对—壬基酚对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的：了解对－壬基酚（p-NP)的体外发育毒性特点，为揭示对－壬基酚的发育毒性作用机制提供实验依据。方法：采用微团培养观察不同浓度的对－壬基酚（0－17.5mg/L)对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果：对－壬基酚对大鼠胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用，表现为染毒组肢芽细胞集落形成率降低，细胞毒性试验吸光度值下降，并有明显的剂量－反应关系。对－壬基酚对肢芽细胞的50％增殖抑制浓度（IP50）和50％分化抑制浓度（IP50）分别为15．85mg/L和11.86mg/L,IP50/ID50=1.34。结论：按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准，对－壬基酚属于阳性致畸物，对大鼠胚胎肢芽细胞的分化和增殖均有特异性抑制作用。     

采用微团培养技术探讨双酚A的体外发育毒性

采用微团培养观察了不同浓度的双酚A(0～ 5 0mg L)对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响 ,旨在了解双酚A的体外发育毒性特点及其可能的作用机制。结果显示 :双酚A对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用 ,表现为染毒组肢芽细胞集落形成数量减少 ,细胞毒性试验吸光度值下降 ,并呈现出明显的剂量 反应关系。双酚A对肢芽细胞的 5 0 %增殖抑制浓度 (IP50 )和5 0 %分化抑制浓度 (ID50 )分别为 38 74mg L和 2 7 93mg L ,IP50 ID50 =1 39。按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准 ,双酚A属于阳性致畸物 ,对肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用     

碱性橙Ⅱ对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的探讨碱性橙Ⅱ对13日龄SD大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。方法分离13日龄SD大鼠胚胎肢芽细胞进行微团培养,不同浓度的碱性橙Ⅱ(0.0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0和400.0 mg/L)作用于肢芽细胞,采用CCK8试剂盒检测碱性橙Ⅱ对细胞增殖的影响,采用阿利新蓝8GX染色方法检测碱性橙Ⅱ对肢芽细胞分化的影响。结果随着碱性橙Ⅱ染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞集落数逐渐减少,细胞增殖率下降,均具有较明显的剂量-效应关系(r细胞毒性=0.958,r细胞分化=0.946);碱性橙Ⅱ对肢芽细胞的半数增殖抑制浓度(p ID50)和半数分化抑制浓度(d ID50)分别为240.6和69.3 mg/L,对细胞分化的抑制作用大于对增殖的抑制作用。结论碱性橙Ⅱ对胚胎肢芽细胞的增殖和分化有抑制作用,可能对大鼠胚胎具有潜在的发育毒性。     

砷对大鼠肢芽细胞增殖和分化的影响

为了进一步阐明三氧化二砷的发育毒性，本研究应用Ｆｌｉｎｔ等人建立的胚胎肢芽细胞微团培养法，探讨了不同浓度砷对体外培养的ＳＤ大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果表明砷对大鼠肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用，呈明显的剂量－反应关系；砷对肢芽细胞的５０％增殖抑制浓度（ＩＰ５０）和５０％分化抑制浓度（ＩＤ５０）分别为０．７０ｍｇ／Ｌ和０．２１ｍｇ／Ｌ；ＩＰ５０／ＩＤ５０值为３．３，揭示砷对大鼠肢芽细胞分化的影响要远大于对细胞增殖的影响。根据Ｒｅｎａｕｌｔ等人推荐的体外致畸判断标准，砷属于强致畸物。实验结果提示砷对大鼠肢芽细胞分化的抑制作用可能并非其细胞毒性作用所致，这是砷致畸作用的重要基础之一。此外还初步探讨了大鼠肢芽细胞异常分化的分子机制。     

甲醛对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化及增殖的影响

目的 探讨甲醛对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化、增殖的影响. 方法分离12 d龄小鼠胚胎肢芽和中脑细胞,与不同浓度的甲醛共培养,观察肢芽和中脑细胞的分化与增殖. 结果随着甲醛染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞的集落数逐渐减少,中脑细胞形成神经集落数减少、体积小,集落细胞间突起数量减少(P<0.01),肢芽细胞和中脑细胞增殖率下降(P<0.01),均具有剂量-效应关系;甲醛对肢芽细胞的半数分化抑制浓度(dID50)和半数增殖抑制浓度(pID50)分别为14.63μmol/L和27.67μmol/L,对中脑细胞的dID50和pID50分别为16.46 μmol/L和26.92μmol/L. 结论甲醛对胚胎中脑及肢芽细胞的分化和增殖有抑制作用,可能对胚胎骨和脑具有发育毒性.     

应用中脑细胞微团培养技术探讨双酚A的发育毒性

目的 为揭示双酚A(BPA)是否具有神经系统发育毒性及其毒作用机制提供实验依据。方法 采用微团培养技术观察不同浓度的BPA(0—60mg／L)对体外培养的13d龄Wistar大鼠胚胎中脑细胞分化的影响及其细胞毒性作用。结果 BPA对体外培养的大鼠胚胎中脑细胞的存活和分化均有抑制作用并呈现出明显的剂量反应关系。BPA对中脑细胞的50％细胞存活抑制浓度(ICV50)和50％分化抑制浓度(ICD50)分别为57．2mg/L和24．6mg／L。两者比值为2.33。结论 BPA对大岚胚胎中脑细胞分化的抑制作用大于对细胞存活的抑制作用。按照Flint等人推荐的体外致畸分类标准，BPA属于阳性致畸物。     

硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞增殖和分化的影响

目的研究硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞的增殖和分化的影响。方法应用微团培养法探讨不同浓度铝(0~100μmol/L)对体外培养的小鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果铝对肢芽细胞的50%增殖抑制浓度(IP50)和50%分化抑制浓度(ID50)分别为45.97和3.60μmol/L,IP50/ID50值为12.8,并有明显的剂量?反应关系。结论硫酸铝钾对胎鼠肢芽细胞的增殖和分化可能有抑制作用。     

钙和锌对胚胎肢芽细胞体外培养增殖分化的影响

目的:研究钙和锌对大鼠胚胎肢芽细胞分化和增殖效应关系,并探讨其中的机制。方法:利用16 d大鼠胚胎肢芽细胞进行原代培养,观察氯化钙和氯化锌对细胞增殖和分化的影响,并利用图像分析细胞形态的变化、丙二醛(MDA)和蛋白质相对含量。结果:钙和锌能促进体外培养胚胎肢芽细胞增多。测得胚胎肢芽细胞内蛋白质相对含量明显高于对照组,200.0 mol/L钙和锌浓度时MDA活性明显增加。结论:当50.0~100.0 mol/L钙和锌浓度时对体外培养胚胎肢芽细胞的生长发育有一定的促进生长分化作用,200.0 mol/L钙和锌浓度时对体外培养胚胎肢芽细胞的生长发育有明显的细胞毒性和抑制作用。     

同型半胱氨酸对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的 进一步研究同型半胱氨酸(HCY)的致畸性及作用机制。方法 应用大鼠胚胎胚芽细胞微团培养法了解HCY对胚胎胚芽细胞增殖和分化的影响。结果 随着剂量的增加,HCY表现了对胚胎肢芽细胞的促进和抑制双相作用。半数抑制分化浓度(IC_(50))是5.0mmol/L,当加入S9时,IC_(50)减至3.5mmol/L;半数抑制增殖浓度是9.5mol/L,当加入S9时,IC_(50)为5.8mmol/L。结论 HCY对胚胎细胞分化的影响更为显著,对大鼠致畸作用不明显。     

亚硒酸钠对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响

目的 探讨亚硒酸钠对大鼠胚胎的致畸性。方法 采用胚胎肢芽细胞培养方法，观察亚硒酸钠对大白鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果 试验显示亚硒酸钠对大鼠肢芽细胞半数抑制分化浓度（ID50）为10．92μmol/L，半数抑制细胞增殖浓度（IP50）为7．95μmol/L。结论 亚硒酸钠的IP50／ID50值为0．728（＜6）,表明亚硒酸钠只是一种细胞毒性物质，而非致畸物。     

乙醛对大鼠胚胎肢芽细胞增殖分化的影响研究

目的研究乙醛的发育毒性和致畸性。方法从１３天龄大鼠胚胎中分离肢芽细胞,体外施予不同剂量的乙醛（０１,０２,０５,２０,８０,１６０,３２０ｍｍｏｌ／Ｌ）连续培养５天,根据肢芽细胞蛋白质合成和集落形成抑制水平反映乙醛的致畸性。结果乙醛在０１ｍｍｏｌ／Ｌ即能影响肢芽细胞的增殖分化,而在２０ｍｍｏｌ／Ｌ以上时细胞则大量死亡,显示其细胞毒性。其ＩＰ５０,ＩＤ５０分别为６８４ｍｍｏｌ／Ｌ,５５０ｍｍｏｌ／Ｌ。增殖分化抑制曲线经拟合后判断乙醛是一种非特异性增殖分化抑制物。结论乙醛具有发育毒性作用和潜在的致畸作用。     

双酚A对植入后大鼠、小鼠胚胎致畸性的体外实验研究

为揭示双酚A(BPA)的发育毒性及其可能的作用机制 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 5日龄BalB C小鼠胚胎和 9 5日龄大鼠胚胎分别与含BPA的大鼠即刻离心血清共培养 48h(BPA终浓度为 0、40、60、80、10 0mg L) ,观察双酚A对小鼠和大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示 ,随着BPA剂量的增加胚胎在体外的生长发育受影响越严重 ,呈现出明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。≥ 60mg L的BPA可诱发小鼠及大鼠胚胎的卵黄囊生长和血管分化不良、生长迟缓及形态分化异常 ,严重者出现体位异常、神经系统、鳃弓发育异常及小眼、小肢芽等畸形。提示在较高剂量下 ,BPA对体外培养的大鼠和小鼠胚胎具有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其致畸作用的机制之一     

醋酸铅的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养，研究了醋酸铅的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示醋酸铅的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为２２ｍｇ／Ｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经纤维减少等形态学变化，其中前者呈剂量—效应关系，表明醋酸铅可抑制胚胎神经细胞的分化、增殖，半数分化抑制浓度（ＩＣＤ５０）为３０ｍｇ／Ｌ，（Ｖ／Ｄ）的比值为７３。本研究表明抑制细胞分化、增殖可能是醋酸铅致发育危害的重要作用机理     

稳恒磁场对大鼠胚胎肢芽细胞发育毒性的研究

目的 研究稳恒磁场对肢芽细胞增殖和分化的强度效应关系。方法 利用大鼠胚胎肢芽细胞进行原代培养,观察培养物经不同强度的稳恒磁场,对细胞增殖和分化的影响。有效期利用图像分析细胞形态的变化。结果 各组磁场强度能明显抑制肢芽细胞增殖和分化,集落形成率明显减少,并显示强度效应关系。拟合细胞分化和增殖抑制曲线,计算得大鼠半数分化抑制强度（ICD50）为35mT,半数存活抑制强度（IVD50）为48mT。结论 抑制细胞分化、增殖可能是稳恒磁场强度致发育危害的结果。     

醋酸锌对大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化影响的研究

目的　研究醋酸锌对原代培养的大鼠胚胎肢芽细胞形态、细胞相对蛋白含量、细胞集落形成率以及肢芽细胞生长发育的影响。方法　取SD大鼠胚胎肢芽组织,分别加入不同浓度的醋酸锌进行体外原代微团培养。用光学显微镜观察细胞形态,在倒置相差显微镜下计数细胞集落数,同时用Folin-酚法检测细胞蛋白含量。结果　当锌浓度为0.05mmol/L时,对肢芽细胞生长和集落的形成无显著影响,而当锌浓度增至0.1mmol/L时,表现出显著促进作用,锌浓度大于1.0mmol/L时则呈现抑制作用,且影响的程度随着锌浓度的增加而增强。醋酸锌对大鼠胚胎肢芽细胞的半数分化抑制浓度(ICD50)为1360.9μg/mL。结论　醋酸锌对胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响呈现双向效应,即低浓度促进,高浓度抑制。