芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4表达的影响

目的:通过观察芍药甘草汤及其拆方对超高温环境大鼠心肌、下丘脑瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)和瞬时感受器电位香草酸受体4(TRPV4)表达的影响,探讨芍药甘草汤及其拆方抗高温的机制。方法:SPF级SD雄性大鼠75只,适应饲养1周后,按体质量随机分为5组,分别为常温正常组,高温正常组,芍药甘草汤组(2. 16 g·kg~(-1)),单味白芍组(1. 08 g·kg~(-1))和单味甘草组(1. 08 g·kg~(-1)),除常温正常组外,均饲养于人工气候箱,各给药组按相应剂量连续给药13 d,常温正常组和高温正常组均给予同体积的纯净水;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)测定各组心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4蛋白和m RNA的表达情况。结果:与常温正常组比较,高温正常组大鼠心肌TRPV3蛋白表达显著上升(P 0. 01);心肌TRPV4 m RNA表达明显下降(P 0. 05);下丘脑TRPV3蛋白表达显著上升(P 0. 01);下丘脑TRPV3 m RNA表达明显下降(P 0. 05)。与高温正常组比较,单味白芍组大鼠心肌TRPV3,TRPV4蛋白表达显著下降(P 0. 01);芍药甘草汤组与单味甘草组大鼠心肌TRPV4蛋白表达明显下降(P 0. 05);单味白芍组大鼠心肌TRPV4m RNA表达明显上升(P 0. 05)。结论:大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4通道在高温环境下被激活,芍药甘草汤及其拆方抗高温机制与调节大鼠心肌、下丘脑TRPV3,TRPV4通道蛋白及m RNA表达有关。     

祛风止痉胶囊对支气管哮喘大鼠气道炎症及TRPV1通路的影响

目的:观察祛风止痉胶囊对支气管哮喘大鼠气道平滑肌瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)表达以及外周血白介素(IL)-4、IL-13、IL-15、IL-17水平的影响。方法:将60只健康雄性大鼠随机分为正常组、阳性对照组、模型组与低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠于实验的第1、15天给予10%OVA腹腔注射1 ml以致敏,第15天将致敏的大鼠给予1%OVA溶液进行超声雾化建立哮喘模型。连续干预10 d。采用ELISA法测定大鼠外周血IL-4、IL-13、IL-5、IL-17水平,采用荧光定量PCR及Western blot测定大鼠肺组织TRPV1 mRNA和蛋白的表达。结果:低剂量、中剂量组、高剂量组IL-4、IL-13、IL-5、IL-17水平低于模型组(均P<0.05),高剂量组IL-4、IL-13、IL-5、IL-17水平低于阳性对照组(均P<0.05)。模型组及阳性对照组的TRPV1 mRNA和蛋白表达高于正常组(均P<0.05),模型组的TRPV1 mRNA和蛋白表达高于阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(均P<0....     

盆痛灵方对子宫内膜异位症模型大鼠TRPV1表达的影响

目的观察瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ(TRPV1)在子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠中异位灶及脊髓背根神经节(DRG)中的表达以及盆痛灵方对其的影响。方法采用自体内膜移植法建立大鼠EMs模型。取造模成功的大鼠随机分为模型组、消炎痛组和盆痛灵低、中、高剂量组,每组9只;另设假手术组9只(仅切除单侧结扎段子宫)。消炎痛组大鼠给予每天3μg/g消炎痛混悬液,盆痛灵低、中、高剂量组大鼠分别给予每天10.2、20.4、40.8 g/kg盆痛灵方水煎液,各组均采用直肠给药方式,每日1次,连续4周;模型组和假手术组给予等体积生理盐水。末次给药后,取各组大鼠的子宫内膜组织及脊髓DRG。采用免疫组化法定位并检测EMs模型大鼠异位灶TRPV1蛋白表达,并用Western Blot、RT-PCR检测异位灶及脊髓DRG中TRPV1蛋白及mRNA相对表达量。结果与假手术组比较,EMs模型大鼠的异位灶和脊髓DRG中TRPV1蛋白及mRNA表达均升高(P0.05);与模型组比较,盆痛灵方可降低EMs模型大鼠异位灶和DRG中TRPV1蛋白及mRNA表达(P0.05)。结论盆痛灵方可能通过降低TRPV1表达起到镇痛作用。     

补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症TRPV1及其致敏因子NGF的影响

目的研究补肾温阳化瘀方对实验性子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)简称内异症,瞬时受体电位辣椒素亚型Ⅰ(transientreceptor potential vanilloid receptor 1,TRPV1)及致敏因子神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的影响,以探讨补肾温阳化瘀方治疗EMT疼痛的作用机制。方法将近交系BALB/c雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、孕三烯酮组,每组15只。观察各组扭体反应,并采用酶联免疫法(ELISA)检测血清NGF的含量,采用免疫组化SP法及Western blot法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白的表达,采用Real-time PCR方法检测子宫和异位灶NGF、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组血清NGF含量显著高于假手术组(P0.01),且与小鼠扭体次数呈正相关(r=0.574,P0.01);与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组血清NGF含量显著下降(P0.05);模型组子宫NGF、TRPV1蛋白及NGF、TRPV1 mRNA表达均高于假手术组(P0.01)。与模型组比较,中药高、低剂量组、孕三烯酮组子宫和异位灶NGF、TRPV1蛋白表达均显著降低(P0.01),NGF、TRPV1 mRNA以中药高剂量组下降最为明显(P0.01)。子宫及异位灶NGF与TRPV1蛋白及mRNA表达均呈正相关(P0.01)。结论 TRPV1及致敏因子NGF共同参与了EMT疼痛的发生;补肾温阳化瘀方可通过降低NGF对TRPV1的上调作用从而发挥抑制EMT疼痛的作用。     

不同艾灸对大鼠血管舒缩功能调节与TRPV1 mRNA关系的研究

目的:通过观察不同艾灸方法对大鼠血管舒缩功能的影响及其与瞬时受体电位香草亚型-1(TRPV1)mRNA表达的关系,探讨艾灸血管效应机制。方法:将30只SD大鼠随机分为瘢痕灸组(10只)、温和灸组(10只)、空白组(10只),按分组干预后,检测大鼠血清TXB_2、e-NOS含量及胸主动脉、肠系膜动脉TRPV1 mRNA的表达量。结果:血清TXB_2:温和灸组瘢痕灸组空白组(P0.05),e-NOS:空白组瘢痕灸组温和灸组(P0.05);与空白组比较,瘢痕灸组胸主动脉组织TRPV1 mRNA的相对表达量降低,肠系膜动脉组织升高,温和灸组胸主动脉组织降低,肠系膜动脉组织降低,其中,温和灸胸主动脉与肠系膜动脉两处组织表达量比较有统计学意义(P0.05),且肠系膜动脉处两种灸法间表达量比较有统计学意义(P0.05)。结论:艾灸可调控血管舒缩因子TXB_2与e-NOS,且温和灸效果可能强于瘢痕灸,其差异可能与不同灸法下TRPV1表达的差异相关,另外艾灸下不同部位TRPV1表达的差异可能是其血管效应的机制。     

疏肝和胃方对胃食管反流大鼠模型背根神经节中TRPV1表达的影响

目的观察疏肝和胃方对胃食管反流大鼠模型背根神经节中内脏敏感因子瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)表达的影响,探讨其治疗胃食管反流病的机理。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、中药组及西药组,每组10只,除正常组外均行贲门肌切开术加幽门半结扎术制备反流性食管炎模型,并分别给予相应干预措施。免疫组化法及实时荧光定量核酸扩增检测(QPCR)方法观察各组大鼠背根神经节TRPV1受体及TRPV1 m RNA的表达。结果与正常组相比,模型组、西药组大鼠背根神经节中TRPV1阳性表达明显增高(P0.05);中药组与正常组比较无统计学差异(P0.05);与西药组比较,中药组TRPV1阳性表达明显降低(P0.05)。模型组背根神经节组织中TRPV1 m RNA表达水平明显高于正常组、中药组及西药组(P0.05);中药组、西药组与正常组比较差异无统计学意义(P0.05);中药组与西药组比较,两组背根神经节组织中TRPV1 m RNA表达差异无统计学意义(P0.05)。结论疏肝和胃方可能通过抑制TRPV1过度表达来发挥其治疗胃食管反流病的作用。     

肠吉泰对IBS内脏高敏感大鼠背根神经节5-HT2AR、5-HT7R和TRPV1表达的影响

目的研究肠吉泰对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏敏感大鼠脊髓背根神经节5-羟色胺2A受体(5-HT_(2A) receptor,5-HT_(2A)R)、5-羟色胺7受体(5-HT_7receptor,5-HT_7R)和瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid type-1,TRPV1)表达的影响。方法 60只新生SD大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、阳性药对照组、肠吉泰低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。采用Al-chaer直肠醋酸刺激法建立内脏高敏感性大鼠模型。造模期间阳性药对照组大鼠醋酸刺激前半小时给予capsazepine(TRPV1阻断剂)腹腔注射(2μg/g),其余各组(除空白对照组外)均给予相同体积的溶剂腹腔注射。造模结束4周后,肠吉泰各治疗组每日分别给予低剂量(2.5 g/kg)、中剂量(5 g/kg)和高剂量(10 g/kg)中药灌胃,空白对照组、模型对照组和阳性药对照组每日分别给予等量去离子水灌胃。治疗4周后,采用结直肠气囊扩张法记录大鼠的腹部回缩反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)计分来评估各组大鼠的内脏敏感性。并用免疫组化法检测IBS内脏敏感大鼠脊髓背根神经节5-HT_(2A)R、5-HT_7R和TRPV1的表达。结果当气囊压力在40、60、80 mm Hg时,模型对照组AWR评分显著高于空白对照组(P0.01)。当气囊压力在40、60 mm Hg时,肠吉泰各剂量治疗组AWR评分较模型对照组明显降低(P0.05,P0.01);模型对照组大鼠脊髓背根神经节5-HT_(2A)R、5-HT_7R和TRPV1表达较空白对照组明显增高(P0.01);与模型对照组比较,肠吉泰各剂量组背根神经节的5-HT_(2A)R、5-HT_7R和TRPV1表达明显下降(P0.01);肠吉泰高剂量组脊髓背根神经节的5-HT_(2A)R、5-HT_7R和TRPV1表达,与空白对照组无明显差异(P0.05)。结论肠吉泰能降低IBS内脏敏感性,其机制可能与降低脊髓背根神经节5-HT_(2A)R、5-HT_7R和TRPV1表达有关。     

知柏地黄汤对解脲支原体感染大鼠生精细胞凋亡及Caspase-3、Caspase-9表达的影响

目的 观察知柏地黄汤对解脲支原体（UU）感染大鼠生精细胞凋亡及对细胞凋亡线粒体调控效应因子Caspase-3、Caspase-9表达的影响。     

知柏地黄汤对解脲支原体感染大鼠睾丸组织IL-2及TNF-α表达水平的影响

目的:研究知柏地黄汤对解脲支原体(Uu)感染大鼠睾丸组织IL-2、TNF-α表达水平的影响,探讨该方防治Uu感染所致的男性不育症的部分免疫学机制。方法:经膀胱接种建立大鼠睾丸组织感染解脲支原体的动物模型。实验设知柏地黄汤治疗组、美满霉素治疗组、模型对照组和假手术组。假手术组、模型对照组灌胃给生理盐水,治疗组灌胃给相应药物,连续给药21d后取标本检测指标。免疫组织化学染色法和Western blotting技术检测睾丸组织IL-2、TNF-α蛋白表达水平,RT-PCR技术检测睾丸组织IL-2、TNF-α基因表达水平。结果:Uu感染大鼠后,睾丸组织IL-2的蛋白表达和基因表达水平降低,TNF-α的蛋白表达和基因表达水平升高,与假手术组比较,差异显著(P<0.01);知柏地黄汤组睾丸组织IL-2蛋白表达和基因表达水平明显升高,TNF-α的蛋白表达和基因表达水平明显降低,与模型对照组比较,差异显著(P<0.01)。结论:知柏地黄汤能通过影响Uu感染大鼠睾丸组织IL-2、TNF-α的表达水平而发挥抗感染作用。     

如意珍宝丸对偏头痛大鼠下行痛觉调节通道的影响

目的:研究藏药如意珍宝丸对硝酸甘油致偏头痛模型大鼠下行痛觉调制通道中心区域中脑导水管内神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)、酪氨酸激酶A(Tyrosine Kinase A,TrkA)、瞬时感受器电位香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid Receptor 1,TRPV1)的表达影响,探究该药干预神经源炎性痛敏性偏头痛的作用机制。方法:以颈部皮下注射硝酸甘油方法复制大鼠偏头痛模型,以如意珍宝丸为药物实验组,琥珀酸舒马普坦为阳性对照组,采用ELISA和Real-Time PCR法检测外周血清及中脑组织NGF、TrkA、TRPV1蛋白及基因表达水平,观察藏药如意珍宝丸对硝酸甘油致偏头痛模型大鼠下行痛觉调制系统的影响。结果:与空白组比较,模型组血清NGF、TrkA、TRPV1蛋白表达显著上升(P0.05);中脑NGF、TrkA、TRPV1基因表达差异性升高(P0.05)。与模型组比较,如意珍宝丸预防组可降低NGF、TRPV1蛋白表达(P0.05);如意珍宝丸观察组能使NGF、TrkA蛋白表达和NGF、TrkA、TRPV1 mRNA表达均降低(P0.05或P0.01)。结论:NGF、TrkA共同参与了下行疼痛调控中TRPV1介导的偏头痛发生;藏药如意珍宝丸可降低NGF、TrkA对TRPV1的上调作用,起到抑制神经源炎性痛敏性偏头痛的作用。     

祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠TRPV1 通道相关蛋白的影响

目的 探讨祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠瞬时受体电位香草酸亚型 1（TRPV1）通道相关蛋白的作用，以期探讨其疗效机制。 方法 48 只 SPF 级豚鼠分为正常组（给予生理盐水）、模型组、西药组、中药组，每组 12 只，除正常组外，其余 3 组采用卵蛋白致敏的方法建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型，模型组给予生理盐水，西药组给予辣椒平，中药组给予祛风宣肺方，干预 1 周后采用 ELISA 法测定血清中 IL-6、IL-20 水平、支气管肺泡灌洗液（BALF） 中 TRPV1、P 物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP） 蛋白水平，WesternBlot 法测定肺组织中 TRPV1、神经激肽-1 受体（NK-1R）、CGRP 蛋白表达。 结果 与正常组比较，模型组血清 IL-6、IL-20、BALF 中 TRPV1、SP、CGRP 及肺组织中 TRPV1、NK-1R、CGRP 水平升高（P<0.01）；与模型组比较，西药组及中药组血清 IL-6、IL-20、BALF 中 TRPV1、SP、CGRP 水平降低（P<0.01），但中药组SP 水平与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与西药组比较，中药组 BALF 中 TRPV1、SP、CGRP水平升高（P<0.05， P<0.01）。 与模型组比较，西药组、中药组肺组织中 TRPV1、NK-1R、CGRP 蛋白表达下降（P<0.05， P <0.01）；与西药组比较，中药组肺组织中 TRPV1、NK-1R、CGRP 表达升高（ P <0.01）。结论 抑制 TRPV1 通道进而降低气道神经源性炎症可能是祛风宣肺方的重要疗效机制之一。     

祛风宣肺汤治疗感染后咳嗽动物模型的疗效及相关机制研究

目的:观察祛风宣肺汤对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的感染后咳嗽(postin-fectious cough,PIC)小鼠动物模型咳嗽反射敏感性性和神经源性炎症的治疗作用,并探索可能的机制。方法:雄性的ICR小鼠24只,按数字随机法随机分成空白组、LPS组和中药组。每组8只,通过腹腔注射一定浓度LPS造成小鼠感染后咳嗽的气道高反应性模型,其中中药组并给予中药组祛风宣肺汤灌胃。氨水刺激后人工数小鼠咳嗽次数,肺功能仪测定气道反应性,免疫组化检测小鼠肺中瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)表达位置和半定量,蛋白质印迹法(Western Blot,WB)方法检测肺组织中辣椒素受体TRPV1蛋白表达,实时定量PCR(real-time PCR)方法检测肺组织中TRPV1、P物质受体神经肽受体1(NKl)的mRNA、神经生长因子(NGF)/神经生长因子受体络氨酸激酶(trKa)的mRNA表达,Elisa方法检测肺组织中P物质(Sbstance P,SP)表达含量。结果:LPS组小鼠咳嗽次数及气道反应性明显高于空白组小鼠,提示LPS模型小鼠造模成功,并且祛风宣肺方能明显降低模型小鼠咳嗽次数、气道反应性和小鼠肺部炎症,相关数据具有统计学意义;祛风宣肺汤可以显著的减少LPS升高的TRPV1的表达和神经源性炎症,包括上游调控轴NGF/trKa的表达。结论:结合目前对于感染后气道高反应性的认识,考虑祛风宣肺汤可能是通过减少NGF/trKa来降低TRPV1的表达和神经源性炎症,并以此来降低气道高反应性。     

疏肝饮对避水应激大鼠内脏痛觉过敏的调节作用

目的:研究疏肝饮及其组分对反复避水应激(RWAS)大鼠内脏痛觉过敏(VHL)的调节作用,并探讨疏肝饮是否通过调节背根神经节(DRG)中瞬时受体电位通道香草酸受体1(TRPV1)和结肠组织中P物质(SP)表达起作用。方法:应用RWAS法复制具有VHL特点的肠易激综合征(IBS)大鼠模型,观察疏肝饮及其组分对结直肠扩张(CRD)引起大鼠腹壁收缩反射(AWR)压力阈值的影响;分别应用免疫组化法和Real-time PCR法检测大鼠结肠组织中SP和DRG中TRPV1的表达变化。结果:模型大鼠引起AWR的压力阈值明显低于正常对照组,疏肝饮可以使模型大鼠引起AWR的压力阈值明显升高;疏肝饮及其组分可以降低模型大鼠结肠组织中高表达的SP和DRG中高表达的TRPV1。结论:疏肝饮可以改善RWAS大鼠的VHL,其作用机制与其调节结肠组织中SP和DRG中TRPV1的表达有关。     

基于TRPV1/AMPK通路探讨石榴皮总多酚对亚油酸诱导的人皮脂腺细胞脂质合成的影响

目的 探讨石榴皮总多酚（pomegranate peel polyphenols，PPPs）对亚油酸（linoleic acid，LA）诱导的永生化人皮脂腺SZ95细胞脂质合成的影响及其作用机制。方法 体外培养SZ95细胞，运用LA诱导构建脂质过度合成模型，采用CCK-8法检测不同质量浓度PPPs对SZ95细胞活力的影响；尼罗红染色检测细胞脂质合成情况；qRT-PCR检测瞬时受体电位香草酸亚型1（transient receptor potential vanilloid 1，TRPV1）、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK）mRNA表达；Western blotting检测TRPV1、AMPK、磷酸化AMPK（phosphorylated AMPK，p-AMPK）蛋白表达。采用siRNA进行细胞转染，观察沉默TRPV1后PPPs对LA诱导的SZ95细胞脂质合成及TRPV1/AMPK通路的影响。结果 1.25、2.5、5μg/mL的PPPs对SZ95细胞活性无明显影响，且均可显著抑制LA诱导的脂质过度合成（P<0.01），其中5 μg/mL PPPs的抑制效应最为明显。与对照组比较，模型组细胞脂质合成明显增加（P<0.01），TRPV1、AMPK mRNA表达及TRPV1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；PPPs对无LA诱导的SZ95细胞基础脂质合成无明显影响，TRPV1、AMPK mRNA表达水平升高（P<0.01），但TRPV1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平差异无统计学意义。与模型组比较，PPPs明显减少LA诱导下的SZ95细胞脂质合成（P<0.01），明显提高TRPV1、AMPK mRNA表达及TRPV1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平（P<0.05、0.01）。沉默TRPV1显著增加了LA诱导下的SZ95细胞脂质合成（P<0.01），并显著减弱了PPPs对SZ95细胞脂质过度合成的抑制（P<0.01），显著降低其TRPV1、AMPK的mRNA及TRPV1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平（P<0.05、0.01）。结论 PPPs可有效抑制LA诱导的SZ95细胞脂质合成，其作用机制可能与TRPV1/AMPK通路有关。     

基于TRPV离子通道探讨苗医弩药针疗法治疗膝骨性关节炎的作用机制

目的:观察苗医弩药针疗法对膝骨性关节炎(KOA)模型家兔膝关节滑膜组织瞬时感受器电位香草酸受体(TRPV)通道的影响,探讨苗医弩药针疗法治疗KOA的作用机制。方法:从34只新西兰雄性家兔中随机选取6只作为正常组,其余家兔采用右膝关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸混合液的方法建立KOA模型,将造模成功的24只家兔随机分为模型组、弩药针组、皮肤针组和涂抹组,各6只。弩药针组家兔采用苗医弩药针疗法于右膝关节面(以血海、梁丘、阳陵泉、阴陵泉为4点的长方形内)上呈"米"字型滚刺;皮肤针组采用皮肤滚针于右膝关节面进行滚刺;涂抹组以弩药液涂抹右膝关节面。隔日1次,每周3次,连续干预4周。于实验第1、21、28、35、42、49天检测家兔机械刺激的缩足阈值(von Frey阈值)。干预结束后,HE染色法观察家兔右膝关节软骨组织形态学改变;ELISA法检测家兔右膝关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot法和real-time PCR检测家兔右膝关节滑膜组织中TRPV1、TRPV4蛋白和mRNA的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组家兔实验第...     

祛风宣肺方通过背根神经反射降低咳嗽敏感性的作用机制研究

目的：探讨祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠背根神经节中瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）、P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）蛋白及基因的作用，进一步研究祛风宣肺方在慢性咳嗽中的作用机制。方法：将48只SPF级雄性健康豚鼠随机分为正常对照组（生理盐水）、模型组（生理盐水）、西药组（Capsazepine）、中药组（祛风宣肺方），采用卵蛋白致敏的方法建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型。药物干预1周后辣椒素雾化法测定各组豚鼠的咳嗽次数，实时PCR法测定背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA水平，蛋白印迹法测定背根节中TRPV1、NK1-R、CGRP蛋白表达。结果：与正常对照组比较，模型组咳嗽次数增加，背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA表达增加，TRPV1、NK-1R、CGRP蛋白表达升高（均P<0.01）。与模型组比较，西药组、中药组咳嗽次数降低（P<0.05），背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA表达下降（P<0.01），西药组背根节中TRPV1、NK-1R、CGRP蛋白表达下降（P<0.05），中药组背根节中NK-1R、CGRP蛋白表达下降（P<0.05），TRPV1蛋白表达与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：抑制TRPV1通道，抑制背根神经反射进而降低气道神经源性炎症可能是祛风宣肺方的重要疗效机制之一。     

电针对大鼠肠易激综合征及 抑郁情绪的改善作用及机制研究

目的： 观察中医针刺疗法中电针“天枢”“上巨虚”方法改善肠易激综合征（IBS）伴抑郁症的作用以及对该模型大鼠结肠组织中瞬时受体电位香草酸亚型 1（TRPV1）、酪氨酸激酶受体A（TrkA）、神经生长因子（NGF）、Rho相关激酶ROCK、Ras同源基因家族蛋白A（RHOA），海马组织中NFκB和SIRT2蛋白表达的影响，探究针刺改善 IBS-D 肠道功能异常伴抑郁症调控作用的机制。方法： 36只SPF级雄性SD大鼠随机分为健康空白组，模型组，电针组和西药组4组，每组9只。后三组通过二硝基苯磺酸（Dinitrobenzene sulfonate，DNBS）灌肠和慢性束缚应激（Chronic restraint stress）方法建立 IBS 模型。空白组全程正常饲养，无造模干预及治疗。电针组用电针刺激大鼠双侧“天枢”“上巨虚”穴位，疏密波，频率2Hz/100Hz，每次20min。 西药组用匹维溴铵混悬液（18mg/kg）灌胃处理，分别持续7天，每天一次。造模前后及治疗干预后记录各组大鼠粪便含水量、糖水偏嗜程度以及高架十字迷宫测试。ELISA技术检测血清炎症因子的指标。采用免疫组化技术检测大鼠海马组织中NFκB，SIRT2蛋白以及大鼠结肠组织中BDNF，SIRT2，NFκB，CREB蛋白的表达和分布情况，Western Blot技术检测结肠组织中TRPV1、TrkA、NGF、ROCK、RHOA的蛋白表达变化。结果：与空白组比较，造模后大鼠粪便含水量增加（P < 0.01），糖水消耗减少（P < 0.05）。干预后，与空白组比较，模型组大鼠高架十字迷宫实验的开放臂停留时间百分比减少（P < 0.01），血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平增加（P < 0.01），结肠组织TRPV1、TrkA、NGF、ROCK、RHOA蛋白表达升高，海马组织NFκB阳性表达升高，SIRT2阳性表达降低；与模型组比较，电针组和西药组大鼠粪便含水量减少（P < 0.01/P < 0.05），开放臂停留时间百分比增加（P < 0.05），血清炎症因子降低，结肠组织TRPV1、TrkA、NGF、ROCK、RHOA蛋白表达降低，NFκB阳性表达降低，SIRT2阳性表达升高。 结论：电针“天枢”“上巨虚”可有效改善 IBS-D 模型大鼠的胃肠症状，缓解大鼠伴随的抑郁情绪和炎性因子水平，可能是通过降低模型大鼠结肠组织TRPV1、TrkA、NGF、ROCK、RHOA蛋白表达而达到治疗目的的。     

厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症及TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响

目的:探讨厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症的效应及对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1),TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响。方法:将60只雌性Balb/c小鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、厚朴麻黄汤低、中、高(7,14,28 g·kg^-1)剂量组和地塞米松组(0.0024 g·kg^-1),每组10只。复制卵蛋白(OVA)致敏及激发小鼠哮喘模型。检测各组小鼠气道反应性,以不同浓度氯化乙酰胆碱(ACh)雾化吸入激发后增强呼气间歇(Penh)值表示,观察各组小鼠肺组织病理学改变,外周血嗜酸性粒细胞数(EOS),支气管肺泡灌洗液(BALF)中EOS百分比的变化。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4,IL-13,前列腺素D2(PGD2),P物质(SP),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达。结果:与正常组比较,给予质量浓度为12.5,25,50 g·L-1ACh雾化吸入后,模型组小鼠Penh明显上升(P<0.05,P<0.01);肺病理显示支气管及管壁周围有大量炎症细胞浸润,支气管黏膜水肿、增厚,黏液分泌增多;外周血中EOS数量及BALF中EOS百分比明显升高(P<0.01)。BALF中IL-4,IL-13,PGD2和SP水平以及肺组织中TRPA1,TRPV1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组Penh明显降低(P<0.05,P<0.01),肺组织病理损伤改善,外周血中EOS数量及BALF中EOS百分比显著降低(P<0.01);BALF中IL-4,IL-13,PGD2和SP水平以及肺组织中TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:厚朴麻黄汤可以改善哮喘小鼠气道炎症、降低气道反应性,其机制除降低Th2相关的细胞因子水平外,可能也与调控TRPA1,TRPV1mRNA与蛋白表达及降低相关神经因子水平有关。     

加味盆痛灵对EMs疼痛大鼠TRPV1/CaMKII信号的调节作用

目的 探讨加味盆痛灵干预TRPV1/CaMKII信号通路逆转EMs疼痛的可能作用机制。方法 采用自体内膜移植法构建SD大鼠EMs模型，将造模成功的大鼠按随机数字法分为模型组、TRPV1抑制剂组(CPZ组)、加味盆痛灵组、CPZ+加味盆痛灵组，每组8只。另设假手术组8只。阳性对照药物TRPV1抑制剂(capsazepine),鞘内注射，每日1次，连续7d。加味盆痛灵(7.77g·kg^-1·d^-1)水煎剂，直肠给药，每日1次，连续28d。分别于不同时间点测定大鼠50%缩足阈值(PWT)。给药结束后，采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测腹腔液中CGRP、SP水平；反转录-聚合酶链式反应(Rt-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测L4-6段DRG组织TRPV1、CaMKII mRNA及蛋白表达。结果 与假手术组相比，模型组PWT显著下调，腹腔液SP、CGRP水平及DRG中TRPV1、CaMKII mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组相比，CPZ组和加味盆痛灵组PWT均显著上调，腹腔液SP、CGRP水平及DR...     

加味九分散对痛风性关节炎大鼠TRPV1表达的影响

目的 通过观察加味九分散对痛风性关节炎大鼠瞬时电位感受器香草酸受体1(TRPV1)表达的影响,探讨加味九分散的止痛机制.方法 将SD雄性大鼠随机分为4组:空白对照组、模型组、扶他林乳胶剂组、加味九分散外敷组.模型组、扶他林乳胶剂组和加味九分散外敷组造痛风性关节炎模型.扶他林乳胶剂组合加味九分散组给药48 h后取大鼠关节...