油酸诱导HepG_2细胞脂肪变性模型的建立

目的:以Hep G2细胞为实验材料,用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型。方法:用不同浓度的油酸培养Hep G2细胞,采用MTT法确定引起肝细胞脂肪变性的油酸的最佳浓度,用油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,并检测细胞内TG的含量和培养液的ALT、AST的水平,实时定量PCR检测CPT-1、FAS、IL-6m RNA的表达。结果:用含0.25m M浓度的油酸的培养基培养Hep G2细胞24h,光镜下可见Hep G2细胞内有脂滴形成,模型组中细胞内TG含量及培养液中AST较对照组增高,差异有统计学意义。模型组较对照组CPT-1m RNA表达增高,FASm RNA表达降低,IL-6m RNA表达增高,差异均有统计学意义。结论:通过油酸建立的体外非酒精性脂肪肝模型,可较好地模拟人脂肪肝的主要特征,为脂肪肝的研究提供了简便的方法。     

泽泻汤对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的抑制作用

目的评价泽泻汤95%乙醇、50%乙醇和水提取物抑制HepG2肝细胞脂肪累积能力。方法采用油酸诱导HepG2细胞脂肪累积建立模型,以噻唑兰染色和油红O染色法吸光度值为指标,结合细胞内脂滴形态,评价泽泻汤对油酸诱导HepG2细胞脂肪累积的干预作用。结果泽泻汤提取物作用HepG2细胞后,经染色后均发现细胞内脂滴明显减少,且质量浓度越高脂类含量越少,50%乙醇提取物和水提物在终质量浓度160、320μg/m L时,细胞内脂滴与模型组相比明显降低(P0.01),95%乙醇提物80μg/m L作用细胞24 h后,细胞内脂滴较模型组有减少(P0.05)。结论 3种泽泻汤提取物均能够减少细胞内脂肪的堆积,其中以50%乙醇提取物对HepG2细胞脂肪堆积抑制能力最强。     

大鼠酒精性脂肪肝模型的建立

目的探索一种相对简单可靠的方法制作大鼠酒精性脂肪肝模型。方法采用乙醇灌胃法结合高脂饮食,在6周时间内建立酒精性脂肪肝模型。HE染色观察肝脏病理学改变;全自动生化分析仪分析血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,总胆红素(TBIL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量;生化法测定肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性以及丙二醛(MDA)含量、肝脏甘油三酯(TG)水平。结果 6周末,酒精引起了明显的肝脏脂肪变性;血清ALT活性以及TBIL、TG水平升高;肝匀浆SOD、GPx活性降低,MDA含量升高;肝组织TG含量升高。结论采用高脂饮食结合酒精灌胃法,可成功制作大鼠酒精性脂肪肝模型。     

绞股蓝多糖对HepG_2细胞酒精性损伤的保护作用

目的研究绞股蓝多糖对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用及可能作用机制。方法在HepG2细胞培养液中加入不同浓度的绞股蓝多糖,作用5h后,再加入无水乙醇,建立细胞损伤模型,继续培养12h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,同时比较各组细胞丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化;Hoechst33342进行细胞凋亡形态学染色。结果不同浓度的绞股蓝多糖均可以提高损伤后HepG2细胞的存活率,抑制AST、ALT水平的升高,减少MDA的形成,提高SOD的活性,减少细胞凋亡。结论低剂量的酒精能引起HepG2细胞的凋亡,绞股蓝多糖对HepG2细胞酒精性损伤具有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、对抗脂质过氧化有关。     

降糖复方对脂性肝细胞损伤与高脂血症的保护作用

目的：研究降糖复方对脂肪酸诱导的HepG2细胞脂性损伤与鹌鹑高脂血症的保护作用。方法：采用高脂饲料诱导鹌鹑实验性高脂血症模型以及采用棕榈酸与油酸混合脂肪酸诱导HepG2细胞发生脂肪损伤变性,结合含药血清学,检测细胞与血清中TG、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力,以及血清中高密度脂蛋白胆固醇（HLD-C）含量;油红O染色,观察细胞内脂质聚集情况;检查鹌鹑动脉内膜病理变化。结果：降糖复方明显减少高血脂鹌鹑动脉内膜粥样硬化斑块和抑制内膜病变程度,降低HepG2细胞内脂质堆积,降低细胞与血清中TG、MDA的含量,并调节SOD活性。结论：降糖复方显著抑制细胞的脂质蓄积,减轻鹌鹑高脂血症和动脉粥样斑块的形成。     

马齿苋对大鼠脂肪肝的治疗和预防作用

目的:研究马齿苋对大鼠肝脏的保护作用。方法:取标准雄性大鼠60只,随机分为6组:即1正常对照组2大鼠高脂乳剂组3脂肪肝模型+马齿苋高剂量组4高脂乳剂+马齿苋低剂量组5高脂乳剂+马齿苋中剂量组6高脂乳剂+马齿苋高剂量组。试验结束腹主动脉采血,测定血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)含量及超氧化合物歧化酶(SOD)活力。结果:1与正常对照组比较,高脂乳剂组TG、TC、AST、ALT、MDA水平升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01);2与正常对照组比较,脂肪肝模型+马齿苋高剂量组TG、TC、AST、ALT、MDA、SOD水平相当,无统计学差异(P>0.05);3与高脂乳剂组比较,马齿苋中、高剂量组TG、TC、AST、ALT、MDA水平降低(P<0.01),SOD活性升高(P<0.01);4马齿苋中剂量组和正常对照组相比各项指标均无统计学差异(P>0.05)。结论:马齿苋具有治疗脂肪肝和预防脂肪肝的作用。     

玉郎伞多糖对抗结核药诱导肝细胞损伤的保护作用

目的 研究玉郎伞多糖(Y LSPS)对抗结核药诱导的肝细胞损伤的保护作用.方法 将不同浓度的利福平、异烟肼及吡嗪酰胺合用(RFP+ INH+ PZA)作用于人张氏肝细胞,用MTT法检测肝细胞的存活率,以80％ ～ 85％存活率的药物浓度为最佳浓度建立肝细胞损伤模型;给予YLSPS处理后,检测细胞培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)和细胞内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的浓度.结果 与模型组比较,YLSPS各剂量可明显降低肝细胞培养上清液中的AST、ALT、LDH水平及肝细胞中MDA的含量,升高SOD的水平,且呈剂量依赖性.结论 YLSPS对RFP+ INH+ PZA合用诱导张氏肝细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化和清除自由基的作用有关.     

栀子大黄汤抗酒精性肝损伤的体内外实验

目的评价栀子大黄汤(Zhi-Zi-Da-Huang decoction,ZZDHD)抗酒精性肝损伤的药效作用。方法建立体外酒精性大鼠肝细胞损伤模型,考察ZZDHD含药血清对损伤肝细胞的增殖(methylthiazoletrazolium,MTT)及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)泄漏的影响。建立酒精性大鼠肝损伤体内模型,不同剂量给药后测定血清ALT,谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和甘油三酯(triglyceride,TG)及肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量与活性,并进行肝组织病理学检查。结果体外细胞试验中,体积分数为20%的含药血清能非常显著提高损伤肝细胞的增殖能力并降低细胞ALT泄漏(P<0.01),其活性最佳。大鼠体内,ZZDHD高、中剂量组均能不同程度地降低由酒精诱导的血清ALT、AST和TG水平的升高(P<0.01或P<0.05);均能非常显著性降低受损肝组织中的MDA含量(P<0.01),升高肝组织SOD活力和GSH含量(P<0.01),同时组织病理学也得出上述一致的结论。结论 ZZDHD对酒精性肝损伤具有明显的防治作用,其作用机制可能与减轻自由基和脂质过氧化物对肝细胞的损伤有关。     

亚慢性氯乙烯染毒联合高脂饮食对小鼠肝脂肪变性的研究

目的探讨低浓度氯乙烯、高脂饮食以及二者联合对小鼠肝脂肪变性的影响。方法 40只健康SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为氯乙烯暴露组(800 mg/m~3)、高脂饮食组、高脂饮食与氯乙烯联合暴露组(800 mg/m~3)和阴性对照组,每组10只,静式吸入染毒13周。观察记录小鼠体重变化,进行肝组织病理学检查[油红O染色和苏木素-伊红(HE)染色],测定小鼠肝脏系数、血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和极低密度脂蛋白(VLDL)的浓度、血清与肝中甘油三酯(TG)及胆固醇(CHO)含量。检测肝中CYP2E1的活性,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量。结果氯乙烯暴露组出现了轻微散在的脂肪空泡样变性,高脂组、高脂氯乙烯联合暴露组肝细胞脂肪变性更为严重。氯乙烯暴露组ALT和AST水平均高于对照组,联合组AST和ALT水平高于高脂组与对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,各组小鼠血清及肝组织CHO含量增加,联合组肝组织CHO高于高脂组与氯乙烯组,差异具有统计学意义(P0.05)。联合组血清及肝组织TG水平高于对照组、高脂组和氯乙烯组,差异具有统计学意义(P0.05)。各组小鼠CYP2E1水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,联合组MDA含量升高, SOD和GSH活性下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论低浓度氯乙烯与高脂饮食共暴露能增强小鼠的肝脂肪变性。     

狗肝菜多糖P2B对CCl4致L-02肝细胞损伤的保护作用

摘 要 目的：探讨狗肝菜多糖（P2B）对四氯化碳(CCl₄)诱导的肝L 02细胞损伤的保护作用。方法: 培养人肝L-02细胞,建立CCl₄肝细胞损伤模型,分组实验：正常对照组、CCl₄损伤组和不同浓度的P2B(0.125、0.25和0.5 mg·ml^-1)样品组。采用MTT法检测生化分析培养液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）以及细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果: 与CCl₄损伤组相比,各P2B样品组细胞活力明显增强,上清液中ALT、AST活性明显降低;细胞内SOD明显升高、MDA含量降低。结论:P2B对CCl₄诱导的体外L 02肝细胞损伤均具有保护作用,随着浓度的增加,作用也随着增强,其机制可能与其抗氧化作用有关。