LC-MS/MS法测定人血浆中噻托溴铵的含量及其药动学研究

目的：建立一种高灵敏液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）测定健康志愿者经口吸入噻托溴铵粉吸入剂1粒（18 μg）后血浆中噻托溴铵的含量, 并评价其药代动力学特征。方法：14名健康志愿者空腹经口吸入噻托溴铵粉1粒（18 μg）后采集静脉血,血浆样品在冰浴条件下,加入内标噻托溴铵-d6,再经过含1%甲酸的乙腈溶液蛋白沉淀后,采用ACE Excel 3 AQ（100 mm× 2.1 mm,3 μm,ACE）色谱柱分离,在正离子模式下以多重反应监测方式进行检测。结果：噻托溴铵在（0.1~16）pg·mL-1浓度范围内线性关系良好,健康志愿者吸入噻托溴铵的Cmax为（5.21 ± 3.22）pg·mL-1、AUC0-t和AUC0-∞分别为（30.0 ± 11.8）h·pg·mL-1和（48.8 ± 15.5）h·pg·mL-1, tmax为（0.064 ± 0.035）h,t1/2为（76.0 ± 23.7）h。结论：本方法可用于噻托溴铵吸入粉剂的人体药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中米拉贝隆及其 中国健康人体药动学研究

目的：建立人血浆中米拉贝隆浓度的LC-MS/MS测定方法,并评价其在中国健康受试者体内的药动学特征。方法：在冰浴条件下,经蛋白沉淀法进行血浆样品前处理,采用ACE Excel 3 AQ（2.1 mm × 100 mm）色谱柱,流动相为5.00 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.1%甲酸）及5.00 mmol·L-1醋酸铵-90%乙腈水溶液（含0.1%甲酸）,流速为0.400 mL·min-1;多反应监测正离子模式,米拉贝隆和米拉贝隆-d5的检测反应离子对分别为m/z 397.2→260.0和m/z 402.2→260.0。入选20名中国健康受试者,空腹单次口服米拉贝隆缓释片50 mg,于不同采血时间点将全血采集至含氟化钠的肝素钠采血管中,分离得到血浆样品进行LC-MS/MS检测。结果：血浆中米拉贝隆的线性范围为0.160~85.0 ng·mL-1, 20名受试者单次口服米拉贝隆缓释片50 mg后的药代动力学参数：AUC0-t为(304 ± 136) h·ng·mL-1,AUC0-∞为（342 ± 153）h·ng·mL-1,t1/2为（34.1 ± 6.58）h,tmax为（4.16 ± 1.10）h,Cmax为（35.3 ± 21.7）ng·mL-1。结论：本研究建立了人血浆中米拉贝隆的LC-MS/MS测定方法,该方法快速、灵敏、准确、专属性强,可应用于该药的中国健康受试者人体药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰的浓度及其体内药动学研究

目的建立人血浆中甲磺酸雷沙吉兰(rasagiline mesylate,PAI)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,并应用于研究其在中国健康人体内的药动学特征。方法以氯吡格雷为内标,血浆样品经液-液萃取后,通过三重四级杆串联质谱仪,以选择性正离子反应监测进行测定,检测离子对为m/z172.3→117.1(雷沙吉兰),m/z322.3→184.0(氯吡格雷)。甲磺酸雷沙吉兰线性范围为0.1047~20.93μg·L-1,定量限为0.1047μg·L-1,方法学各项指标均符合要求。应用此法研究24名(男女各半)中国健康志愿者口服甲磺酸雷沙吉兰片的药动学特点及进行了统计学比较。结果结果显示0.5、1.0及2.0 mg 3个剂量组(n=12)甲磺酸雷沙吉兰的吸收呈线性动力学特征;中剂量多次给药后,无蓄积现象;性别对雷沙吉兰主要药动学参数的影响差异也无统计学意义;但高脂饮食对雷沙吉兰的药物峰浓度有明显影响,但对吸收程度无明显影响。结论建立的LC-MS/MS测定法专属、灵敏,满足甲磺酸雷沙吉兰片的人体药动学研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中布洛芬对映体的浓度

目的建立简便、快速、灵敏的LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中手性药物布洛芬浓度的分析方法,进行系统的方法学验证,并用于布洛芬在Beagle犬体内的药代动力学研究。方法以酮洛芬为内标,血浆样品经正己烷(含5%异丙醇)液萃取后,以甲醇:1 mmol·L-1甲酸铵(含0.2%甲酸,10%甲醇)(82∶18,V/V)为流动相,采用Lux 5u Cellulose-3(250 mm·4.6 mm,5μm)柱分离,流速为0.8 m L·min-1。通过电喷雾电离源以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 205.2/161.2(布洛芬)和m/z 253.1/209.2(内标,酮洛芬)。方法验证包括基质效应、提取回收率、线性、定量下限、批内与批间精密度、稳定性、稀释效应等。结果犬血浆中左/右旋布洛芬的线性范围为0.2~50 mg·L-1,最低定量限为0.2 mg·L-1,批内、批间精密度(RSD)介于1.01%~13.1%之间。Beagle犬单次口服给予右旋布洛芬后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC(0-t)分别为:(82.98±14.83)mg·L-1、(3.217±0.7298)h、(362.0±58.67)h·mg·L-1。单次口服给予消旋布洛芬后,其左/右旋布洛芬的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC(0-t)分别为:(70.62±14.81)/(74.48±20.08)mg·L-1、(1.520±0.9286)/(5.432±1.234)h、(177.8±34.18)/(649.6±200.2)h·mg·L-1。结论该方法简便、快速、灵敏度高、重复性好,能够同时测量血浆中左/右旋布洛芬的药物浓度,可用于布洛芬在Beagle犬体内的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑浓度

目的:采用LC-MS/MS法测定人血浆及唾液中伏立康唑的浓度。方法:血浆样品及唾液样品经氢氧化钠碱化,萃取剂萃取后进行分析。使用Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1。结果:线性范围为10～4 000 ng·mL-1,最低定量限为10 ng·mL-1,萃取回收率为81.3%～94.4%,基质效应为-5.35%～1.25%,日内和日间RSD均<7.9%。结论:所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆伏立康唑浓度测定及药代动力学和生物利用度的研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的非洛地平浓度

目的:建立高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中的非洛地平浓度.方法:以非洛地平-d3为内标,血浆样品采用乙腈进行蛋白质沉淀前处理后,采用Waters Xbridge-C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm),以水/甲酸/1 mol·L-1醋酸铵(100/0.2/0.1,v/v/v)、乙腈/甲酸/...     

LC-MS/MS 法测定人血浆中倍他米松

建立测定人血浆中倍他米松的LC-MS/MS方法。采用Venusil XBP C₈ (200 mm×3.9 mm ID, 5 μm)色谱柱，流动相为甲醇-水(含甲酸铵5 mmol·L^-1)(80∶20)，流速0.4 mL·min^-1；质谱仪离子源为电喷雾离子源(ESI)，正离子模式检测，监测离子为393.3→355.2(倍他米松)和361.3→343.2(泼尼松龙,内标)。血浆样本用乙酸乙酯处理。倍他米松在0.5~80.0 ng·mL^-1线性关系良好(r=0.999 2)， 血浆低、 中、 高3种浓度(1.0， 10.0， 60.0 ng·mL^-1)平均提取回收率为88.24%，定量限为0.5 ng·mL^-1。本方法操作简便、准确、灵敏，适用于复方倍他米松注射液人体药代动力学研究。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中乌头碱的浓度

目的:建立LC-MS/MS法检测大鼠血浆中乌头碱的浓度。方法:以维拉帕米作内标,血浆样品经MTBE液液萃取后,采用HyPURITYCyano(150mm×2.1mm,5μm)柱分离,流动相为乙腈:10mmol/L甲酸铵=(70∶30,V/V),流速为0.30mL/min。然后采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,乌头碱和维拉帕米的离子选择通道分别为:m/z646.4→586.4和455.2→164.9。结果:乌头碱的线性范围为9.3～2390pg/mL,最低检测浓度为9.3pg/mL,日内和日间变异均<15%。结论:本方法灵敏度高,适用于乌头碱在鼠内的药物代谢动力学研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中曲札茋苷及其药动学研究

目的:建立LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中曲札茋苷的浓度,并用该方法研究其在Beagle犬体内的药动学特征.方法:以虎杖苷为内标,血浆样品采用甲醇沉淀的方式分离蛋白并离心取上清进样,色谱柱为Kromasil?C18柱(150 mm×2.1 mm).以10 mmol·L-1甲酸铵水溶液和乙腈为流动相,梯度洗脱,...     

LC-MS/MS法测定比格犬血浆中匹莫范色林浓度及药代动力学研究

目的建立一种高效、灵敏的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定匹莫范色林在比格犬血浆中的浓度并应用于药代动力学研究。方法血浆样品用甲基叔丁基醚(MTBE)液液萃取预处理,使用Agilent Eclipse XDB-C 18(4.6 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱进行分离,流动相为乙腈(含0.1%甲酸)-水(含5%乙腈,0.1%甲酸)梯度洗脱,流速为1.2 mL·min-1,分流比为1∶1,质谱检测用电喷雾离子(ESI)源,正离子模式下采用多反应监测(MRM)模式,分析时间为4.5 min。使用WinNonlin 6.1软件的NCA模块计算药动学参数。结果匹莫范色林在0.05~20 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,定量下限为0.05 ng·mL-1,批内和批间精密度良好CV均小于7.1%(LLOQ均小于18.4%),准确度RE均在-6.6%~12.7%之内(LLOQ均在3.8%~19.9%)。结论本方法高效、灵敏、准确,成功用于比格犬血浆中匹莫范色林浓度的测定及其药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定坦索罗辛在比格犬血浆中的浓度及其缓释制剂的药动学研究

目的:建立坦索罗辛血药浓度LC-MS/MS测定方法,并研究坦索罗辛缓释制剂在比格犬体内的药代动力学。方法:6只比格犬空腹单次口服给予含有0.4 mg的盐酸坦索罗辛缓释胶囊,给药前(0 h)、给药后不同时间点各采血0.3 mL,分离血浆后,加入内标愈创木酚甘油醚,经乙酸乙酯萃取,以甲醇:水:甲酸(80∶20∶0.2,V/V/V)为流动相,在反相C18色谱柱进行分离。采用电喷雾离子源(ESI源)的正离子方式检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子反应为m/z409.0→m/z228.0(坦索罗辛)和m/z199.0→m/z125.0(内标,愈创木酚甘油醚)。结果:坦索罗辛在线性范围内0.05～10.0 ng/mL线性良好,定量下限为0.05 ng/mL,批内、批间精密度(RSD)均小于13.4%。盐酸坦索罗辛缓释制剂0.4 mg口服给药后AUC0-24 h为(7.82±1.92)ng.h.mL-1、AUC0-∞为(8.04±2.02)ng.h.mL-1t、1/2为(2.96±2.13)h。结论:LC-MS/MS法灵敏度高、分析快速,适用于比格犬血浆中坦索罗辛的药动学研究,坦索罗辛缓释胶囊口服给药后半衰期短,消除快。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的替加色罗及其药动学

目的建立人血浆中替加色罗LC-MS/MS测定法,进行人体药动学研究。方法测定24名健康受试者口服受试制剂(单剂量、多剂量)后血浆中替加色罗浓度。结果单剂量口服替加色罗(4、6、12mg)后药动学参数:t(1/2)β为(2.92±0.89)、(3.81±0.84)、(3.3±0.47)h;t_(max)为(1.06±0.28)、(1.00±0.26)、(1.00±0.18)h;ρ_(max)为(1.23±0.47)、(2.34±0.60)、(4.24±1.71)μg·L~(-1);AUC_(0→12)为(3.04±0.91)、(5.21±1.13)、(9.29±3.37)μg·h·L~(-1);MRT为(3.57±0.81)、(3.91±0.65)、(3.34±0.48)h;替加色罗多剂量(6mg,bid)药动学参数t_(max)为(0.96±0.10)h,ρss_(max)为(2.60±0.53)μg·L~(-1),pss_(min)为(0.07±0.01)μg·L~(-1),ρ_(av)为(0.51±0.11)μg·L~(-1),AUC_(0→12)为(6.13±1.3)μg·h·L~(-1)。结论本方法结果准确、灵敏,替加色罗在大部分人体内的过程符合二室开放模型,其主要药动学参数与国内外文献相近。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中伪麻黄碱及其药动学研究

目的建立人血浆中伪麻黄碱含量的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定法,并对其进行人体药动学研究。方法血样用甲醇沉淀、离心后进行质谱分析,色谱柱：Agilent ZORBAX SB C18（100 mm×3.5 mm,3.0μm）;流动相：甲醇-水（含10 mmol.L-1乙酸铵,0.05%甲酸）=28∶72（v/v）;质谱条件：气动辅助电喷雾离子化（ESI）,正离子检测,选择性多反应检测（SRM）：伪麻黄碱,166.1〉148.1;内标：帕罗西汀,330.1〉192.1。测定20名健康受试者口服受试制剂（单剂量、多剂量）后血浆中伪麻黄碱浓度。结果线性范围1-600μg.L-1,最低定量限（LLOQ）为1.0μg.L-1,绝对回收率为85.8%-87.6%。单剂量口服伪麻黄碱（120、240 mg）后药动学参数：t1/2为（6.8±0.9）、（6.6±1.3）h,tmax为（6.1±1.6）、（7.4±3.8）h,Cmax为（210.44±41.59）、（465.26±87.65）μg.L-1,V为（398.12±91.05）、（353.52±102.34）L,CL为（42.57±9.02）、（39.69±8.87）L.h-1,AUC0-48为（3 256.12±711.26）、（6 954.52±1 955.27）μg.h.L-1,MRT0-48为（11.71±0.89）、（11.87±1.26）h;伪麻黄碱多剂量（120 mg,bid）药动学参数：Cmax为（398.08±102.56）μg.L^-1,V为（309.66±82.37）L,CL为（37.51±7.23）L.h^-1,AUC0-48为（5 463.24±2 256.39）μg.h.L^-1,Cav为（282.11±92.19）μg.L-1,DF为（0.61±0.15）,AUCss为（3 372.85±1 328.78）μg.h.L^-1。结论本方法结果准确、灵敏,伪麻黄碱主要药动学参数与国内外文献报道基本一致。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的金刚烷胺浓度及其药动学

目的建立HPLC-MS/MS分析方法测定人血浆中的金刚烷胺浓度,并用于研究健康受试者口服氨酚咖黄烷胺片后金刚烷胺的药动学。方法血浆经乙醚-二氯甲烷(4∶1,V/V)提取,采用C18柱为分析柱,甲醇-10 mmol.L-1醋酸铵溶液-冰醋酸(60∶40∶0.08,V/V/V)为流动相,流速1.0 mL.min-1,柱后分流,0.2 mL.min-1进入质谱,柱温35℃。质谱检测方式:多反应离子监测,选择监测的离子为m/z152→m/z135(金刚烷胺)和m/z275→m/z230(内标物,氯苯那敏)。结果金刚烷胺的线性范围为1~200μg.L-1(r=0.9999),血浆中金刚烷胺的最低定量限达1μg.L-1(RS,N>10),回收率>80%。结论本法简便、准确、灵敏度高,适用于金刚烷胺的药动学研究。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆内尼可地尔浓度及其药动学研究

目的:建立LC-MS/MS法测定尼可地尔在大鼠血浆中的浓度,并初步研究其在大鼠体内的药动学行为。方法:血浆样品以甲醇沉淀,采用Kromasil 100-5-C18(2.1 mm×150 mm,5.0μm)色谱柱进行色谱分离。以甲醇-含甲酸铵和甲酸的水溶液为流动相,流速0.3 mL·min-1,进样量4μL,LC-MS/MS分析,分别以m/z 212.1→136.0和m/z 271.2→172.2为尼可地尔和内标(甲苯磺丁脲)的质谱检测条件。大鼠灌服10 mg·kg-1尼可地尔后,不同时间点取样测定其血浆中尼可地尔的浓度。由DAS 2.0计算药动学参数。结果:尼可地尔质量浓度在5.0~2 000.0 ng·mL-1内线性关系良好(r=0.997 9,权重1/X2);定量下限为5.0 ng·mL-1;尼可地尔和内标的提取回收率均高于95%,日内、日间的RSD均小于15%;尼可地尔血浆样品在室温放置4 h,-70℃冰箱放置15 d以及预处理后室温放置24 h的变化率均小于15%。大鼠口服灌胃尼可地尔(10 mg·kg-1)后,尼可地尔在大鼠体内吸收较快,达峰时间约为0.3 h,达峰浓度约为15.0μg·m L-1。结论:建立的LC-MS/MS方法适合于尼可地尔的药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中米格列奈浓度及其药动学研究

目的建立一种快速分析测定人血浆中米格列奈的液相色谱-串联质谱色谱法,用以研究米格列奈在健康人体内的药动学。方法以那格列胺为内标,血浆酸化后经液液萃取后,采用液相色谱-串联质谱法以多反应检测方式进行测定,选择监测的离子为m/z 316.2→298.2(米格列奈)和m/z 318.2→120.2 (那格列胺)。流动相以甲醇-10 mmol·L~(-1)醋酸铵水溶液(75:25,V/V),流速0.3 mL·min~(-1),色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C_(18)(1.8μm,3 mm×150 mm);柱温:30℃。结果米格列奈在0.502 0～4 016μg·L~(-1)浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.995),最低检测浓度为0.502 0μg·L~(-1),精密度和准确度试验均符合生物分析要求,应用此法测得5、10、20 mg剂量组不同给药方式、多个时间点的米格列奈血药浓度,结果呈线性动力学特征。结论该方法灵敏度高、专属性强、准确、简便,适用于米格列奈的人体药动学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中奥美拉唑的血药浓度及其药动学

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中奥美拉唑的血药浓度并进行药动学研究。方法:以兰索拉唑为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经LC-MS/MS分离分析。采用Diamonsil C₁₈柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),甲醇-水(含0.01%甲酸)(67:33)为流动相;流速为0.3 ml·min^-1,采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行负离子监测,奥美拉唑和兰索拉唑的定量分析离子对分别为m/z 344.2/193.8,367.9/163.8。结果:奥美拉唑在3.38~2 110.00 ng·ml^-1 (r=0.997 1)范围内线性关系良好,最低定量限为3.38 ng·ml^-1,方法回收率在92.48%~99.39%,日内(n=5)RE均小于3.96%,日间(n=15)RE均小于6.41%。结论:该方法快速简便,灵敏准确,可用于奥美拉唑血药浓度监测和药动学研究。     

LC-MS/MS法测定家兔血浆中多奈哌齐的浓度

目的建立测定家兔血浆中多奈哌齐浓度的LC-MS/MS法,并用该法研究多奈哌齐在家兔体内的药动学特征。方法色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-5 mmol·L^(-1)醋酸铵溶液-甲酸(体积比为50.0:50.0:0.1),采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定家兔给予多奈哌齐贴剂后血浆中的药物浓度。结果血浆中多奈哌齐质量浓度在1.0～500.0μg·L(-1)醋酸铵溶液-甲酸(体积比为50.0:50.0:0.1),采用沉淀蛋白法处理血浆样品,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测,测定家兔给予多奈哌齐贴剂后血浆中的药物浓度。结果血浆中多奈哌齐质量浓度在1.0～500.0μg·L^(-1)内线性关系良好(r=0.996 5);日内精密度RSD≤7.9%,日间精密度RSD≤6.4%;平均提取回收率为(95.1±7.1)%(n=6),基质效应为(109.9±2.8)%(n=6)。多奈哌齐贴剂在家兔血浆中主要药物动力学参数如下:t_(1/2)为(28.2±11.4)h,ρ_(max)为(0.353±0.101)mg·L(-1)内线性关系良好(r=0.996 5);日内精密度RSD≤7.9%,日间精密度RSD≤6.4%;平均提取回收率为(95.1±7.1)%(n=6),基质效应为(109.9±2.8)%(n=6)。多奈哌齐贴剂在家兔血浆中主要药物动力学参数如下:t_(1/2)为(28.2±11.4)h,ρ_(max)为(0.353±0.101)mg·L^(-1),AUC_(0-168)和AUC_(0-∞)分别为(15.6±6.4)和(15.7±6.4)mg·h·L(-1),AUC_(0-168)和AUC_(0-∞)分别为(15.6±6.4)和(15.7±6.4)mg·h·L^(-1)。结论该方法适用于多奈哌齐在家兔体内药物动力学的研究。