阿尔茨海默症中Aβ毒性机制研究进展

阿尔茨海默症为常见的中枢神经系统退行性疾病,临床表现为进行性认知功能障碍。Aβ的神经毒性作用在AD的形成过程中起着重要作用,但其机制相当复杂。本文对近十年来Aβ在AD中的毒性机制进行了综述。     

人参皂甙Rb1抑制Aβ25-35诱导皮层神经元tau蛋白的过度磷酸化

目的：探讨人参皂甙Rb1对凝聚态Aβ25-35诱导的胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化的影响及其可能的作用机制。方法通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测胎鼠皮层神经元tau蛋白在Ser396、Ser199／202和Thr231位点的磷酸化水平、总tau蛋白水平和糖原合成酶3B(GSK-3β)的蛋白表达水平。结果20μmol／L     

阿尔茨海默病与tau蛋白的磷酸化及去磷酸化

本简要介绍了阿尔茨海默病的研究现状以及发病机理和病理学特征，并介绍了作为阿尔茨海默病标志蛋白的tau蛋白的结构、功能，以及其过度磷酸化修饰与阿尔茨海默病发生的关系。同时，总结了近几年来针对细胞内各种蛋白激酶和蛋白磷酸酶在tau蛋白的磷酸化平衡系统中所起作用的最新研究进展，并说明了因蛋白磷酸酶活力缺陷导致的tau蛋白过磷酸化的可逆性。在此理论基础上，扼要介绍了蛋白磷酸酶激活剂在治疗阿尔茨海默病中的研究进展及展望。     

Epo对Aβ25-35引起的细胞损伤的影响

研究表明，造血因子促红细胞生成素（Erythropoietin，Epo）对一系列中枢神经系统损伤的细胞及动物模型均具有保护作用，然而，关于Epo对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）有无影响目前仍不十分清楚。由于在AD的发病机制中J3淀粉样蛋白（β-amyloidpeptide，AJ3）的毒性作用具有重要的意义，     

阿尔茨海默病患者外周血标记物Aβ42、Aβ40、P-tau蛋白与Hcy的相关性研究

目的 探究血清中Aβ42、Aβ40、P-tau蛋白和Hcy在阿尔茨海默病痴呆患者(AD)、遗忘型轻度认知障碍患者(aMCI)、正常老年人(NC)之间的关系.方法 选取2019年9月至2020年11月门诊或住院老年患者76例,其中AD组20例,aMCI组23例,健康对照组33例.用ELISA检测法检测3组人群血清中Aβ4...     

有关阿尔茨海默病抗Aβ蛋白的药物研究进展

阿尔茨海默病(AD)的病因和发病机制尚不清楚.目前"淀粉样蛋白假说"引起广泛关注和重视.本文概述了基于"Aβ假说"的药物研究进展.     

Aβ1-40对阿尔茨海默症神经干细胞凋亡的影响

目的 探讨β淀粉肽1-40(Aβ1-40)对阿尔茨海默症(AD)神经干细胞凋亡的影响.方法 取新生雄性Wistar大鼠(<1 d)的海马组织,制成单细胞混悬液,并进行培养,取传代2代的神经干细胞进行实验.将神经干细胞分为Aβ1-40组、对照组,Aβ1-40组分别使用浓度为20、50、80μg·mL-1的Aβ1-40处理...     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及tau蛋白磷酸化的影响

目的 探究电针对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆能力改善的情况以及对大鼠海马tau蛋白磷酸化的影响.方法 将雄性SD大鼠30只随机分成正常组、模型组和电针组,每组10只.除正常组外,其余两组侧脑室各注射β淀粉样蛋白多肽片段Aβ25-35制备动物模型.电针组治疗分为3个疗程.以Morris水迷宫来评价大鼠的学习和记忆能力,并且使用Western blot法来检测大鼠海马区Tau蛋白和其丝氨酸198位点、404位点磷酸化水平,利用软件分析测定Western blot图像条带的光密度（OD）值.结果 模型组Morris水迷宫试验逃避潜伏期比正常组长（均P 〈 0.05）,电针组与模型组差异有统计学意义.3个组之间海马区tau蛋白总量的差异无统计学意义,与模型组比较,电针组丝氨酸的198和404位点的tau蛋白磷酸化tau蛋白水平具有降低（均P 〈 0.05）的趋势.结论 电针治疗显著并且能减轻AD大鼠海马tau蛋白磷酸化水平,改善AD模型大鼠学习记忆能力.     

阿尔茨海默病临床治疗策略的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性疾病,它严重威胁人类的健康和生活质量。目前尚无有效策略可以治疗AD,FDA批准的一些药物分子仅能部分缓解AD症状。一般认为,导致AD的核心原因是大脑内Aβ蛋白和tau蛋白的异常聚集和沉积。因此,减少这些蛋白的聚集和沉积被认为是可能有效治疗AD的策略,包括抑制生成、抑制聚集和直接清除。目前,临床上在测试的治疗策略包括:(1)针对Aβ的疫苗与抗体;(2)针对tau的疫苗与抗体;(3)聚集抑制剂;(4)β-内切酶等酶的抑制剂;(5)炎症抑制小分子;(6)其他。本文综述这些治疗策略,包括已经宣告失败的临床试验,希望为开发新的AD治疗策略提供一些帮助。     

酸性肽对AD大鼠学习记忆能力及Aβ表达的影响

目的：研究酸性肽（acidic peptide,AP）对AD大鼠学习记忆能力及Aβ表达的影响。方法：雄性SD大鼠84只,随机分成7组,每组12只。Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ组为AD模型组,Ⅲ组为AD模型＋生理盐水组,Ⅳ组为AD模型＋谷氨酸0．3g／kg治疗纽,V组为AD模型＋AP15mg／kg治疗纽,Ⅵ组为AD模型＋AP30mg／kg治疗组,Ⅶ组为AD模型＋AP60mg／kg治疗组。采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术,用鹅膏蕈氨酸（IBO）损毁大鼠双侧基底核（nbM）,建立AD动物模型,手术后用不同剂量AP对AD大鼠进行治疗,测定与学习、记忆有关的行为学指标及脑内与AD密切相关的Aβ水平的变化。结果：与模型组相比,酸性肽高、中剂量组均能显著提高AD大鼠的学习、记忆能力,并能显著降低Aβ的沉积。结论：AP能减少皮质中Aβ的沉积,对AD具有治疗作用。     

原花青素对 D半乳糖联合 AlCl3诱导的阿尔茨海默病大鼠海马 Aβ、tau和SOD的影响

目的：研究原花青素对D-半乳糖（D-gal）联合三氯化铝（AlCl3）诱导的阿尔茨海默病大鼠海马Aβ、tau和超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法：D-gal腹腔注射（i.p.）180 mg · kg^-1 · d^-1联合AlCl3灌胃（i.g.）15 mg · kg^-1 · d^-112周建立阿尔茨海默病模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、维生素E组、原花青素低剂量组、原花青素高剂量组,另设空白对照组。造模后每日灌胃给相应药物一次,连续8周。于末次给药后处死,取大鼠海马部位脑组织,采用Western blot检测Aβ、SOD、tau蛋白表达。结果：与空白对照组相比,模型组Aβ、tau蛋白表达显著增加,SOD蛋白表达显著减少,差异有统计学意义（P〈0.01）。与模型组相比,随着原花青素剂量的增加,大鼠Aβ、tau蛋白表达减少,SOD蛋白表达增加,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）。结论：原花青素可改善D-gal联合AlCl3诱导的AD大鼠海马病变,其机制可能与提高海马SOD活性有关。     

阿尔茨海默病中钙调蛋白与PP2A和GSK-3β的关系

阿尔茨海默病(AD)是最常见的神经退行性疾病之一,其与表型水平的认知和记忆功能障碍相关。从神经病理学的角度来看,这种疾病的特征是细胞外老年斑和细胞内神经纤维缠结(NFT)的积累以及氧化应激,局部神经元功能障碍和树突过程的退化。除了上述特征之外,近几十年的研究表明,钙蛋白酶(calpain)在细胞中广泛地被激活,胰岛素信号传导的紊乱也是AD病理学中tau蛋白过度磷酸化不可分割的一部分。钙蛋白酶是保守的特异性依靠Ca2+激活的中性半胱氨酸蛋白酶,在体内有广泛的表达。自40多年前发现以来,钙蛋白酶家族的成员已经与多种病理状况相关联,其中包括神经退行性疾病。研究发现,在AD患者脑脊液中钙蛋白酶的表达和活性升高,并发现钙蛋白酶的活化是通过可溶性Aβ蛋白激活N-甲基-D-天冬氨酸受体介导的途径实现的。另有研究表明,钙蛋白酶内源抑制剂calpastatin能抑制神经细胞的凋亡,对神经细胞起到一定的保护作用。越来越多的证据表明,信号分子磷酸化状态的平衡是细胞信号调节的关键点。因此,激酶-磷酸酶磷的平衡是非常重要的。PP2A是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶的成员,有研究表明其在神经退行性疾病中表达异常。PP2A作为脑中最重要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,其表达的失调可能加速AD的发展。并且有研究已经证明在AD患者的脑中PP2A活性降低,在基因和蛋白质水平上PP2A的各种亚基(如PP2AC)表达均减少。神经元中tau蛋白有多个丝氨酸和苏氨酸的磷酸化位点,它的过度磷酸化会影响微管的结合和解离,形成神经内神经纤维缠结,从而中断微管网络。Tau蛋白过度磷酸化是AD的主要标志之一,已经有研究表明,AD患者脑中tau蛋白磷酸化比正常受试者高3到4倍。由于蛋白质的磷酸化水平取决于激酶/磷酸酶的活性,因此tau磷酸酶和激酶活性的不平衡可能在AD中发挥决定性作用。tau蛋白的磷酸酶是PP2A,它负责超过70%的tau蛋白丝氨酸/苏氨酸蛋白去磷酸化,同时,GSK-3β被认为是最重要的tau蛋白激酶。tau蛋白的过度磷酸化与PP2A和GSK-3β的功能障碍密切相关。本文就AD中钙蛋白酶与tau蛋白磷酸酶PP2A和tau蛋白激酶GSK-3β的相关文献进行综述。     

阿尔茨海默症治疗药物的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是一种常见的进行性神经退行性疾病,它严重影响着老年人的健康,对社会造成巨大的压力。但是由于其发病机制不明确,临床治疗效果不佳。近年来,针对AD的治疗方法层出不穷,本文就目前的研究进展进行综述。     

蒲公英总黄酮改善Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病大鼠记忆功能障碍的观察

目的：探索蒲公英总黄酮对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病（AD）大鼠记忆功能的影响以及潜在机制。方法：将50只健康SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和蒲公英总黄酮低、中、高剂量组（100、200、400 mg·kg-1）。采用大鼠右侧海马CA1 区注射1 μL Aβ25-35建立AD大鼠模型,术后各组进行灌胃治疗21d。治疗结束采用Morris水迷宫法观察大鼠的记忆能力;分离海马组织并制备组织匀浆,采取二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光法检测活性氧 (ROS) 水平;利用硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化酶法检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;将海马组织制备切片,应用TUNEL染色观察海马神经元凋亡;Western blot法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。结果：与正常对照组相比,模型组大鼠逃逸潜伏期明显延长,空间探索时间明显缩短,海马组织ROS水平增加,MDA含量明显增高,SOD活性明显下降,海马神经元细胞凋亡增加,Bax和Caspase-3表达上调同时Bcl-2表达降低。与模型组相比,不同浓度的蒲公英总黄酮均能缩短逃逸潜伏期,延长空间探索时间,降低ROS水平和MDA含量,升高SOD活性,减少神经元细胞凋亡,同时上调Bcl-2表达,降低Bax和Caspase-3表达,并且呈现浓度依赖性关系。结论：蒲公英总黄酮能够保护Aβ25-35诱导的大鼠记忆能力损伤,这可能与拮抗氧化应激介导的神经元细胞凋亡有关。     

灵芝三萜类化合物对AD大鼠脑海马神经细胞Aβ1-40的影响

目的 研究灵芝三萜类化合物(GLT)对阿尔茨海默病(AD)大鼠脑海马神经细胞Aβ1-40表达的影响.方法 将自然衰老模型大鼠60只随机均分为六组:模型组,GLT低、中、高剂量组,溶媒对照组(食用油)及阳性对照组(健脑胶囊),5个月龄大鼠10只为正常对照组.连续灌胃给药60 d后,免疫组化法检测海马Aβ1-40表达.结果 模型组海马神经细胞Aβ1-40表达增多,GLT组Aβ1-40表达减少.结论 GLT有防治AD的作用,其作用机制可能与减轻Aβ的神经毒性以及减少脑内Aβ沉积有关.     

药物CIG调节tau蛋白磷酸化改善转基因小鼠的tau蛋白病变

目的微管相关蛋白tau在阿尔茨海默病(AD)的发病机制中发挥重要的作用,并且得到了越来越多的关注。过表达P301L突变tau蛋白的rTg4510转基因小鼠具有明显的tau病理表现,广泛应用于AD的基础研究及药理研究中。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)为中药山茱萸的有效部位,在我室之前的研究中显示CIG在体外模型中可以降低tau蛋白的磷酸化。方法本研究应用rTg4510小鼠为AD病理模型,给予CIG药物处理3个月后进行行为学检测,之后分别灌注固定取材及新鲜取材。应用Western印迹等方法检测磷酸化tau蛋白、磷酸化调节酶、微管及突触相关蛋白的表达水平;应用免疫荧光等方法观察病理性tau蛋白、微管的形态、突触相关蛋白表达等;应用Serine/Threonine Phosphatase Assay检测磷酸酯酶PP2A的活性。结果 CIG可以增加rTg4510小鼠在Morris水迷宫中的空间和工作记忆,改善在物体识别实验中的物体识别记忆,降低小鼠的过度活跃状态。同时CIG可以改善rTg4510小鼠的脑萎缩,降低海马区域的神经元的丢失;同时CIG可以增加rTg4510小鼠骨架相关蛋白的表达,改善细胞骨架形态;增加小鼠突触NMDA受体及突触相关蛋白的表达,增加突触的数量。其主要的机制为CIG降低了rTg4510小鼠脑内多个位点的磷酸化,降低了病理性tau蛋白的沉积;同时降低了磷酸化的可溶性tau蛋白,降低不可溶性tau蛋白。CIG降低磷酸化的机制,发现CIG可以增加主要的磷酸酯酶PP2A的甲基化修饰,并且可以调节PP2A甲基化调节酶LCMT-1/PME-1的比例。同时,CIG可以增加内源PP2A酶的激活因子PPP2R4的表达,并增加PP2A酶的活性。结论 CIG可以改善rTg4510转基因小鼠的认知能力,改善脑萎缩和神经元的丢失,保护细胞骨架形态和突触。其主要机制为CIG降低了tau蛋白的过度磷酸化及病理性tau蛋白的沉积。进一步研究发现CIG可能通过增加内源性PP2A激活剂PTPA的表达,进而直接或通过调节PP2A的修饰间接地增加PP2A活性。因此本研究提示CIG可能作为一个潜在的以PP2A激活为靶点的抗AD药物。     

CCR3的缺失导致阿尔茨海默病小鼠模型中β-淀粉样蛋白和过度磷酸化tau蛋白的减少

目的慢性神经炎症可能参与阿尔茨海默病(AD),其特征在于,神经胶质细胞活化和促炎性细胞因子和趋化因子的分泌。趋化因子CCL11已被证明是衰老过程中认知衰退的致病因素,但它是否参与AD的发病却很少被我们所知。在本研究中,我们拟在小鼠模型中回答CCL11及其受体CCR3是否参与AD发病过程的问题。方法我们采用了免疫组化、蛋白印迹和体视学细胞计数等方法来回答上述问题。结果 CCL11特异性受体CCR3的缺失使APP/PS1双转基因小鼠脑内tau蛋白磷酸化,Aβ沉积以及小胶质细胞及星形胶质细胞增生显著降低。结论 CCL11的增加可能是AD的危险因素,并且拮抗CCR3可能给AD带来治疗益处。     

β-淀粉样蛋白对大鼠学习记忆、病理及tau蛋白磷酸化的影响

目的研究大鼠海马区内注射β-淀粉样蛋白（Aβ）的神经毒性,建立阿尔茨海默病（AD）动物模型,探讨Aβ毒性机制。方法选取雌性成年SD大鼠24只,随机分为止常对照组、生理盐水组、AD组,每组8只。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,HE染色及B ielschowsk i染色法观察海马神经元形态,免疫组化法观察tau蛋白异常磷酸化变化。结果与正常对照组大鼠相比,AD组大鼠水迷富测试结果明显减退（P〈0.01）;海马CA1区神经元纤维形态紊乱,tau蛋白磷酸化阳性细胞数明显增多（P〈0.01）。结论大鼠海马内注射凝集态Aβ可产生神经毒性作用,能较好地模拟AD行为和病理表现,其神经毒性可能是通过tau蛋白的异常磷酸化起作用。     

加兰他敏治疗阿尔茨海默症的研究进展

加兰他敏是从雪片莲中提取的一种生物碱,具有可逆性胆碱酯酶抑制活性.它不仅用于脊髓灰质炎和相关的肌无力、局部麻痹的治疗,更因为它良好的中枢胆碱活性而应用于改善阿尔茨海默病人的思维和记忆功能.现对加兰他敏的作用机制和药效等作一综述,以增进对其治疗阿尔茨海默病及相关疾病的重视.     

葛根素对阿尔茨海默病细胞模型Aβ蛋白的抑制作用

目的在过表达β淀粉样前体蛋白的SH-SY5Y细胞上(SH-SY5Y/APP695)观察葛根素对β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)生成的作用,探讨其防治阿尔茨海默病的机制。方法葛根素2.5,5和10μmol·L-1处理SH-SY5Y/APP细胞24 h,MTT法检测细胞活力,ELISA试剂盒测定细胞外Aβ1-40和Aβ1-42水平;Western blot蛋白质印迹法检测APP及β-分泌酶的蛋白表达变化;荧光法测β-分泌酶的活性;RT-PCR法检测β-分泌酶转录的变化。结果葛根素可剂量依赖性的减少SH-SY5Y/APP695细胞外Aβ1-40、Aβ1-42的水平;酶活性分析显示2.5,5和10μmol·L-1的葛根素分别抑制了15%,30%和40%β-分泌酶的活性。Western blot印迹结果显示,葛根素能剂量依赖性抑制β-分泌酶蛋白表达,2.5,5和10μmol·L-1的葛根素使β-分泌酶的蛋白表达分别减少至82%,71%和45%,与空白对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论葛根素通过下调β-分泌酶蛋白的表达、抑制β-分泌酶的活性减少Aβ的形成,这可能是葛根素防治阿尔茨海默病作用的重要机制之一。