三种免疫分析系统检测抗甲状腺过氧化物酶抗体分析

目的：探讨不同免疫分析系统检测抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）结果的可比性,以评价不同检测系统间结果的相关性。方法：收集2019年10月12日—12月16日我院收治的甲状腺功能异常患者血液标本共80份,分别采用新产业化学发光免疫分析仪（CLIA法）、贝克曼化学发光免疫分析仪（CLIA法）和罗氏电化学发光免疫分析仪（ECLIA法）测定不同浓度水平标本的TPOAb值。分析三种免疫分析系统的检测结果是否有较好的一致性,是否能够满足临床的诊疗需求。结果：定性判断新产业CLIA法检测TPOAb,其符合率为83.75%,Kappa值0.644;贝克曼CLIA法检测TPOAb,其符合率为87.5%,Kappa值0.530。结论：新产业和贝克曼化学发光分析仪检测TPOAb结果与罗氏电化学发光分析仪检测结果有中等的一致性,可满足临床需求。     

联合检测血清CA153 CA125 CA199在乳腺癌早期诊断中的价值

目的:探讨血清CA153、CA125、CA199联合检测在乳腺癌早期诊断中的临床应用价值。方法:采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)同时检测43例乳腺癌、48例乳腺良性疾病与50例正常健康体检女性的血清CA153、CA125、CA199水平。结果:乳腺癌组CA153、CA125、CA199水平均显著高于健康对照组与乳腺良性疾病组(P<0.01),乳腺良性疾病组CA153、CA125、CA199水平与健康对照组均差异无显著性(P>0.05)。CA153、CA125、CA199单独检测乳腺癌的灵敏度分别为58.14%,34.88%,27.91%,特异度为92.86%,89.80%,93.88%。三者联合检测乳腺癌的灵敏度为79.07%、特异度为85.71%。结论:血清CA153、CA125、CA199联合检测能提高乳腺癌早期诊断的诊断率。     

联合检测血清CEA、CA153、CA125、CA199在肺癌早期诊断中的价值

目的探讨血清CEA、CA153、CA125、CA199联合检测在肺癌早期诊断中的临床应用价值。方法采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)同时检测57例肺癌、53例肺部良性疾病与60例正常健康体检者的血清CEA、CA153、CA125、CA199水平。结果肺癌组CEA、CA153、CA125、CA199水平均显著高于健康对照组与肺部良性疾病组(P<0.01),肺部良性疾病组CEA、CA153、CA125、CA199水平与健康对照组均无显著性差异(P>0.05)。CEA、CA153、CA125、CA199单独检测肺癌的灵敏度分别为59.65%、36.84%、54.39%、28.07%、80.70%,特异度为94.69%、97.35%、91.15%、93.81%、89.38%,诊断效率82.94%、77.06%、78.82%、71.76%、86.47%。四者联合检测肺癌的灵敏度为80.70%,特异度为89.38%、诊断效率为86.47%。结论血清CEA、CA153、CA125、CA199联合检测能提高肺癌早期诊断的诊断率。     

血清肿瘤标志物水平联合检测在乳腺癌诊断中的临床价值分析

目的分析血清肿瘤标志物水平联合检测在乳腺癌诊断中的临床价值。方法选取2018年1月至2019年8月本院治疗的乳腺疾病患者105例,依据B型超声、病理诊断结果分为乳腺良性疾病组(n=51)、乳腺癌组(n=54)。采集入选者空腹静脉血,通过全自动化学发光免疫分析仪测定糖链抗原153(CA153)、糖链抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖链抗原199(CA199)水平。观察两组CA153、CA125、CEA、AFP、CA199水平,并计算CA153、CA125、CEA、AFP、CA199单项及联合诊断乳腺癌的敏感度、特异度。结果乳腺癌组CA153、CA125、CEA、AFP、CA199水平均高于乳腺良性疾病组,差异有统计学意义(P<0.05);CA153+CA125+CEA+AFP+CA199诊断乳腺癌的敏感度(94.44%)高于各指标单项诊断(75.93%、48.15%、37.04%、44.44%、68.52%),差异有统计学意义(P<0.05);CA153+CA125+CEA+AFP+CA199联合诊断乳腺癌的特异度与各指标单项诊断比较差异无统计学意义。结论乳腺癌患者血清中CA153、CA125、CEA、AFP、CA199水平升高,且将上述指标联合检测有助于提升诊断效能,为乳腺癌诊治提供确切信息。     

Array-ELISA检测六项肿瘤标志物诊断结直肠癌的临床价值分析

目的:探讨微阵列酶联免疫法(Array-ELISA)检测六项肿瘤标志物诊断结直肠癌(CRC)的临床价值。方法:选择49例CRC患者作为CRC组,选择19例同期进行结直肠手术的良性病变患者作为良性组,另取同期71例健康体检者作为对照组。采集3组患者的静脉血,通过Array-ELISA技术进行六项肿瘤标志物(AFP、CEA、PSA、CA125、CA153及CA199)检测。比较3组血清六项肿瘤标志物检测结果、CRC组ROC AUC结果、以及CRC组PRE与6项肿瘤标志物的相关参数。结果:(1)CRC组血清CEA、AFP、CA199及CA125水平均高于良性组与对照组(P<0.05)。3组PSA与CA153水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)单项检测中CEA(AUC=0.916,P=0.001)具有最高的诊断价值,Logistic回归模型建立的PRE面积为0.932,均高于单项指标检测。(3)本组CRC患者中的CEA特异度、灵敏度与准确率在单项中最高;联合检测中Logistic回归预测变量PRE的特异度、灵敏度与准确率高于CEA(P<0.05)。结论:Array-ELISA对CRC患者六项肿瘤标志物均有理想的检测效果,但单项肿瘤标志物的特异度、灵敏度具有一定的局限性,六项指标联合检测可以有效提高CRC的检出率。     

酶联免疫法与全自动化学发光法检测乙肝表面抗原的特异度及敏感度比较

目的比较酶联免疫法与全自动化学发光法检测乙肝表面抗原(HBsAg)的特异度及敏感度。方法选择该院2017年3月至2019年3月就诊的203例患者并采集外周血标本,采用酶联免疫吸附法(ELISA)、化学发光免疫分析法(CLIA)进行检测,参考中和确认试验比较两种方法检测结果及检测效果。结果 203例标本CLIA法检测阳性48例,ELISA法阳性46例,中和确认试验阳性48例,与CLIA法结果一致;对比中和确认试验,ELISA法和CLIA法均有较高的特异度和符合率,分别为100%、99%和100%、100%,但对比中和确认试验灵敏度分别为95.8%、100%,ELISA法、CLIA法的Kappa值分别为0.97、1,而受试者工作特征(ROC)曲线下面积依次为0.88、0.97,差异具有统计学意义(χ2=5.840, P=0.016)。结论酶联免疫法与化学发光法检测HBsAg的均有较高的特异度,但化学发光法检测敏感度更高。     

半自动和全自动化学发光免疫分析仪检测糖尿病患者血浆C肽的一致性评价

目的:探讨半自动和全自动化学发光免疫分析仪检测糖尿病患者血浆C肽的一致性。方法:选择我院因糖尿病住院的110例患者的空腹血浆作为样本,用罗氏型号:CObas e 601全自动化学发光免疫分析仪和PHX-2012半自动化学发光免疫分析仪同时检测样本的C肽浓度。结果:通过半自动和全自动化学发光免疫分析仪检测实际测出血浆C肽值为(1.57±1.38)ng/ml和(2.56±2.39)ng/ml,两种仪器测得的C肽值有显著关系(p0.05)。两种分析仪检测出C肽值均正常75例,均异常18例,诊断符合率为84.5%。显示两种分析仪对于糖尿病患者血浆C肽的结果判断是具有一致性(卡方值=5.48,P=0.02,p0.05);在糖尿病诊断方面,全自动化学发光免疫分析仪的敏感度为75/90(83.3%),特异度为18/20(90.0%),正确指数为0.73;半自动化学发光免疫分析仪的敏感度为75/80(93.6%),特异度为18/30(60.0%),正确指数为0.54。结论:半自动和全自动化学发光免疫分析仪对于糖尿病患者血浆C肽的结果判断具有一致性,但是使用全自动化学发光免疫分析不仅节约了人力成本检测出的结果还比较准确,因此全自动比半自动化学发光免疫分析仪在临床上的辅助价值更高。     

不同肿瘤标志物联合检测对原发性肝癌的诊断效能分析

目的:探索不同肿瘤标志物联合检测对原发性肝癌的诊断效能,为临床诊断提供参考依据。方法:收集来我院就诊的临床诊断为原发性肝癌的患者72例作为观察组,诊断为良性肝病的患者65例作为良性肝病组,80例健康体检者作为健康对照组,所有对象采用化学发光法测定肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原-199(CA199)、糖类抗原-125(CA125)和糖类抗原-153(CA153)的含量,然后对单组患者的5种肿瘤标志物的检测结果、各指标对各组检测阳性率进行比较,并对不同肿瘤标志物单独检测与联合检测原发性肝癌的诊断价值分析。结果:观察组AFP、CA199和CA153的值高于良性肝病组,AFP、CEA、 CA199、 CA125和CA153的值高于健康对照组,良性肝病组的CA199和CA125的值高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);AFP、CEA、 CA199和CA153对观察组的检测阳性率高于良性肝病组,AFP、CEA、 CA199和CA125对观察组的检测阳性率高于健康对照组,AFP、CEA、 CA199和CA125对良性肝病组的检测阳性率高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);各指标联合检测原发性肝癌的灵敏度为86.4%,特异度为89.2%,正确指数为75.6%,误诊率为13.6%,漏诊率为10.8%,且联合检测比各指标单独检测的正确指数都高。结论:血清肿瘤标志物AFP、CEA、 CA199、 CA125和CA153联合检测可提高原发性肝癌诊断的灵敏度和特异度,对原发性肝癌有较好的诊断价值。     

罗氏e602不同仪器间乙肝标志物检测结果的一致性

目的对罗氏cobas 8000 e602乙肝标志物的试剂在Au1和Au2检测两仪器间检测结果的一致性进行评价。方法参照CLSI EP9A3方案,各取40例样本同时在Au1和Au2间单次检测,对其结果进行一致性分析,计算医学决定水平处的偏移值,以≤1/2室间质评(±10%)作为可接受标准。结果罗氏e602 Au1和Au2间乙肝标志物结果 95%在Bland-Altman一致性界限内,Passing-Bablok回归方程分别为HBsAg:Y=-0.0036+1.0458X,HBsAb:Y=0.6364+1.0043X;HBeAg:Y=-0.0096+1.0063X;HBeAb:Y=-0.0011+1.0203X;HBcAb:Y=-0.0002+0.9160X。医学决定水平的偏移值分别为4.13%、6.57%、-0.33%、1.88%、-8.79%,比对结果可接受。结论罗氏cobas 8000 e602Au1和Au2检测乙肝标志物的比对结果一致,检测结果无差异。     

胸腔积液结核感染T细胞斑点试验对结核性胸膜炎的诊断分析

目的分析胸腔积液结核感染T细胞斑点试验对结核性胸膜炎的诊断价值。方法回顾性分析2018年1月至2020年1月永城市疾病预防控制中心72例结核性胸膜炎患者的临床资料,将其纳入观察组,将同期53例存在胸腔积液的非结核性胸膜炎患者纳入对照组。所有患者均接受胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、结核杆菌DNA(TB-DNA)及结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测。比较3种检测方法的阳性检出率及诊断效能。结果胸腔积液ADA诊断符合率为69.60%(87/125),TB-DNA诊断符合率为68.80%(86/125),T-SPOT.TB诊断符合率为85.60%(107/125);T-SPOT.TB检测的一致性最高(Kappa=0.742,P<0.05)。胸腔积液T-SPOT.TB检测的灵敏度、特异度、准确度(94.44%、86.79%、91.20%)高于ADA(69.44%、79.25%、76.00%)、TB-DNA(51.39%、96.23%、70.40%),3种检测方法对结核性胸膜炎的诊断灵敏度、特异度、准确度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔积液T-SPOT.TB检测诊断结核性胸膜炎具有较高的灵敏度、准确度,具有重要的诊断价值。     

A rapid whole-blood immunoassay system

A new immunoassay system has been developed which allows the detection of circulating antigens, antibodies or drugs in whole blood without specialized personnel or equipment. This is achieved by the use of bispecific reagents, which comprise specific antibodies or antigens that are coupled to a non-agglutinating antierythrocyte antibody. Within two minutes, these reagents cause specific agglutination of a patient's own red cells in samples that contain the relevant analyte. Levels of low molecular weight haptens also can be measured by the use of an indirect, agglutination-inhibition assay. This simple immunoassay method would fulfil the needs of many physicians and Third-World countries and also has mass-screening and veterinary applications.     

IMx全自动免疫分析系统的原理及临床应用

美国雅培公司生产的IMx全自动免疫分析系统应用广泛,反应方法学先进,它综合使用了微粒子酶免、离子捕捉和荧光偏振免疫三种分析技术,本文主要介绍了它的原理、特点及临床应用.     

国产化学发光免疫分析系统检测AFP的性能评价

目的:探讨不同化学发光检测系统测定甲胎蛋白(AFP)结果的可比性,探讨不同检测系统的临床适用性。方法:依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件的规定,以罗氏cobas-e601电化学发光免疫分析仪检测结果为参比系统(X),以迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪测试结果为待对比系统(Y),通过检测AFP指标,对两套系统结果进行对比分析和偏倚评估。结果:两检测系统对AFP的检测结果具有良好的相关性,相关系数大于0.95;预期偏差均在可接受范围内,具有良好的一致性。结论:国产迈瑞CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪检测AFP能够满足临床需要,可以推广应用。     

电化学发光免疫分析仪技术的应用评价

为了定量评价Elecsys2010电化学发光免疫分析仪技术性能.以CEA、TSH、LH检测为例,对该技术的准确度、灵敏度和可测范围、特异性和稳定性指标进行了探讨.各项技术指标均达到和超过了实验方法选择的标准.Elecsys2010电化学发光荧光免疫分析仪是一项准确度和灵敏度高、特异性强、检测范围宽、线性良好的全自动快速分析系统,特别适用于临床常规和急诊检测.     

CA50靶向抗体文库的构建筛选及应用评价

目的 获得针对CA50靶点的高亲和力、高特异性抗体,建立体外诊断CA50检测试剂盒,提高肿瘤诊断的特异性和灵敏度。 方法 PCR 技术获得单链抗体( ScFv)基因并克隆入pcomb3XSS噬粒载体,通过电转化获得ScFv噬菌体抗体库。用CA50特性识别表位LST a(唾液酸化-乳糖-N-四糖a)的抗原淘洗筛选,获得针对CA50靶点的特异性抗体基因序列。随机挑选克隆测序,验证ScFv抗体库的多样性。利用重叠PCR技术获得人鼠嵌合抗体基因,经过抗体表达纯化及配对筛选建立双抗体夹心法CA50检测试剂盒。同时收集临床诊断阳性样本54例和临床阴性对照样本146例,利用该研究建立的CA50检测试剂盒与罗氏CA50试剂盒进行平行对照,评价其检测相关性。 结果 建立噬菌体抗体库的容量为2.5×10⁸,具有较好的多样性。24个PCR鉴定阳性克隆测序,结果为20个正确插入且插入序列均不相同。经过3轮淘洗筛选出5个阳性克隆,经过抗体配对筛选建立的CA50试剂盒临床样本检测结果与罗氏的临床相关性(r=0.98)。 结论 通过噬菌体展示抗体库技术成功筛选出了针对CA50的高特异性、高亲和力抗体,为CA50检测在相关肿瘤辅助诊断中的应用提供可能性。     

甲状腺肿瘤患者生化免疫检验中化学发光免疫测定技术的应用分析

目的:探讨甲状腺肿瘤患者生化免疫检验中化学发光免疫测定技术的应用价值。方法:选取2019年5月至2021年5月佳木斯市中医医院90例疑似甲状腺肿瘤患者作为研究对象,所有患者均接受生化免疫检验,检验方法分别为化学发光免疫测定法(CLIA)与免疫放射分析法(RIA),对比两种方法对甲状腺激素及甲状腺球蛋白水平、个数检测差异性,将病理诊断作为金标准,分析两种方法对疾病检出情况及敏感度、特异度、准确性。结果:CLIA测定法检验甲状腺球蛋白水平、甲状腺球蛋白个数均高于RIA组,差异有统计学意义(P<0.05);CLIA测定法检验FT3、FT4及TSH均高于RIA组,差异有统计学意义(P<0.05);病理学证实,90例患者中72例为阳性,18例为阴性,CLIA测定法显示阳性69例,阴性17例,RIA测定法显示阳性53例,阴性11例;CLIA测定法诊断甲状腺肿瘤敏感度、特异度及准确性分别为95.83%、94.44%、95.56%,高于RIA测定法的72.22%、61.11%、70.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CLIA测定法应用于甲状腺肿瘤患者生化检验,敏感度、特异度及准确性高,能够为甲状腺肿瘤早期诊断及治疗方案选择提供指导,具有较高临床价值。     

应用FITC系统建立非均衡竞争游离甲状腺素化学发光法

[目的]制备抗人甲状腺素多克隆抗体并应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)系统建立非均衡竞争FT4化学发光法.[方法]以T4-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰兔,制备抗人T4多克隆抗体,亲和层析法吸附掉与3-碘-L-甲状腺原氨酸(3-iodo-L-tyrosine)、3,5-二碘-L-甲状腺原氨酸(3,5-diiodo-L-tyrosine)、D-三碘甲状腺原氨酸(D-T3)、L-三碘甲状腺原氨酸(L-T3)、反三碘甲状腺原氨酸(rT3)有交叉反应多抗,纯化特异性的抗人T4多克隆抗体并用FITC标记T4类似物,用抗FITC抗体包被微孔板.反应时,将FT4校准品或样品、FITC-T4类似物、T4抗体-HRP依次加入包被有抗FTTC抗体的化学发光板中,FITC -T4类似物与FT4校准品或样品,非均衡竞争结合T4抗体-HRP,从而在微孔板上形成免疫反应复合物T4类似物-T4抗体-HRP,通过酶促化学发光反应,就可以显示出与样品FT4浓度负相关的相对光单位(relative light unit,RLU),建立FT4化学发光检测方法.[结果]抗体经酶联免疫吸附实验证明对T4具有高度特异性,与3-iodo-L-tyrosine、3,5-diiodo-L-tyrosine、L-T3、D-T3、rT3无交叉反应.该方法建立的试剂盒标准曲线的线性相关系数不小于0.9900;分析灵敏度为0.9 pmol/L;线性检测范围0.9～130 pmol/L;精密度测试批内变异系数CV＜ 10％;与进口发光免疫分析系统做线性相关比较,线性回归系数为1.0852,相关系数为0.9673,临床符合率良好;本方法建立的试剂盒经加速稳定性试验37℃放置7d与2～8℃放置7d无异.[结论]综上所述,应用FITC系统建立的非均衡竞争FT4化学发光免疫分析灵敏度高、特异性好适于临床诊断应用.     

血清CA19-9免疫放射测定在消化系统肿瘤中的应用

ＣＡ１９－９（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ａｎｔｉｇｅｎ １９－９）是由胃、肠、胰及肝等脏器分泌的一种粘蛋白，是最基本最重要的糖蛋白型肿瘤标记物，属肿瘤相关抗原，当以上组织发生病变尤其是患恶性肿瘤时，其血清ＣＡ１９－９处于高水平，比较体内ＣＡ１９－９含量变化有利于及早发现上述有关脏器发生恶性肿瘤［１，２］。本研究采用ＩＲＭＡ法对１４５例患者血清ＣＡ１９－９含量进行检测，比较胰腺癌、原发性肝癌、胃癌、黄疸及慢性胰腺炎等疾病中血清ＣＡ１９－９水平差异，并探讨其临床意义。１ 资料与方法１．ｌ 标本来源 正常…     

应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸（FT3）化学发光法

目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。     

建立非均衡竞争叶酸定量测定的化学发光免疫分析法

目的 制备抗人叶酸(FA)抗血清并应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立可常规应用的定量检测血清FA的化学发光免疫分析(CLIA)法.方法 FITC-FA类似物、FA抗体-HRP依次加入包被有抗FITC抗体的化学发光板,形成FITC抗体-FITC-FA类似物-FA抗体-HRP的免疫反应复合物;并进行方法学评价,同时与非FITC检测系统及罗氏化学发光免疫分析系统检测结果进行比较.结果 成功制备FA抗血清并建立基于FITC系统的非均衡竞争CLIA;经方法学评价,自研法的线性相关系数绝对值大于0.990 0,灵敏度1.21 nmol/L,线性范围1.21～38.80 nmol/L,批内变异系数小于5％,自研法定量检测性能优于非FITC系统;与罗氏检测系统结果有较好相关性(R=0.908 1).结论 建立的非均衡竞争定量检测血清FA的CLIA法,具有良好的检测灵敏度与特异性,可应用于常规检测.