聚合酶链反应用于涂阴结核病早期诊断的评价

聚合酶链反应用于涂阴结核病早期诊断的评价张言斌谭耀驹谭守勇李一耕应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测各种临床标本中的结核分支杆菌具有快速、敏感、特异之优点。通过对２０８例新入院涂片检查阴性而ＰＣＲ技术检测结核分支杆菌特异性ＤＮＡ片段（ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ）...     

结核患者外周血单个核细胞结核分支杆菌DNA转阴时间探讨

结核患者外周血单个核细胞结核分支杆菌ＤＮＡ转阴时间探讨雷建平我们已证实结核患者外周血单个核细胞（ＰＭＣ）中存在结核分支杆菌（ＴＢ）ＤＮＡ［１］，并在此基础上探讨结核患者ＰＭＣ中ＴＢ－ＤＮＡ转阴时间。对象和方法：为１５例经细菌学、病理学、Ｘ线、免疫学结...     

结核分支杆菌利用福平药物敏感性的直接快速检测

探讨利用分子生物 学方法直接快速检测临床标本结核分支杆菌利福平（ＲＦＰ）药物敏感性的可行性。方法自行设计针对ｒｐｏＢ基因特异扩增的引物（扩增产物为１８３ｂｐ片段）,运用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染色法,检测４５株结核分支杆菌临床分离株,对其中部分菌株进行ｒｐｏＢ基因ＤＮＡ序列分析,运用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染色法对７０份结核病患痰标本进行直接快速检测,并与药敏试验结果做对照分     

AmpliSensor—聚合酶链反应定量检测肺结核患者外周血结 …

目的 探讨ＡｍｐｌｉＳｅｎｓｏｒ－聚合酶链反应定量检测外周血中结核分支杆菌ＤＮＡ在肺结核的应用价值。方法 采用ＱｌＡａｍｐ和ＡｃｕＰｕｒｅ法提取，制备全血中模板ＴＢ－ＤＮＡ，应用ＡｍｐｌｉＳｅｎｓｏｒ－ＰＣＲ定量检测，并与ＩＳ６１１０－单管巢式聚合酶链反应（ＳＮ－ＰＣＲ）作比较。结果２００例肺结核患者的血液标本中，两种方法测得结核分支杆菌ＤＮＡ的阳性率分别为６０．５％、６３．５％。８５例非结核肺病     

DNA指纹技术方法学的建立及其在结核菌株鉴定中的应用

目的探讨结核分支杆菌ＤＮＡ指纹技术的方法学及其在结核菌株水平鉴定中的应用。方法以结核分支杆菌染色体ＤＮＡ插入序列ＩＳ６ＩＩＯ为基础，根据不同来源的结核分支杆菌菌株ＤＮＡ有相异的ＩＳ６１１０拷贝数和分子量，应用增强化学发光标记技术对结核分支杆菌ＤＮＡ酶切产物进行杂交和检测。结果（１）不同来源的５０例结核病人临床分离株具有相异的ＤＮＡ指纹谱。（２）－病人肺部痰和膝关节脓培养阳性的结核菌株ＤＮＡ指纹图谱     

肺结核患者外周血白细胞中结核分支杆菌DNA检测及实验评价

目的探讨结核菌检测的新途径及其在肺结核诊断中的价值。方法应用聚合酶链反应技术对７６例肺结核患者（４０例同时留有疾标本），４２例非结核患者外周血标本进行了结核分支杆菌ＤＮＡ检测。结果利用聚合酶链反应检测外用血白细胞中结核菌ＤＮＡ对肺结核诊断的灵敏度为８６％，特异性为 ９０％，准确度达８７％；４０例外周血与疾标本的ＰＣＲ配对检测表明，血标本中的结核菌ＤＮＡ检出率明显高于痰标本。结论外周血白细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测用于肺结核诊断具有较高的敏感性和准确性，明显优于痰标本，可作为肺结核诊断优良可靠的指标。     

5种方法联合检测力阴肺结核诊断价值的研究

目的 探讨痰聚合酶链反应（ＰＣＲ）ＴＢ－ＤＮＡ检测、血清结核分支杆菌糖脂免疫球蛋白Ｇ（ＬＡＭＩｇＧ）、卡介菌免疫球蛋白Ｇ（ＰＰＤＩｇＧ）、结核特异性循环免疫复合物（ＳＣＩＣ）与结核菌素（ＰＰＤ）０．１Ｕ皮试联合检测对菌阴肺结核的诊断价值。方法 以上述５种检测方法用于力阳肺结核３１例、健康对照５３例、非结核肺疾病３０例、初治菌阴肺结核５４例同步检测。血清免疫学检测用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）。对     

单克隆抗体ELISA双抗体夹心法检测支气管肺泡灌洗液结核杆菌抗原

利用抗结核分支杆菌ＭｃＡｂ和抗结核分支杆菌ＨＲＰ－ＭｃＡｂ经双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，对１２８份支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬ）标本进行了检测。结果：痰菌阴性肺结核病人ＢＡＬ标本中结核分支杆菌抗原水平明显高于非结核肺部疾病组。对菌阴肺结核检出的敏感性为８４．１％，特异性为８２．４％，此法降低了利用多克隆抗体检测ＢＡＬ标本易出现的假阳性率。认为此法可作为结核病的辅助诊断方法。     

聚合酶链反应检测临床标本中结核分支杆菌DNA诊断结核病的评价

常规的结核病诊断方法,抗酸染色镜检（镜检）阴性率低,结核菌培养需时长,常给诊断和治疗造来困难。聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术自１９８５年发明以来,为结核病建立了一种快速、敏感、特异与简便的细菌检查方法,取得了令人鼓舞的效果。近年来,我们应用ＰＣＲ技术检测２７７０份临床标本结核分支杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）,对ＰＣＲ技术在结核病诊断中的作用进行评价。１材料和方法病例选择：（１）结核组：１２０３例,其中肺结核８８４例（包括慢性纤维空洞型肺结核２０例,浸润型肺结核６４５例,结核性胸膜炎１７２例,血行播散型…     

聚合酶链反应－冷单链构象多态性快速检测结核分支杆菌rpoB基因突变

目的评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法采用聚合酶链反应－冷单链构象多态性（ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ）方法对８７株结核分支杆菌临床分离株及有药敏结果的２２份相应肺结核患者痰标本进行分析。结果ＰＣＲ扩增ｒｐｏＢ基因的敏感性为１００ｐｇＤＮＡ及５０００个菌体，属于分支杆菌特异。所有分离菌的ｒｐｏＢ基因ＰＣＲ扩增均为阳性。采用套式ＰＣＲ可使扩增敏感性提高１００倍。与传统药敏试验方法相比，ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ对８７株结核分支杆菌临床分离菌利福平耐药性的检测敏感性和特异性分别为８９．６％及１００％。２２份涂阳培阳痰标本中套式ＰＣＲ扩增阳性的６份均为高度利福平耐药，其ＳＳＣＰ结果也与相应分离株的药物敏感性试验相符。结论ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变快速、简便、易行，适用于结核分支杆菌分离株利福平耐药性的快速测定。如进一步提高引物增特异性及敏感性，该技术可望用于临床标本直接检测     

多发耐药结核病的发生与控制(现代实用结核病学系统讲座第十三讲)

多发耐药结核病的发生与控制（现代实用结核病学系统讲座第十三讲）郭述良王宠林罗永艾本文多发耐药结核病（ｍｕｌｔｉｐｌｅ－ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｔｕ－ｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ，ＭＤＲ－ＴＢ）是指患者排出的结核分支杆菌至少已对异烟肼（ＩＮＨ）和利福平（ＲＦＰ...     

痰结核分支杆菌DNA扩增对肺结核疗效监测

为评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）痰结核分支杆菌ＤＮＡ（ＴＢＤＮＡ）扩增对肺结核疗效监测的实用价值，对３１例初治涂阳肺结核患者进行了２年的随访研究。对象随机选择初治涂阳肺结核３４例，男２４例，女１０例，年龄１９～５８岁。痰涂片抗酸染色和ＰＣＲ检查阳性，胸...     

基因扩增结合探针杂交和巢式聚合酶链反应检测痰结核分支杆菌的比较研究

基因扩增结合探针杂交和巢式聚合酶链反应检测痰结核分支杆菌的比较研究陈志敏汪天林张在珍应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移、光敏生物素标记ＤＮＡ探针杂交（ＳＢＨ）及巢式ＰＣＲ技术进行了结核分支杆菌的实验与临床应用比较研究。材料与方法（１）...     

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核分支杆菌

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核分支杆菌董德琼杨渝浩彭理年肖瑜申茂权凌建华采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的结核分支杆菌ＤＮＡ，并与涂片和培养法比较，以评价ＰＣＲ检测ＢＡＬＦ中结核分支杆菌在肺结核诊断中...     

KatG基因的分子生物学与结核分支杆菌异烟肼耐药

ＫａｔＧ基因的分子生物学与结核分支杆菌异烟肼耐药黄海南韩金祥结核分支杆菌（ＭＴＢ）耐药性的出现是困惑结核病治疗的主要原因，许多感染了耐药性ＭＴＢ的患者，因缺乏有效的治疗手段而使病情加重甚至死亡。异烟肼（ＩＮＨ）是抗结核治疗中最主要的药物之一，是多种药...     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分 …

探讨外周血单个核细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测在肺结核诊断中的价值。方法采用改良Ｔｒｉｔｏｎ－ｘ－１００法分离，制备单个核细胞中模板，ＤＮＡ，聚合酶链反应扩增结核分支杆菌２４０ｂｐ基因片段，同时分析了影响ＰＣＲ结果的有关因素。结果８９例肺结核患者的血标本，８４例肺结核患者的痰标本中，结核分支杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７３％和５７％；８４例肺结核患者外周血，痰标本配对检测总阳性率可达８７％。     

结核分支杆菌利福平耐药基因突变的研究

目的了解我国结核分支杆菌耐利福平（ＲＦＰ）分离株ｒｐｏＢ基因突变情况，建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法通过聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和ＰＣＲ－直接测序法（ＰＣＲ－ＤＳ）分析５０株结核分支杆菌临床分离株的ｒｐｏＢ基因。结果３株结核分支杆菌药物敏感株和２株非ＲＦＰ耐药株中，仅１株ｒｐｏＢＳＳＣＰ图谱异常的药物敏感株出现５３１位密码子ＴＣＧ→ＴＴＧ突变。４５株ＲＦＰ耐药株中，１０株ＳＳＣＰ和ＤＳ分析均未见ｒｐｏＢ突变，３５株ＳＳＣＰ和ＤＳ分析异常，其中１４株为５３１位密码子ＴＣＧ→ＴＴＧ或ＴＧＧ或ＴＡＣ突变，１４株为５２６位ＣＡＣ→ＴＡＣ或ＧＡＣ或ＣＣＣ或ＣＴＣ或ＧＴＣ突变，２株为５１６位ＧＡＣ→ＧＴＣ或ＴＡＣ突变，２株为５１６位和５２６位及５１５位和５１６位密码子双点突变，３株ｒｐｏＢ序列与结核分支杆菌不同。结论大多数结核分支杆菌耐ＲＦＰ是由于其ｒｐｏＢ基因突变所致，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＰＣＲ－ＤＳ方法可快速测定结核分支杆菌ＲＦＰ耐药基因型     

肺结核患者外周血白细胞中结核分支杆菌DNA检测及实验评价

目的 探讨结核菌检测的新途径及其在肺结核诊断中的价值。方法 应用聚合酶链反应技术对７６例肺结核患者（４０例同时留有痰标本），４２例非结核患者外周血标本进行了结核分支杆菌ＤＮＡ检测。结果 利用聚合酶链反应检测外周血白细胞中结核菌ＤＮＡ对肺结核诊断的灵敏度为８６％，特异性为９０％，准确度达８７％；４０例外周血与痰标本的ＰＣＲ配对检测表明，血标本中的结核菌ＤＮＡ检出率明显高于痰标本。结论 外周血细胞中结     

淋巴细胞部份结核分枝杆菌DNA检测的临床意义

目的 判别淋巴细胞部份ＴＢ－ＤＮＡ检测的临床意义。方法 将淋巴细胞分离液分离血细胞方法与ＰＣＲ方法结合，对１５０例活动性结核、５０例非结核、３０例结核病已于三年前治愈率、３０例健康对照者同步检测外周血淋巴细胞部分和血浆部份的ＴＢ－ＤＮＡ１２３ｂｐ和２４５ｂｐ；并观察３０例初治肺结核病人外周血淋巴细胞部份ＴＢ－ＤＮＡ转阴时间。整个研究采取双盲法。结果 确实有ＴＢ－ＤＮＡ存在于活动性肺结核病人淋巴细胞     

不同结核分支杆菌抗原对结核病的诊断价值

目的　研究不同结核分支杆菌单体蛋白抗原在结核病体液免疫诊断中的价值。方法以快速免疫色谱法（ＩＣＴＴＢ卡） 检测结核分支杆菌５ 种单体蛋白的抗原性，观察其在结核病诊断中的敏感性和特异性，并与ＰＰＤ 皮试及脂阿拉伯糖甘露糖（ＬＡＭ） 相比较。结果　ＩＣＴＴＢ 卡、ＬＡＭ 及ＰＰＤ皮试诊断结核病的敏感性分别为５５．９％ 、５２．６％ 、７５．０％ ，后者与前二者间差异均有显著意义（ Ｐ＜０ ．０５）；ＩＣＴＴＢ卡、ＬＡＭ、ＰＰＤ皮试诊断肺结核的特异性为８７ ．６％ 、６２．９％ 、６８．９％ ，前者与后二者间差异均有非常显著意义（ Ｐ＜ ０．０１）；ＩＣＴＴＢ卡诊断肺结核病的临床阳性预计值为８８ ．５％ ，临床阴性预计值为５３ ．８ ％ ；非结核病例中的ＩＣＴＴＢ阳性主要由抗原４、５ 阳性所致，如果去除抗原４ 、５，那么ＩＣＴＴＢ诊断结核病的特异性将提高到９８．９％ 。结论　血清结核分支杆菌单体蛋白抗原性的测定是肺结核病一项有用的辅助诊断手段。