寻常型银屑病患者外周血CD4~+CD25~+及CD8~+CD25~+细胞的检测

目的研究进展期寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞的数量变化及其在银屑病免疫病理学发病机制中的作用。方法应用流式细胞术对进展期寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞进行检测。结果进展期寻常型银屑病外周血CD4+CD25+细胞及CD8+CD25+调节性T细胞数量与正常对照组相比,均显著降低(P<0.05,P<0.005),而CD4+CD25+/CD8+CD25+比值无显著性差异(P>0.05)。结论寻常型银屑病的发病与CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞的同步降低有关,与二者的比值无关。     

银屑病和白癜风患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测

目的: 检测CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在白癜风和银屑病患者外周血中的表达.方法: 用流式细胞术检测19例白癜风患者、18例银屑病患者及19名正常人外周血中CD4+CD25+Treg的表达水平.结果: 白癜风患者的CD4+CD25+Treg表达率为(1.056±0.662)%,低于正常对照组(2.022±0.98)%,差异有统计学意义(P＜0.05);银屑病患者的CD4+CD25+Treg为(1.761±1.396)%,与正常人无显著性差异(P＝0.177).结论: CD4+CD25+Treg细胞在白癜风患者外周血中数量明显减少.     

散发型白癜风患者外周血CD4~+/CD8~+T细胞比值及CD4~+CD25~+T细胞的检测

目的检测散发型白癜风患者外周血CD4+/CD8+T细胞比值及CD4+CD25+调节性T细胞水平,探讨其与散发型白癜风发病的关系。方法散发型白癜风患者29例,男13例,女16例。通过流式细胞仪对散发型白癜风患者外周血CD4+/CD8+T细胞比值及CD4+CD25+调节性T细胞水平进行检测,并与20例健康人相比较。结果与健康对照组相比,散发型白癜风患者外周血中CD4+/CD8+T细胞比值的差异无统计学意义(P0.05),而CD4+CD25+调节性T细胞水平明显减少,差异有统计学意义(P0.05),但在不同病程的患者中CD4+CD25+调节性T细胞数量的差异无统计学意义(P0.05)。结论散发型白癜风患者外周血中存在CD4+CD25+调节性T细胞水平下降,可能与散发型白癜风的发生发展有一定关系。     

寻常性银屑病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的功能研究

目的 测定银屑病患者外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞功能的改变,探讨调节性T细胞在其发病中的作用。方法 寻常性银屑病患者12例,银屑病面积和严重度指数（PASI）评分15 ～ 34.5分,均为慢性斑块状。健康对照组6例,为健康献血者。通过免疫磁珠体外分离外周血中的CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25- T细胞,纯度达90％以上。采用［3H］-脱氧胸腺嘧啶苷方法检测CD4+CD25+ T细胞的增殖和抑制功能,ELISA法测定细胞因子和RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达。结果 多克隆刺激后CD4+CD25+ T细胞无明显增殖,IL-2可逆转此无反应状态。健康对照组CD4+CD25+ T细胞对CD4＋CD25－ T细胞增殖的抑制率可达60％,而银屑病组抑制率仅为19.5％（P < 0.01）。银屑病患者CD4＋CD25－ T细胞单独培养及与CD4＋CD25+ T细胞共培养后,分泌IFN-γ水平分别为（179.66 ± 48.97） ng/L和（109.55 ± 48.04） ng/L,健康对照组分别为（87.36 ± 33.36） ng/L和（32.55 ± 15.69） ng/L,两组比较,P值均 < 0.05;对IFN-γ分泌的抑制率银屑病患者组为40％,健康对照组为63％（P < 0.05）;健康对照组CD4＋CD25+ T细胞和CD4＋CD25－ T细胞单独培养,TGF-β分泌分别为（3025 ± 769） ng/L和（2450 ± 431） ng/L（P < 0.05）。两组之间,无论单独培养或两种细胞共培养,IL-10、TGF-β的分泌差异均无统计学意义（P > 0.05）。CD4+CD25+ T细胞表达高水平的Foxp3, 银屑病患者和健康人对照调节性T细胞和效应T细胞的Foxp3表达相似。结论 银屑病患者外周血中调节性T细胞抑制功能的减弱导致效应T细胞增殖失控,可能参与了银屑病的发病。     

系统性红斑狼疮患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞及其细胞因子的改变

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)及其细胞因子的改变。方法用流式细胞仪直接免疫荧光法检测SLE患者外周血CD4+CD25+T细胞的百分率,FoxP3+分子表达,细胞因子IL-10,TGF-β1的表达。结果 SLE患者活动期组、稳定期组、健康对照组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分率分别是(3.57±1.45)%,(5.14±1.63)%,(6.03±1.96)%。活动期患者明显低于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。CD4+CD25+FoxP3+T细胞、CD4+CD25-FoxP3+T细胞占CD4+T细胞的百分率,活动期患者明显高于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD4+CD25+FoxP3+T细胞与疾病的活动指数(DAI)正相关(r=0.659,P<0.05);而CD4+CD25-FoxP3+T细胞与DAI无统计学相关性(r=0.184,P>0.05)。活动期患者CD4+CD25+IL-10+细胞明显高于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。然而CD4+CD25-TGF-β+细胞在活动期患者、稳定期患者和健康对照组之间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 SLE患者外周血中Tr细胞数量减少,分泌的IL-10增加,TGF-β减少,可能导致细胞免疫抑制功能减弱,自身免疫耐受平衡被打破,出现激活的自身反应性T细胞增多;此外,T淋巴细胞激活增多,还可辅助B细胞产生更多相关抗体,表现出多种临床症状。     

白塞病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的检测白塞病(BD)患者外周血Cd4+ CD25+调节性T细胞数量变化并分析其与疾病活动性的关系,探讨其临床意义.方法利用流式细胞仪和单克隆荧光抗体技术测定31例BD患者和27例健康对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+Cd4+细胞中的比例.结果活动期患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的百分率(6.43%±2.54%),低于健康对照者(8.17%±2.87%)(P＜0.05).非活动期患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+ CD4+细胞中的百分率(8.35%±2.31%),略高于健康对照者(P＞0.05).结论BD患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+CD4+细胞中的比例降低与疾病活动相关.通过检测外周血CD4+CD25+调节性T细胞在CD3+ CD4+细胞中的比例来评估机体免疫状态是一个可行的办法.     

斑秃患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4~+CD25~+调节T细胞的检测

目的检测斑秃(AA)患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞数量变化,分析AA的可能病因。方法利用流式细胞仪和单克隆荧光抗体技术,测定重度和局限性AA各40例患者外周血中T淋巴细胞亚群占T淋巴细胞的比率及CD4+CD25+Tr细胞在CD3+CD4+T淋巴细胞中的比率。结果重度AA患者外周血中CD4+CD25+Tr细胞占CD3+CD4+T细胞的比率为(1.43±0.74)%,显著低于正常对照组(2.25±0.97)%(P<0.01),重度AA患者的CD4+T占T淋巴细胞的比率为(31.42±6.66)%,略高于正常对照组(30.69±7.47)%(P>0.05),差异无显著性,而CD8+T占T淋巴细胞的比率为(25.86±4.35)%,明显高于正常对照组(22.42±6.10)%(P<0.01);局限性AA患者的三项指标分别为(2.14±0.87)%,(32.60±10.27)%和(21.59±5.24)%,与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论AA患者外周血中CD4+CD25+Tr明显低于正常对照组,CD8+T比率明显高于正常对照组,可能是导致重度AA发病的主要免疫机制。     

CD4+CD25+T细胞在特应性皮炎患儿外周血中的表达

目的:探讨CD4+CD25+T细胞在特应性皮炎发病中的可能作用.方法:用流式细胞仪对40例AD患儿和45例健康儿童外周血CD4+CD25+、CD4+、CD25琳巴细胞亚群等进行检测,并结合临床资料进行相关分析.结果:AD儿童组CD4+CD25+/CD4+与对照组相比明显升高(P=0.018,P＜0.05),婴幼儿组无明显差异(P=0.15,P＞0.05),两组CD4+、CD25+细胞相比、轻中重组两两相比、局限型与泛发型相比,其差异均无统计学意义(均大于0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在特应性皮炎的发病中起一定的作用,但对病情的判断无重要意义.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其细胞因子在寻常型银屑病患者的改变

目的探讨寻常型银屑病患者CD4~+CD25~+调节性T细胞及其细胞因子的改变。方法用流氏细胞仪直接免疫荧光法检测寻常型银屑病患者外周血CD4~+CD25~+T细胞的百分率、FoxP3+分子表达、细胞因子白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β的表达。结果寻常型银屑病患者CD4~+CD25~+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是4.55±1.11、5.26±1.38、6.03±1.96,CD4~+CD25~+FoxP3+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是3.85±0.89、4.31±1.26、4.95±1.37。进行期患者明显低于静止期患者和健康对照组(P0.05);而静止期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+IL-10+细胞、CD4~+CD25~+TGF-β+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是11.57±5.64、14.49±8.26、16.35±9.98;2.65±0.97、4.23±1.55、4.83±1.84;进行期患者明显低于静止期患者和健康对照组(P0.05);而静止期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+FoxP3+T细胞与PASI呈负相关(r=-0.659,P0.05);CD4~+CD25~+IL-10+T与PASI呈负相关(r=-0.537,P0.05);而CD4~+CD25~+TGF-β+T细胞与PASI直线相关(r=-0.184,P0.05)。结论 CD4~+CD25~+调节性T细胞的比例以及Foxp3的表达、IL-10、TGF-β的表达明显下降,导致调节性T细胞的抑制功能缺陷,进而影响银屑病病情的发展。可以推测,调节性T细胞的数量或功能异常,均将影响银屑病的发病。     

卵巢癌患者腹水及外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞含量及抑制功能的研究

目的:分析并探讨卵巢癌患者腹水及外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞含量及抑制功能。方法:选取2012年2月至2015年2月期间在我院和宁波市鄞州第二医院接受治疗的卵巢癌患者56例,采集腹水标本56例,外周血标本56例。使用流式细胞术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)的表达。采用1.5μmol/L的羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记CD4~+CD25-T细胞,观察CFSE标记效果,计算抑制率。结果:研究结果显示,56例腹水患者CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell为(28.34±13.27)%,56例外周血标本CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell为(14.56±4.36)%。腹水和外周血标本CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell含量有显著差异(P0.05)。腹水Treg抑制功能比外周血Treg强,经统计学检验,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:腹水Treg含量及抑制功能比外周血Treg强,提示卵巢癌腹腔内相对容易发生免疫逃逸,而Treg升高可能参与促进肿瘤复发。     

HIV/AIDS患者CD4~+ T细胞中CD25和CD8~+ T细胞中CD28的表达

目的探讨外周血CD4+ T细胞中CD25表达率和CD8+ T细胞中CD28表达率在HIV/AIDS患者发病中的作用。方法应用流式细胞仪荧光染色技术检测35例HIV/AIDS患者CD4+ T细胞中CD25表达和CD8+ T细胞中CD28的表达,以41名健康体检人员做对照。结果HIV/AIDS患者和健康对照组之间CD4+ T细胞中CD25表达率(27.51±4.23)%,(44.41±9.17)%,CD4+25+ T细胞占淋巴细胞的比例(2.00±1.42)%,(16.62±4.60)%,CD4+25- T细胞占淋巴细胞的比例(5.16±3.37)%,(21.03±6.19)%,CD8+ T细胞中CD28中的表达率(25.12±6.33)%,(44.24±8.61)%,CD8+28- T细胞占淋巴细胞的比例(36.85±8.98)%,(13.33±4.58)%的差异均有显著性(P<0.01),CD8+ 28+ T细胞占淋巴细胞的比例(12.31±4.14)%,(10.51±3.71)%差异无显著性(P>0.05)。结论HIV/AIDS患者CD25在CD4+ T细胞与CD28在CD8+ T细胞的表达率降低可能与HIV感染后引起的免疫缺陷有关,CD8+ CD28- T细胞的增加有助于促进HIV/AIDS患者的炎性反应和免疫激活。     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与IL-17在梅毒血清固定患者外周血中的表达及意义

目的:观察梅毒血清固定患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和IL-17的表达及意义。方法:采用三色流式细胞术及免疫酶联吸附法测定18例梅毒血清固定患者和18例对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和IL-17的表达水平。结果:梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的含量明显高于对照组(t=6.29,P<0.01);IL-17的含量与对照组比较差异无统计学意义(t=-1.68,P=0.102)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞表达水平增高造成的免疫抑制可能与梅毒血清固定有关;IL-17的表达水平可能与梅毒血清固定无关。     

Functional characterization of CD4+CD25+ regulatory T cells differentiated in vitro from bone marrow-derived haematopoietic cells of psoriasis patients with a family history of the disorder

BACKGROUND: In psoriasis CD4+CD25+ regulatory T cells are functionally deficient. The imbalance between regulatory and effector T-cell functions is important for inducing psoriasis. It is reasonable to speculate that the dysfunctional activity of CD4+CD25+ regulatory cells may originate partly from the abnormal haematopoietic cells determined mainly by genetic background. OBJECTIVES: To test the hypothesis that haematopoietic stem cells are responsible for dysfunctional CD4+CD25+ regulatory cells in psoriasis. METHODS: Bone marrow-derived CD34+ haematopoietic cells from patients with psoriasis (with a family history of psoriasis) and from normal controls were differentiated into T cells in vitro. CD4+CD25+ T cells were isolated by an immunomagnetic bead method, and proliferation activity and capacity for cytokine secretion were determined. Furthermore, the ability of CD4+CD25+ T cells to suppress the proliferative responses of allogeneous peripheral blood CD4+CD25- effector T cells was assessed in vitro. RESULTS: The differentiated CD4+CD25+ T cells of psoriatic origin showed similar characteristics to those of normal volunteers, including proliferation activity and secretion profile of the cytokines interleukin (IL)-2, IL-4, IL-8, IL-10 and interferon (IFN)-gamma. However, proliferation and secretion levels of the cytokines IL-2 and IL-10 for CD4+CD25+ cells of psoriatic CD34+ cell origin were significantly lower than those of normal controls in response to streptococcal superantigen (Strep-A). In particular, CD4+CD25+ T cells differentiated from psoriatic CD34+ cells were functionally insufficient to restrain effector T-cell proliferation. CONCLUSIONS: CD4+CD25+ T cells differentiated in vitro from haematopoietic cells of patients with psoriasis are impaired in regulatory function. The dysfunction of psoriatic CD4+CD25+ T cells may be due to inherent genetic programming passed down from bone marrow-derived haematopoietic cells.     

SLE患者外周血中CD4＋CD25＋CD127^low/-标记的调节性T细胞与临床表现和实验室指标相关性研究

目的：探讨CD4＋CD25＋CD127low/-标记的调节性T细胞（Treg）在系统性红斑狼疮发病机制电的作用。方法：用流式细胞仪检测45例系统性红斑狼疮（SLE）患者和45例年龄、性别相匹配的健康志愿者外周血CD4＋T细胞中Treg的百分比,同时分析SLE患者外周血中的CD4＋CD25＋CD127low/-标记的Treg与其临床表现、实验室指标的相关性。结果：SLE患者外周血CD4＋T细胞中Treg百分比与健康对照组比较差异无统计学意义。在SLE患者中,Treg的百分比与抗核小体抗体呈正相关（r=0．299,P=0．046）,有光敏感的SLE患者中Treg较无光敏感组增高（P=0．017）,余均无统计学差异。结论：SLE患者外周血中以CD4＋CD25＋CD127low/-标记的Treg中可能因含有部分无免疫抑制活性的效应性T细胞而特异性差,因此可能不适合用于临床免疫抑制治疗。     

白芍总苷联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮及对外周血CD4^+CD25^+T细胞表达水平的影响

目的探讨白芍总苷联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮(SLE)及对外周血CD4^+CD25^+T细胞表达水平的影响。方法研究对象为我院确诊的系统性红斑狼疮患者74例,按随机数字表法分为对照组和研究组,对照组37例予以环磷酰胺联合糖皮质激素治疗,研究组37例在对照组基础上予以白芍总苷治疗,测定所有患者治疗前后血清学指标,同时进行随访,记录不良反应及复发率状况。结果相对于治疗前,2组治疗后IgA、IgG、IgM,CD40^+,血清人可溶性血管细胞黏附因子(sVCAM)-1、白细胞介素(IL)-18,血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶(MMP)-3含量均降低,C3、C4,CD4^+CD25^+,MMP-9含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05);相对于对照组,研究组治疗后IgA、IgG、IgM,CD40^+,sVCAM-1、IL-18,VEGF,MMP-3含量较低,C3、C4,CD4^+CD25^+,MMP-9含量较高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组复发率18.92%(7/37)低于对照组复发率40.54%(15/37),2组间复发率对比,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,观察组总有效率为显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白芍总苷联合环磷酰胺治疗系统性红斑狼疮疗效确切,CD4^+CD25^+T细胞表达率提高,值得推广。     

斑秃患者外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞及T淋巴细胞亚群的测定

目的 研究斑秃患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量及CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群数量与斑秃疾病严重程度的关系。方法 对斑秃进行病情分组，以流式细胞仪检测17例重度、15例局限型斑秃患者和25例正常人对照者外周血中有功能活性的CD4+CD25+调节性T细胞（即CD4+CD25+ Foxp 3 T 细胞）在CD4+ T淋巴细胞中的比率，CD4+和CD8+占T淋巴细胞的比率。 结果 重度斑秃患者外周血中有功能活性的CD4+CD25+ Foxp 3 T细胞占CD4+ T细胞比率为0.54% ± 0.31%，显著低于正常人对照组（3.21% ± 0.76%）及局限型斑秃患者（2.71% ± 0.37%，P ＜ 0.001）；与正常人对照组比较，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。重度斑秃患者的CD4+占T淋巴细胞的比率为32.61% ± 3.48%，显著低于正常人对照组（43.0% ± 3.63%，P ＜ 0.001），而CD8+占T淋巴细胞的比率为40.96% ± 8.54%，显著高于正常人对照组（25.23% ± 2.14%，P ＜ 0.001）。局限型斑秃患者的此两项指标分别为41.25% ± 4.27%和26.6% ± 2.28%，与对照组差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。重度斑秃患者的CD8+占T淋巴细胞的比率与CD4+CD25+ Foxp 3调节性 T 细胞占CD4+ T细胞的比率有负相关关系（r ＝ －0.94，P ＜ 0.001）。结论 重度斑秃可能与外周血中CD4+CD25+ T细胞数量的减少和功能活性的降低有关。