HIF-2α在肺动脉高压中的研究进展

肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)是一种以肺血管阻力进行性增加、闭塞性血管重构为特征的疾病。低氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2 alpha, HIF-2α)是参与肺血管细胞异常增殖和肺血管重构过程的关键因子之一。本文主要从细胞水平、整体水平综述HIF-2α在PH发生中的作用及其机制,并对目前以HIF-2α为靶点治疗肺动脉高压的候选方案进行介绍,以期为PH发病机制的研究及有效治疗方法的筛选提供参考。     

低氧对大鼠骨髓间充质干细胞HIF-1α表达影响的研究

目的通过体外不同氧浓度下培养大鼠骨髓间充质干细胞,RT-PCR方法检测,观察正常氧浓度和低氧浓度对HIF-1α(缺氧诱导因子-1α)表达的影响。方法分离雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外培养,鉴定其CD34、CD44的表达,分为正常氧浓度组和低氧浓度组培养24h,RT-PCR方法检测,不同氧浓度对细胞HIF-1α表达的影响。结果贴壁法培养的细胞表达CD44,不表达CD34;正常氧浓度培养的细胞较少有HIF-1α的表达,低氧浓度培养的细胞HIF-1α的表达明显增加。结论细胞低氧可激活HIF-1α的表达,低氧浓度培养的细胞的HIF-1α表达较正常氧浓度培养的细胞的表达明显增加。     

晚期宫颈癌患者HIF-1α、HIF-2α及ERCC-1蛋白检测的临床意义

目的探讨晚期宫颈癌患者的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2,HIF-2α)以及核苷酸切除修复交叉互补-1(excision repair cross-complementing-1,ERCC-1)蛋白检测的临床意义。方法选取2014年8月2016年2月收治的晚期宫颈癌患者30例为观察组,另选取同时间段收治的宫颈良性病变患者30例为对照组。采用RT-PCR以及免疫组化法检测2组患者的病变组织中HIF-1α、HIF-2α的mRNA和蛋白水平,分析HIF-1α、HIF-2α与疾病发生发展的相关性。并根据观察组患者外周血基ERCC-1因表达的不同,将观察组患者分为C组和T组,给予观察组患者顺铂新辅助化疗,观察化疗后C组和T组患者的疗效指标,分析新辅助化疗治疗效果与ERCC-1表达的相关性。结果 HIF-1αmRNA、HIF-2αmRNA在观察组和对照组患者的组织标本中均有表达,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组HIF-1αmRNA、HIF-2αmR...     

低氧诱导因子抑制药在抗肿瘤方面的研究进展

低氧诱导因子抑制药(YC-1)是一种小分子物质,最初研究主要集中在心血管系统,如抗血小板聚集、收缩血管等方面。研究发现,YC-1能抑制低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,从而开启YC-1在抗肿瘤方面的研究。YC-1抗肿瘤作用是多方面的,包括细胞周期抑制和诱导肿瘤细胞凋亡、抗血管生成、抗炎性反应及抑制金属蛋白酶类(MMPs)等。     

乳腺癌组织中ING4、HIF-1α和HIF-2α表达及与肿瘤微血管新生的关系

目的 探讨乳腺癌组织中生长抑制因子4(ING4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达及与肿瘤微血管新生的关系.方法 选取择期行手术治疗的乳腺癌病人107例,利用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌和癌旁组织中HIF-1α、HIF-2α、ING4和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达,免疫组化染色检测乳腺癌和癌旁组织中微血管密度(MVD).结果 乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均高于癌旁组织,而ING4 mRNA 相对表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α mRNA相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05),HIF-2α mRNA相对表达量与肿瘤大小、淋巴结转移有关(P<0.05),ING4 mRNA相对表达量与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);乳腺癌组织中VEGF mRNA相对表达量和MVD计数均高于癌旁组织,均差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈正相关(r=0.382、0.417和0.408、0.491,P<0.05),ING4 mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈负相关(r=-0.395、-0.502,P<0.05).结论 乳腺癌组织中HIF-1α、HIF-2α基因表达升高,而ING4基因则被抑制,可能共同参与了乳腺癌组织中血管新生.     

HIF-1α在七氟烷预处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤中的作用

目的 研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)在七氟烷预处理减轻离体大鼠心脏缺血再灌注(I-R)损伤中的作用.方法 84只雄性SD大鼠随机均分为七组:假手术组(Sham组)、I-R组、七氟烷预处理组(S组)、七氟烷预处理十二甲氧乙二酰甘氨酸(DMOG)组(S+D组)、七氟烷预处理+3-(5 '-羟基甲基-2’-呋喃基)-1-苯基吲哚(YC-1)组(S+Y组)、DMOG组(D组)和YC-1组(Y组).应用Langendorff离体心脏灌流装置建立大鼠心肌I-R损伤模型,连续测定心功能指标,并取心肌测HIF-1α及半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平及HIF-1α目的基因的表达水平.结果 与I-R组相比,S组、S+D组和S+Y组I-R损伤心功能的各项指标明显改善(P＜0.05),HIF-1α表达水平显著升高(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达水平显著下降(P＜0.05).结论 HIF-1α促进七氟烷预处理对离体大鼠心脏I-R损伤的保护作用.     

低氧状态下红景天苷经HIF-1α信号通路调节人成骨样MG-63细胞表型表达的研究

目的研究低氧状态下红景天苷对成骨细胞表型表达的调控作用及其作用机制。方法 MTT法检测细胞增殖能力;采用Annexin V/PI双染法分析低氧诱导的细胞凋亡情况;磷酸苯二钠法检测成骨细胞分化的早期标志性基因碱性磷酸酶(ALP)活性;RT-PCR技术检测低氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、抑癌基因VHL蛋白(p VHL)、骨钙素(OC)、成骨细胞特异性转录因子Runx2及Osterix mRNA表达水平;采用ELISA法检测VEGF及OC的蛋白表达水平和I型胶原的含量;Western blot技术检测HIF-1α、p VHL、Osterix、Runx2的蛋白表达水平;免疫荧光共聚焦显微镜技术观察HIF-1α的核转位情况;荧光素酶报告基因检测技术检测HIF-1α的转录活性。结果低氧状态下红景天苷促进MG-63细胞增殖,抑制由低氧诱导的MG-63细胞凋亡,促进Osterix、Runx2表达及通过增加ALP活性、Ⅰ型胶原和OC含量促进成骨细胞分化成熟。进一步研究发现,低氧状态红景天苷可下调HIF-1α的表达及核转位,而上调其转录活性及下游靶基因VEGF的表达。结论低氧状态下红景天苷通过调节HIF-1α/VEGF信号通路促进成骨细胞增殖和分化,同时抑制由低氧诱导的成骨细胞凋亡。     

HIF-1α在腮腺恶性肿瘤中的表达及临床意义

目的：探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在腮腺恶性肿瘤中的表达及临床意义。方法：采用S—P免疫组化法对48例腮腺恶性肿瘤及30例腮味良性肿瘤、15例正常腮腺组织检测HIF-1α。结果：①HIF-1α在腮腺恶性肿瘤中的阳性表达率为75．00％．与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;②HIF-1α的表达与肿瘤有无淋巴结转移和临床分期有关（P〈0．05）。结论：HIF-1α在腮腺恶性肿瘤高表达,HIF-1α可能与腮腺恶性肿瘤的生物学行为密切相关。     

HIF-2α和Tie2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 研究低氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管生成素受体(Tie2)、微血管密度(MVD)在乳腺癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测41例乳腺癌组织(A组)及22例乳腺正常组织(B组)中HIF-2α、Tie2及MVD表达,RT-PCR方法检测HIF-2α mRNA和Tie2 mRNA表达水平,分析HIF-2α、Tie2表达与乳腺癌临床指标的关系.结果 与B组相比,A组HIF-2α、Tie2、MVD表达明显增加(P＜0.05).A组中HIF-2α mRNA、MVD表达均与Tie2 mRNA表达呈正相关(r=0.881、0.832,P＜0.05).HIF-2α、Tie2蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结转移密切相关.结论 HIF-2α、Tie2在乳腺癌血管生成过程中起到了重要的作用,可作为判断肿瘤生物学行为指标之一.     

低氧诱导因子-1α对脓毒症肠黏膜屏障的保护作用

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对脓毒症肠黏膜屏障的影响及机制。方法:SD大鼠随机分4组:假手术组、脓毒症组、脓毒症+HIF-1α刺激剂组(脓毒症+DMOG组)、脓毒症+HIF-1α抑制剂组(脓毒症+Bay87-2243组),每组6只。采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)建立脓毒症模型。ELISA检测大鼠血浆炎性标记物IL-1β、IL-6、TNF-α,氧化应激标记物丙二醛(MDA)以及抗氧化因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的水平。Western blot检测大鼠肠黏膜HIF-1α表达。HE染色检测肠黏膜病理学损伤。结果:与假手术组相比,脓毒症大鼠炎症因子、氧化应激因子以及HIF-1α显著上调(P<0.05);给予腹腔注射DMOG明显降低脓毒症大鼠血浆IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平(P<0.05);增加血浆SOD、CAT水平(P<0.05);HIF-1α表达上调(P<0.05),肠黏膜病理损伤减轻,Chiu's评分显著降低(P<0.05)。口服灌胃Bay87-2243则得到相反的结果。结论:HIF-1α对脓毒症肠黏膜损伤具有保护作用,其机制可能与缓解脓毒症炎性反应和抑制氧化应激水平有关。     

HIF-1α对大鼠缺血-再灌注后Fas蛋白表达的影响

目的 探讨低氧预适应(HP)作用后的低氧诱导因子1α(HIF-1α)对大鼠缺血-再灌注损伤(I-RI)时Fas蛋白表达的影响及其意义.方法 采用改良的自体肝移植模型研究I-RI.将SD大鼠随机分为正常对照(NC)、自体移植(AT)和HP三组,每组24只.HP组术前用8%氮氧混合气体处理90 min,分别于术后1、6、24 h处死大鼠取肝脏标本,抽血检测肝功能,采用免疫组化方法测定HIF-1α及Fas蛋白的表达,并在透射电镜下比较超微结构的改变.结果 NC组HIF-1α表达最弱,HP组与AT组相比较,HP组各时相点表达更明显.经图像处理转化为平均灰度值后,与NC组比较,HP和AT两组各时相表达增强(P＜0.05),其中HP组HIF-1α的表达更强(P＜0.05);HP组各时段的Fas蛋白表达均明显低于AT和NC组(P＜0.05);HP组血清ALT和AST水平显著低于AT组(P＜0.05);AT组镜下见肝细胞浓缩,细胞间隙变大,染色质粗糙,核仁浓缩甚至裂解,细胞器明显密集化,线粒体肿胀,膜模糊不清;而HP组肝细胞形态明显改善,仅部分细胞器如线粒体出现轻度肿胀.结论 HIF-1α可在HP的作用下高表达,从而下调肝组织中Fas蛋白含量,减轻肝脏I-RI.     

膀胱癌组织HIF-1α与Survivin、Bcl-2表达的关系和意义

目的探讨膀胱癌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、生存素(Survivin)、Bcl-2的表达关系和临床意义。方法对68例膀胱移行细胞癌组织和20例正常膀胱组织石蜡标本进行免疫组化(SP)染色,检测HIF-1α与Survivin、Bcl-2的表达情况。结果膀胱癌组织中HIF-1α、Survivin、Bcl-2与正常膀胱组织相比均明显增强(P<0.05);3种蛋白质表达随病理分级、分期的升高而升高(P<0.05);复发膀胱癌组织中HIF-1α、Survivin表达较初发膀胱癌组织增强(P<0.05);相关分析显示,HIF-1α与Survivin、HIF-1α与Bcl-2表达均存在正相关关系(r=0.4486,0.3428,0.2016,P<0.05)。结论 HIF-1α在膀胱癌组织中表达增强,且随肿瘤进展表达进一步升高;其机制在于HIF-1α可能通过调节Survivin、Bcl-2表达而增强膀胱癌细胞的抗凋亡能力促进膀胱癌进展。     

人参皂苷Rg3对低氧条件诱导的Hep-2细胞作用机制的初步研究

目的:研究人参皂苷Rg3对低氧条件下人喉鳞癌细胞Hep-2中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:通过体外低氧培养Hep-2人喉鳞癌细胞株,同时设立阴性对照组和阳性对照组(顺铂).人参皂苷Rg3作用24 h后,应用免疫细胞化学技术和流式细胞技术检测Hep-2细胞HIF-1α和VEGF蛋白表达的变化;应用RT-PCR技术检测HIF-1α和VEGF mRNA表达的变化.结果:在低氧条件下,Rg3组和顺铂对照组的Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白表达低于阴性对照组(P<0.05);Rg3组的HIF-1α和VEGF mRNA水平明显低于阴性对照组(P<0.05),顺铂组的HIF-1α和VEGFmRNA水平无明显变化.结论:低氧条件下,人参皂苷Rg3抑制Hep-2细胞中的HIF-1α和VEGF蛋白和mRNA的表达,这可能是Rg3抗肿瘤作用的机制之一.     

低氧对人胃癌SGC7901细胞株SP细胞比例的影响与HIF-2α、OCT-4表达变化的关系

目的:通过观察低氧对人胃癌SGC7901细胞株侧群(side population,SP)细胞比例的影响及其与HIF-2α和OCT-4表达变化的关系,初步研究低氧对肿瘤干细胞的影响及机制.方法:Hoechst33342染色检测人胃癌SGC7901细胞系SP细胞比例,免疫荧光化学法检测OCT-4在SP和非SP细胞中的表达,免疫细胞化学法检测HIF-2α和OCT-4蛋白的表达.结果:常氧下人胃癌SGC7901细胞系中SP细胞的比例为2.36%,低氧诱导24、48、72h后其比例逐渐增加,分别为3.01%、3.23%、3.45%(P<0.05);常氧下OCT-4在SP和非SP细胞中的表达差异无统计学意义(P>0.05),低氧诱导24、48、72h后,OCT-4在SP细胞和非SP细胞中的表达逐渐增强(P<0.05),在SP细胞中的表达要高于非SP细胞.常氧下HIF-2α和OCT-4蛋白呈低水平表达,低氧诱导24、48、72h后,二者的表达逐渐增加(P<0.05),且HIF-2α和OCT-4蛋白呈高度正相关(P<0.05).结论:低氧可使人胃癌SGC7901细胞系中的SP细胞增多,其机制可能与低氧诱导HIF-2α-OCT4通路的表达,促进肿瘤细胞的干细胞化及维持干细胞的未分化状态有关.     

低氧诱导因子-3α的研究进展

低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)是细胞应对氧气水平降低时的主要调节因子,具有调控与细胞缺氧应激相关基因表达的作用。HIF是由1个不稳定的氧气浓度依赖的α亚基(HIF-α)和1个稳定的不受氧气调节持续表达的β亚基(HIF-β)组成的异源二聚体。人的序列同源性的α亚基有3种,包括HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α。相对于HIF-1α和HIF-2α亚基,对HIF-3α亚基的研究还是相对匮乏的。HIF-3α被认为是HIF-1α和HIF-2α的负调控因子,由于其具有多种剪接变异体,因此HIF-3α参与多种生理功能。该综述对HIF-3α的结构,剪接变异体,表达调控及其各种生理功能进行了系统的阐述,并对今后的研究方向进行了展望。     

抑制HIF-1α表达的中药抗肿瘤活性成分研究进展

实体肿瘤的重要特征之一是缺氧,缺氧微环境可导致缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)的过度表达。HIF-1α是缺氧应答中最为关键的转录因子,可通过激活下游基因表达促进肿瘤细胞异常增殖、肿瘤血管生成、能量代谢异常、耐药性增加、侵袭和转移。因此,下调HIF-1α的表达是一条目前被认为治疗实体肿瘤的很有前景的途径。然而,大多数现有的HIF-1α抑制剂的临床效果受到低效性和高毒性的限制。由此,针对HIF-1α的过度表达研发强效安全的新型药物尤为重要。近年来,大量研究发现多种中药化学成分可直接或间接抑制HIF-1α的激活,在对抗低氧诱导的肿瘤进展过程方面具有广阔的前景。本综述汇总了近十年内直接或间接抑制HIF-1α表达的各种中药抗肿瘤活性成分的研究进展,并进行总结与讨论,以期为进一步研究作为参考。     

肾小管HIF-1α/miR-23a通路在脓毒血症急性肾损伤中的作用机制

目的 探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法 体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-2细胞分为LPS组、NC siRNA组、HIF-1α siRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1α siRNA+miR-NC组、HIF-1α siRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2细胞作为空白对照组(Control组)。采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达。结果 与Control组比较,LPS组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,...     

木犀草素通过HIF-1α抑制糖酵解调控M1型巨噬细胞极化

目的 基于低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)介导糖酵解途径研究木犀草素(luteolin)调控M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法 RAW264.7细胞随机分为对照组(M0)和脂多糖(LPS)联合干扰素γ(IFN-γ)诱导组(M1);之后将M1组分为Luteolin治疗组、2-DG(糖酵解抑制剂)组、Luteolin+2-DG组、Luteolin+DMOG(HIF-1α激活剂)组。Western blot检测iNOS、Arg-1和HIF-1α蛋白表达;流式细胞仪检测巨噬细胞亚型;ELISA检测细胞IL-6和IL-10浓度;Real-time PCR检测GLUT1、HK2、PFK1、PK和HIF-1α mRNA表达。结果 与M1组比较,Luteolin治疗组以及Luteolin和2-DG共培养组糖酵解相关因子HIF-1α、GLUT1、HK2、PFK1和PK表达水平降低;细胞葡萄糖消耗增加、乳酸分泌量减少。M1型巨噬细胞标记物iNOS、CD86和IL-6表达降低,M2型巨噬细胞标记物Arg-1、CD206和IL-10表达增高。而DMOG能...     

HIF-1α抑制剂在白血病治疗中的研究进展

缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factor,HIF-1)是一种氧平衡转录因子,在人体细胞内广泛分布,能在各种缺血缺氧环境中激活并发挥作用.其主要由HIF-1α和HIF-1β2个亚基组成.HIF-1α是唯一的氧气调节亚单位,其激活可引起细胞增殖、凋亡抑制、代谢转移和癌症进展,因此,该基因的启动常提示肿...     

脑膜瘤中HIF-1α、VEGF和MMP-9的表达及其意义

目的 探讨脑膜瘤中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达与脑膜瘤组织学分级、复发的关系.方法 采用免疫组化方法检测脑膜瘤标本中HIF-1α、VEGF和MMP-9表达情况,分析它们相互间以及与脑膜瘤组织学分级、复发的关系.结果 (1)52例脑膜瘤标本中HIF-1α、VEGF和MMP-9的阳性表达率分别为78.8%、84.6%和73.1%;表达强度均与脑膜瘤的病理级别呈正相关(rs=0.499、0.448、0.583,P＜0.01);(2)VEGF表达强度与HIF-1α的表达强度呈正相关(rs=0.714,P＜0.01),MMP-9表达强度与HIF-1α、VEGF的表达强度无关(rs=-0.0066,rs=-0.095,P＞0.05);(3)52例脑膜瘤中有7例复发,复发率为13.5%;脑膜瘤复发与性别、发病年龄不相关(P＞0.05);而与病理分级以及HIF-1α、VEGF和MMP-9表达强度相关(P＜0.01).结论 HIF-1α、VEGF和MMP-9表达与脑膜瘤分级及术后复发密切相关.HIF-1α可有诱导血管生成的作用.