罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏色素上皮衍生因子、基质金属蛋白酶2及转化生长因子β1表达的影响

45只SD大鼠分为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病罗格列酮治疗组,实验12周末以免疫组织化学和RT-PCR检测肾脏色素上皮衍生因子(PEDF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达.结果 显示,罗格列酮治疗可降低糖尿病大鼠增高的肾脏重量/体重比值、肌酐、尿素氮、尿蛋白排泄率、甘油三酯水平(均P＜0.01).罗格列酮增加糖尿病大鼠肾脏降低的PEDF、MMP-2蛋白表达,降低升高的TGF-β1蛋白表达(均P＜0.01).PEDF mRNA的表达也呈相似趋势.提示罗格列酮可通过调节肾脏PEDF、MMP-2及TGF-β1的表达对肾脏起到保护作用.

Abstract：

Forty-five male SD rats were divided into normal group, diabetic control group, and rosiglitazone treatment diabetic group.By the end of 12 weeks, the expressions of pigment epithelium-derived factor(PEDF), matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in the kidney were determined by immunohistochemistry and RT-PCR.The results showed that rosiglitazone decreased the increased kidney weight/body weight ratio, serum creatinine, blood ureanitrogen, urinary albumin excretion, triglyceride levels in diabetic rats (all P＜0.01).Rosiglitazone prevented the decreasing of protein expressions of PEDF and MMP-2 and the increasing of protein expression of TGF-β1 (all P＜0.01).PEDF mRNA showed a similar change,suggesting that renoprotection of rosiglitazone on diabetic rats may be mediated through regulating the expressions of PEDF, MMP-2, and TGF-β1.     

马来酸罗格列酮抑制糖基化终产物诱导的人肾系膜细胞RANTES高表达

目的探讨马来酸罗格列酮对糖基化终产物（AGEs）诱导的人肾系膜细胞（HRMC）趋化因子RANTES高表达的影响,及其对糖尿病大鼠血清糖基化终产物-肽（AGE-P）及肾脏RANTES表达的影响。方法运用糖基化修饰的牛血清白蛋白（AGE-BSA）与马来酸罗格列酮干预体外培养的HRMC,EusA法检测细胞培养上清中RANTEs蛋白水平,实时定量RT-PCR检测细胞中RANTES mRNA水平,Western blot检测RANTES蛋白表达。制备2型糖尿病大鼠模型,马来酸罗格列酮治疗10周。流动注射分析法测定血清AGEP,免疫组织化学检测肾皮质RANTES表达。结果马来酸罗格列酮干预组HRMC RANTES的mRNA和蛋白表达以及蛋白分泌明显低于AGE-BSA组;马来酸罗格列酮治疗组糖尿病大鼠血清AGE-P明显下降,肾皮质RANTES表达明显低于糖尿病非治疗组。结论马来酸罗格列酮可以抑制AGE-BSA诱导的HRMC RANTES的表达和分泌,还可降低糖尿病大鼠血清AGE-P及肾脏RANTES表达。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响

目的 观察罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响.方法 SD大鼠30只,10只分至正常对照组,20只腹腔注射小剂量链脲佐菌素结合高能量饲料制备2型糖尿病大鼠模型,然后分至糖尿病组(n=10)及罗格列酮干预组(n=10).运用流动注射分析法测定血清糖基化终产物-肽(advanced glycosylation end products-peptide,AGE-P),应用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法分别检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达.选用单因素方差分析进行数据统计分析.结果 糖尿病组大鼠血清AGE-P[(2.87±0.21)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.41±0.03)及fractalkine蛋白表达(0.79±0.04)均明显高于对照组[分别为(0.90±0.13)U/ml、0.85±0.04及0.46±0.03,P<0.01];罗格列酮干预组大鼠血清AGE-P[(1.45±0.15)U/ml]、肾皮质fractalkine mRNA(1.00±0.05)及fractalkine蛋白表达(0.67±0.03)则明显低于糖尿病组(P<0.01).结论 罗格列酮可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾脏保护作用.     

丝胶对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β_1表达的影响

目的观察丝胶对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只。链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃、阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33 mg/kg)灌胃。分别检测各组大鼠的血肌酐和尿素氮,SP免疫组织化学染色法观察大鼠肾脏TGF-β1的表达。结果糖尿病模型组大鼠的血尿素氮和肌酐明显高于正常对照组大鼠(P<0.01),丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血尿素氮和肌酐明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01,P<0.05)。TGF-β1蛋白免疫阳性产物呈棕黄色细腻颗粒状,位于肾小囊壁层上皮细胞、足细胞和球内系膜细胞的胞浆。糖尿病模型组大鼠肾脏TGF-β1蛋白的表达明显高于正常对照组大鼠(P<0.01);丝胶治疗组、阳性对照组大鼠肾脏TGF-β1蛋白的表达明显低于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏TGF-β1的表达减轻肾脏肥大和细胞外基质积聚,对糖尿病时肾脏损伤具有一定的保护作用。     

罗格列酮减轻大鼠残肾单核细胞趋化蛋白1、转化生长因子β_1的表达

研究背景罗格列酮是过氧化物酶增殖体活化受体γ(PPAR-γ)激动剂,可调节反应基因转录和炎性因子表达。已有研究发现 PPAR-γ激动剂可防止肾功能恶化,但在慢性肾衰竭中,罗格列酮是否通过对单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)表达的影响起肾脏保护作用尚不明了。目的观察罗格列酮对肾大部切除大鼠残肾 MCP-1、TGF-β_1表达的影响。方法将大鼠随机分为4组,每组8只:假手术组、肾大部切除组(NX 组)、肾大部切除加小剂量罗格列酮治疗组(XL 组,罗格列酮5 mg/(kg·d))和肾大部切除加大剂量罗格列酮治疗组(DL 组,罗格列酮15 mg/(kg·d))。8周后观察大鼠血压、尿蛋白、BUN、SCr 和肾脏病理改变,用免疫组化检测肾组织 MCP-1的表达。用 RT-PCR 的方法测定肾组织 TGF-β_1的表达。结果 1)罗格列酮能降低肾大部切除大鼠血压,与 NX 组比较差异有非常显著意义(P<0.01),且呈剂量—效应依赖关系。2)罗格列酮能降低大鼠尿蛋白、BUN、SCr,与 NX 组比有显著差异(P<0.01)。24 h 尿蛋白定量:假手术组(2.8±1.6)g 比 NX ...     

舒洛地特对糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率及肾脏转化生长因子-β1表达的影响

目的 探讨舒洛地特对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率及肾脏转化生长因子-β1 mRNA和蛋白表达的影响.方法 33只健康8周龄雄性SD大鼠采用随机数字表法分为健康对照组(n=11)、糖尿病组(n=11)及舒洛地特干预组(n=11).糖尿病组和舒洛地特干预组空腹10 h后一次性腹腔内注射链脲佐菌素溶液(65 mg/kg),健康对照组注射等量生理盐水.72 h后尾静脉空腹血糖>16.7 mmol/L且持续3 d视为造模成功,其中糖尿病组成模大鼠9只,舒洛地特干预组成模大鼠10只.舒洛地特干预组给予10 mg·kg-1·d-1舒洛地特灌胃,糖尿病组和健康对照组给予等量生理盐水灌胃,共12周.用药结束后次晨测定24 h尿白蛋白排泄率,留取肾脏组织作转化生长因子-β1免疫组织化学染色,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定其mRNA表达水平.采用单因素方差分析及SNK或LSD检验进行统计学分析.结果 24 h尿白蛋白排泄率糖尿病组平均为363μg/min,舒洛地特干预组为151μg/min,健康对照组为26 μg/min,差异有统计学意义(F=93.93,P<0.01).糖尿病组肾脏组织转化生长因子-β1 mRNA的表达量为3.11±0.84,舒洛地特干预组为0.99±0.27,健康对照组为0.44±0.13,差异有统计学意义(F=80.43,P<0.01).肾脏组织转化生长因子-β1蛋白免疫组织化学染色在糖尿病组着色深且广泛,舒洛地特干预组较糖尿病组染色浅,与健康对照组相近.结论 舒洛地特可降低尿白蛋白排泄率,下调肾脏组织转化生长因子-β1 mRNA及蛋白的表达,从而发挥肾脏保护作用.     

罗格列酮对糖尿病大鼠心肌组织水通道蛋白1表达的影响

目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠心肌组织水通道蛋白1 (AQP1)表达的影响,探讨罗格列酮对糖尿病大鼠早期心肌病变的干预作用.方法 将刚建立2型糖尿病模型的大鼠随机分为罗格列酮大、小剂量干预组各8例和模型组9例,以及正常大鼠10例,8 w后应用免疫组织化学和Western 印迹方法测定心肌组织AQP1的表达变化.结果 罗格列酮可降低血清心肌酶的释放,稳定心肌组织中AQP1蛋白的表达,且以大剂量组疗效显著,对早期糖尿病大鼠心肌具有一定保护作用.结论 罗格列酮可通过稳定早期糖尿病心肌组织中AQP1 蛋白的表达,在一定程度上缓解糖尿病心肌病变的发生与发展.     

棉酚对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1和纤维连接蛋白及11β类固醇脱氢酶表达的影响

目的 观察棉酚对2型糖尿病大鼠肾脏病理变化影响,并探讨其作用机制. 方法 雄性SD大鼠随机分成正常组、糖尿肾病组及棉酚干预组.检测各组的血糖、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平;用光镜及电镜观察大鼠肾脏的组织形态学改变;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾脏组织转化生长因子β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、11β类固醇脱氢酶(11β-HSD1)、11β-HSD2mRNA含量;免疫组织化学法测定大鼠肾脏TGF-β1、FN表达水平. 结果 糖尿病组大鼠血糖、胆固醇、血低密度脂蛋白胆固醇水平高于正常组(P<0.01),肾小球体积增大,肾小球毛细血管基底膜不规则增厚,足细胞突起、肿胀,可见足突融合,阳性基质增多.肾组织TGF-β1、FN基因mRNA表达及蛋白表达高于正常组(P<0.01),11β-HSD2mRNA表达低于正常组(P<0.05);棉酚干预组血糖低于糖尿病组(P<0.01),血胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平有下降趋势;肾脏组织病理改变减轻,TGF-β1、FNmRNA表达及蛋白低于糖尿病组(0.16±0.02、0.22±0.05和0.24±0.06、0.33±0.07,P<0.05),11β-HSD1、11β-HSD2mRNA表达与糖尿病组比较无明显改变. 结论 棉酚可改善2型糖尿病大鼠肾脏的病理改变,其作用机制与降血糖,进而抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1、FN表达,阻止细胞外基质的堆积有关.     

罗格列酮对高脂血症大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及机制探讨

目的 观察罗格列酮对高脂血症大鼠血管平滑肌细胞凋亡及磷酸化Smad2/3表达的影响.方法 高脂饮食复制SD大鼠高脂血症模型,酶消化法原代提取SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外培养,取5～8代细胞进行实验.无血清培养24 h后:实验一分为4组:①对照组,②罗格列酮组(本实验所用罗格列酮均为100 μmol/L),③罗格列酮+过氧化物酶体增生激活受体γ(PPAR-γ)阻断剂GW9662组,④罗格列酮+抗转化生长因子β1(anti-TGF-β1)组,分别用Western blot于1 h检测磷酸化Smad2/3水平,24 h后流式细胞学检测细胞凋亡;实验二分2组:①对照组,②100 μmol/L罗格列酮组,分别于0、0.5、1、2,6、12和24 h,用Western-blot检测磷酸化Smad2/3水平.结果 24 h后罗格列酮组细胞凋亡率较对照组明显升高(P<0.05),罗格列酮+GW9662组和罗格列酮+抗转化生长因子β1组细胞凋亡率较罗格列酮组明显降低(P<0.05);罗格列酮处理后0.5 hVSMC p-Smad2/3表达水平明显高于对照组(P<0.05),且1 h迭高峰(P<0.05),p-Smad2/3水平达到高峰后又较快下降(P<0.05);罗格列酮+GW9662组和罗格列酮+anti-TGF-β1组p-Smad2/3表达水平较罗格列酮组低(P<0.05).结论 罗格列酮可能通过激活过氧化物酶体增生激活受体γ,诱导血管平滑肌细胞磷酸化Smad2/3表达水平上调从而诱导血管平滑肌细胞凋亡.     

罗格列酮减轻大鼠残肾单核细胞趋化蛋白1、转化生长因子β1的表达

研究背景 罗格列酮是过氧化物酶增殖体活化受体γ(PPAR-γ)激动剂,可调节反应基因转录和炎性因子表达.已有研究发现PPAR-γ激动剂可防止肾功能恶化,但在慢性肾衰竭中,罗格列酮是否通过对单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、转化生长因子β1,(TGF-β1)表达的影响起肾脏保护作用尚不明了.目的 观察罗格列酮对肾大部切除大鼠残肾MCP-1、TGFβ1表达的影响.方法 将大鼠随机分为4组,每组8只:假手术组、肾大部切除组(NX组)、肾大部切除加小剂量罗格列酮治疗组(XL组,罗格列酮5 mg/(kg·d))和肾大部切除加大剂量罗格列酮治疗组(DL组,罗格列酮15 mg/(kg·d)).8周后观察大鼠血压、尿蛋白、BUN、SCr和肾脏病理改变,用免疫组化检测肾组织MCP-1的表达.用RT-PCR的方法测定肾组织TGF-β1的表达.结果 1)罗格列酮能降低肾大部切除大鼠血压,与NX组比较差异有非常显著意义(P＜0.01),且呈剂量-效应依赖关系.2)罗格列酮能降低大鼠尿蛋白、BUN、SCr,与NX组比有显著差异(P＜0.01).24 h尿蛋白定量:假手术组(2.8±1.6)g比NX组(31.6±16.9)g比XL组(18.4±5.0)g比DL组(15.7±8.1)g,P＜0.01;BUN:假手术组(4.3±0.6)mmol/L比NX组(13.4±2.2)mmol/L比XL组(9.1±1.4)mmol/L比DL组(8.8±1.6)mmol/L,P＜0.01;SCr:假手术组(20.0±5.8)μmol/L比NX组(59.84±9.2)μmol/L比XL组(55.54±5.8)μmol/L比DL组(43.9±10.5)μmol/L,P＜0.01.3)NX组可见肾小球硬化,细胞外基质增生,肾组织大量胶原纤维沉积.用药后病变减轻,其中大剂量罗格列酮组肾小管、间质MCP-1明显减少(P＜0.01).4)与假手术组相比,NX组残肾组织TGF-β1 mRNA的表达明显升高(P＜0.05),罗格列酮治疗组TGF-β1 mRNA的表达较NX组有所降低,以大剂量罗格列酮治疗组为明显(P＜0.01).结论 罗格列酮可降低NX大鼠的血压,剂量依赖性地降低尿蛋白,改善肾功能和肾脏病理损害,可能与抑制残肾组织MCP-1和TGF-β1的表达有关.     

色素上皮衍生因子及其单核苷酸多态性与糖尿病并发症

色素上皮衍生因子来源于人视网膜色素上皮细胞,可以通过促进活化的血管内皮细胞凋亡来抑制病理性血管的生成,是眼内有效的血管生成抑制剂。同时,色素上皮衍生因子可能通过阻断高糖诱导的TGF-β在肾脏的过度表达,起到保护肾脏的作用。色素上皮衍生因子抗炎及调节动脉内膜新生血管形成的特性也起到了阻止动脉粥样硬化进程的作用。近年来的研究显示,在糖尿病并发症患者眼部及肾脏局部组织中,色素上皮衍生因子表达量较单纯糖尿病组有所下降,血清水平则升高,提示其与糖尿病并发症密切相关。色素上皮衍生因子单核苷酸多态性与糖尿病并发症的关系也在进一步研究当中。     

芒果苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制

目的 研究芒果苷对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及机制.方法 利用腹腔注射链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,并进行随机分组:正常对照组、糖尿病模型组及低 [15 mg/(kg·d)]、中[30 mg/(kg·d)]和高剂量[60 mg/(kg·d)]芒果苷组.12周时,检测肾重、肾脏肥大指数、血糖、24 h尿蛋白量,观察肾组织形态改变,免疫组织化学法和Western Blotting法测定肾组织转化生长因子β、基质金属蛋白酶2和组织型金属蛋白酶抑制剂2的表达.结果 与正常对照组大鼠相比,糖尿病组肾脏肥大指数、24 h 尿蛋白量显著上升;肾组织中转化生长因子β和组织型金属蛋白酶抑制剂2表达均明显增加,而基质金属蛋白酶2表达则明显降低.与糖尿病组相比,芒果苷治疗组肾脏肥大指数、24 h 尿蛋白量显著下降(P<0.01);肾组织中转化生长因子β和组织型金属蛋白酶抑制剂2表达均明显减少(P<0.05或P<0.01),而基质金属蛋白酶2表达明显升高(P<0.05或P<0.01).结论 芒果苷对链脲佐菌素诱导的糖尿病肾损伤具有明显的保护作用,其机制可能与调节糖尿病肾病发病中的细胞外基质组成有关,其中转化生长因子β、组织型金属蛋白酶抑制剂2和基质金属蛋白酶2在糖尿病肾病变发生、发展中具有重要作用.     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白表达的作用

目的观察丝胶对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只大鼠。链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白的表达情况。结果胰岛素蛋白免疫阳性产物位于胰岛β细胞胞质,呈棕黄色颗粒状。糖尿病模型组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.392±0.017),明显低于正常对照组大鼠(0.729±0.017)(P<0.01);丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.619±0.039),明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛素蛋白的表达保护糖尿病时胰岛β细胞损伤。     

罗格列酮对糖尿病大鼠残存胰岛表达肝细胞生长因子的影响

目的 观察罗格列酮对实验性1型糖尿病大鼠残存胰岛表达肝细胞生长因子(HGF)的影响. 方法 SD大鼠随机分为3组,正常对照(Con)组24只,糖尿病(DM)组24只,罗格列酮干预(RGZ)组24只.于应用罗格列酮后5个时间段分别测定各组FBG、FIns.免疫组化法检测胰岛中Ins及HGF的表达,并进行形态学量化分析. 结果 与DM组相比,RGZ组经罗格列酮干预后2周,血清胰岛素水平逐渐上升;血糖水平逐渐下降;胰腺相对β细胞量明显增多;胰岛HGF表达水平提高(P均<0.05).RGZ组胰岛HGF表达水平与胰腺相对β细胞量(r=0.766,P<0.05)及血清胰岛素水平(r=0.740,P<0.05)呈正相关. 结论 罗格列酮能增加实验性1型糖尿病SD大鼠β细胞数量,其机制可能与上调胰岛HGF的表达有关.     

罗格列酮对糖尿病合并高血压大鼠血压的影响及其机制

目的探索罗格列酮对糖尿病合并高血压大鼠血压的影响及其可能的机制。方法选择自发性高血压大鼠24只,采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病合并高血压模型,造模后,随机分为对照组12只,治疗组12只(罗格列酮灌胃),治疗4周,观察血压变化,检测血清NO和一氧化氮合成酶(NOS)含量,用免疫组织化学染色检测血管内皮素受体A(ETRA)和内皮素受体B(ETRB)表达变化。结果与对照组比较,治疗组大鼠血压明显降低(P<0.05);血清NO和NOS含量均明显增高[(29.98±4.86)μmol/L vs(38.68±4.57)μmol/L,P<0.01;(15.53±1.19)U/ml vs(17.51±1.48)U/ml,P<0.01];心肌ETRA水平无明显变化(P>0.05),而ETRB表达水平显著升高(P<0.01)。结论罗格列酮能明显降低糖尿病合并高血压大鼠的血压,产生降压现象的机制可能是通过选择性的上调ETRB表达,提高NOS活性,进而增加NO合成,促进血管舒张实现的。     

罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶α表达及活性的影响

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪酸代谢及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)α表达和活性的影响.方法 根据随机数字表将40只4～5月龄雄性Wistar大鼠随机分至健康对照组(n=16;给予基础饲料)和高脂喂养组(n=24;给予高脂饲料).喂养4周末,两组各取8只大鼠行高胰岛素.正葡萄糖钳夹实验,评价高脂喂养组胰岛素抵抗状态.造模成功后根据随机数字表将高脂喂养组(n=16)随机分至高脂喂养亚组(n=8)和罗格列酮干预亚组(n=8),继续喂以高脂饲料4周,罗格列酮干预亚组同时给予3 mg·kg-1·d-1罗格列酮灌胃.骨骼肌甘油三酯经氯仿-甲醇抽提后采用全自动生化分析仪测定.运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法 测定骨骼肌AMPKα1及AMPKα2 mRNA表达水平;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法 测定骨骼肌AMPKα1、AMPKα2及P-AMPKα蛋白表达水平.组间比较采用完伞随机设计的单因素方差分析.结果 第8周末,高脂喂养亚组葡萄糖输注率低于健康对照组[分别为(19.3±3.7)和(30.4±4.2)mg·kg-1·min-1,P<0.01],罗格列酮干预亚组葡萄糖输注率高于高脂喂养亚组[分别为(25.8±1.6)和(19.3±3.7)mg·kg-1·min-1,P<0.05].高脂喂养亚组骨骼肌甘油三酯含量高于健康对照组[分别为(4.4±1.2)和(2.0±0.5)μmol/g,P<0.01],罗格列酮干预亚组骨骼肌甘油三酯含量低于高脂喂养亚组[分别为(3.3±1.1)和(4.4±1.2)μmol/g,P<0.05].骨骼肌AMPKαl mRNA及蛋白表达无组问差异(P>0.05);骨骼肌AMPKα2 mRNA、蛋白表达和P-AMPKα蛋白表达高脂喂养亚组低于健康对照组,而罗格列酮干预亚组高于高脂喂养亚组(均P<0.05).结论 高脂饮食可导致大鼠骨骼肌脂质堆积及胰岛素抵抗.罗格列酮干预可增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌AMPKα2表达和AMPKα活性,降低骨骼肌脂质含量,提高胰岛素敏感性.     

沉默结缔组织生长因子对鼠转化生长因子β/Smads信号的影响

目的 研究小干扰RNA(siRNA)沉默结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠转化生长因子(TGF)β/Smads信号通路的影响.方法 将化学合成CTGF siRNA转染肝星状细胞(HSC)T6和经门静脉注入CCl4诱导6周的肝纤维化大鼠,设空白及随机siRNA对照,抽提HSC T6及大鼠肝组织总RNA和蛋白质,应用Western blot和RT-PCR检测HSC T6及肝组织CTGF及TGF β1,Smad2、3、7蛋白质和基因表达. 结果与空白对照组相比,siRNA能显著下调HSC T6 CTGF蛋白表达,以48 h最明显,CTGF蛋白表达下调94%±4%(t=46.196,P<0.01),而TGF β1、Smad2,3,7 mRNA表达差异无统计学意义;模型组及对照siRNA组,CCl4诱导的大鼠肝组织CTGF和TGF β1蛋白表达明显上调,与模型组相比,CTGF siRNA组大鼠肝组织CTGF及TGF β1蛋白表达分别下调95%±2%(F=21.234,P<0.01)和74%±8%(F=13.464,P<0.05),但Smad2和Smad7蛋白表达无明显改变. 结论沉默CTGF基因表达对大鼠肝TGF β/Smads信号具有阻抑作用.     

罗格列酮对糖尿病大鼠心脏转化生长因子-β1/SMADs信号转导通路及心脏重塑的影响

目的观察罗格列酮对糖尿病大鼠心脏转化生长因子-β1(TGF-β1)/SMADs信号转导通路的影响及对心脏重塑的作用.方法30只雄性SD大鼠随机分成正常组、糖尿病组和罗格列酮组,每组10只.腹腔注射链脲菌素60 mg/kg建立糖尿病模型.12周后,多导生理记录仪测定大鼠心功能;测定大鼠体质量、心脏质量并计算心脏质量/体质量;电镜观察心肌超微结构改变;苦味酸酸性复红染色观察心肌间质纤维化程度;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)测定大鼠心脏SMAD3和SMAD7信使核糖核酸(mRNA)水平,免疫组化法分析大鼠心脏TGF-β1、SMAD3和SMAD7的蛋白水平.结果与正常组比较,糖尿病组心功能明显受损,心脏胶原含量显著增加(P＜0.01),心脏质量/体质量显著增加(P＜0.01),电镜超微结构显示心肌肌丝溶解、断裂,间质胶原增生,SMAD3 mRNA表达水平明显增加(P＜0.01),SMAD7mRNA表达水平明显降低(P＜0.01),TGF-β1和SMAD3蛋白表达水平均增加(P＜0.01),SMAD7蛋白表达水平降低(P＜0.01).应用罗格列酮干预后,心功能明显改善,胶原含量明显下降(P＜0.05),心脏质量/体质量下降(P＜0.05),超微结构破坏程度减轻,SMAD3 mRNA表达水平降低(P＜0.01),SMAD7 mRNA水平增加(P＜0.01),TGF-β1和SMAD3蛋白表达水平均降低(P＜0.05～0.01),SMAD7蛋白表达水平增加(P＜0.01).结论罗格列酮能够明显改善链脲菌素糖尿病大鼠心脏重塑,改善心功能,影响TGF-β1/SMADs信号通路活化可能是其作用机制之一.     

罗格列酮对实验性2型糖尿病大鼠肾脏保护作用

通过高糖高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素的方法建立模拟2型糖尿病大鼠合并肾脏损害的动物模型,糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、罗格列酮治疗组（3mg/kg·d）和正常对照组。4周、8周末测量大鼠血糖和胰岛素水平,18周末测量大鼠血糖、血肌酐和胰岛素水平,留24小时尿检测尿肌酐、尿蛋白定量。用免疫组化、反转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测TGF-β1在肾脏的表达情况。结果TGF-β1在糖尿病组大鼠肾脏的表达明显增加,罗格列酮可以显著降低糖尿病大鼠血糖、血脂水平,降低尿白蛋白和肾脏的TGF-β1表达水平。结论罗格列酮对实验性2型糖尿病大鼠合并肾脏损害具有一定的治疗作用。     

反义转化生长因子βⅡ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反义转化生长因子βⅡ型受作(TGF βRⅡ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术中构建反义TGF βRⅡ真核细胞表达质粒,采用猪血清腹腔注射制备免疫性大鼠肝纤维化模型,实验动物分为肝纤维化模型组、反义TGF βRⅡ治疗组、pCDNA3对照组及正常对照组。反义TGF βRⅡ质粒和pCDNA3空质粒与糖化多聚赖氨酸偶联后经尾静脉分别导入大鼠体内,通过northern blot、RT-PCR、Western blot检测外源导入质粒在肝组织中的表达,检测血清转化生长因子β1(TGFβ1)、肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与Van Gieson染色观察反义TGF βRⅡ质粒对大鼠肝纤维化的影响。 结果 反义TGF βRⅡ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可使反义治疗组血清TGF β1含量下降,反义TGF βRⅡ治疗组为(23.16 ± 3.13)ng/ml,模型组为(32.96±3.79)ng/ml,F=36.73,P<0.01。肝组织羟脯氦酸含量下降,治疗组为(0.17±0.01)mg/g,模型组为(0.30±0.03)mg/g,F=15.48,P<0.01。减少了肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积,治疗组Ⅰ型胶原为650.26±51.51,Ⅲ型胶原为661.5 8±55.28,模型组Ⅰ型胶原为1209.44±16.60,Ⅲ型胶原为1175.14±121.44,F值分圳为69.87、70.46,P<0.01。并促进反义治疗组肝脏病理形态一定程度的改善。