不同干预疗法对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构影响的对比研究

目的:对比观察跑台运动、全身垂直振动、金雀异黄酮和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨微结构的影响,为绝经后骨质疏松的防治提供理论参考依据。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组(10只)和去卵巢组(50只)。去卵巢10周时,将去卵巢组大鼠按体重分层后又随机分为去卵巢组、跑台运动组、振动训练组、金雀异黄酮组和雌激素组,并开始进行不同的干预处理。干预处理8周时,腹主动脉取血处死各组大鼠,游离左股骨和第5腰椎,从每组随机取6只大鼠的左股骨和第5腰椎行micro-CT扫描及三维结构重建,选取股骨远端和第5腰椎椎体距生长板1 mm处,2.0mm×3.5 mm、厚0.9 mm的骨组织区域为感兴趣区域,进行骨形态计量学分析。结果:与去卵巢组比较,去卵巢大鼠经全身垂直振动和雌激素干预后,股骨体积骨密度(v BMD)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁数目(Tb.N)显著增加,骨小梁间隙(Tb.Sp)显著下降,骨小梁厚度(Tb.Th)和结构模型指数(SMI)无显著变化。经跑台运动和金雀异黄酮干预后,Tb.Sp显著下降,其他指标无显著变化;去卵巢大鼠经跑台运动、全身振动、金雀异黄酮和雌激素干预后,第5腰椎所有检测指标均无显著变化。结论:全身垂直振动和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨微结构的改善效应大于跑台运动和金雀异黄酮,且对股骨的改善效应大于腰椎。     

蛇床子总黄酮对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨密度及生物力学的影响

目的探讨蛇床子总黄酮对去卵巢（OVX）骨质疏松大鼠股骨骨密度及股骨生物力学的影响。方法40只6、7月龄雌性SD大鼠随机分为4组：假手术（SHAM）组,去卵巢（OVX）组,OVX＋已烯雌酚（E）组和OVX＋蛇床子总黄酮组,每组10只。实行手术后,于术后第三天开始灌胃用药。90天后处死大鼠,取左测股骨进行股骨骨密度和股骨生物力学的测量。结果去卵巢后股骨骨密度及股骨生物力学指标明显下降;用蛇床子总黄酮后,股骨骨密度及股骨生物力学指标均增高。结论蛇床子总黄酮对去卵巢（OVX）造成的骨质疏松有一定的防治作用,能防止骨生物力学性能的受损,效果略逊色于已烯雌酚。     

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠血清和骨组织碱性磷酸酶水平的影响

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠血清和骨组织碱性磷酸酶水平的影响。方法:将36只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢振动三组。去卵巢10周后,去卵巢振动组每天进行2次全身垂直振动治疗,振动频率90 Hz,时间15 min。治疗7周时,采用双能Χ线骨密度仪检测各组大鼠左侧离体股骨骨密度,用721分光光度计检测血清和右侧股骨远端碱性磷酸酶水平。结果:与假手术组比较,去卵巢静止组血清碱性磷酸酶水平显著增加,股骨远端碱性磷酸酶水平以及离体股骨近端和远端的骨密度显著下降,而离体股骨中段骨密度无显著变化。与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组离体股骨远端碱性磷酸酶水平以及股骨近端和远端骨密度显著增加,而血清碱性磷酸酶水平和离体股骨中段骨密度无显著变化。结论:全身垂直振动可能通过增加骨组织碱性磷酸酶水平改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度。     

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓细胞分化的调节作用

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓细胞分化的调节作用.方法:将36只3月龄雌性未孕SD大鼠按体重分层后随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢振动3个组.去卵巢手术后10周,去卵巢振动组大鼠经过1周适应振动治疗后,开始接受正式全身垂直振动治疗,每次振动15 min、频率为90 Hz,每天振动2次,每周7次.治疗7周时,用721分光光度计检测血清碱性磷酸酶和甘油三酯水平;常规HE染色观察左侧胫骨组织形态学;收集右侧股骨和胫骨骨髓细胞,一部分细胞用作碱性磷酸酶和油红O染色,另一部分细胞用作尼罗红(Nile Red)染色.结果:与假手术组比较,去卵巢静止组骨髓细胞碱性磷酸酶阳性染色细胞数目显著降低,而骨髓细胞Nile Red阳性染色细胞百分比和胫骨骨髓脂肪空泡数目显著增加;与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组骨髓细胞碱性磷酸酶阳性染色细胞数目显著增加,而骨髓细胞Nile Red阳性染色细胞百分比和胫骨骨髓脂肪空泡数目显著下降.结论:全身垂直振动不仅增加去卵巢骨质疏松大鼠骨髓细胞的成骨分化能力,而且降低去卵巢骨质疏松大鼠骨髓细胞的成脂分化能力.     

不同强度运动与雌激素联合作用对去卵巢大鼠腰椎超微结构影响的扫描电镜观察

目的 :探讨不同强度运动与雌激素联合作用对去卵巢所致骨质疏松大鼠腰椎超微结构的影响。方法 :成年雌性SD大鼠分正常对照组 (SHAM )、骨质疏松对照组 (OVX)、雌激素对照组(OVX +ES)、中等强度运动组 (OVX +EX1)、大强度运动组 (OVX +EX2 )、中等强度运动加雌激素组(OVX +ES +EX1)和大强度运动加雌激素组 (OVX +ES +EX2 )。用扫描电镜观察 8周不同强度运动及运动和雌激素联合作用对腰椎松质骨的影响。结果 :两个运动加雌激素组腰椎骨小梁数量较两个单纯运动组、雌激素对照组及骨质疏松对照组增多 ,骨小梁表面吸收面减少 ,胶原排列规律、整齐。大强度运动组骨小梁发生板结、出现微骨折且空间结构被破坏。结论 :雌激素和运动联合作用比单纯用药或单纯运动能起到更好的预防椎体骨丢失及改善椎体超微结构的作用     

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎转录因子Osterix蛋白表达的影响

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎转录因子Osterix蛋白表达的影响,探讨全身垂直振动治疗绝经后骨质疏松的作用机制。方法:将36只3月龄健康雌性未孕SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、去卵巢静止组(OVX组)和去卵巢振动组(WBV组),每组12只。手术后10周,WBV组开始接受全身垂直振动治疗。振动频率90 Hz,重力加速度3.8 g,振幅0.5 mm,每天2次,每次15 min,每周7天,振动7周。振动结束后,腹主动脉取血处死各大鼠,按解剖位置分离第2腰椎(L2)和第3腰椎(L3)。用HE染色观察L2组织形态学变化;用TRAP染色法对L2石蜡切片破骨细胞进行染色并计数;用免疫组化检测L2转录因子Osterix定位变化;用Western blot检测L3转录因子Osterix蛋白表达水平的变化。结果:与Sham组和WBV组比较,OVX组大鼠腰椎骨髓腔脂肪空泡数目、骨小梁表面破骨细胞数目显著增加,而转录因子Osterix蛋白表达显著下降。结论:全身垂直振动能降低去卵巢骨质疏松大鼠腰椎破骨细胞的数目,增强腰椎转录因子Osterix蛋白的表达。     

大豆异黄酮和运动对去卵巢大鼠股骨骨密度的影响

目的:探讨大豆异黄酮与中等强度运动联合作用对去卵巢大鼠骨密度的影响。方法:将50只12周龄雌性Wistar大鼠按体重随机分为假手术组(Sham,正常对照组)、去卵巢组(OVX)、去卵巢+大豆异黄酮组(OVX+IF)、去卵巢+运动组(OVX+EXE)及去卵巢+大豆异黄酮+运动组(OVX+EXE+IF),每组10只。补药组大鼠以50mg/kg体重大豆异黄酮灌胃,其余组以等量溶剂灌胃。各运动组大鼠进行跑台训练。实验期包括2周适应期和8周训练期。实验前后称重。实验结束后处死大鼠,测量其股骨骨密度。结果:实验后,去卵巢组大鼠体重显著高于假手术组(P<0·01),去卵巢+运动组和去卵巢+大豆异黄酮+运动组大鼠体重均显著低于去卵巢组(P<0·05)。去卵巢组大鼠股骨骨密度显著低于假手术组(P<0·01)。去卵巢+运动组和去卵巢+大豆异黄酮组大鼠股骨骨密度与去卵巢组相比显著增加(P<0·05,P<0·01)。去卵巢+大豆异黄酮+运动组大鼠的股骨骨密度非常显著高于去卵巢组(P<0·001)。结论:大豆异黄酮和运动联合对抑制去卵巢大鼠骨密度减少有一定协同作用。     

不同强度运动和雌激素联合作用对去卵巢大鼠骨骼生物力学性能的影响

目的:探讨不同强度运动和雌激素联合作用对去卵巢大鼠骨骼生物力学性能的影响。方法:将80只成年雌性SD大鼠按体重随机分为基础对照组、假手术组、骨质疏松对照组、雌激素对照组、低强度运动组、低强度运动加雌激素组、中等强度运动组、中等强度运动加雌激素组、大强度运动组以及大强度运动加雌激素组,利用858BIONIX生物力学检测系统测定8周实验后各组大鼠股骨颈最大载荷、第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷。结果:(1)与假手术组比,骨质疏松对照组的股骨颈最大载荷、第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷3项力学性能指标分别降低了50%、40%和27%(P<0·05)。(2)与骨质疏松对照组和雌激素对照组比,大鼠去卵巢后3种强度的单纯运动组和运动加雌激素联合组股骨颈最大载荷均显著增加(P<0·05),且随运动强度的增加而增加(P<0·05);相同强度下,运动加雌激素联合组的股骨颈最大载荷与单纯运动组无显著性差异。(3)单纯大强度运动组的第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷较骨质疏松对照组和雌激素对照组显著增加(P<0·05);低强度运动加雌激素组第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷两项力学指标既显著高于单纯低强度运动组(P<0·05),也显著高于雌激素对照组(P<0·05)。中等强度运动加雌激素组的第2腰椎最大凹入载荷显著高于单纯中等强度运动组(P<0·05)及雌激素对照组(P<0·05)。结论:单纯运动对力直接作用部位的力学性能———股骨颈最大载荷的影响大于单纯补充雌激素,运动和雌激素无明显协同作用;对于非力直接作用部位的力学性能———第2腰椎最大凹入载荷及第3腰椎最大压缩载荷,运动和雌激素联合有一定的协同作用。     

去卵巢大鼠骨密度与骨生物力学关系的探讨

绝经后骨折的发生率随骨矿密度的降低而增加[1,2],骨骼由大量的钙(Ｃａ)、磷(Ｐ)等矿物质构成,为了解绝经前后骨密度(ＢＭＤ)变化与生物力学的关系,本研究用双光子骨密度仪动态测定去势前、后的大鼠骨密度,同时测定血清钙、磷、镁及生物力学指标。1　材料和方法11　实验动物和喂养　Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠,10周龄,体重120～170ｇ,每组12只,按体重随机分为2组,1组为实验(切除卵巢)组,第2组为对照组(假书术),动物双鼠喂养,自由进食。16周末去卵巢,第32周末,骨动脉取血,处死。12　实验方法121　双光子骨密度测定(ＢＭＤ)　美国Ｗｉｓｃｏｓｉｎ…     

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓细胞PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞和骨髓基质干细胞PPARγ和PGSK-3β蛋白表达的影响。方法:36只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢振动3组。去卵巢手术10周后,去卵巢振动组大鼠开始每天进行2次时间15 min、频率90 Hz的全身垂直振动治疗。振动治疗7周时,腹主动脉取血处死大鼠,迅速在无菌条件下截取双后肢,冲洗骨髓细胞,一部分细胞直接提取蛋白,另一部分细胞采用全骨髓方法培养后再提取蛋白。采用Western blotting方法检测提取蛋白中的PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达水平。结果:(1)与假手术组比较,去卵巢静止组全骨髓细胞PPARγ蛋白表达无显著差异,而P-GSK-3β蛋白表达显著降低;与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组全骨髓细胞PPARγ蛋白表达无显著差异,而P-GSK-3β表达显著增加。(2)与假手术组比较,去卵巢静止组骨髓基质干细胞PPARγ蛋白表达无显著差异,而P-GSK-3β表达显著降低;与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组骨髓基质干细胞PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达均无显著差异。结论:全身垂直振动能促进去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞P-GSK-3β蛋白表达,但其效应在体外培养后消失。     

不同强度运动与雌激素联合作用对去卵巢大鼠股骨上端超微结构影响的扫描电镜观察

目的 :探讨不同强度运动与雌激素联合作用对去卵巢大鼠股骨上端超微结构的影响。方法 :成年雌性SD大鼠分为正常对照组 (SHAM )、骨质疏松对照组 (OVX)、雌激素对照组 (OVX +ES)、中等强度运动组 (OVX +EX1)、大强度运动组 (OVX +EX2 )、中等强度运动加雌激素组 (OVX +ES +EX1)和大强度运动加雌激素组 (OVX +ES +EX2 )。用扫描电镜观察 8周不同强度运动及运动和雌激素结合对股骨上端松质骨的影响。结果 :与骨质疏松对照组比 ,中等强度运动组股骨上端骨量增多、保持更好的微结构 ,而大强度运动组骨量及空间结构无变化。两个运动加雌激素组股骨上端骨小梁数量较两个单纯运动组、雌激素对照组及骨质疏松对照组增多 ,骨小梁表面吸收面减少 ,胶原排列规律、整齐。结论 :中等强度运动对去卵巢大鼠股骨上端骨量和骨微结构产生良好影响 ,而大强度运动的影响依赖于是否补充雌激素 :当去卵巢大鼠补充雌激素时大强度运动对骨量及骨结构产生积极作用 ,当去卵巢大鼠缺乏雌激素时大强度运动产生副作用。     

不同强度运动对去卵巢大鼠骨量的影响及其机理

以成年SD大鼠去卵巢建立骨质疏松模型,用骨形态计量学方法,研究了8周的大强度和中等强度(分别为20m/min和30m/min,1h/day,5d/week)跑台运动对大鼠胫骨近心干骺端松质骨骨量的影响.结果去卵巢安静组大鼠骨量减少(%Tb.Ar-75%,p＜0.01;Tb.N-74%,p＜0.01),骨形成增加(BFB/BS+115%,BFR/BV+123%,P＜0.01)、骨吸收增加(Oc.No+229%,p＜0.01),为高转换型的骨代谢.中等强度运动的去卵巢大鼠比去卵巢安静大鼠骨形成减少(%L.Pm-42%,BFR/BS-36%,P＜0.05),骨吸收减少(Oc.No-42%,p＜0.05),高转换受到抑制,骨量增加(%Tb.Ar+53%,p＜0.05;Tb.N+69%,p＜0.01),但仍比正常组大鼠骨量降低(%Tb.Ar-61%,p＜0.01).去卵巢后大强度运动与去卵巢安静组大鼠各项指标相比无显著性差异(p＞0.05),与中等强度运动比骨形成增加(BFR/BS+121%,P＜0.01),骨吸收增加(Oc.No+103%,p＜0.05),骨量减少(%Tb.Ar-37%,p＜0.05),仍为高转换型骨代谢.结论大鼠去卵巢后中等强度运动通过抑制高骨转换可减少骨丢失,减轻骨质疏松的程度,大强度运动对减轻骨质疏松的程度无作用.     

不同强度运动对去卵巢大鼠股骨下端松质骨影响的扫描电镜观察

以成年大鼠去卵巢建立骨质疏松模型，利用扫描电镜观察了８周的中等强度和大强度跑台运动对去卵巢大鼠股骨下端松质骨超微形态结构的影响。结果：大鼠去卵巢后两种强度的运动均比非运动组大鼠骨小梁数目增多，以中等强度运动更明显；骨小梁厚度增加，以大强度组更明显，大强度组骨小梁发生片层状改变。中等强度运动组骨吸收面积减小，骨小梁表面骨胶原纤维排列更整齐。大强度组裂纹及微骨折增多。结论：中等强度运动对去卵巢大鼠股骨下端松质骨超微结构产生了更好的作用。     

局部植入BMP对去势大鼠股骨近端生物力学强度及髓腔面积变化的影响

目的探讨去势大鼠股骨近段植入牛骨形成蛋白(bone morphorgeneic protein,BMP)后其骨生物力学强度及髓腔面积的变化。方法随机选取6月龄wistar雌性大鼠22只,摘除卵巢制作绝经后骨质疏松模型成功后,同一只动物双侧肢体对照,试验侧股骨颈植入牛骨形成蛋白及纤维蛋白(FS)复合物,对照侧植入纤维蛋白,术后4周、8周处死取材,测量股骨近端生物力学强度及髓腔面积和截面面积。结果4周后,试验侧与对照侧股骨近端骨生物力学强度和髓腔面积无明显差异;8周后,试验侧股骨近端生物力学强度较对照侧增高;髓腔面积较对照侧有较明显的减小(P<0.05)。结论股骨近端局部植入BMP可提高去势大鼠股骨近端局部的生物力学强度和减小近端髓腔面积和截面积,其可能减少骨质疏松性髋部骨折置换后假体的松动,成为骨质疏松性骨折假体置换中新的辅助治疗方法。     

低强度复合振动治疗去卵巢老龄大鼠骨质疏松实验研究

目的:观察低强度复合振动对去卵巢老龄大鼠骨质疏松的治疗作用。方法:13月龄SD雌性经产大鼠16只,随机均分为对照组和实验组。卵巢摘除法骨质疏松造模,3个月后检查骨密度(BMD)下降后实验组接受低强度复合振动(振动频率45 Hz～55 Hz,振动强度0.12 g～0.21 g,g=9.8 m/s2,20分钟/次/天,5天/周),对照组不进行振动治疗。13周复合振动实验结束后分别活体测量两组大鼠腰椎、股骨骨密度(Lorland XR-46),胫骨标本骨微结构扫描分析(SCANCO u-CT),测试腰椎、股骨标本力学性能(858 mini bionix)及酶法检测血清碱性磷酸酶、非前列腺酸性磷酸酶,电化学发光免疫法检测血清骨钙素和I型胶原C端交联肽。结果:复合振动实验结束后实验组腰椎和股骨BMD较实验前显著增加(分别增加0.0110±0.0048 g/cm2,P=0.000和0.0056±0.0065 g/cm2,P=0.004),而对照组显著下降(分别下降0.0071±0.0042 g/cm2和0.0073±0.0063 g/cm2)。相较对照组,骨微结构参数Tb.N显著增加(P=0.002)、Tb.Sp显著降低(P=0.005)以及BV/TV显著增加(P=0.048),腰椎、股骨强度极限也显著增加(P=0.038,P=0.014),但血清骨钙素、碱性磷酸酶、I型胶原C端交联肽、非前列腺酸性磷酸酶两组无统计学差异。结论:低强度复合振动可以减轻去卵巢老龄大鼠骨质疏松程度,提高骨质疏松大鼠骨质量。