牛磺酸镁抗豚鼠离体心脏2型短QT综合征作用的研究

目的观察牛磺酸镁配合物(taurine-magnesium coordination compound,TMCC)对豚鼠离体心脏表面心电图的影响,初步探索TMCC抗2型短QT综合征(type 2 short QT syndrome,SQT2)的作用。方法采用Langendorff主动脉逆行灌流法对豚鼠离体心脏进行灌流,利用Biopac生理记录仪采集豚鼠离体心脏表面Ⅱ导联心电图以观测TMCC在应用吡那地尔(pinacidil)诱导SQT2条件下,对豚鼠离体心脏QT间期、有效不应期、跨室壁复极离散度、RR和QT间期不稳定性等的影响。结果 TMCC能够逆转吡那地尔所致QT间期的缩短,逆转吡那地尔所致有效不应期的缩短,降低吡那地尔所致的跨室壁复极离散度增大,减小吡那地尔所致的RR、QT间期不稳定性增大。结论 TMCC通过延长QT间期和有效不应期、降低跨室壁复极离散度和不稳定性等作用对SQT2有一定治疗作用。     

hERG钾离子通道表达系统的建立及其对药物致QT间期的影响

目的药物致QT间期延长的副作用已成为药物安全管理部门和药物公司广泛关注的药物心脏毒性问题。源于许多非抗心律失常药物能通过阻断hERG(huma nether-a-gogo related gene)钾离子通道使动作电位QT间期延长,进而导致尖端扭转性室性心动过速(TdP),甚至猝死。本研究基于hERG表达系统,通过膜片钳技术观察hERG通道的电生理学特性,构建药物致QT间期延长体外评价模型,同时观察中药成分三七总皂苷(PNS)对hERG电流的影响,为药物致QT间期延长的安全性评价提供技术手段。方法用WesternBlot方法对转染hERG通道蛋白的HEK293细胞株进行确证。使用膜片钳技术,通过全细胞记录模式,记录hERG电流,观察hERG电流的电生理学特性及PNS对hERG电流的影响。结果Western Blot结果表明,转染hERG通道的HEK293细胞在155kDa和135kDa处分别有两条明显的蛋白条带,而未转染的HEK293细胞未出现这样的条带,与文献报道一致。hERG钾离子通道特异性阻断剂E-4031能明显阻断hERG电流。实验结果证明hERG蛋白稳定转染于HEK293细胞上并能成功地记录到hERG特征性表达电流。通过膜片钳全细胞记录模式观察到hERG电流的内向整流特性及细胞外钾离子浓度对hERG电流的影响。初步观察了PNS对hERG电流的作用,100和300μg/mlPNS有明显增大hERG电流的作用,呈剂量时间依赖性,表现为PNS使hERG电流激活曲线左移,尾电流峰值幅度上升并延缓尾电流的失活过程。结论成功地建立了药物致QT间期延长体外评价hERG模型;中药成分三七总皂苷(PNS)对hERG电流具有兴奋性效应,提示PNS具有缩短心肌细胞动作电位时程的作用。     

双黄连粉针剂对豚鼠心肌电生理的影响

目的探讨双黄连粉针剂对豚鼠心脏电生理的影响,以及其心脏安全性及作用机制。方法①在体实验:双黄连粉针剂325.5,1627.5和3255.0mg·kg-1分别在两组动物进行,每组15只。一组动物按照生理盐水→双黄连粉针剂325.5→1627.5mg·kg-1,另一组按照生理盐水→双黄连粉针剂3255.0mg·kg-1的顺序经颈外静脉缓慢推注,持续5min。于给生理盐水及静脉推注各剂量药物后5min记录心电图,分析P-R间期和校正QT间期(QTc)。②离体实验:按照灌流液(空白对照)→双黄连粉针剂0.3→1.5→3→9g·L-1→洗脱的顺序灌流,持续5min。于灌流5min末记录豚鼠离体心脏心电图,分析7只豚鼠的P-R间期和QTc间期;记录左心室乳头肌动作电位,分析5只豚鼠的动作电位复极50%水平时程(APD50)和90%水平时程(APD90)。结果①在体豚鼠心电图表明,双黄连粉针剂325.5和1627.5mg·kg-1显著延长P-R间期,从生理盐水处理时的(59±5)ms分别延长到(74±10)ms和(88±20)ms(P<0.05),各浓度组的QTc间期无明显变化;双黄连粉针剂3255.0mg·kg-1处理P-R间期则从生理盐水处理时的(58±5)ms延长到(133±29)ms(P<0.05),QTc从(247±16)ms延长到(301±65)ms(P<0.05),并显示明显的室内传导阻滞。②离体豚鼠心电图表明,双黄连粉针剂3和9g·L-1使空白对照组P-R间期从(84±17)ms延长到(113±39)ms和(130±23)ms(P<0.05),伴有明显的室内传导阻滞,而各浓度组的QTc间期无明显变化。双黄连粉针剂各浓度组对正常豚鼠左心室乳头肌动作电位APD50与APD90无明显作用。结论注射用双黄连粉针剂能引起豚鼠房室和室内传导阻滞,其作用机制可能是抑制心肌细胞钠通道。     

康普瑞丁磷酸二钠对豚鼠心室肌细胞动作电位和hERG通道电流的影响

目的研究康普瑞汀磷酸二钠(CA4P)对豚鼠心室肌细胞动作电位间期(APD)和人类ether-a-go-go相关基因(hERG)编码的K~+离子通道的影响,探讨CA4P对心脏毒性作用的体外细胞学机制。方法使用全细胞膜片钳技术记录CA4P10、100μmol/L作用下豚鼠心肌细胞的动作电位,并记录CA4P 3、10、30、100、300μmol/L下对HEK293细胞hERG通道尾电流的抑制率及CA4P 30μmol/L在10、20、30、40、50 mV时对h ERG电流的抑制率。结果 CA4P 10、100μmol/L显著延长动作电位复极50%时程(ADP_(50))和动作电位复极90%时程(ADP_(90))。CA4P可浓度相关性和电压相关性抑制hERG尾电流幅度,半数抑制浓度(IC_(50))为54.9μmol/L,安全边缘范围为30.5～2.8。结论 CA4P可延长动作电位间期及抑制hERG通道电流。     

当前对小分子药物致QTc间期延长评价的探索(英文)

对QT间期延长的评估是小分子药物研发过程中的关键一步。ICHS7A/S7B为指导这个心血管风险评估提供了主要框架。ICH指南描述了通过体外hERG抑制、离体动作电位时间和在体心电图等三步法来评估QT间期延长。狗、猴、猪、兔、雪貂和豚鼠是常用实验动物用于体内的电生理研究,尤其使用清醒的比格犬。在这些指南中标准研究的基础上,大量新的非在体研发方法也在使用。例如受体结合对hERG抑制、离体兔子心脏或豚鼠心脏灌流等方法。这些模型和临床都有较好的相关性,并且具有成本低廉、实验周期短的特点。因此能够帮助快速准确的预测潜在的心脏病风险,从而加速小分子研发的进程。     

室速与心电图T波峰末间期及QT离散度的关系

T波峰末间期(Tpeal-Tend inferval,Tpe)是指T波顶峰至T波终末之间的一段时间,可作为反映心室跨壁复极离散度的量化指标[1～2].国内外较多文献报道已证实,心室肌跨壁复极离散度是一个正常存在的电生理现象,并且发现异常增大的跨壁复极离散度是多种室性心律失常(室速,室颤,心性猝死)发生的主要基质.如果T波峰末间期被证实能准确反映跨壁复极,必将为临床预测恶性心律失常发生的危险性提供一个重要的预测指标.QTd的增大与室速的发作有正相关性,已被较多的学者所认可[2],本文通过同步十二导动态心电图中检出的阵发性室速病例与无室速者进行对比分析,旨在探讨Tpe及QTd与阵发性室速发作的相关性及两者的预测敏感性.     

丹红注射液对兔离体左心室心电图及致心律失常作用

目的 观察丹红注射液(抗凝中药)对兔心脏电活动除极和复极过程的影响.方法 选用冠状动脉灌注兔左心室楔形组织块标本,对标本施加刺激周长(BCL)1000 ms基础刺激,1 h后进行实验;实验组给予丹红注射液;同时,分别以卡托普利和司帕沙星作为阴性对照组和阳性对照组,观察对跨壁心电图QRs复合波时程、QT间期、T波峰值至终点的时程(Tp-e)的影响,以及是否引早期后除极(EAD)和尖端扭转型室速(TdP).结果 丹红注射液对QRS波宽度无明显影响;当给予20、60 mL·L~(-1)时,较阴性对照组QT间期轻度延长(P<0.05),并与相关浓度的卡托普利作用一致;但对Tp-e间期及Tp-e/QT比值均无明显影响(P>0.05),且未诱发EAD或Tdp.结论 丹红注射液在本实验浓度范围内,仍无明显诱发尖端扭转型室速和其他室性心律失常的危险性.     

靶向hERG通道评价羟基吴茱萸次碱的心脏安全性

药物诱发长QT间期综合征(long QT syndrome, LQTS)已成为临床上重要的研究课题,其中获得性长QT间期综合征(acLQTS)的发生主要是药物抑制人类ether-α-go-go相关基因(the human ether-α-go-go related gene,hERG)通道所致。hERG基因编码快速激活延迟整流钾离子通道(rapid component of the delayed rectifier potassium current, Ikr)的α亚基,其在动作电位3期复极过程中发挥重要作用,也是大多数抗心律失常药物作用的靶点。本文旨在探讨羟基吴茱萸次碱(hydroxyrutaecarpine, HRU)对hERG通道的影响,评估其心脏安全性。利用全细胞膜片钳技术记录HRU对hERG通道电流及动力学的影响,并验证与hERG通道的结合位点。运用PCR技术测定HRU对hERG mRNA表达水平的影响。利用Western blot技术检测HRU对hERG蛋白和转录因子Sp1 (specificity protein 1)表达的影响。采用免疫荧光技术证实HRU对hERG蛋白...     

流浪精神病患者Q-Tc、Q-Tcd的对照研究

目的探讨流浪活动对精神病患者是否有心室复极影响,从而评价流浪精神病患者入院时心脏事件的安全性。方法对50例初诊流浪精神病患者,50例普通精神病患者在入院时及住院4周后分别进行进行心电图检查,测量得出的校正QT间期(Q-Tc)、QT离散度(Q-Td)、校正QT离散度(Q-Tcd),以正常职工体检人员50例进行对照分析。结果流浪精神病患者组和普通精神病患者入院时比较,以及和对照组比较,均有QT间期延长,QT弥散度增大,比较差异有统计学意义(P 0.05),住院4周后流浪精神病患者组和普通精神病患者组较入院QT间期(Q-Tc)、QT离散度(Q-Td)、校正QT离散度(Q-Tcd)数值增大,二者比较差异无统计学意义(P0.05)。结论流浪精神病患者流浪期间有Q-Tc延长、QT离散度增大,存在心脏复极影响,存在心脏事件的风险。     

非抗心律失常药的致心律失常作用及相关危险因子

获得性QT间期延长综合征 (LQTS)可由抗心律失常药以外的药物引起 ,包括促胃肠动力药、止吐药、抗心律失常药以外的心血管药物、抗菌药、静脉麻醉药、抗精神病药、抗抑郁药、抗组胺药等 ,它们可阻断心脏的电压门控性通道特别是延迟整流钾电流的快速激活成分 (IKr)、延长动作电位时程(APD)及QT间期、诱发尖端扭转型室性心动过速(TdP)等快速型室性心律失常。一些常见的危险因子如女性 ,电解质紊乱 (特别是低钾、低镁 ) ,临床显著的心动过缓或心脏疾病 ,遗传性LQTS ,肝、肾功能障碍 ,与其他药物合用所致的药动学与药效学的相互作用等通过减少复极储备 ,大大增加诱发TdP的可能性