化学发光免疫法检测B型利钠肽的检测限值和功能灵敏度研究

目的 探讨西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)的检测限值和功能灵敏度.方法 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件和有关文献,选择BNP通用稀释液作为空白标本,批内重复测定10次,计算光量子值的均数、标准差和变异系数(CV),用以确定检测低限(LLD);同时,空白标本每天上、下午各检测1批,每批重复检测3次,连续检测5 d,共获得30个空白结果,用非参数方法确定空白限(LoB).制备接近1～4倍LoB浓度的系列实验标本,各浓度每天上、下午各检测1次,连续检测5 d,计算每个浓度水平光量子值的均数、标准差和CV,用以确定生物检测限(BLD)和CV值为10%条件下的功能灵敏度(FS);同时对所有80个测定结果,按EP-17A文件采用非参数方法确定检出限(LoD).结果 ADVIA Centaur 240检测系统BNP的LLD为1.47 pg/mL,LoB为0.86 pg/mL,均低于厂家声明的灵敏度;BLD为3.27～3.71 pg/mL,LoD为3.54 pg/mL,10%CV条件下的FS为4.64 pg/mL.结论厂商声明的LLD和BLD得到验证,同时建立了实验室BNP检测的LoB、LoD和FS,为临床提供了准确、可靠的检验结果.建议临床实验室使用EP-17A文件确定LoB和LoD,并确定在一定精密度条件下的FS.     

化学发光免疫法检测B型利钠肽的分析性能评价

目的 验证西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)的精密度及判断准确度性能的可接受性,以及探讨BNP的分析灵敏度及BNP的最适血液标本类型.方法 参照美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件和相关文献,对ADVIA Centaur 240 检测BNP的精密度和准确度进行评价.分别采用肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和干燥血清管进行抽血,样本在不同时间进行BNP检测,比较BNP的测定值与变化趋势,判断BNP的最适血液标本类型.通过EP17-A文件确定BNP检测的空白限(limit of blank,LoB)、检测低限(limit of detection,LoD)和功能灵敏度(functional sensitivity,FS).结果 ADVIA Centaur 240 化学发光免疫检测系统检测BNP精密度的批内CV和总CV均为＞3.5%,准确度与定值校准品的偏差为1.1%~2.6%,BNP检测的最适血液标本类型为EDTA抗凝血浆,LoB,LoD及FS分别为0.86,3.61和4.64 pg/ml.结论 西门子ADVIA Centaur 240化学发光检测系统检测BNP的主要分析性能均达到了厂商声明的性能和有关的质量要求.最佳血液标本类型的选择及建立临床实验室的LoB,LoD和FS可为临床提供更加准确可信的检测值.     

时间分辨荧光分析法检测低值乙型肝炎病毒表面抗原的质量评价

目的评价时间分辨荧光分析法检测低值乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的性能。方法使用不同浓度试剂盒标准品、二级标准品进行重复测定,建立相应的数学模型,进行检测低限（lower limit of detection,LLD）、生物检测限（biologic limit of detection,BLD）、功能灵敏度（functional sensitivity,FS）、空白限（limit of blank,LoB）、检出限（limit of detection,LoD）、定量检出限（limit of quantifications,LoQ）的统计计算。结果 LLD为0.044ng/mL、BLD为0.18ng/mL、FS为0.18ng/mL、LoB为0.03ng/mL、LoD为0.108ng/mL,尝试计算低值HBsAg检测结果的不确定度,确定定量检出限（LoQ）约为0.5ng/mL。结论使用灵敏度性能和不确定度2种方法进行评价,该检测系统对低值HBsAg分析能够达到试剂盒规定的性能要求。     

游离前列腺特异性抗原性能指标的建立

目的建立Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪检测游离前列腺特异性抗原(f-PSA)的空白限(LoB)、最低检出限(LoD)及定量检出限(LoQ)。方法参照美国临床实验室标准化协会2012年颁发的EP17-A2《临床实验室评价检测能力(第2版)》,将f-PSA的空白样品及系列低浓度样品在Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析系统进行检测,根据数据的分布规律,采用相应的统计学方法,确定该方法检测f-PSA的LoB、LoD及LoQ。结果 f-PSA的LoB为0.05ng/mL,LoD为0.16ng/mL,LoQ为0.35ng/mL。结论建立的Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析系统f-PSA的LoB、LoD、LoQ,其检测能力符合临床检验要求。     

化学发光免疫法检测甲胎蛋白的生物检测限和功能灵敏度研究

目的建立化学发光免疫法检测甲胎蛋白的生物检测限和功能灵敏度。方法参照相关文献,甲胎蛋白空白样品及系列稀释浓度样品在Bayer Centaur240化学发光免疫检测系统进行检测,计算其光强度均值、标准差及变异系数,确定该方法的检测低限、生物检测限和功能灵敏度。结果方法的检测低限为1.00ng/ml,低于厂家声明。生物检测限在2.65～3.53ng/ml之间,功能灵敏度为3.53ng/ml。结论各实验室应自行建立肿瘤标志物的生物检测限和功能灵敏度,才能为临床诊断和治疗提供更有价值的信息。     

吡喃糖氧化酶法检测1,5-脱水葡萄糖醇的空白限、检出限和功能灵敏度的建立及评价

目的建立吡喃糖氧化酶法检测1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)的空白限(LoB)、检出限(LoD)和功能灵敏度(FS)并进行评价。方法参考美国临床和实验室标准化委员会(NCCLS)发布的EP17-A文件,将1,5-AG空白标本和系列低水平标本在ADVIA2400生化分析仪上测定1,5-AG,确定该方法的LoB、LoD和FS。结果依据NCCLS EP17-A方案建立吡喃糖氧化酶法检测1,5-AG的LoB为0.35μg/mL,LoD为0.64μg/mL,FS为0.960μg/mL。结论该研究建立了适合实验室ADVIA2400生化分析仪吡喃糖氧化酶法检测1,5-AG的LoB、LoD和FS,其分析性能指标基本满足实验室的要求,可为临床提供准确、可靠的检验结果。     

酶联免疫分析检测乙型肝炎e抗原的空白限、检出限及定量限的建立与评价

目的建立并评价酶联免疫分析手工操作检测HBeAg的空白限(LoB)、检出限(LoD)及定量限(LoQ)。方法参照美国临床实验室标准化协会EP-17A文件和有关文献,结合工作实际,将HBeAg的空白样品及系列低浓度样品进行酶联免疫分析手工操作的检测,根据数据的分布规律,采用相应的统计学方法,建立酶联免疫分析手工操作检测HBeAg的LoB、LoD及LoQ并进行评价。结果 HBeAg的LoB为0.131PEI U/mL,LoD为0.350PEI U/mL,LoQ为0.450PEI U/mL。结论厂商声明的LoB得到验证,同时建立了实验室检测HBeAg的LoB、LoD和LoQ,为临床诊断和治疗提供更有价值的信息。     

电化学发光免疫法检测降钙素原的空白限、检出限和功能灵敏度的评价

目的对Roche Cobas E601全自动电化学发光免疫检测系统检测降钙素原(PCT)的检测限值和功能灵敏度(FS)进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在Roche Cobas E601全自动电化学发光免疫检测系统进行检测,确定该方法的空白限(LoB),检出限(LoD)和FS。结果 PCT的LoB为0.029ng/mL,LoD为0.068ng/mL,FS为0.034ng/mL。结论建立了Roche Cobas E601全自动电化学发光仪PCT的LoB,LoD和FS,其分析灵敏度性能指标符合厂商提供的性能指标。为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息。     

化学发光免疫法检测AFP的分析灵敏度核实实验及评价

目的核实Bayer Centaur 240全自动化学发光仪甲胎蛋白(AFP)的分析灵敏度。方法用甲胎蛋白配套稀释液作为空白样品,将合适浓度的新鲜血清重复测定5次,计算其均值。用稀释液作系列稀释,组成0,0.94,1.90,2.80,3.80,5.60 ng/ml的甲胎蛋白系列检测样品,重复测定10次,记录光强度值(RLUs)。结果按99.7%的可信限计算,AFP检测低限为0.94 ng/ml;按照国际纯粹和应用化学联合会的规定,AFP检测低限1.15 ng/ml,生物检测限在1.90~2.80 ng/ml之间,功能灵敏度为1.9 ng/ml。结论实验两种方法计算的检测低限均小于厂家所给检测低限1.3 ng/ml。     

肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸的方法学性能评价及参考值分析

目的对肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸进行方法学性能评价,初步估计尿肌氨酸的生物参考值。方法参考CLSI EP5-A2、EP17-A、EP6-A、C28-A3等文件,评价肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸的重复性、空白限(limits of blank,LoB)、检测限(limitsof detection,LoD)、定量限(limits of quantitation,LoQ)、线性范围、回收率和生物参考值。结果肌氨酸氧化酶法检测2.0μmol/L肌氨酸溶液、2.9μmol/L新鲜尿液样本,总不精密度均14.0%;肌氨酸氧化酶法检测5.0、10.0μmol/L肌氨酸溶液及6.4、9.8μmol/L新鲜尿液样本,总不精密度均10.0%。肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸的LoB约为0.35μmol/L;肌氨酸溶液的LoD、LoQ分别为1.1、1.9μmol/L,新鲜尿样本分别为1.2、2.0μmol/L;线性范围为2.0～125.6μmol/L;回收率为65.3%～90.5%。健康人群尿肌氨酸的生物参考值为0.01～0.06μmol/g肌酐。结论肌氨酸氧化酶方法检测尿肌氨酸的精密度、检测限、线性范围等可满足临床实验室的要求,但仍需在校准品基质方面有所改进以提高准确度。     

电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能评价

目的 评价电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能.方法 参考CLSI发布的方法学评价系列文件,对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的精密度、正确度、空白限(LoB)和检出限(LoD)、功能灵敏度(FS)、分析测量范围(AMR)、最大稀释度、临床可报告范围(CRR)以及胆红素、血红蛋白和乳靡对分析的干扰进行评价,并与厂商声明的性能和有关的质量标准进行比较.根据CLSI C28-A2文件,选择18～74岁的健康体检者80名,按年龄分为4组,每组20名,以验证厂商声明的生物参考区间的适用性.结果 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的批内CV和总CV分别为1.1％ ～2.2％和1.5％ ～2.9％,与卫生部临床检验中心室间质量评价调查品同方法组的均值和配套校准品标示值的偏差分别为2.7％ ～5.9％和2.7％～7.5％,LoB、LoD和FS分别为2.5、7.8和8.8 pg/ml,AMR为8～35 126 pg/ml,最大允许稀释度为1∶2,CRR为9～70 252 pg/ml,胆红素(428 μmol/L)、血红蛋白(2 g/L)和乳靡(2 200 FIU)对NT-proBNP测定无干扰.不同年龄组各20名健康参考个体NT-proBNP浓度除1个检测值(167 pg/ml)超出厂商提供的参考区间外,其余均在厂商提供的参考区间内.结论Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的主要分析性能达到了厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,厂商声明的生物参考区间可满足临床需要.     

ADVIA Centaur化学发光免疫分析系统检测B型钠尿肽的性能评价

摘要：目的：评价ADVIA Centaur化学发光免疫分析法（CLIA）检测B型钠尿肽（BNP）的分析性能。 方法：参考美国临床和实验室标准协会（CLSI）发布的方法学评价系列文件（EP文件）及有关文献,对西门子公司ADVIA Centaur CLIA系统检测BNP的精密度、空白限（LoB）、检出限（LoD）、功能灵敏度（FS）、分析测量范围（AMR）、最大稀释度和临床可报告范围（CRR）以及胆红素、Hb和乳糜对分析的干扰进行全面系统地评价,比较肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和血清管4种不同标本类型及放置不同时间对BNP测定的影响,并对单纯心力衰竭（心衰）患者和急性脑梗死合并心衰患者的血浆BNP和血清NT-proBNP浓度进行检测,观察二者在不同疾病状态下的相关性。 结果：ADVIA Centaur CLIA系统检测BNP的批内不精密度（批内CV）和总CV分别为1.1%~2.3%和2.3%~3.6%,LoB、LoD和FS分别为0.86、3.61和4.64 pg/mL,AMR为4~5 094 pg/mL,最大允许稀释度为1∶2,CRR为5~10 188 pg/mL,胆红素（428 μmol/L）、Hb（2 g/L）和乳糜（2 200 FIU）对BNP测定无干扰;单纯心衰患者BNP与NT-proBNP的检测结果有良好的相关性（P<0.001）,而急性脑梗死合并心衰患者二者无明显相关（P>0.05）。 结论：西门子公司ADVIA Centaur CLIA系统检测BNP的主要分析性能达到厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,但在急性脑梗死合并心衰患者BNP与NT-proBNP的变化不一致,在临床应用时应引起重视。     

临床化学发光免疫法检测AFP的分析性能验证与实验方法

目的建立临床化学发光免疫检验方法学性能验证方案和实验方法。方法参考美国临床和实验室标准化协会（CLSI）系列文件和相关文献，结合工作实际，设计验证方案，并对Bayer Centaur 240化学发光免疫检测系统测定血清AFP的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、临床可报告范围和生物参考区间6大分析性能进行验证和评价，并将实验结果与厂家（德国拜尔公司）提供的分析性能或公认的质量指标进行比较。结果AFP含量在77．4、168．0ng／ml时，日间不精密度分别为5．70％和4．84％，与厂商日间不精密度（4．9％和5．0％）基本一致；4个浓度校准品检测结果与靶值的相对偏倚均〈5％，5份室间质评控制品检测结果与靶值的相对偏倚在-3．4％-11．9％之间；检测低限为1．04ng／ml，略低于厂商的检测低限（1．30ng／ml），生物检测限在2．65—3．53ng／ml之间，功能灵敏度为3．53ng／ml；分析测量范围为3．53—912．00ng／ml（厂商线性范围1．3—1000．0ng／ml），临床可报告范围为3．53—182400．00ng／ml；生物参考区间验证结果为0．6—7．7ng／ml（厂商参考区间〈8．1ng／ml）。结论Bayer Centaur 240化学发光免疫检测系统检测AFP的分析性能符合临床要求，验证方案和实验方法简便易行。本研究对规范医学实验室建设和实验室认可，提高化学发光免疫检验质量有重要意义。     

前清蛋白定量检测限和功能灵敏度的评价及临床应用

目的：对 Roche Modular P 全自动生化分析仪检测前清蛋白（PA）的空白限（LoB）、检测限（LoD）、定量检测限（LoQ）以及功能灵敏度（FS）进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP-17A 文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在 Roche Modular P 全自动生化分析仪上进行检测确定该方法的空白限、检出限和定量检测限。依据国内通用方法确定功能灵敏度。结果 PA 的空白限为16．35 mg/L ,检测限为18．23 mg/L ,定量检测限暂无法评价,功能灵敏度为25．00 mg/L。结合其可报告范围的低值,确定其临床的报告范围及报告方式。结论建立了 PA 在 Roche Modular P 全自动生化分析仪上检测的定量检测限,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息,对不同评价的方法进行比较,明确了不同方法实际应用的优点以及局限性。     

化学发光法测定anti-HBs的检出限和临床可报告范围的建立及临床应用

目的建立化学发光法测定anti-HBs的检出限和临床可报告范围,并进行临床应用评价。方法依据相关文件,设计化学发光法测定anti-HBs的空白限(LoB)、检出限(LoD)、定量检出限(LoQ)、分析测量范围(AMR)、临床可报告范围(CRR)的方案,并进行测量;应用建立的临床可报告范围和最大稀释度对急性乙肝患者恢复期进行预测及2016年1～6月期间出生的51例新生儿不同疫苗接种效果的评价。结果化学发光法测定anti-HBs的LoB,LoD,LoQ,AMR和CRR分别为0.87,1.89,3.0,0～970.50,3.0～48 525 mIU/ml,且最大稀释度为1:50;急性乙肝患者在就诊后第4周anti-HBs就出现升高(临床可报告范围),三种疫苗接种后的anti-HBs均值以B疫苗最高。结论化学发光法测定anti-HBs的检出限和临床可报告范围的建立能满足临床实验室的要求,为临床提供可靠的检验结果。     

化学发光免疫法检测BNP的分析测量范围和临床可报告范围研究

目的 研究化学发光免疫法检测B型钠尿肽(BNP)的分析测量范围(AMR)和临床可报告范围(CRR).方法 参照美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)发布的EP6-A文件要求制备实验样品,每个样品在西门子ADVIA Centaur化学发光免疫分析系统上重复测定2次,利用多项式回归法确定BNP的分析测量范围;通过稀释回收试验确定最大稀释度,结合功能灵敏度和分析测量范围上限确定临床可报告范围.结果 ADVIA Centaur化学发光免疫分析系统的分析测量范围为2.0～5 094 pg/ml,临床可报告范围为2.5～10 188 pg/ml.结论 厂商声明的ADVIA Centaur化学发光免疫系统检测BNP的分析测量范围得到验证确认,但对于超过分析测量范围的高值标本建议用生理盐水做1∶2稀释.     

化学发光法检测半乳糖凝集素3的性能评价及其在心力衰竭中的初步应用

目的评价化学发光法检测半乳糖凝集素3(Gal-3)的分析性能并初步探讨其对心力衰竭(HF)的诊断价值。方法依据相关文件评价化学发光法检测Gal-3的分析性能[空白检测限(LoB)、检出限(LoD)、定量限(LoQ)、精密度、线性范围及抗干扰能力]并验证厂家声明的参考区间,比较年龄、性别和样本类型对化学发光法测定Gal-3的影响。检测55例HF患者(HF组)及80名体检健康者(正常对照组)的血浆Gal-3水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估Gal-3诊断HF的价值。结果 Gal-3试剂(化学发光法)生产厂家声明的LoB、LoD、LoQ分别为0.80、1.0、1.0 ng/mL,验证均通过。重复精密度[以变异系数(CV)表示]为1.9%～4.8%、期间精密度(以CV表示)为2.6%～6.1%,精密度验证通过。在4.07～113.11 ng/mL范围内,化学发光法测定Gal-3呈线性。血红蛋白20 g/L、总胆红素(TB)403.2μmol/L、直接胆红素(DBil)214.08μmol/L、乳糜浊度7 450 FTU对化学发光法检测血清Gal-3无干扰。血浆的Gal-3测定值高于血清(P0.05)。男、女性之间Gal-3水平差异无统计学意义(P0.05)。将研究对象按样本类型(血清、血浆)分组后再按年龄分组,血清组中3个年龄亚组(20～45岁组、45～60岁组、≥60岁组)之间Gal-3水平差异有统计学意义(P0.05),血浆组2个年龄亚组(20～60岁组、≥60岁组)之间Gal-3水平差异有统计学意义(P0.05)。Gal-3水平随年龄增高而升高。HF患者血浆Gal-3水平明显高于正常对照者(P0.001)。ROC曲线分析显示,血浆Gal-3诊断HF的曲线下面积(AUC)为0.969,最佳临界值为20.04 ng/mL,敏感性为85.5%,特异性为100.0%。结论化学发光法检测Gal-3的分析性能良好,需注意的是年龄对Gal-3水平有一定的影响。Gal-3对HF有较高的辅助诊断价值。     

五种肿瘤标志物分析灵敏度的建立

目的对糖抗原724(CA724)、糖抗原242(CA242)、甲胎蛋白(AFP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)进行研究,并建立分析灵敏度。方法通过化学发光法,对上述五种肿瘤标志物的生物检测限(BLD)、功能灵敏度(FS)及检测低限(LLD)进行计算。结果上述五种肿瘤标志物的实际定性检测低限与说明书之间存在一定差异性。结论通过对五种肿瘤标志物分析灵敏度的建立能够报告低限,能够对肿瘤患者的标志物检测结果提供帮助,均具备一定的临床价值。     

化学发光法检测超敏促甲状腺素分析灵敏度的性能验证

目的 对西门子Centaur cp全自动化学发光分析仪测定超敏促甲状腺素(TSH3-Ultra)分析灵敏度的性能进行验证.方法 用促甲状腺素配套稀释液作为空白样品,并以此稀释液对低浓度(浓度值为0.010 0 mIU/L)的新鲜患者血清进行稀释,配置成低浓度系列样品作为分析灵敏度的实验样品.空白样品批内重复测定10次,其他系列样品日间重复测定10次,记录每次检测的发光强度(RLUs),计算检测低限、生物检测限、功能灵敏度等.结果 按99.7%可信限计算,TSH3-Ultra检测低限为0.001 0 mIU/L;按照国际纯粹和化学联合会的规定TSH3-Ultra检测低限为0.001 1 mIU/L,与生产厂家产品说明书声明一致;生物检测限为0.005～0.006 mIU/L,功能灵敏度为0.006 mIU/L,低于生产厂家产品说明书声明的功能灵敏度(0.008 mIU/L).结论 西门子Centaur cp全自动化学发光分析仪检测TSH3-Ultra分析灵敏度的性能与厂家声明性能基本一致.     

卫生行业与医药行业相关标准检出限的异同解析

当体外诊断试剂厂商仅按医药行业标准对某个定性检测项目声明了空白限(LoB)时,临床实验室应完成该项目检出限(LoD)的性能验证。文章对多个医学相关个行业标准中LoD、LoB的定义进行分析,并指出其在各文件中的异同。同时将定性项目中C50浓度、C95浓度与定量项目中LoD、LoB的相互联系进行归纳、整理。