胶乳凝集抑制试验的质控及影响因素

检测尿ＨＣＧ用胶乳凝集抑制反应（ＬＡＩ）［１］，方法简便快速，经济实惠，准确性高。但干扰因素不少，有必要进行质量控制。现就质控方法介绍如下，供同行参考。１试剂的准备１．１胶乳抗原抗血清（上海医化所提供）。１．２阴性对照取非妊娠妇女（蛋白定性阴性）的尿...     

不同免疫程序制备伤寒抗血清的效价比较

目的 比较两种免疫程序制备伤寒杆菌抗血清的效价,寻求获取符合实验教学需要的高效价伤寒抗血清的较佳方法.方法 采用2天短期间隔的免疫程序和常规2周间隔的免疫程序,分别以伤寒沙门菌O、H菌液免疫家兔,用试管凝集法检测并比较其血清抗体效价.结果 免疫后获取的伤寒沙门菌O抗原和H抗原抗血清的几何平均滴度(GMT),2天间隔免疫程序分别为1∶22807和1∶25600,2周间隔免疫程序分别为1∶2691和1∶5702.结论 2天短间隔免疫程序所制备的伤寒杆菌抗血清效价较高,不失为获取实验教学用抗血清的较佳免疫程序.     

睑结膜注射法制备抗血清

<正> 制备动物抗血清是免疫病理工作中必不可少的环节。尤其是在目前免疫组织化学技术广泛开展,对抗血清种类的需要不断增加,而国内尚缺乏成套商品供应的情况下,自已动手制备抗血清更显得重要。传统的注射抗原的部位有皮下、皮内、肌肉、腹腔、静脉和局部淋巴结等.这些方法有的操作复杂,有的需要时间太长,有的则不能产生满意的抗体效价。我们根据冯元春的报道并经我们的实验证实,睑结膜注射血清抗原是一种制备抗血清的较好方法。     

细粒棘球蚴抗血清的制备及特性鉴定

为制备用于细粒棘球蚴重组抗原目的基因免疫学筛选的抗血清,并且进行特性鉴定,用抗原免疫法获得抗血清,并用Westen-blot法和ELISA法对其特性进行鉴定。结果,经Westen-blot法鉴定,制备出的抗血清能识别分子量为32、36、42、58、67kDa以及88kDa以上的细粒棘球蚴天然抗原成分,而对照组血清则不能识别相应的蛋白。ELISA法测定血清抗体效价均达到1×10-4。制备的抗血清具有良好的特异性和较高的抗体效价。     

绵羊红细胞与鸡红细胞制备溶血素在免疫学溶血反应中的运用比较

目的比较并检测两种动物红细胞（RBC）免疫家兔制备溶血素的效价,且在免疫学溶血反应中的效果比较,寻求获取符合医学免疫学实验教学需求的高效价溶血素的较佳方法。方法选择两种免疫抗原—绵羊红细胞（SRBC）和鸡红细胞（CRBC）腹腔多点注射家兔制备溶血素,用血球凝集法和补体溶血试验检测并比较两种不同免疫抗原所制备抗血清的效价,且通过在免疫学溶血反应中的溶血素运用效果,比较两种动物RBC作为免疫原获取溶血素是否能得到满意的结果。结果免疫后获得的溶血素效价几何平均滴度（GMT）抗-SRBC为1：333.44（血球凝集法）和1：267.77（补体溶血试验）,抗-CRBC为1：286.22（血球凝集法）和1：154.48（补体溶血试验）。结论以CRBC免疫家兔所制备的溶血素效价低于SRBC,两种血清溶血素应用于溶血反应时,抗-SRBC溶血素可产生较好的溶血效果,而抗-CRBC溶血素不能产生完全透明溶血现象。故不能替代SRBC用作免疫学溶血反应实验的红细胞抗原。     

羊红血球凝集抑制试验测定尿绒毛膜促性腺激素的临床应用

<正> 绒毛膜促性腺激素(以下简称为HCG)是妊娠时胎盘分泌的一种激素。常用的尿青蛙试验和乳胶试验测定尿中HCG 是一种定性试验,敏感度较低。而羊红血球凝集抑制试验测定尿中HCG 是一种定量试验,敏感度较高,对早期妊娠、葡萄胎、绒癌的辅助诊断,以及对后二者疾病治疗指标的提示、治疗效果的判断和随访观察均有很大意义。我院1978年2月—79年8月,采用上海生物化学制药厂供应的妊娠半定量试剂作HCG稀释半定量试验和浓缩半定量试验,共测定311     

抗"O"试验的模拟方法

目的 节约实验经费，同时解决还原溶血素超时影响实验时间安排的问题。方法 （1）溶血抑制法：用蒸馏水代替生理盐水和还原溶血素，用12g／L盐水代替1：200的阳性被检血清；或者用0．5g／L胆盐溶液代替还原溶血素，用20g／L氯化钙溶液代替1：200的阳性被检血清；（2）胶乳凝集法：用硫酸铝钾液代替阳性血清，用牙膏液代替ASO胶乳抗原。结果 溶血抑制法获得1：400效价，胶乳凝集法获得阳性凝集现象。结论 采用上述方法可分别代替抗“O”试验溶血抑制法或胶乳凝集法，可既经济又简便地开出该项教学实验。     

胶乳凝集法测定尿中微量血红蛋白的探讨

报道了胶乳凝集试验测定尿中微量血红蛋白的方法。抗原用人红细胞分离出ＨｂＡ，免疫家兔，获得特异性抗体致敏在胶乳上，结果表明，尿中微量血红蛋白最低检出量为１５０ｎｇ／ｍ１，与日本伊腾氏报道基本一致。试验采用玻片凝集，５分钟内即可得出结果。本法简便，快速、敏感、特异、有利于临床开展，也可作为尿液分析仪检测的一个补充。文中还对假阳性，假阴性的问题进行了探讨。     

抗HCG单克隆抗体细胞系的建立及应用

以注射用HCG免疫BALb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经4次克隆化筛选,建立分泌抗HCG单克隆抗体的杂交瘤株,命名为IC_(12),经鉴定,单克隆抗体(mcAb)属于鼠IgG_1亚类。效价为ELISA法1:64000,胶乳凝集法1:512。化学交联HCG、MCAb聚苯乙烯胶乳,直接凝集试验(抗原对抗体),检测100例早孕尿液,阳性率100％,与市售常规妊娠胶乳试验相比已显示出非凡的特异性。     

实验教学中颗粒性抗原与可溶性抗原制备抗血清的方法及其应用

目的比较颗粒性抗原与可溶性抗原制备抗血清的效价,寻求获取符合实验教学需要的高效价抗血清的较佳方法。方法牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）作为可溶性抗原,伤寒“H”菌液作为颗粒性抗原,采用1周间隔的免疫程序,以BSA和伤寒杆菌“H”菌液免疫家兔,用对流免疫电泳和双向琼脂扩散试验、肥达试验检测并比较其血清抗体效价。结果浓度为7×109个/ml伤寒杆菌“H”菌液免疫家兔后获取的伤寒“H”抗血清几何平均滴度（geometry mean titer,GMT）为1∶9051.07,浓度为5mg/ml BSA免疫家兔后测得抗血清GMT分别为1∶3.668和1∶6.17。结论颗粒性抗原与可溶性抗原1周间隔免疫程序制备的抗血清可获取符合实验教学的抗血清效价。     

保证妊娠胶乳凝集抑制试验准确性的几点改进

绒毛膜促性腺激素（HCG）的测定，对早期妊娠及妊娠有关疾病的诊断具有重要价值。在一些基层化验室，比较常用的方法是胶乳凝集抑制试验，此法操作简便省时，但影响因素较多，如试剂的敏感性、尿中杂质的干扰、温度、观察时间和一些病理改变（如脑垂体病。甲状腺功能亢进、卵巢肿瘤、子宫内膜增生、子宫内膜癌等）均能影响试验结果。有的作者采用阴性对照，虽可解决部分假阳性问题，但仍不能排除上述因素的影响。笔者对此作了改进，提高了试验的准确度，现报道如下。1材料与方法1．1反应板1．2试剂相互匹配的抗HCG血清和HCG胶乳抗原，阳…     

短程免疫法制备抗血清效果比较

目的探讨快速制备抗血清的方法和效果,以适应其在实验教学中的需要。方法采用短程免疫法,对家兔分组,用大肠杆菌抗原菌液、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原小剂量连续多次接种后,收集抗血清,对其效价进行测定,并与传统抗血清制备方法进行比较。结果经大肠杆菌抗原、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原免疫后的抗血清最终分别达到1∶10240、1∶1200和1∶10240的高效价。结论此方案制备抗血清所用时间短,效价高,亲和力强,适用于实验教学。     

微量重组白细胞介素2抗原制备抗血清

重组白细胞介素2(recombined interleukin 2,r-IL2)是近年来研究较多的一种重要生物活性物质。由于纯化制备困难,无充足来源,且价格昂贵。按常规方法每只小鼠需数百微克抗原物质制备抗血清。本试验介绍了用较少量抗原免疫小鼠而获得较高效价抗血清,此对单克隆抗体的制备有一定意义。     

短程免疫法制备高效价抗血清研究

目的:探索快速制备免疫血清的方法和效果。方法:采用短程免疫法,分别以伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原分组小剂量连续多次免疫家兔后,收集抗血清,用ELISA间接法测定抗体效价。结果:ELISA结果显示伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原抗血清最终分别达到1∶20 480和1∶10 240的高效价。结论:短程免疫法所制备抗血清效价高,亲和力强。     

妊娠早期胎儿性别鉴定的试验

中国科学院遗传研究所在提取孕妇尿中的绒毛膜促性腺激素的过程中,对此激素的作用进行了讨论,认为此激素可能与性分化有关。他们从探索早期胎儿性别的鉴定方法入手,经过一年左右的试验,他们发现微量免疫扩散法是妊娠早期胎儿性别鉴定的一个较为简便的新方法。根据免疫学基本原理,某些抗原物质进入动物体后,可引起动物血清     

SP-B中间产物特异性抗体的制备与鉴定

目的制备和鉴定表面活性物质蛋白B(surfactant protein B,SP-B)加工处理过程中部分中间产物的特异性抗体。方法利用Lasergene 7.0和Macvector 11.0.4软件进行抗原表位分析,确定作为抗原的3条多肽序列,将人工合成的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫前血清背景和免疫后血清效价,抗原亲和纯化抗血清,超滤浓缩抗体,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测抗体纯度,间接ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹(Western blot)鉴定抗体特异性。结果免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价均达到要求,抗原亲和纯化后所得抗体纯度及效价高,特异性好。结论成功制备了3种SP-B中间产物特异性多克隆抗体,为深入研究SP-B的加工处理奠定了基础。     

石杉碱甲人工抗原的合成、鉴定及免疫原性分析

目的 制备乙酰胆碱脂酶抑制活性成分石杉碱甲(huperzine A,HupA)的人工抗原及抗血清.方法 将HupA与戊二醛、载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)反应偶联,制得半抗原-载体蛋白复合物后,用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定其中结合的半抗原数目;以此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,并通过ELISA法检测其抗体效价和特异性.结果 合成的人工抗原HupA-GA-BSA中HupA与BSA的结合比约为8:1;免疫小鼠得到特异针对HupA的抗血清,HupA抗体的效价为1:62 500.结论 成功地合成了HupA的人工抗原,且该抗原有较好的免疫原性.     

短程免疫法制备免疫血清的方法和效果

目的 探讨快速制备抗血清的方法 和效果.方法 采用短程免疫法,以家兔为实验动物,分别用大肠杆菌抗原菌液、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原小剂量连续多次接种后,收集抗血清,对其效价进行测定.结果 经大肠杆菌抗原、SRBC抗原和鸡蛋黄等抗原免疫后的免疫血清最终分别达到1∶10 240、1∶1 200和1∶10 240的高效价.结论 此方案制备免疫血清所用时间短,效价高,亲和力强,适用于实验教学.     

尿HCG连续测定用于先兆流产的监护

鸡红血球凝集抑制试剂,是我所在上海羊红血球凝集抑制试剂基础上改进而成。临床用于对先兆流产的妊妇,测定尿中绒毛膜促性腺激素(以下简称 HCG),作为保胎的监护手段。现将82例结果报告如下。     

早早孕免疫目力测定盒临床应用

早早孕诊断方法是一种基子夹心层原理的固相酶联免疫吸附分析法。利用此法定性主要是测尿液或血清中人绒毛膜促性腺激素提供了一种迅速灵敏的单克隆酶免疫分析方法。经过我们临床应用认为是妊娠早期诊断的最佳方法。我院自1988—1993年五年中观察试验近2500例妊娠妇女的尿液，平均阳性率在99．9％。其中妊娠35天至45天者尤为灵敏（100％阳性）此法与胶乳凝集抑制实验比较后者只在60天至70天时阳性率最高，而在35天至60天前虽可检出，但阳性率只在89％。由此可见早早孕酶免疫测定盒远优于胶乳凝集抑制实验。早早孕免疫目力测定盒临床应用@王…