鲍曼不动杆菌的同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的:研究临床分离鲍曼不动杆菌的耐药性演变、同源性、产碳青霉烯酶类型及碳青霉烯酶基因型.方法:收集临床分离的72株鲍曼不动杆菌,采用VITEK-Ⅱ药敏分析系统对72株鲍曼不动杆菌进行18种抗菌药物的敏感性检测.采用肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链技术(ERIC-PCR)进行基因分型和同源性比对.用改良Hodge试验检测杆菌的产碳青霉烯酶表型,对碳青霉烯酶基因blaOXA-23,blaOXA-40和blaOXA-58进行PCR扩增及序列分析.结果:72株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低,为8.33％,其次是阿米卡星,对其余抗菌药物的耐药率均高达70％以上.ERIC-PCR技术将其分为7个基因型,同源性分析显示其中4个基因型在医院内流行.产碳青霉烯酶的菌株有56株,blaOXA-23扩增阳性的有61株,blaOXA-58扩增阳性的有1株.结论:鲍曼不动杆菌耐药严重,且存在院内感染传播的现象;产碳青霉烯酶的菌株较多,主要的碳青霉烯酶基因型为blaOXA-23;湖南省存在blaOXA-58阳性鲍曼不动杆菌株.     

鲍曼不动杆菌临床分离株耐药性与OXA-碳青霉烯酶基因型研究

目的 研究我院鲍曼不动杆菌耐药性与OXA-碳青霉烯酶基因之间的关系.方法 2005年1月至2006年6月我院临床分离出的共120株鲍曼不动杆菌采用琼脂对倍稀释法进行常用抗菌药物的敏感性研究;根据耐药表型对耐亚胺培南/西司他丁(IMP)菌株进行碳青霉烯酶基因blaOXA-23、blaOXA-24的PCR检测及基因序列分析. 结果 120株临床分离鲍曼不动杆菌对11种抗菌药物的耐药率均超过50%,对IMP的耐药率低于50%(44.4%).多重耐药常见,对3种以上抗菌药物耐药者达91.67%.对IMP耐药的50株鲍曼不动杆菌中,PCR检测13株阳性,序列分析证实均为blaOXA-23;未发现blaOXA-24. 结论 我院鲍曼不动杆菌多重耐药常见,blaOXA-23是主要的OXA-碳青霉烯酶基因型,可能是医院感染的主要基因型.     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因及同源性分析

目的 研究本院近3年临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药现状、同源性及碳青霉烯酶基因型.方法 收集2006年1月-2009年7月临床分离存活的、非重复的亚胺培南耐药及敏感对照株鲍曼不动杆菌,进行扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)分子鉴定菌种,采用琼脂稀释法测定菌株对美罗培南、亚胺培南等抗菌药物的MIC;采用基因间重复序列引物PCR(REP-PCR)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性;用多重PCR、测序等方法分析鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶包括TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型、PER-型及IMP-、VIM-型碳青霉烯酶和OXA型碳青霉烯酶分布特点.结果 274株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)对头孢菌素类、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、喹喏酮类抗生素敏感率＜10%,对米诺环素敏感率为41.2%;对多黏菌素B 100%敏感.2006年1月-2009年7月期间共检出5个克隆,主要为A1耐药克隆株于不同病房的暴发流行.β-内酰胺酶检测出OXA-23、-66、-69、-72、-58型碳青霉烯酶及PER-1型酶.blaOXA-23-like与blaOXA-51-like基因同时存在的CRAB株为53.6%(147/274).未检出IMP-、VIM-型碳青霉烯酶及TEM-1型酶、SHV-型酶、GES-型、VEB-型β-内酰胺酶.结论 CRAB克隆株的传播是造成我院碳青霉烯类耐药率增加的重要原因.OXA-51-like、OXA-23型酶为对CRAB对碳青霉烯类耐药的主要碳青霉烯酶.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因研究

目的了解本地区耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)的耐药特征以及D类和B类碳青霉烯酶基因的流行状况。方法收集广东省2家三甲医院临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌70株,采用K-B纸片法进行药敏试验;设计合成D类和B类碳青霉烯酶的引物序列进行PCR扩增和测序分析;热不对称PCR法检测侧翼序列。结果 70株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对13种抗生素的耐药率都在84.29%以上,共有3株鲍曼不动杆菌检出OXA-58-like,60株检出OXA-51-like,23株检出OXA-23-like,4株检出OXA-24-like,另有1株检出了NDM-1基因;NDM-1上游存在ISAba125插入序列。结论鲍曼不动杆菌耐药情况严重,本地区鲍曼不动杆菌D类碳青霉烯酶基因的分布以OXA-23-like为主,同时检测出B类碳青霉烯酶NDM-1,需密切监测。     

长沙地区临床分离碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的分子流行病学特征

目的: 了解长沙地区临床分离鲍曼不动杆菌的耐药性,探讨碳青霉烯类抗生素耐药菌株的分子流行病学特征。方法: 收集长沙地区10所综合性医院2010年3月至2010年12月间临床分离的非重复鲍曼不动杆菌株205株;采用K-B法检测药物敏感性,改良双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶(金属酶),改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;PCR扩增OXA-23,OXA-24,OXA-51,OXA-58及IMP-1和VIM-2型碳青霉烯酶基因,并进行测序分析。应用肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus PCR,ERIC-PCR)对菌株进行DNA分型及同源性分析。结果: 在监测的18种药物中,耐药率超过50%的达14种。其中哌拉西林耐药率最高(80.5%),头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低(2.5%)。共筛选出耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌115 株,其金属酶表型及基因检测均为阴性;改良Hodge试验阳性71株,其中64株OXA-23基因扩增阳性。115株菌株OXA-51均阳性,未检出OXA-24,OXA-58基因。115株菌株共分为7个ERIC基因型。其中A型19株,B型72株,为主要的流行克隆。结论: 长沙地区临床分离鲍曼不动杆菌多重耐药十分严重;产OXA-23 和OXA-51型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制,且碳青霉烯类耐药菌株存在克隆流行。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因分析

目的研究我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（IRAB）的耐药性与碳青霉烯酶基因型。方法收集我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌35株,K—B法和E—test法测定对常用抗茵药物的敏感性,采用改良Hodge试验和乙二胺四乙酸（EDTA）协同试验检测耐亚胺培南不动杆菌产碳青霉烯酶和金属β-内酰胺酶情况,聚合酶链反应（PcR）检测其碳青霉烯酶基因OXA-23、OXA-24、OXA-58、IMP、VIM。结果35株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类、部分氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗菌药物均有很高耐药率（〉70％）,仅对阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦和多粘菌素B有较高的敏感性（〉70％）,35株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌均产碳青霉烯酶,未检测到金属β-内酰胺酶,全部检测到OXA-23型基因,未检测到OXA-24、OXA-58、IMP、VIM型基因。结论耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药相当严重;产OXA-23型碳青霉烯酶是我院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

创伤外科耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型检测

目的 了解昆明医科大学第四附属医院创伤外科临床分离的鲍曼不动杆菌D类碳青霉烯酶的基因型, 为临床合理使用抗菌药物及预防院内感染提供参考.方法 收集昆明医科大学第四附属医院创伤外科临床分离的非重复鲍曼不动杆菌96株, 分析患者资料, 应用聚合酶链反应 (polymerase chain reaction, PCR) 检测OXA-51、OXA-23、ISAba1-oxa-51、ISAba1-oxa-23 4种碳青霉烯酶基因.结果 在96株鲍曼不动杆菌中, 70.84% (68株) 分离自创口组织;在检测的12种抗菌药物中, 96株鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率最高 (78.13%) , 左氧氟沙星的耐药率最低 (43.75%) ;在23株亚胺培南敏感的鲍曼不动杆菌中, 有4株未检测到OXA-51, 5株观察到OXA-23表达;73株亚胺培南不敏感的鲍曼不动杆菌中, OXA-51、OXA-23、ISAba1-oxa-51、ISAba1-oxa-23基因的检出率分别是100%、95.89%、79.45%、71.23%.OXA-51+ISAba1-oxa-51+OXA-23+ISAba1-oxa-23基因表达模式检出率为65.75%.结论 亚胺培南敏感的鲍曼不动杆菌可能存在D类碳青霉烯酶OXA-23的表达;该院创伤外科耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的主要模式为OXA-51+ISAba1-oxa-51+OXA-23+ISAba1-oxa-23, 这可能是导致该菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药性高的机制之一.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因型研究

目的 研究重庆地区对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌(CRAb)的耐药性及碳青霉烯酶基因型.方法 收集2007年1月至2009年12月重庆地区某两所教学医院153株从患者分离的对亚胺培南耐药的CRAb,用琼脂稀释法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度,PCR扩增D类碳青霉烯酶基因blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like、blaOXA-58-like.用EDTA纸片法检测金属酶表型,PCR检测基因型blaIMP、blaVIM、blaSIM.结果 所有耐碳青霉烯类的CRAb除对阿米卡星、庆大霉素和左氧氟沙星等保持一定敏感性外,对其余抗菌药物耐药率均为100%.所有耐碳青霉烯类的CRAb均产OXA-23型碳青霉烯酶,在blaOXA-23-like上游连接有ISAba1启动元件.结论 重庆地区流行的对亚胺培南耐药的CRAb均产OXA-23型碳青霉烯酶.     

成人GHD患者的血清瘦素、脂联素、内脂素水平及相关性研究

【摘要】 目的了解三甲医院携带碳青霉烯酶基因blaOXA-58的鲍曼不动杆菌的检出率和菌株克隆相关性,为临床合理使用抗菌药物和制定恰当的感染控制措施提供理论依据。方法收集四川大学华西医院非重复鲍曼不动杆菌临床分离株。菌种的鉴定通过recA基因测序鉴定。PCR检测菌株的固有碳青霉烯酶基因blaOXA-51/66和获得性碳青霉烯酶基因blaOXA-58。用肠杆菌科基因间重复序列-聚合酶链反应分型技术(ERIC-PCR)、多位点序列分型技术(MLST)和脉冲场凝胶电泳分型技术(PFGE)对blaOXA-58阳性的菌株进行克隆相关性分析。结果经recA和blaOXA-51/66检测证实有115株鲍曼不动杆菌临床分离株。其中,9株对亚胺培南敏感性下降〔最小抑菌浓度(MIC)≥2mg/L〕的菌株携带有blaOXA-58,占7.8%。其ERIC-PCR指纹图谱相似。MLST分型结果显示有8株菌属于ST-95型,1株菌属于ST-75型。8株ST-95型鲍曼不动杆菌的PFGE图谱显示为同一个克隆,分属于两个差异很小的亚型。结论我院部分对碳青霉烯敏感性下降的鲍曼不动杆菌临床分离株携带有获得性碳青霉烯酶基因blaOXA-58。blaOXA-58阳性的鲍曼不动杆菌在我院主要以克隆性播散为主。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药机制探析

目的通过对菌株的检验来对鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药机制进行探讨.方法在临床中要先对耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌进行分离,细菌鉴定采用法国梅里埃ATB半自动细菌鉴定仪,药敏选用KB纸片法与药敏上机板条相结合,三维试验检测ESBLs和AmpC酶,PCR检验方法检测耐药基因,PCR阳性产物进行基因测序.结果通过与基因库的比对可以发现,所选的6株鲍曼不动杆菌大多数是多重耐药菌株,在三维试验中,此类菌株均产生了ESBLs,有4株菌株产生了AmpC酶.在6株鲍曼不动杆菌的耐药基因型检测中发现有4株AmpC酶阳性,6株均为TEM阳性,4株为PER阳性,4株为OXA-24、VIM、IMP和VEB型等均为阴性,6株OXA-23型均阳性.结论耐亚胺培南鲍曼不动杆菌有OXA-23型碳青霉烯酶基因,OXA-23型碳青霉烯酶是主要耐药机制.     

鲍曼不动杆菌OXA基因的检测及ISAba1对其表达的影响

[目的]了解鲍曼不动杆菌的OXA-碳青霉烯酶基因分布情况及插入序列1(ISAba1)对OXA -23基因表达的影响.[方法]收集临床分离的鲍曼不动杆菌无重复株110株.多重PCR扩增OXA - 23 - like、OXA - 24 - like、OXA - 51 - like、OXA - 58 - like基因,并测序...     

ICU病区泛耐药的鲍曼不动杆菌碳青霉烯类药物耐药基因分析

目的研究ICU区病区分离的泛耐药(pandrug-resistant,PDR)鲍曼不动杆菌的耐药机制,检测菌株所含的主要基因型别及其流行情况,指导临床合理用药。方法收集2009～2010年两年分离自ICU病区的PDR鲍曼不动杆菌20株,用浓度梯度法(E-试条法)检测15种抗菌药物的耐药率,用PCR法检测blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58、blaVIM、blaNDM-1和blaIMP 7种基因型别。结果 20株PDR鲍曼不动杆菌,对常规的14种抗菌药物耐药率阿米卡星55%,米诺环素70%,复方新诺明80%,其他药物均100%;对多黏菌素B的耐药率为0;PCR检测结果显示,检测到3种耐药基因,blaOXA-23、blaVIM和blaIMP;其中14株细菌blaOXA-23阳性,2株blaVIM阳性,1株blaIMP阳性,总阳性率85.5%。结论 PDR-AB对绝大多数常规药物均有较高的耐药性,其耐药机制复杂,对碳青霉烯类耐药的耐药基因主要为blaOXA-23,亟待我们积极深入地探索研究。     

碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌的临床特征及克隆变迁

目的:研究天津医科大学总医院碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）的临床特征、耐药机制以及克隆变迁情况。方法:回顾性分析天津医科大学总医院2011年1月—2018年12月感染CRAB患者的临 床资料;采用聚合酶链反应（PCR）检测CRAB的碳青霉烯酶基因;应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对CRAB进行分子流行病学分型。结果:该院CRAB对庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药性较高,且 97.5%的菌株blaOXA-23基因阳性,未检测出blaOXA-24-like 、blaOXA-58-like、blaIMP、blaVIM、blaSIM、 blaNDM基因。PFGE将2011-2015年79株CRAB分成15个克隆型,以A克隆型和C克隆型为主,2011 年CRAB呈散在流行,2012年以C克隆型为主,2013年A克隆型出现,并取代C克隆型成为2013—2015年主要的流行菌株。A克隆型对亚胺培南高度耐药（MIC50 =64 μg/mL）,对美罗培南中度耐药（MIC50 =16 μg/mL）,且与中央静脉插管相关（χ2 =5.80,P=0.016）;C克隆型对亚胺培南中度耐药（MIC50 =16 μg/mL）,对美罗培南低度耐药（MIC50 =8 μg/mL）,且与三代头孢菌素的使用相关（χ2 =4.65,P=0.031）。结论:blaOXA-23基因是该院CRAB最主要的碳青霉烯酶基因,对亚胺培南和美罗培南高中度耐药的A克隆型是该院流行传播的主要克隆型。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的检测

目的了解徐州地区三级医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的流行情况。方法收集徐州地区三级医院临床分离的对亚胺培南耐药的非重复鲍曼不动杆菌株97株,予VITEK-32型全自动微生物分析系统鉴定,予PCR方法检测金属酶耐药基因及OXA型碳青霉烯酶基因。结果经PCR方法检测所有受试菌未检测到金属酶基因blaIMP、blaVIM、blaSIM和OXA-24碳青霉烯基因,其中85株检测OXA-23型碳青霉烯酶基因,检出率为87.6%(85/97株)。结论徐州地区三级医院鲍曼不动杆菌产OXA-23型碳青霉烯酶可能是导致其对碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因。     

分子生物学方法鉴定鲍曼不动杆菌与仪器鉴定结果比较

目的 比较鲍曼不动杆菌的分子生物学鉴定结果和仪器鉴定结果。方法 采用法国梅里埃公司VITEK2COMPACT全自动微生物分析仪对细菌进行鉴定和抗菌药物敏感性分析,鉴定为鲍曼不动杆菌复合群的细菌,采用聚合酶链反应（PCR）检测OXA-51基因。结果 68株VITEK2 COMPACT鉴定为鲍曼不动杆菌复合群的菌株中,50株OXA-51基因阳性,确定为鲍曼不动杆菌;18株OXA-51基因阴性,为复合群其它细菌。鲍曼不动杆菌（OXA-51阳性）与复合群其它细菌（OXA-51阴性）比较,对临床常用的碳青酶烯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、头孢菌素类等抗菌药物的敏感性降低（P〈0.05）。结论 鲍曼不动杆菌复合群其它细菌耐药率显著低于鲍曼不动杆菌,采用检测OXA-51基因方法对鲍曼不动杆菌复合群进行准确的菌种鉴定有利于正确指导临床抗菌药物的选择和感染控制的介入。     

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶分析

目的分析临床分离的4株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的同源性及β-内酰胺酶.方法采用浓度梯度法(E test)测定亚胺培南等12种抗菌药物对4株菌株的最低抑菌浓度(MIC),脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性,等电点聚焦电泳(IEF)、三维试验、2-巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)及克隆测序等方法分析β-内酰胺酶.结果4株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌来自同一克隆株,耐药谱基本一致,仅1株对头孢吡肟、头孢哌酮舒巴坦中度敏感,对其余抗菌药物均高度耐药.三维试验显示4株细菌存在能水解亚胺培南的酶.3株细菌有pI 5.4、5.8、6.6、7.2条带,另1株少pI 5.8条带,pI 5.4、5.8条带均能被克拉维酸抑制.PCR扩增产物经克隆测序证实同时存在OXA-23、PER-1基因.结论存在同时产OXA-23型碳青霉烯酶和PER-1型超广谱β-内酰胺酶的鲍曼不动杆菌引起的医院感染.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌苯唑西林基因型分析

目的了解我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带苯唑西林（oxacillin,OXA）基因型的情况,为医院感染监控及流行病学调查提供科学依据。方法采用多重PCR方法,分析2010年4-12月我院住院患者分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌68株的OXA基因型。结果 68株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌中,7株只携带OXA-51基因（检出率约为10.29%）,60株同时携带OXA-51和OXA-23基因（检出率约为88.24%）,1株同时携带OXA-51和OXA-58基因（检出率约为1.47%）,未扩增到OXA-24基因。结论我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌携带OXA基因以OXA-51＋OXA-23基因型为主,实验室应加强对产酶菌株的监测。