沙丁胺醇在诱导培养人气管平滑肌细胞凋亡中的作用

目的 研究沙丁胺醇（商品名：舒喘灵）对于诱导培养人气管平滑肌细胞凋亡的作用。 方法 分离人气管平滑肌细胞并且在含有10％胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔（DMEM）培养基中培养,4－6代的细胞用于实验。细胞用沙丁胺醇或色满卡林（cromakalim)或8－溴－环磷酸腺苷（Br-Camp)培养24h或48h ,光镜和电镜观察形态学改变。琼脂糖电泳分析DNA碎片。链亲和素－过氧化物酶（SP）免疫组化染色监测p53、Bcl－2和Bax基因表达的改变。通过破碎DNA的原位末端标记技术（TUNEL）检测凋亡细胞的百分数。结果 （1）沙丁胺醇或8－Br-cAMP降低存活细胞的数目。在48h、300μmol/L的浓度,存活的细胞数量最低;（2）人气管平滑肌细胞用沙丁胺醇（100μmol/L、300μmol/L)孵化48h显示出凋亡的形态学特征（细胞皱缩、染色质浓聚）;（3）琼脂糖电泳显示,核酸DNA断裂片呈典型的梯状条带（大约180－200bp);（4）沙丁胺醇或8－Br-cAMP组p53或Bax基因表达显著高于对照组,但Bcl－2组基因表达低于对照组;（5）TUNEL显示,人气管平滑肌细胞的凋亡阳必用100、300μmol沙丁胺醇或100μmol8-Br-cAMP处理组与对照组比较差异有显著性（q分别为24．04、58．47、27．28,P均＜0．001）。但cromakalim组和先用普萘洛尔（商品名：心得安）后与沙丁胺醇组与对照组比较,差异无显著性（q分别为0．12、0．53;P分别为0．932、0．717）,不影响凋亡细胞的基本水平。结论 （1）在体外,沙丁胺醇以时间和浓度依赖的方式诱导人气管平滑肌细胞凋亡。（2）cAMP蛋白激酶A通路对于沙丁胺醇诱导的凋亡是必须的和充分的。     

缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖研究进展

缺氧时肺动脉平滑肌细胞的增殖在肺血管重构、缺氧性肺动脉高压的形成中有重要作用,但其作用机制仍不完全清楚。本文就缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其可能机制作一综述。     

缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖研究进展

缺氧时肺动脉平滑肌细胞的增殖在肺血管重构、缺氧性肺动脉高压的形成中有重要作用,但其作用机制仍不完全清楚。本文就缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其可能机制作一综述。     

凝血酶促血管平滑肌细胞增殖的信号转导研究进展

血管平滑肌细胞异常增殖在动脉粥样硬化和血管成形术后狭窄等血管增殖性疾病的发病机制中起着重要作用.近来研究表明,凝血酶具有生长激素样作用,参与了血管增殖性疾病的发展.本文就凝血酶及其受体的特性,促血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的信号转导作一综述.     

同型半胱氨酸促血管平滑肌细胞增殖的机制

目的　研究同型半胱氨酸 (HCY)对血管平滑肌细胞 (VSMC)细胞周期、细胞周期素和 P2 7蛋白表达的影响。方法　用流式细胞技术测定细胞周期、细胞周期素和 P2 7蛋白表达量。结果　 HCY促进 VSMC增殖和细胞 S期合成 ,同时使细胞周期素 D、E、A表达明显增加 ,P2 7蛋白表达下降。结论　 HCY促进 VSMC增殖和细胞 S期合成可能是通过增加细胞周期素 D、E、A的表达 ,抑制 VSMC中 P2 7蛋白的表达来实现的。     

凝血酶促血管平滑肌细胞增殖的信号转导研究进展

血管平滑肌细胞异常增殖在动脉粥样硬化和血管成形术后狭窄等血管增殖性疾病的发病机制中起着重要作用。近年来研究表明，凝血酶具有生长激素样作用，参与了血管增殖性疾病的发展，本文就凝血酶及其受体的特性，促血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的信号转号作一综述。     

银杏叶对血管平滑肌细胞增殖活性的影响

目的研究银杏叶对血管平滑肌细胞增殖活性的影响。方法对大鼠的胸主动脉平滑肌细胞采用组织块培养法,用四氧基偶氮硝基唑蓝（MTT）法测定细胞活性。结果与正常对照组比较,高糖（30mmol/L）在24h、48h、72h均有较强的促进大鼠VSMC增殖作用（P〈0.01）;与高糖组比较,不同剂量的EGB对过度增长的VSMC有抑制作用（P〈0.05）。结论EGB制剂可抑制高糖引起的VSMC过度增殖。     

同型半胱氨酸对平滑肌细胞增殖的影响及机制

目的 研究同型半胱氨酸(HCY)对平滑肌细胞增殖的影响及机制.方法利用~3H-TdR掺入、血小板衍化生长因子(PDGF)、血管紧张素Ⅱ(AugⅡ)生物活性检测,观察HCY对平滑肌细胞增殖、PDGF和AngⅡ的影响.结果HCY促进平滑肌细胞增殖,同时使平滑肌细胞分泌PDGF、AngⅡ增加,二者均有剂量效应关系.结论HCY促进血管平滑肌细胞增殖,可能是通过促使PDGF、AngⅡ分泌增加实现的.     

全反式维甲酸对培养的大鼠动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对培养的大鼠动脉平滑肌细胞(VSMCs)的影响。方法 血管平滑肌细胞采用组织贴块法培养。ATRA(2.5×10-6mol/L)分别作用于经PDGF—BB(10 ng/ml)和20％FCS刺激后的VSM—Cs,作用24h后分别行3H—TdR,3H—Leucine掺入实验测定。结果 ATRA明显抑制由PDGF—BB(10ng/ml)和20％FCS促进的VSMCs的DNA和蛋白质合成。结论ATRA具有抑制VSMCs增殖的作用。     

葛根素抑制凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖

目的　观察葛根素对T诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法　建立凝血酶(T)诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖模型,以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定的方法观察T及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。结果　T对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在2 4小时末达峰,且T浓度在0 . 1U/L～1 . 0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制T诱导的细胞增殖与DNA合成。结论　葛根素能抑制T诱导的VSMC增殖。     

中药调控高血压血管平滑肌细胞增殖的研究进展

血管平滑肌细胞作为血管中膜的主要成分,其异常增殖是高血压血管重构以及血管增殖性疾病的主要病理基础。中药治疗高血压的临床效果肯定,目前对中药治疗高血压的机制等相关研究越来越深入。本文就近年来中药调控高血压血管平滑肌细胞增殖的研究进展做一综述。     

水蛭素对培养的兔动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：动脉的中膜平滑肌细胞（ＳＭＣ）向内膜移行和增殖是经皮腔内冠状动脉成形术（ＰＴＣＡ）后再狭窄的主要原因。为探讨水蛭素预防再狭窄的可能性，本文观察了水蛭素对培养的兔胸主动脉ＳＭＣ增殖的影响。方法：用４只兔的胸主动脉ＳＭＣ传代培养（５～６代），将水蛭素（１～２５μｇ／ｍｌ）加入ＳＭＣ培养液中，于１、２、３天后进行细胞计数并于６小时后测定氚－胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）参入的放射性强度每分钟次数（ｃｐｍ）值。求出各组均数及标准差，采用方差分析及ｑ检验进行统计分析。结果：各浓度组的水蛭素均抑制ＳＭＣ的增殖及对３Ｈ－ＴｄＲ的摄取，且呈剂量依赖性，与对照组相比Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１。结论：水蛭素抑制培养的兔动脉ＳＭＣ的增殖，这为水蛭素可能用于预防以ＳＭＣ增殖为基础的再狭窄提供实验依据。     

银杏叶提取物对活性氧诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察银杏叶提取物（EGB）对活性氧诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法用含100 g/L小牛血清的DMEM体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,用不同浓度的过氧化氢（H2O2）作为外源性活性氧刺激VSMC增殖,应用3H-胸腺嘧啶脱氧核苷（3H-TdR）掺入和细胞周期时相测定等方法观察给予不同浓度的EGB预处理后,EGB对H2O2作用后VSMC的增殖的影响。结果H2O2对VSMC的增殖活性具有剂量依赖性促进作用,EGB可以抑制H2O2诱导的VSMC增殖,且具有剂量依赖性。结论EGB对于动脉粥样硬化形成及经皮腔内冠状动脉介入治疗后再狭窄的防治可能具有应用前景。     

不同强度恒磁场对人脐动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 :探讨不同强度恒磁场对离体人脐动脉平滑肌细胞 （VSMC）增殖的影响。方法 :用含 10 0 ml· L- 1 新生牛血清及成纤维生长因子 （5μg· L- 1 ）和表皮生长因子 （10μg· L- 1 ）的 DMEM的培养液 ,培养人 VSMC至 3～ 10代 ,将培养液与 VSMC的混悬液 （细胞浓度为 1× 10 5· m L- 1 ） 10 0μL加入 96孔培养板中培养 ,对照组持续培养 72h,实验组 2 4h后将培养板置于 0 .5～ 6 0 m T的恒磁场中继续培养 48h,用 MTT法和 3 H- Td R掺入法检测两组VSMC的增殖数量 （A值和核素闪烁计数值 ）。结果 :在恒磁场的作用下 ,0 .5 ,1,2 ,5 m T组人脐 VSMC的增殖数量显著低于对照组 （P<0 .0 5 ）。 10 ,30 ,6 0 m T组人脐 VSMC的增殖数量显著高于对照组 （P<0 .0 1）。结论 :恒磁场强度为 0 .5 ,1,2 ,5 m T时抑制 VSMC增殖 ,10 ,30 ,6 0 m T时促进 VSMC增殖。     

血管平滑肌细胞增殖及其调控

血管壁受损是导致血管平滑肌细胞增殖的起始原因,损伤刺激通过细胞内的信号转导可引起许多原瘤基因的表达和细胞的因子生成,从而使血管平滑肌细胞增殖和凋亡的平衡被打破,导致血管平滑肌细胞过分增殖,通过干预细胞内信号转导通路或／和调节相关基因的表达以阻断血管平滑肌细胞增殖可望成为治疗此类心血管疾病的有效途径。     

霉酚酸对静态和刺激状态下平滑肌细胞增殖和胶原Ⅰ产物的作用研究

目的建立稳定的人脐带血管内皮细胞(ECs)和平滑肌细胞(SMCs)模型研究霉酚酸(MPA)对SMCs增殖和胶原Ⅰ产物的作用。方法以北京大学航天临床医学院2002-09～2003-09从脐带静脉、动脉分别获取和培养ECs和SMCs;用无血浆DMEM细胞培养液制备含或不含MPA(质量浓度分别:0、0.31、1.25、2.50、5.00、10.00μg·mL-1)的ECs调节的细胞培养液;用细胞与3H-胸腺嘧啶结合闪烁记数法测定SMCs增殖;用酶联免疫法测定SMCs释放到培养液中的胶原之量。结果与对照组相比,在ECs调节的培养液(不含MPA)作用下,实验组SMCs增殖显著提高到(170.6±13.7)%(P<0.01),胶原Ⅰ产物显著增加到(128.0±7.7)%(P<0.01);对非刺激状态SMCs,MPA只在高质量浓度(10μg·mL-1)时直接显著地抑制SMCs增殖(P<0.05),抑制率(29.9±3.5)%。在所有实验浓度,MPA呈剂量依赖地显著抑制SMCs胶原Ⅰ产物,最大抑制率(81.0±4.8)%;对在ECs调节的培养液作用下,无论是在ECs调节的培养液制备过程中加入MPA作用于ECs,还是在ECs调节的培养液制备后加MPA到培养液,MPA都明显地抑制SMCs增殖和胶原Ⅰ产物。结论MPA能够一定程度地抑制人血管SMCs增殖,同时能很好地抑制SMCs胶原Ⅰ产物。     

IGF—I调节血管平滑肌细胞增殖的研究进展

介绍ＩＧＦ－Ｉ促进血管平滑肌细胞增殖作用以及其它血管活性物质对ＩＧＦ－Ｉ这一生物效应的调节。同时也对ＩＧＦ－Ｉ受体后分子机制进行探讨。     

活性氧不参与二氯化钴诱导的人肺动脉平滑肌细胞增殖

目的 探讨活性氧是否参与二氯化钴诱导的人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)过度增殖.方法 用化学性缺氧模拟剂二氯化钴处理HPASMC,建立缺氧性肺动脉高压血管重塑的细胞模型 用外源性活性氧供体过氧化氢处理HPASMC,观察活性氧对细胞增殖的影响;活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理HPASMC,观察其对二氯化钴或过氧化氢诱导的细胞增殖的改善作用;应用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖,Western blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白的表达,双氯荧光素染色和荧光照相术检测细胞内活性氧的含量.结果 在25 ～ 50μmol/L浓度范围内,二氯化钴处理24 h可诱导HPASMC增殖,50 μmol/L二氯化钴处理24 h可使细胞内HIF-1α的水平明显增加;与二氯化钴的作用类似,过氧化氢在12 ～ 25μmol/L浓度范围内处理24 h也可引起细胞增殖,但不改变HIF-1α的水平;在二氯化钴或过氧化氢处理前,用不同浓度的NAC预处理,在1 500 μmol/L浓度时,NAC预处理可明显抑制过氧化氢诱导的HPASMC过度增殖(P＜0.05),而对二氯化钴诱导的细胞增殖则无明显影响(P＞0.05);另外,50 μmol/L二氯化钴处理6～24 h对细胞内活性氧的含量无明显影响(P＞0.05).结论 化学性缺氧可诱导HPASMC过度增殖,其机制可能不依赖于活性氧.