弗他溃疡患者间歇期和溃疡期辅助性T细胞细胞因子的变化

目的 检测复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer,RAU)患者间歇期和溃疡期外周血中辅助性T细胞分泌的细胞因子的变化.方法 15例患者,女6例,男9例,抽取间歇期和溃疡期的静脉血,酶联免疫法检测血清中IL2、IFNγ、IL4、IL10的含量,比较患者间歇期和溃疡期细胞因子的变化.结果 患者溃疡期血清中的IL2、IFNγ、IL4含量明显高于间歇期,两者的差异有统计学意义(P<0.05).血清中IL10的含量在间歇期和溃疡期无明显变化(P>0.05）.结论 RAU患者溃疡期的细胞免疫相关细胞因子发生变化,Th1和Th2细胞失衡.     

白细胞介素35对口腔扁平苔藓患者外周血辅助性T细胞17与调节性T细胞平衡的影响

目的探讨外源性白细胞介素(interleukin,IL)35对口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者外周血中辅助性T细胞17(helper T cell 17,Th17)与调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡的影响。方法选取2016年10至12月就诊于贵州医科大学附属医院口腔内科黏膜专科门诊的12例OLP患者外周血(OLP组)(男性1例,女性11例,26~68岁;其中非糜烂型OLP4例,糜烂型OLP 8例),同期收集贵州医科大学附属医院体检中心的13名健康人外周血(健康对照组)(男性1名,女性12名,20~68岁),无菌提取两组外周血单个核细胞,流式细胞术(flow cytometry,FCM)分选外周血CD4+T细胞,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测两组外周血CD4+T细胞中Th17、Treg细胞特异转录因子维甲酸相关孤核受体γt(retinoic acid receptor-related orphan receptorγt,RORγt)、叉头状转录因子(forkhead box3,Foxp3)mRNA表达水平;将OLP患者外周血分选出的CD4+T细胞分为实验组与对照组,实验组加入重组人IL-35蛋白(recombinant human IL-35,rhIL-35),对照组加入等体积磷酸盐缓冲液,分别进行细胞体外培养,收集培养结束后的细胞,qPCR检测上述因子的表达水平。结果OLP组CD4+T细胞中Foxp3、RORγt mRNA的相对表达量[M(Q25,Q75)分别为0.15(0.09,0.30)和1.04(0.45,2.15)]均显著大于健康对照组[分别为0.04(0.02,0.06)和0.10(0.05,0.11)](Z=-4.134,P<0.01;Z=-3.699,P<0.01)。OLP组RORγt/Foxp3 mRNA比值[6.22(3.67,15.34)]显著大于健康对照组[2.50(1.24,5.23)](Z=-2.665,P=0.007)。OLP患者外周血实验组CD4+T细胞Foxp3 mRNA相对表达量[0.40(0.21,1.22)]显著大于对照组[0.15(0.11,0.26)](Z=-2.510,P=0.012),两组RORγt mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),实验组RORγt/Foxp3 mRNA比值[3.44(1.55,8.16)]显著小于对照组[6.22(4.43,12.21)](Z=-2.746,P=0.006)。结论OLP患者外周血中存在Th17细胞占优势的Th17/Treg平衡异常,外源性IL-35可通过促进Treg细胞扩增,实现对OLP患者外周血中Th17/Treg平衡的调节。     

口腔扁平苔藓外周血中辅助性T细胞/调节性T细胞平衡与临床特征相关性分析

目的 了解口腔扁平苔藓（OLP）患者外周血中辅助性T细胞17（Th17）与调节性T细胞（Treg）的平衡变化,探讨它们在OLP发病机制中的作用及意义。方法 选取17例正常组和33例OLP患者（网纹型15例,糜烂型18例）的外周血,应用流式细胞术（FCM）检测Th17、Treg细胞的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测它们的转录因子维甲酸相关孤核受体γt（RORγt）和叉头状转录因子3（Foxp3）mRNA的表达。结果 OLP外周血中Th17、Treg细胞及RORγt、Foxp3 mRNA表达均升高（P<0.05）,但Treg细胞和Foxp3 mRNA表达在OLP两型间差异无统计学意义。Th17/Treg比值在OLP中升高（P<0.05）,其中糜烂型OLP显著高于正常组及网纹型OLP（P<0.01）,但网纹型OLP与正常组相比差异无统计学意义。Spearman相关分析显示Th17细胞和Th17/Treg比值与体征计分、RAE计分存在正相关关系（r=0.66,P=0.00;r=0.66,P=0.00;r=0.52,P=0.00;r=0.50,P=0.00）;同时Th17细胞与Treg细胞也存在正相关关系（r=0.39,P=0.03）。结论 OLP外周血中Th17和Treg细胞以及它们的比例均增高,Th17/Treg失衡在糜烂型OLP的发病过程中起了一定作用。     

糖皮质激素对口腔扁平苔藓辅助性T细胞平衡的影响

目的　明确口腔扁平苔藓 (OLP)患者的Th1 /Th2免疫应答模式,探讨糖皮质激素对OLP患者辅助性T细胞平衡的影响。方法　密度梯度离心法分离OLP患者和对照组外周血单个核细胞,分别用植物血凝素(PHA)和地塞米松刺激OLP患者外周血单个核细胞,采用酶联免疫吸附法,检测培养上清液中干扰素γ(IFN γ)和白细胞介素 4(IL 4)的含量;应用半定量逆转录聚合酶链反应技术,检测培养细胞中IFN γ和IL 4mRNA的表达水平。结果　外周血单个核细胞经PHA诱导培养,OLP患者组IFN γ的水平低于健康对照组 (P<0 05),IL 4的水平高于对照组,但差异无统计学意义(P>0 05),IFN γ/IL 4的比值低于对照组 (P<0 05 )。地塞米松可抑制IFN γ和IL 4的水平(P<0 01),且对IFN γ的抑制作用较IL 4更为显著。结论　OLP患者存在Th1 /Th2的平衡失调,为Th2占优势的免疫应答,糖皮质激素对OLP的Th1 /Th2细胞因子均有抑制作用。     

辅助性T-17细胞在根尖周炎中的免疫病理作用

辅助性T(Th)-17细胞是一种与Th-1和2细胞亚群不同的新的辅助性CD4阳性T细胞亚群,其分化调节与多种细胞因子有关,可以清除特定的细胞外病原体起到保护宿主的作用,对自身抗原的特异性又可导致炎症和自身免疫性疾病。根尖周炎的具体发病机制尚不清楚,但先天性和获得性免疫反应在根尖周炎症中起着重要的作用,而Th-17细胞的发现有助于诠释Th-1和2细胞中的一些异常现象,更好地认识Th-17细胞在根尖周炎疾病发生过程中的免疫病理作用。根尖周炎是一种多数继发于根管牙髓感染,以持续的抗原刺激引起宿主反应和根尖部牙槽骨组织破坏为主要特征的牙体牙髓疾病,其病理机制与局部炎症和免疫反应密切相关。本文就Th-17细胞、Th-17细胞的分化和调节、Th-17细胞与根尖周炎宿主免疫炎症反应间的关系等研究进展作一综述。     

口腔黏膜病临床治疗Ⅵ.复发性阿弗他溃疡的诊断与治疗

复发性阿弗他溃疡（recurrent aphthous ulcer，RAU）是最常见的口腔黏膜病。流行病学调查显示，每5个人中即有1人至少发生过1次溃疡，且不论男女、年龄、人种均可发生。目前，RAU的病因及致病机制仍不明确。RAU的诱因可能是局部创伤、精神紧张、食物、药物、激素水平改变及维生素或微量元素缺乏。系统性疾病、遗传、免疫及微生物在RAU的发生、发展中可能起重要作用。由于病因不明，RAU的诊断完全是基于病史及临床表现，缺少可作为确诊依据的实验室指标。RAU预示着机体可能有潜在系统性疾病，如胃肠、血液和内分泌系统的疾病，但临床上大部分患者身体健康，无系统性疾病。溃疡灼痛明显，呈圆形或椭圆形，具有周期性、复发性、自限性的特征。RAU又称为复发性阿弗他性口炎（recurrent aphthous stomatitis，RAS）、复发性口腔溃疡（recurrent oral ulcer，ROU）、复发性口疮（recurrent aphthae）或canker sores。     

口腔扁平苔藓浸润T细胞表面白细胞介素2受体的表达及其意义

作者用免疫组织化学ＰＡＰ法检测了ＯＬＰ病损区浸润Ｔ细胞表面白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的情况。结果显示：ＯＬＰ病损区浸润Ｔ细胞表面有ＩＬ－２受体的表达（１５／２２），其表达程度与病程及类型无明显关系（Ｐ〉０．０５），作者认为ＩＬ－２Ｒ的ＯＬＰ病损内聚集及局部免疫反应的启动、调节可能有重要影响。     

Elevated production of salivary nitric oxide in oral mucosal diseases

Nitric oxide (NO) is known to play an important role in biological systems. In this study, we measured levels of NO in the saliva of 39 patients with oral mucosal diseases: 21 had oral lichen planus (OLP) and 18 had recurrent aphthous ulceration (RAU). NO was assayed using the Griess reagent, which measures nitrite (NO2), the byproduct of NO. NO2 was detected in all tested samples, and levels in the saliva of patients were significantly increased relative to those of healthy subjects. We also examined the effect of NO on fibroblasts, keratinocytes and NA cells (an epithelial cancer cell line) in vitro. S-nitroso-N-acetyl-DL-penicillamine (SNAP) and 3-morpholinosydnonimine (SIN-1) were used as NO donating reagents. The results revealed that cell viability was significantly reduced by NO derived from SNAP and SIN-1 in a dose-dependent manner. Although the role of salivary NO in normal physiology is as yet unknown, these findings suggest that excessive salivary NO plays a potential role in modifying oral mucosal diseases as a physiopathological regulator.     

Role of distinct CD4+ T helper subset in pathogenesis of oral lichen planus

Oral lichen planus (OLP) is one of the most common chronic inflammatory oral mucosal diseases with T‐cell‐mediated immune pathogenesis. In subepithelial and lamina propria of OLP local lesions, the presence of CD4⁺ T helper (CD4⁺ Th) cells appeared as the major lymphocytes. These CD4⁺ T lymphocytes can differentiate into distinct Th cell types such as Th1, Th2, Treg, Th17, Th22, Th9, and Tfh within the context of certain cytokines environment. Growing evidence indicated that Th1/Th2 imbalance may greatly participate into the cytokine network of OLP immunopathology. In addition, Th1/Th2 imbalance can be regulated by the Treg subset and also greatly influenced by the emerging novel CD4⁺ Th subset Th17. Furthermore, the presence of novel subsets Th22, Th9 and Tfh in OLP patients is yet to be clarified. All these Th subsets and their specific cytokines may play a critical role in determining the character, extent and duration of immune responses in OLP pathogenesis. Therefore, we review the roles of distinct CD4⁺ Th subsets and their signature cytokines in determining disease severity and susceptibility of OLP and also reveal the novel therapeutic strategies based on T lymphocytes subsets in OLP treatment.     

调节性T细胞和Th17细胞在OLP中的表达

目的：通过观察调节性T细胞（regulatory Tcells,Treg）和Thl7细胞（helper Tcells17,Th17）在口腔扁平苔藓（OLP）组织中的表达情况,探讨其在OLP发生发展过程中的变化。方法：应用免疫组织化学双标记技术检测35例OLP患者和19例对照组口腔黏膜组织中CD25＋Foxp3＋、CD4＋IL-17＋细胞的表达。结果：OLP组病损组织中有大量CD25＋Foxp3＋细胞浸润,较对照组显著增多,两者差异非常显著（P〈0．01）。CD4＋IL-17＋细胞在OLP组织中的表达较正常口腔黏膜组织有增加趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。经进一步统计学分析,CD25＋Foxp3＋细胞和CD4＋IL-17＋细胞数量改变在OLP组织中表达呈正相关（P〈0．05）。结论：Treg细胞的数量在OLP组织中增多,Thl7细胞可能协同Treg细胞,在OLP发生发展过程中发挥了一定的作用。     

常见口腔黏膜疾病患者行种植修复相关问题的研究进展

随着修复技术的发展及人们对生活质量要求的提高,伴有缺牙的口腔黏膜病患者行种植修复的需求越来越高.受口腔黏膜病困扰的缺牙患者行种植修复是否可行,效果如何目前并无定论,亦无针对口腔黏膜病患者行种植修复的相关治疗指南.本文就常见的口腔黏膜病(如口腔扁平苔藓、自身免疫性大疱性疾病和舍格伦综合征等)患者行种植修复的相关研究进展进...     

辅助性T17细胞在牙周炎小鼠中的免疫状态研究

目的 研究辅助性T（Th）17细胞在牙周炎小鼠中的免疫状态。方法 将7周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为牙周炎组和对照组,每组4只。牙周炎组采用口腔涂抹牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的方法建立牙周炎动物模型。对照组涂抹PBS液。在涂抹结束后的第4周取材,流式细胞仪检测CD4+维甲酸相关核孤儿受体（ROR）γτ+（Th17）细胞;酶联免疫吸附（ELISA）检测Th17细胞相关的细胞因子白细胞介素（IL）-17A的蛋白表达。结果 牙周炎小鼠牙龈组织、颈部淋巴结和外周血中CD4+ RORγτ+（Th17）细胞在总CD4+ T细胞中的比例和细胞数量显著高于对照组（P<0.01）。与对照组相比,牙周炎组IL-17A的表达增加（P<0.05）。结论 在牙周炎的发生发展中,Th17细胞介导的细胞免疫应答增强,牙龈组织、颈部淋巴结和外周血可能是Th17细胞介导免疫应答的主要场所。     

Smad 2/3、7蛋白在OLP CD8+T细胞中的表达

目的:观察Smad2/3、在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)CD8 T细胞中的表达。方法:采用免疫7 组化双标记法检测28例OLP组织中CD8 T细胞Smad2/3、7蛋白表达水平。设10例临床正常口腔黏膜(Normal oral mucosa,)为对照组。结果:NOMNOM组织中CD8 /Smad2/3、CD8 /Smad7双标记阳性细胞均为零。OLP组织中, CD8/Smad2、3和CD8 /Smad7双标记细胞的阳性率分别为1.020 1.24,5.524±5.074。结论:与NOM相比, OLP组织中CD8 T细胞Smad2、 3表达无明显升高。而Smad7阳性颗粒均位于细胞浆中,可能部分阻碍了TGF-β/Smad正向反馈通路,从而引起CD8 T细胞抑制不足,造成OLP慢性炎症的长期持续。