母牛分支杆菌菌苗预防糖尿病并发肺结核的实验研究

目的　探讨母牛分支杆菌 (Mycobacteriumvaccae)菌苗对实验性糖尿病大鼠发生肺结核的预防作用。方法　大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型 1周后 ,随机分为 4组 :糖尿病结核组、母牛分支杆菌菌苗免疫组、卡介苗 (BCG)免疫组、联合免疫组 ,分别给予不同的处理 ,观察母牛分支杆菌菌苗的免疫预防作用。 1个月后自大鼠尾静脉注入标准结核分支杆菌H3 7Rv,H3 7Rv 感染 6周后剖杀大鼠。观察肺脏结核分支杆菌定量培养、结核病变指数、肺泡巨噬细胞吞噬的结核分支杆菌数 ,并作肺组织病理学分析。结果　母牛分支杆菌菌苗免疫组的病变指数、肺脏结核分支杆菌定量培养、肺泡巨噬细胞吞噬的结核分支杆菌计数分别为 2 5± 0 7、(4 1± 0 6 )× 10 4 cfu、2 6± 0 9;未免疫组分别为 3 3± 0 5、(9 9± 1 0 )× 10 4 cfu、7 2± 0 7。P值分别为 <0 0 5、<0 0 1、<0 0 1。组织病理学分析显示母牛分支杆菌菌苗和 (或 )BCG免疫组肺脏结核病变以增殖结节为主 ,无坏死结节 ;未免疫组肺脏则以淋巴细胞结节、坏死结节为主。提示母牛分支杆菌菌苗能减轻糖尿病大鼠的肺结核病变。结论　母牛分支杆菌菌苗对糖尿病大鼠发生肺结核有较好的预防作用     

母牛分支杆菌菌苗防治实验性尘肺大鼠并发结核病的实验研究

实验观察了母牛分支杆菌菌对实验性尘肺大鼠防治结核病的作用，以肺脏中活菌数量，肉眼病变和组织切片观察为指标，结果，母牛分支杆菌菌呈显著防尘肺大鼠肺结核的作用，异烟肼亦呈显著防治作用，且优于母牛分杆菌菌苗，母牛分杆菌菌苗并用异烟肼，其肺脏中活菌数量显著低于二者单用。     

母牛分枝杆菌菌苗预防老龄小鼠肺结核的动物实验研究

目的探讨母牛分枝杆菌菌苗对实验性老龄小鼠肺结核的免疫预防作用。方法老龄C57BL/6J小鼠30只,随机法分为3组:即无免疫保护组、母牛分枝杆菌菌苗预防组(微卡组)、卡介苗(BCG)预防组,分别给予生理盐水0.1ml、母牛分枝杆菌菌苗22.5μg、BCG 0.1 mg皮内注射。4周后将浓度为5×10⁵/ml的H37Rv标准菌株0.2ml经小鼠尾静脉给予攻毒。感染6周后处死小鼠,流式细胞仪测定小鼠外周血T淋巴细胞亚群、观察肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数、肺脏中活结核分枝杆菌定量培养及肺组织病理学分析。结果微卡组和卡介苗组的CD4T淋巴细胞、CD4/CD8比值分别为(48.81±3.10、3.84±0.37),(48.08±3.72、4.16±0.24)均较无免疫保护组(38.97±3.03、3.25±0.26)显著升高(p<0.01)。而微卡组CD4/CD8比值则低于卡介苗组(p<0.05)。微卡组和卡介苗组的肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数、肺脏中活结核分枝杆菌定量培养分别为(2.3±0.5(、1.06±0.25)×10⁵cfu),(2.7±0.6(、1.21±0.37)×10⁵cfu)无免疫保护组(5.4±0.9、(4.07±0.97)×10⁵cfu)减少(p<0.01)。组织病理学显示微卡组和卡介苗组肺脏结核病变以增殖性结核结节为主,无坏死结节;无免疫保护组肺脏则以淋巴细胞结节、坏死结节为主。结论母牛分枝杆菌菌苗可增强CD4T淋巴细胞活性,对实验性老龄小鼠肺结核有较好的预防作用。     

母牛分支杆菌制剂对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮水平的影响

一氧化氮（ＮＯ）在活化巨噬细胞抗某些肿瘤细胞和微生物上起重要作用。用不同剂量的母牛分支杆菌制剂免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，检测小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的水平，结果显示受免疫小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮水平明显高于未免疫小鼠（Ｐ＜０．０１－０．００１）。不同剂量母牛分支杆菌制剂免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，腹腔巨噬细胞产生的一氧化氮水平差别不显著（Ｐ＞０．０５）。因此认为，母牛分支杆菌制剂作为结核病免疫治疗剂其作用之一是活化巨噬细胞产生一氧化氮，从而达到杀菌的目的。     

母牛分支杆菌制剂通过一氧化氮进行免疫调节的作用

目的用母牛分支杆菌制剂作用于不同状态的动物，通过产生一氧化氮（ＮＯ）而达到不同的效果。方法在第一组实验中，用不同剂量的母牛分支杆菌制剂免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过检测ＮＯ－２间接反映ＮＯ的变化。在第二组实验中，用结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ感染豚鼠，１０天后给受染豚鼠注射母牛分支杆菌制剂。结果受免疫小鼠腹腔巨噬细胞产生ＮＯ－２水平明显高于未免疫小鼠（Ｐ＜０．０１）。不同剂量母牛分支杆菌制剂免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠间腹腔巨噬细胞产生ＮＯ－２水平差别不显著（Ｐ＞０．０５）。受染豚鼠注射母牛分支杆菌制剂后，ＮＯ－２产生水平明显低于单纯结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ感染组。结论母牛分支杆菌制剂不但能提高机体免疫水平，而且可以在结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ感染造成组织细胞破坏的条件下，调整免疫反应，进而减少组织损伤。     

老年女性血清白细胞介素6活性与骨密度的相关性

目的探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）在老年女性原发性骨质疏松症（ＯＰ）发病机理中的作用。方法采用ＩＬ－６依赖性细胞株Ｂ９．９增殖反应四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法检测９７例不同年龄组健康女性血清ＩＬ－６活性以及骨密度的水平。结果随年龄的增长，女性的ＩＬ－６活性逐渐升高（老年组、老年前期组分别为７．８±３．２及３．６±２．６Ｕ／ｍｌ，青中年组未达到２Ｕ／ｍｌ），骨密度值逐渐下降（３组分别为０．７３±０．１１、０．８９±０．１５及０．９９±０．１６ｇ／ｃｍ２），两者呈明显负相关（ｒ＝－０．７２４，Ｐ＜０．０５）；绝经后女性的ＩＬ－６活性较绝经前女性明显升高（分别为８．４±３．６及２．８±１．２Ｕ／ｍｌ，Ｐ＜０．０５），而骨密度值却明显降低（分别为０．６９±０．１８及１．０２±０．１６ｇ／ｃｍ２，Ｐ＜０．０５）。结论ＩＬ－６活性的升高与绝经后女性的骨丢失有关，ＩＬ－６可能参与了ＯＰ的发病机理。     

母牛分支杆菌制剂对小鼠腹腔巨噬细胞产生过氧化氢水平的影响

用不同剂量的母牛分支杆菌制剂免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，检测小鼠腹腔巨噬细胞产生过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的水平，结果显示受免疫小鼠腹腔巨噬细胞产生Ｈ２Ｏ２水平明显高于未免疫小鼠（Ｐ〈０．０１）。不同剂量母牛分支杆菌制剂免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，腹腔巨噬细胞产生的Ｈ２Ｏ２水平差异不显著（Ｐ〉０．１）。认为，母牛分支杆菌制剂作为结核病免疫治疗剂，其作用之一是活化巨噬细胞产生Ｈ２Ｏ２，从而达到杀菌目的。     

母牛分枝杆菌菌苗预防老龄小鼠肺结核的动物实验研究

目的 探讨母牛分枝杆菌菌苗对实验性老龄小鼠肺结核的免疫预防作用.方法 老龄C57BL/6J小鼠30只,随机法分为3组：即无免疫保护组、母牛分枝杆菌菌苗预防组（微卡组）、卡介苗（BCG）预防组,分别给予生理盐水0.1 ml、母牛分枝杆菌菌苗22.5 μg、BCG 0.1 mg皮内注射.4周后将浓度为5×105/ml的H37Rv标准菌株0.2 ml经小鼠尾静脉给予攻毒.感染6周后处死小鼠,流式细胞仪测定小鼠外周血T淋巴细胞亚群、观察肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数、肺脏中活结核分枝杆菌定量培养及肺组织病理学分析.结果 微卡组和卡介苗组的CD4T淋巴细胞、CD4/CD8比值分别为（48.81±3.10、3.84±0.37）,（48.08±3.72、4.16±0.24）均较无免疫保护组（38.97±3.03、3.25±0.26）显著升高（P＜0.01）.而微卡组CD4/CD8比值则低于卡介苗组（P＜0.05）.微卡组和卡介苗组的肺脏肺泡巨噬细胞内结核分枝杆菌数、肺脏中活结核分枝杆菌定量培养分别为（2.3±0.5、（1.06±0.25）×105cfu）,（2.7±0.6、（1.21±0.37）×105cfu）无免疫保护组（5.4±0.9、（4.07±0.97）×105cfu）减少（P＜0.01）.组织病理学显示微卡组和卡介苗组肺脏结核病变以增殖性结核结节为主,无坏死结节;无免疫保护组肺脏则以淋巴细胞结节、坏死结节为主.结论 母牛分枝杆菌菌苗可增强CD4T淋巴细胞活性,对实验性老龄小鼠肺结核有较好的预防作用.     

原发性肝癌患者血清甲状腺激素变化

目的观察原发性肝癌（ＰＨＣ）患者血清甲状腺激素的变化。方法应用放射免疫法（ＲＩＡ）检测２４例ＰＨＣ患者的血清Ｔ３，Ｔ４，ＴＳＨ和ｒＴ３，并以２４例健康成人作对照。结果ＰＨＣ组血清Ｔ３为１．６０±０．１４ｎｍｏｌ／Ｌ，而对照组为２．３７±０．０８ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．００１）。ＰＨＣ切除组血清Ｔ３，Ｔ４和ｒＴ３分别为１．９４±０．１６ｎｍｏｌ／Ｌ，１３４．３４±１１．４９ｎｍｏｌ／Ｌ和２．６１±０．３９；而ＰＣＨ未切除组分别为１．２２±０．１７ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０５），１０４．０１±７．２４ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０５）和１．３５±０．３６（Ｐ＜０．０５）。结论ＰＨＣ患者血清Ｔ３降低，晚期患者出现血清Ｔ４降低和Ｔ３／ｒＴ３比值降低。     

老年肺部感染患者白细胞介素2活性的变化

对５０例老年肺部感染患者白细胞介素２（ＩＬ－２）的活性进行了测定。结果表明：老年肺部感染患者ＩＬ－２活性（４．１±４．０Ｕ／ｍｌ）显著低于健康老年人（１３．０±１０．１Ｕ／ｍｌ）（Ｐ＜０．００１），亦明显低于非老年肺部感染患者（７．２±５．４Ｕ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０５）。肺部急性感染患者当感染控制后ＩＬ－２活性显著回升（１１．１±７．５Ｕ／ｍｌ）（Ｐ＜０．００１）。此外，病程＞４年的老年肺结核患者ＩＬ－２活性（２．８±２．０Ｕ／ｍｌ）低于病程＜４年的患者（７．７±５．７Ｕ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０５）；重症患者（２．９±２．８Ｕ／ｍｌ）低于轻症患者（８．５±５．４Ｕ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１）。提示肺部感染及肺结核的严重程度和病程均可影响老年患者的ＩＬ－２活性。ＩＬ－２可反映老年肺部感染患者的免疫状态。     

实验性糖尿病结核动物模型的建立

目的　建立糖尿病合并结核的动物模型。方法 腹腔一次性注射2%链脲佐菌素(60mg/kg体重)建立Wistar大鼠糖尿病模型,再经大鼠尾静脉注射结核分支杆菌H₃₇Rv0.01mg/0.4ml建立糖尿病结核模型。分别测定血糖值、肺脏病变指数和肺泡巨噬细胞吞噬的结核分支杆菌数,观察肺、肝、脾及胰腺组织的病理学改变。结果 实验组不仅血糖≥16.65mmol/L,胰岛受损,且肺、脾组织有明显结核病变。结论 实验表明我们建立的糖尿病结核动物模型是成功的。     

母牛分枝杆菌治疗初治肺结核合并尘肺的临床疗效观察

目的观察并评价注射用牛母分枝杆菌(微卡)治疗初治肺结核合并尘肺患者的临床疗效及作用。方法将91例肺结核合并尘肺患者归为对照组,将84例肺结核合并尘肺患者归为试验组。对照组及试验组均给予2H3R3Z3E3/4H3R3方案进行治疗,但试验组同时加入微卡治疗;我们收集治疗前后患者的临床症状改善、肺部病灶吸收,痰菌转阴的相关数据,评价两组间是否有统计学差异。结果试验组的疗效优于对照组,P<0.05。结论微卡在辅助治疗初治肺结核合并尘肺患者有疗效,能改善临床症状、促进肺部病灶吸收。     

Ag85B与MPT64 DNA疫苗联合免疫对鼠结核分枝杆菌感染的保护作用

目的　研究Ag85B与MPT6 4DNA疫苗联合免疫对鼠结核分枝杆菌感染的免疫保护效果。方法　C5 7BL/ 6小鼠 5 4只 ,采用随机数字表法随机分为 6组 ,分别用磷酸盐缓冲液 (PBS)、pcDNA3 1( )、卡介苗 (BCG)、pcDNA/Ag85B、pcDNA/MPT6 4、pcDNA/Ag85B pcDNA/MPT6 4经肌肉注射法免疫小鼠 ,0、3、6周各 1次 ,即PBS组、pcDNA3 1组、BCG组、pcDNA/Ag85B组、pcDNA/MPT6 4组及pcDNA/Ag85B pcDNA/MPT6 4组。BCG组只在 0周予皮内注射卡介苗 1次。末次免疫后第 5周用 1×10 6CFU的H3 7Rv经尾静脉实施攻击 ,攻击后 6周处死部分小鼠 ,用酶联免疫吸附测定 (ELISA)法检测血清总IgG、纯化蛋白衍生物 (PPD)特异性脾淋巴细胞干扰素γ(IFN γ)和白细胞介素 4 (IL 4 )分泌水平 ,四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定特异性脾淋巴细胞增殖 ;作脾、肺组织荷菌量和病理学检查 ,并观察小鼠存活时间。结果　PBS组肺和脾器官荷菌量分别为lg-1(7 85 4± 0 0 0 3)CFU/g和lg-1(7 190±0 0 16 )CFU/g、pcDNA3.1组分别为lg-1(7 70 0± 0 0 16 )CFU/g和lg-1(7 0 72± 0 0 6 8)CFU/g、BCG组分别为lg-1(6 4 4 9± 0 0 0 2 )CFU/g和lg-1(5 4 36± 0 0 4 2 )CFU/g、pcDNA/Ag85B组分别为lg-1(7 370± 0 0 0 2 )CFU/g和lg-1(6 4 2 96± 0 0 0 9)C     

微卡苗对PPD强阳性者体液免疫的影响及意义

目的 观察母牛分枝杆菌疫苗(即微卡苗)对机体体液免疫的影响?方法 测定PPD强阳性者注射微卡苗前?后12周,服异烟肼前?后血清IgG抗体OD值并进行对比分析?结果 注射微卡苗前?后12周血清抗体水平明显升高(P<0.01)阳性率由25%上升为80%?服药组?对照组抗体水平治疗前?后无差异?结论 注射微卡苗可提高机体的体液免疫水平,对于结核病的发生可能有预防效果,比服药更安全?易于控制?     

依赖利福平结核分枝杆菌的动物实验研究

目的通过对依赖利福平结核分枝杆菌的豚鼠结核病模型研究,探讨依赖利福平结核分枝杆菌是否存在。方法豚鼠按随机数字法分成依赖利福平结核分枝杆菌(1130株、1219株、b858株)组、耐利福平结核分枝杆菌(1290株)组和对豚鼠强毒力致病株(ATCC 35810株)组,每株组再设实验组和对照组。建立豚鼠1130株、1219株、b858株、1290株和 ATCC 35810株攻毒模型,实验组用利福平治疗,对照组用生理盐水治疗,各组分别于4、7、10周观察豚鼠脏器(脾、肺、肝)致病指数、脏器重量指数(WI)、脏器(脾、肺)结核分枝杆菌培养的荷菌量及组织病理学检查。结果 1130株、1219株、1290株和 b858株攻毒豚鼠7周时,致病指数值:实验组分别为68.7±13.8、60.0±13.5、70.0±5.8和23.8±18.9,对照组分别为76.2±18.9、40.0±16.8、63.8±10.3和22.5±15.5,差异均无统计学意义(t 值分别为0.64、1.85、0.35和0.10,P 均>0.05);脾 WI 值:实验组分别为0.229±0.048、0.256±0.067、0.324±0.054和0.199±0.029,对照组分别为0.278±0.025、0.216±0.076、0.368±0.033和0.213±0.038,差异均无统计学意义(t 值分别为1.75、0.79、1.41和0.57,P 均>0.05);脾荷菌量的对数值:实验组分别为(4.98±0.30)、(4.68±1.26)、(5.07±0.47)和(3.85±0.45)CFU,对照组分别为(4.90±1.03)、(4.79±0.45)、(5.08±0.55)和(4.23±0.95)CFU,差异均无统计学意义(t 值分别为0.11、0.15、0.03和0.73,P 均>0.05),实验组和对照组的病理检查结果相似。结论依赖利福平结核分枝杆菌豚鼠结核病模型研究结果与耐利福平结核分枝杆菌株豚鼠结核病模型近似,未见明显依赖利福平现象。     

母牛分枝杆菌菌苗凝胶肺内应用的安全性评价

目的 观察含母牛分枝杆菌菌苗(微卡)凝胶注入肺部后的吸收和安全性,并对注入的适宜剂量和不良反应进行分析,为可用于肺结核局部免疫治疗提供依据.方法 50只日本长耳兔随机分成5组,每组10只,气管插管至末梢支气管,注入相关制剂.第1组为对照组,注人生理盐水3 ml;第2组为单纯凝胶组,注入卡波姆凝胶3 ml;第3、4、5组...     

结核菌感染者微卡菌苗预防作用的研究

目的　观察、评价母牛分支杆菌菌苗(微卡苗)对结核菌感染健康人群PPD皮试强阳性者预防性治疗的效果。方法 对18～45岁PPD皮试强阳性健康人群分为微卡苗注射组、口服INH组和未处理对照组,观察对比治疗前、后的PPD皮试反应变化及发病情况。结果 治疗后较治疗前PPD反应:微卡苗组硬结平均直径显著减小(P<0.01),出现水泡、坏死者显著减少(P<0.01),INH预防组和未处理对照组二者变化较小(P>0.05)。观察1年微卡苗预防组无1人发病,INH预防组发病1例,未处理对照组发病4例。结论 微卡菌苗对结核菌感染者有较好的预防性治疗作用。     

母牛分支杆菌菌苗对结核病小鼠Th1/Th2 细胞动力学及诱导型一氧化氮合酶 表达影响的研究

目的　从分子病理学角度探讨母牛分支杆菌菌苗 (以下简称母牛菌苗 )的免疫调节机制。方法　将BALB/C小鼠随机分为 3组 :单纯攻毒组 (A)、母牛菌苗免疫攻毒组 (B)和正常对照组(N)。经尾静脉注射H37RV 建立结核病小鼠模型 ,母牛菌苗由腹腔注射。肉眼观察肺脏病变指数并采用免疫组化染色和常规HE染色 ,探讨IFN γ、IL 4、iNOS表达与肺脏组织损伤的类型和程度的关系。结果　结核病小鼠病变弥漫 ,伴有灶性干酪坏死 ,免疫组织化学染色结果显示在炎性渗出及肉芽肿内IFN γ阳性细胞随时间推移逐渐增多 ,至第 6周达高峰 (0 0 5 8± 0 0 10 ) ,与正常对照组比较有非常显著性差异 (0 0 0 5± 0 0 2 0 ,P <0 0 1)。此后为Tho平衡期 ,在肺损伤组织中IFN γ和IL 4阳性细胞基本相当。iNOS表达在急性期增多慢性期减少。母牛菌苗免疫攻毒组小鼠肺组织病变 ,以增殖结节、淋巴样结节为主 ,未见坏死病变 ,免疫反应表现为 :感染全过程中以Th1应答为主 ,即IFN γ阳性细胞逐渐增多 ,第 8周达高峰 (0 0 5 8± 0 0 10 ) ,IL 4阳性细胞一直维持在低水平 ,未出现Tho平衡期。iNOS表达一直维持在高水平。结论　母牛菌苗调节结核病小鼠免疫的可能机制为 :启动Th1应答 ,抑制Th2应答 ,激活iNOS活性 ,增强机体保护性免疫。