PCR—SSCP方法用于痰标本中结核分支杆菌rpoB基因突变检测

本文用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法直接检测痰标本中结核分支杆菌ｒｐｏ基在变，评价此方法用于结核分支杆菌利福平耐性试验的意义，以期建立一种直接检测分支杆菌耐利福平的快速方法。本文用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法分析了３０例结核病人和２０例非结核性肺部疾病病人痰标本。３０份肺结核病人的痰用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测痰中结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变：２１份痰ＰＣＲ扩增阳性，其中１３份ＳＳＣＰ图谱与参考株Ｈ３７ＲｖＳＳＣＰ图谱有     

结核性腹膜炎的实验室诊断

目的评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对结核性腹膜炎的诊断价值。方法用ＰＣＲ结合地高辛标记核酸探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测４２例结核性腹水中结核分支杆菌ＤＮＡ，并与常规细菌学检测及ＥＬＩＳＡ对比。引物来自结核分支杆菌特异重复插入序列ＩＳ６１１０。特异性通过杂交及限制性内切酶ＳａｌⅠ酶切证实。同时比较了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测与凝胶电泳检测的敏感性。结果ＰＣＲ的敏感性为６９％，ＥＬＩＳＡ为７１％，培养为９％，涂片镜检均为阴性。并发现杂交较凝胶电泳检测更敏感。结论ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对结核性腹膜炎有较高的诊断价值，但前者更具有特异性。将Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术与ＰＣＲ技术结合，可进一步提高检测的敏感性和特异性。     

江西上高钩端螺旋体病主要传染源（耕牛）和主要流行菌群（七…

本研究分离培养了４４３份病人及疑似病人血清标本，钩端螺旋体阳性率１８．５％，其中２０６份标本ＰＣＲ产物凝胶电泳检测阳性率１４．６％，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性率２０．９％．６３头猪肾钩体培养阳性率４．８％，１２３只鼠肾钩体培养阳性率４．０％。２２５份牛尿钩体培养阳性率６．２％，ＰＣＲ产物凝胶电泳阳性经１４．０％，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性率１５．８％。     

结核分支杆菌DNA的单管巢式聚合酶链反应检测

目的探讨单管巢式聚合酶链反应（ＳＮＰＣＲ）检测石蜡包埋组织结核分支杆菌ＤＮＡ的特异性和敏感性。方法应用普通ＰＣＲ（ＧＰＣＲ）、双管巢式ＰＣＲ（ＤＮＰＣＲ）和ＳＮＰＣＲ对结核分支杆菌ＢＣＧ和３０例结核性淋巴结炎石蜡包埋组织进行结核分支杆菌复合群ＩＳ６１１０特异插入序列片段ＤＮＡ检测。结果ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测ＢＣＧＤＮＡ均于１５ｆｇ以上呈现阳性结果，其敏感性明显优于ＧＰＣＲ（４８０ｆｇ）。ＧＰＣＲ、ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测３０例结核性淋巴结炎阳性率分别为４３％、１００％和１００％，抗酸染色阳性率（１０％）与３种ＰＣＲ法相比差异有非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＧＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ相比差异亦具非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＳＮＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ相同。结论巢式ＰＣＲ检测淋巴结石蜡包埋组织结核分支杆菌的敏感性显著高于ＧＰＣＲ，其中ＳＮＰＣＲ具有与ＤＮＰＣＲ相同的特异性和敏感性，并具有更大的实用价值。     

聚合酶链反应－单链构象多态性用于耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变的研究

目的研究结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变及其与利福平（ＲＦＰ）耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法分析了４０株结核分支杆菌临床分离株。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法由ＰＣＲ扩增和扩增产物ＤＮＡ单链多态性分析组成。结果两对引物ＰＣＲ扩增产物分别为４１１和２５８ｂｐ，其敏感性分别为５ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ和１ｐｇ／μｌ、５００个菌／ｍｌ；均为属特异性。４０株结核分支杆菌临床分离株２５８ｂｐ扩增片段ＳＳＣＰ图谱的特点：以参考菌株结核分支杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照，１０株敏感株均无区别；单耐ＲＦＰ或包括ＲＦＰ多种抗结核药３０株，除３株外，其余２７株ＳＳＣＰ图谱有明显的区别；检测阳性率为９０％，特异性为１００％。结论ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可检测出耐ＲＦＰ结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变；该基因是ＲＦＰ的药物靶编码基因，它的突变与ＲＦＰ耐药性有密切关系，这有助于结核分支杆菌耐药性的快速检测和研究     

聚合酶链反应－冷单链构象多态性快速检测结核分支杆菌rpoB基因突变

目的评估ｒｐｏＢ基因突变检测在结核分支杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法采用聚合酶链反应－冷单链构象多态性（ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ）方法对８７株结核分支杆菌临床分离株及有药敏结果的２２份相应肺结核患者痰标本进行分析。结果ＰＣＲ扩增ｒｐｏＢ基因的敏感性为１００ｐｇＤＮＡ及５０００个菌体，属于分支杆菌特异。所有分离菌的ｒｐｏＢ基因ＰＣＲ扩增均为阳性。采用套式ＰＣＲ可使扩增敏感性提高１００倍。与传统药敏试验方法相比，ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ对８７株结核分支杆菌临床分离菌利福平耐药性的检测敏感性和特异性分别为８９．６％及１００％。２２份涂阳培阳痰标本中套式ＰＣＲ扩增阳性的６份均为高度利福平耐药，其ＳＳＣＰ结果也与相应分离株的药物敏感性试验相符。结论ＰＣＲ－冷ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变快速、简便、易行，适用于结核分支杆菌分离株利福平耐药性的快速测定。如进一步提高引物增特异性及敏感性，该技术可望用于临床标本直接检测     

三种快速检测结核分支杆菌方法的评价

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术、单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＴＢ１５－Ｃ＿３经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及抗酸染色等３种方法，对１０种抗酸杆菌及２种非分支杆菌进行检测。ＰＣＲ仅对结核分支杆菌复合体扩增出２４５ｂｐ特异性条带，ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测除人型结核分支杆菌外，还与ＢＣＧ、鸟型及瘰疬分支杆菌反应阳性，抗酸染色则所有分支杆菌均呈阳性。用ＰＣＲ、ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ及抗酸染色检测了１２４份临床标本，ＰＣＲ的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率（Ｐ＜０．０５），ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率明显高于抗酸染色涂片和ＰＣＲ的阳性率（Ｐ＜０．０１）。认为三种方法在使用中各自有其优点，不可偏废。     

聚合酶链反应和DNA探针联合检测临床标本中结核杆菌的研究

目的为提高聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测未培养临床标本中结核杆菌的敏感性和特异性，方法，首先通过琼脂糖凝胶电泳检测ＰＣＲ扩增产物，然后用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ法转移到至膜上，与地高辛标记的人型结核杆菌ＤＮＡ探针杂交。结果ＰＣＲ电泳检测的灵敏度为１ｐｇ而ＤＮＡ探针检测将灵敏度提高到１００ｆｇ。２４种受试菌株中，只有结核分支杆菌复合体和蟾分杆菌有２４５ｂｐ扩增带，其中牛型结核分支杆菌与１８８ｂｐ探针不杂交，对２     

基因扩增结合探针杂交和巢式聚合酶链反应检测痰结核分支杆菌的比较研究

基因扩增结合探针杂交和巢式聚合酶链反应检测痰结核分支杆菌的比较研究陈志敏汪天林张在珍应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移、光敏生物素标记ＤＮＡ探针杂交（ＳＢＨ）及巢式ＰＣＲ技术进行了结核分支杆菌的实验与临床应用比较研究。材料与方法（１）...     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分支杆菌DNA的临床价值

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术配对检测９２例肺结核患者外周血单个核细胞内和痰标本中结核分支杆菌ＤＮＡ，同时检测３０例非结核患者外周血。结果显示：外周血和痰标本ＰＣＲ阳性率分别为７１７％和５５４％，前者明显高于后者（Ｐ＜００５）；各型肺结核外周血和痰标本ＰＣＲ阳性率不尽相同；３０例非结核患者外周血ＰＣＲ阳性３例（１０％）。认为ＰＣＲ检测肺结核患者外周血单个核细胞内结核分支杆菌ＤＮＡ是一种快速、敏感的方法，可用于肺结核早期诊断与鉴别诊断     

上海市某结核病定点医院结核病房空气样本中分枝杆菌的检测

目的 了解上海市某结核病定点医院结核病房空气中的分枝杆菌污染情况及潜在传染性。 方法 采用液体撞击式微生物气溶胶采样器（FA-1型撞击式空气微生物采样器）采集该医院22间结核病房中空气样本134份,均在痰涂片抗酸杆菌阳性（＋~＋＋＋＋）患者床边采集。每间病房均有4张床位,每间病房的空间布局相同,但患者组成情况不完全相同。经氢氧化钠-N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC-NaOH)前处理,分别采用罗氏培养、BacT/ALERT 3D全自动快速培养进行分枝杆菌分离培养,并对培养阳性样本采用DNA序列分析的方法进行菌型鉴定。两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率的比较采用配对卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 134份结核病房涂阳患者床边采集到的空气样本中有3份分枝杆菌分离培养阳性,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌。BacT/ALERT 3D培养阳性3份,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染2份,阳性检出率为2.3%（3/132）。罗氏培养阳性2份,经DNA序列分析证实分别为胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染1份,阳性检出率为1.5%(2/133)。经配对卡方检验,两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率差异无统计学意义（χ²=0.00,P>0.05）。 结论 该医院结核病房痰涂片抗酸杆菌阳性患者床边所采集的空气样本中可分离到分枝杆菌,虽然目前尚无法判断这些菌株是否由于就诊患者传播所致,但是定期监测医院内空气质量是预防与控制医院内感染的一项重要措施。     

Comparative study of PCR, smear examination and culture for diagnosis of cutaneous tuberculosis

Diagnosis of tuberculosis (TB), especially cutaneous TB by conventional laboratory method is unreliable and time consuming. We assessed the utility of Polymerase Chain Reaction (PCR) test vis a vis other laboratory tests in 37 clinical samples of skin biopsy from equal number of patients with different variants of cutaneous TB. The PCR test amplifying 165bp region of 65kDa antigen coding gene specific for M. tuberculosis was performed on skin biopsy samples obtained from cases with a strong clinical evidence of cutaneous TB. The samples were also subjected to other laboratory tests e.g. smear examination, conventional (LJ based culture) and rapid BACTEC culture and histopathological examination for mycobacteria. Significant difference (p<0.05) was observed in the sensitivity of PCR test vis-a-vis other tests e.g. smear examination, LJ and BACTEC culture. PCR test showed a higher sensitivity than histopathological examination but the difference was not found to be statistically significant (p>0.05). PCR test showed the maximum positivity of 79.4% followed by histopathology (73.5%), BACTEC culture (47.5%), LJ media culture (29.4%) and smear examination (5.8%). The sensitivity and specificity of PCR test employing culture as the "gold standard" were 95.2% and 100%. The mean time taken for a positive result in different tests were less than 24 hours for smear examination, 1 day for PCR test, 23.42 days for BACTEC culture and 38.02 days for LJ culture. These results show that PCR amplification of 165bp region of 65kDa antigen coding gene of M. tuberculosis is a rapid and sensitive test for diagnosis of cutaneous TB using skin biopsy samples.     

Comparative performance of PCR-based assay versus microscopy and culture for the direct detection of Mycobacterium tuberculosis in clinical respiratory specimens in Lebanon.

SETTING: American University of Beirut Medical Center, Lebanon. OBJECTIVE: To assess the performance of a polymerase chain reaction (PCR) using primers that flank 542 bp within IS6110 in Mycobacterium tuberculosis (TB) vs. microscopy and BACTEC culture, in the diagnosis of tuberculosis. DESIGN: A total of 82 clinical respiratory pulmonary specimens and 73 samples from BACTEC vials were tested by the three methods. RESULTS: Of 24 smear-positive culture-positive (SP-CP) and 11 smear-negative culture-positive (SN-CP) TB specimens, PCR detected 83% and 64%, respectively. Among 17 specimens yielding mycobacteria other than tuberculosis (MOTT), the PCR was positive in 33% SP-CP and 14% SN-CP specimens. Among the 73 BACTEC vials, PCR was positive in 36 of 38 (95%) yielding culture-positive TB, and in one of 20 (5%) yielding culture positive MOTT. None of the 30 smear-negative culture-negative (SN-CN) clinical specimens and 15 of the CN vials were positive by PCR. The overall sensitivity of PCR was 77% and 95% for TB detection in respiratory specimens and BACTEC vials, respectively, and the specificity was 94% in both. CONCLUSIONS: Because a substantial number of TB cases are missed, especially in SN-CP specimens, a PCR-based assay utilizing these primers cannot be used reliably, alone, in clinical laboratory diagnosis of mycobacterial respiratory infections.     

骨关节结核各类标本进行结核分枝杆菌培养与PCR检测的阳性率结果分析

目的 比较骨关节结核病灶中脓液、干酪、肉芽及死骨组织的结核分枝杆菌培养阳性率,及结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960（简称“MGIT 960”）培养、改良罗氏培养基培养、PCR检测的联合阳性率.方法 2011年6月至2012年5月首都医科大学附属北京胸科医院收治的经病理明确诊断为骨关节结核的患者50例,通过手术获取病灶中的脓液（50份）、干酪（42份）、肉芽（48份）及死骨组织标本（43份）,分别进行结核分枝杆菌MGIT 960培养及改良罗氏培养基培养,比较4种组织标本的培养阳性率,计算2种培养方法的联合阳性率;对脓液标本单独通过PCR方法进行了阳性率检测;计算脓液标本3种方法的联合阳性率.结果 4种标本MGIT 960培养的阳性率依次为：死骨组织（41.9％,18/43）＞脓液（40.0％,20/50）＞肉芽（33.3％,16/48）=干酪（33.3 ％,14/42）;4种标本改良罗氏培养阳性率依次为：肉芽（20.8％,10/48）＞脓液（20.0％,10/50）＞死骨组织（16.3 ％,7/43）＞干酪（14.3％,6/42）;脓液的PCR检测阳性率为48.0％（24/50）.MGIT 960和改良罗氏培养2种结核分枝杆菌培养方法的联合阳性率为50.0％（25/50）,而PCR检测、MGIT960和改良罗氏培养3种方法的联合阳性率为68.0（34/50）.结论 骨关节结核患者,应尽可能选择多种标本以提高培养阳性率.MGIT 960培养可以作为首选的细菌学诊断方法,但如果再联合使用改良罗氏培养和PCR扩增技术,能够进一步提高检出阳性率.     

Detection of M. tuberculosis in clinical samples of diversified nature by IS6110 based PCR

Performance of the polymerase chain reaction technique based on IS6110 sequence was evaluated in clinical samples obtained from pulmonary and extrapulmonary cases of tuberculosis. One hundred and seventy two samples were processed for detection of M. tuberculosis by ZN stained smear examination, LJ medium culture, BACTEC radiometric culture and PCR tests amplifying 123bp region of IS6110 sequence. A significant difference was seen in the sensitivities of different tests, the figures being 83% for PCR test, 35.2% for smear examination, 47.16% for LJ culture and 53.45% for BACTEC culture (p < 0.05). However, no significant difference was found as far as specificity was concerned. PCR test sensitivity in. pulmonary and extrapulmonary clinical samples were 90.14% and 77.27% respectively and found to be significantly higher (p < 0.05) when compared with those of other tests. The mean detection time for M. tuberculosis was 24.03 days by LJ medium culture, 12.89 days by BACTEC culture and less than one day by PCR test. PCR based on IS6100 sequence is highly sensitive method for the early diagnosis of pulmonary and extrapulmonary tuberculosis.     

应用免疫磁珠分离-改良罗氏培养技术检测痰结核分枝杆菌的研究

目的通过免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)富集痰液中的结核分枝杆菌,提高痰液培养的阳性率,以期用于结核病的快速诊断。方法制备兔抗结核杆菌IgG抗体,并将其结合于免疫磁珠表面。采集71例确诊结核病患者的痰液标本,通过免疫磁珠分离技术捕获、富集吸附结核分枝杆菌后用改良罗氏培养基培养,并与传统改良罗氏(L-J)培养法和痰涂片抗酸染色法作比较。结果 71例结核病患者痰涂片抗酸染色检查阳性26例,阳性率36.6%;传统改良L-J培养阳性34例,阳性率47.9%;免疫磁珠分离技术捕获、富集结核分枝杆菌后进行改良L-J培养阳性48例,阳性率67.6%。三者阳性率差异有统计学意义(P<0.05),改良L-J培养和痰涂片检查阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用免疫磁珠分离技术捕获、富集痰液中的结核分枝杆菌后进行培养,可显著提高痰培养的阳性率,该方法可用于结核病的快速诊断。     

发光二极管荧光显微镜实验室诊断效果评价

目的评估发光二极管荧光显微镜实验室诊断结核分枝杆菌的能力。方法收集409痰标本,以固体罗氏培养为金标准,比较发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜在敏感性、特异性及检出时间上的差异,并比较技术人员对几种方法的评价。结果罗氏培养阳性的175份痰标本中,普通光学显微镜法112份为阳性,普通荧光显微镜法121份为阳性,发光二极管荧光显微镜法130份为阳性,敏感性分别为64.0%,69.1%,74.3%;罗氏培养阴性的234份痰标本中,普通光学显微镜法233份为阴性,荧光显微镜法227份为阴性,发光二极管荧光显微镜法227份为阴性,特异性分别为99.6%,97.0%,97.0%。χ2检验统计结果表明,发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜检测结果差异有统计学意义(P0.001)。普通光学显微镜、普通荧光显微镜和发光二极管荧光显微镜读片所用的读阳性片时间分别为186.7 s、75.1 s、72.2 s,发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜在读阳性片时间上差异有统计学意义(P0.05),与普通荧光显微镜差异无统计学意义。参与研究的技术员评价发光二极管荧光显微镜较其他2种方法易接受。结论发光二极管荧光显微镜较普通光学显微镜及普通荧光显微镜在检查效果及检出时间上存在明显优势,对技术人员的亲和性好,具有推广使用的价值。     

Microcolony detection in 7H11 thin layer culture is an alternative for rapid diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection.

SETTING: Radiometric technology and molecular biology are used in rapid diagnosis of tuberculosis in laboratories around the world. However, these technologies increase costs and are not available in laboratories where economic resources are limited. OBJECTIVE: To compare sensitivity and time for detection of positive cultures in a microcolony method, Middlebrook 7H11 thin layer agar plate (TL7H11), and a conventional culture, Lowenstein-Jensen (L-J). DESIGN: A total of 761 clinical samples were processed using acid-fast smear and culture on TL7H11 plates and L-J tubes. TL7H11 plates were checked microscopically for microcolony growth twice weekly for 4 weeks, and L-J tubes were checked once a week for 8 weeks. RESULTS: Overall positivity was 11.0%. More than 60% of the positive samples were detected within the first 10 days on TL7H11, and none on L-J. After 2 weeks, more than 80% were positive on TL7H11 compared to 10% on L-J. In paucibacillary samples, TL7H11 detected 2.18% and L-J 4.57% (P < 0.001). Microcolony morphology was 100% distinctive for Mycobacterium tuberculosis on TL7H11. The calculated cost of TL7H11 prepared in the laboratory was US$2.90 per unit. CONCLUSION: The TL7H11 method is an inexpensive, rapid and reliable alternative for diagnosing M. tuberculosis infection. It is therefore a valuable option for laboratories in low income countries.     

手工MGIT系统在基层结核病实验室中检测分枝杆菌的效果评价

目的对手工MGIT液体培养系统（manual mycobacteria growth indicator tube system, M-MGIT）检测分枝杆菌的效果进行评价。方法收集2012年1月至2013年2月北京市朝阳区疾病预防控制中心结核病门诊初诊患者526例,收集首次痰标本526份,分别对同份标本进行罗氏（Lowenstein-Jensen,L-J）固体培养、全自动BACTEC MGIT 960 系统培养（A-MGIT）和M-MGIT系统培养,统计学分析采用χ²检验和t检验,以P<0.05 为差异有统计学意义。结果526份标本中,3种分离培养方法共分离出261株分枝杆菌菌株,检出率为49.6%;M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法阳性检出率分别为48.7%（256/526）、49.0%（258/526）和41.3%（217/526）。M-MGIT和A-MGIT培养法检出率均高于L-J培养法,差异有统计学意义（χ²值分别为5.84、6.45,P值均<0.05),但M-MGIT和A-MGIT培养法检出率差异无统计学意义（χ²=0.02,P>0.05）。M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法阳性菌株平均报告时间分别为13d［（13±6）d］、12d［（12±6）d］和24d［（24±9）d］,M-MGIT和A-MGIT法阳性报告时间明显短于L-J法,差异有统计学意义（t值分别为15.84、18.32,P值均<0.05）,M-MGIT和A-MGIT之间的差异无统计学意义（t=1.89,P>0.05）。M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法污染率分别为4.6%（24/526）、4.9%（26/526）和4.1%（43/1052）,差异无统计学意义（χ²=0.64,P>0.05）。结论M-MGIT液体培养系统能快速检测分枝杆菌,检出率高,阳性报告时间短,成本低廉,适合基层结核病实验室应用。     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的临床应用

目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术（simultaneous amplification and testing,SAT）在结核病患者的痰液、体液及病灶组织等标本中检测结核分枝杆菌的价值.方法 收集在广州市胸科医院就诊的疑似结核病患者的痰液734份、体液标本94份（包括68份胸腔积液、21份脑脊液、5份关节积液,以下统称“体液”）及病灶组织标本76份,共计904份标本.同时采用SAT法、改良罗氏培养法进行检测,培养阳性者进行基因芯片菌种鉴定.SAT法与改良罗氏培养法结果不相符的标本,用结核分枝杆菌聚合酶链（polymerase chain reaction technology for Mycobacterium tuberculosis,PCR-TB）荧光诊断试剂盒进行检测.采用x2检验比较SAT法与改良罗氏培养法对结核病患者的阳性检出率.结果 以改良罗氏培养结果为金标准,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为90.20％（230/255）、92.48％（443/479）、91.69％（673/734）;94.74％（18/19）、81.33％（61/75）、84.04％（79/94）;100.00％（14/14）、77.42％（48/62）、81.58％（62/76）.以扩大金标准（培养＋PCR法）比对,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为96.30％（260/270）、99.35％（461/464）、98.23％（721/734）;96.97％（32/33）、100.00％（61/61）、98.94％（93/94）;100.00％（27/27）、97.96％（48/49）、98.68％（75/76）.改良罗氏培养法和SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的阳性检出率分别为34.74％（255/734）和36.24％（266/734）、20.21％（19/94）和34.04％（32/94）、18.42％（14/76）和36.84％（28/76）;痰标本两者的阳性率比较,差异没有统计学意义（x2=0.36,P＞0.05）.体液与病灶组织标本中,SAT法较改良罗氏培养法的阳性率高出13.83％和18.42％,差异有统计学意义（x2值分别为4.55、6.44,P值均＜0.05）.结论 SAT法检测痰液、体液及病灶组织标本中的结核分枝杆菌,具有快速、敏感度和特异度较高的优点,可提高结核分枝杆菌的检出率.