两种重组人粒细胞集落刺激因子动员异基因造血干细胞移植供者的随机临床观察

目的 比较两种重组人粒细胞集落刺激因子(rHuG-CSF)惠尔血和特尔津,对造血干细胞移植供者的动员疗效.方法 异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者52例,人类白细胞抗原(HLA)配型全相合的同胞供者52例,随机采用两种rHuG-CSF特尔津和惠尔血分别进行供者造血干细胞动员,对供者千细胞动员参数及患者移植后造血重建等进行比较研究.结果 惠尔血组和特尔津组外周血白细胞计数高峰时间均为第4天(38.9±3.0)×109/L和(37.8±2.9)×109/L(P>0.05).惠尔血和特尔津两种动员剂对供者外周血造血干细胞参数的影响,其结果分别为采集物MNC计数(4.8±0.7)×108/kg vs(5.1±0.4)×108/kg;CD34+(1.6±0.3)×106/kg vs(1.9±0.7)×106/kg;惠尔血和特尔津两种动员剂对供者骨髓血造血干细胞参数有诸多方面的影响,其结果分别为采集物MNC计数(3.8±0.5)/L vs(3.9±0.7)/L;CD34+(1.3±0.7)×106/kg vs (1.5±0.4)×106/kg(均P>0.05).特尔津和惠尔血两种动员剂对造血干细胞移植后造血重建的影响,其结果分别为移植后中性粒细胞植活时间(14.6±0.9)d vs(15.2±1.6)d;血小板的植活时间(18.1±0.8)d vs(17.0±1.9)d(P>0.05);两种动员剂对造血干细胞移植供者不良反应无显著差异.结论 惠尔血和特尔津两种动员剂分别对供者外周血及骨髓的造血干细胞动员动力学,以及对患者造血重建影响均无显著性差异.特尔津能可靠用于造血干细胞供者的动员及患者移植后造血重建.     

粒细胞集落刺激因子动员正常供者外周血造血干细胞研究

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员正常供者外周血造血干细胞的效果、影响因素及不良反应。方法:对20例造血干细胞正常供者采用中位剂量G-CSF10.9μg/(kg·d)皮下注射3～5天后,使用COBESpectra血细胞分离机采集外周血干细胞。采用流式细胞仪检测采集物中CD34 细胞数。结果:第一次采集的单个核细胞(MNC,个)及CD34 细胞量(个)分别为(1.12～13.06,中位数3.10)×108/kg供者体重及(1.14～10.42,中位数3.8)×106/kg供者体重。MNC及CD34 细胞采集总量分别为(2.21～13.60,中位数5.80)×108/kg受者体重及(2.30～14.00,中位数6.40)×106/kg受者体重,均达到移植要求。男性CD34 细胞总量显著高于女性。不良反应较为轻微。供者年龄、体重、G-CSF剂量、采集前白细胞数等与采集所得MNC及CD34 细胞量无明显相关性。结论:G-CSF作为正常供者动员剂安全有效。     

健康供者骨髓血造血干细胞采集效果分析

目的：研究影响骨髓造血干细胞动员及采集的因素。方法方便选取2013年3月＿2016年6月期间就诊该院的77名健康供者,经重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF﹚动员后第4天采集骨髓,分析不同健康供者的年龄和性别对骨髓造血干细胞采集的影响以及采集时外周血白细胞数与采集效果的关系。结果77名供者均成功采集,骨髓采集物单个核细胞数(BM-MNCs)为(4.3±0.43﹚×108/kg,骨髓采集物CD34+细胞数(BM-CD34+﹚为(1.84±0.30﹚×106/kg,健康供者年龄和性别差异无统计学意义,采集时外周血白细胞数不能预测骨髓采集物中CD34+细胞的数量。结论采用5~10μg/kg G-CSF动员,健康供者均可成功采集骨髓干细胞。     

小儿外周血造血干/祖细胞采集效果和安全性的研究

目的探讨小儿外周血造血干/祖细胞采集的效果和安全性。方法32名供者经粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员后,应用血细胞分离机进行外周血干/祖细胞采集。循环血量2～6 L。采集中,监测病人的血压、心率、呼吸、MNC(单个核细胞)、WBC、RBC、Hb、Hct和Plt及血清Ca2 浓度的变化。采集的MNC液用CD34单抗标记后检测CD34 细胞数,并同时作CFU-GM集落培养。结果32例共进行了89次干/祖细胞采集,机器平均每次循环血量2.5个血容量。MNC采集效率达(64.78±3.23)%,每次采得MNC液60ml,获得MNC为(3.1±0.6)×108/kg;CD34 为(2.8±0.6)×106/kg及CFU-GM(2.6±0.5)×105/kg。术中供者无任何不良反应。采集前后血压、心率、呼吸、RBC、Hb、Hct和血清Ca2 浓度无明显变化(P>0.05),但Plt数从采集前的159.63×109/L下降到采集后的112.78×109/L,下降幅度达29.35%。结论采用CS-3000PLUS血细胞分离机采集小儿外周血造血干/祖细胞是一种有效和安全的方法,供者仅需2～3次采集就能获得异体外周血造血干/祖细胞移植所需的干/祖细胞数量。     

Amicus血细胞分离机干/祖细胞采集效果及采集前后供者血液指标变化

目的 探讨Amicus血细胞分离机单个核细胞(MNC)程序采集外周血干细胞/祖细胞的效果及供者采集前后血液指标变化.方法 应用Amicus血细胞分离机的MNC程序采集21例供者外周血干细胞,21例供者经G-CSF动员,于第5天采集外周血,处理全血量为(9 428.23±3 169.36)ml,抗凝剂为(813.49±165.46)ml.结果 采集物中MNC数为(19.75±9.01)×109/袋,MNC百分率为(97.34±2.52)%,MNC的采集效率为(56.91±26.82)%,CD34+细胞数为(1.80±0.97)×108/袋,产品容量为(149.42±32.13)ml,采集后供者红细胞、血红蛋白、红细胞压积、血小板分别下降10.97%、9.98%、10.06%、10.67%,所有供者均未出现严重的不良反应.结论 应用Amicus血细胞分离机采集外周血干细胞,可以安全高效地从供者外周血中分离出MNC和CD34+细胞,用于干细胞移植.     

当归多糖对小鼠外周血造血干细胞动员作用的研究

目的探讨当归多糖(APS)对小鼠外周血造血干细胞的动员作用。方法采用外周血白细胞(WBC)计数、淋巴细胞(LC)计数、免疫细胞化学、流式细胞术、造血祖细胞体外培养等实验技术观察APS的动员作用。结果APS动员后小鼠外周血的WBC、LC数明显高于生理盐水(NS)组(P<0.05);APS动员后外周血中CD34 细胞百分率明显高于NS组(P<0.05);APS组CFU-Mix产率显著高于NS组(P<0.01);并且APS和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)联合动员后的各项指标均高于单用APS或单用rhG-CSF组。结论APS对小鼠外周血造血干细胞有一定的动员作用,并且APS和rhG-CSF联合动员的效果好于单用APS或单用rhG-CSF的动员效果。     

依托泊甙联合rhG-CSF动员恶性淋巴瘤自体外周血干细胞的疗效评估

目的:观察依托泊甙(VP-16)联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对恶性淋巴瘤(ML)患者自体外周血干细胞(APBSC)的动员效果,并对其毒性反应进行评估.方珐:26例恶性淋巴瘤患者经过3～7周期常规化疗,经X线、B超、CT、骨髓穿刺、全身骨扫描及各项常规生化检查疗效达完全或部分缓解后动员,动员方案为VP-16 1500mg/m2静脉滴注,白细胞下降至最低点开始回升时给予rhG-CSF 5μg·kg-1·d-1皮下注射,1日1次,连用3～5 d后WBC上升至5.0×10 9/L以上时开始采集,采集APBSC次数分别为1～3次.检测采集细胞中的单个核细胞(MNC)及CD34 细胞数量,观察动员期间不良反应及APBSC回输后骨髓造血恢复情况.结果:26例患者动员后采集获得MNC的平均数量为5.20×10 8/kg,其中17例患者CD34 细胞数平均为5.15×10 6/kg.所有患者均移植成功,重建造血功能,WBC恢复至1.0×10 9/L的时间为 12d,中性粒细胞恢复至0.5×10 9/L的时间为 13d.动员期间有4例患者出现中性粒细胞减少性发热,其余不良反应均可耐受.结论:VP-16联合rhG-CSF是动员恶性淋巴瘤患者自体外周血干细胞的有效方法.     

造血干细胞移植供者应用粒细胞集落刺激因子的研究

目的:探讨外周血造血干细胞移植(peripheral b lood stem cell transp lantation,PBSCT)供者应用粒细胞集落刺激因子(granu locyte colony stimu lating factor,G-CSF)后细胞成分的变化和药物对供者身体状况的近期影响。方法:对18例健康PB-SCT供者给予G-CSF 5~10μg/(kg.d)4~5 d,采集外周血单个核细胞进行检测,临床观察用药后出现的毒副反应。结果:①外周血白细胞在动员后4~5 d达峰值,动员后比动员前高7~14倍(P<0.01)。②细胞采集在动员后第4~5 d开始,两者单个核细胞(MNC)和CD34+细胞值之间无明显差异。③本组供者不同性别和体重间,MNC值有显著差异性。④主要毒副反应为骨痛和肌痛、乏力等,采集细胞过程中出现口唇、四肢麻木。结论:对PBSCT供者应用G-CSF 5~10μg/(kg.d),4~5d可有效动员MNC和CD34+细胞。供者对此剂量的毒副反应能够耐受。     

健康供者外周血造血干细胞动员的临床研究

目的:探讨造血生长因子(HGFs)对健康供者外周血干细胞(PBSC)的动员作用,并比较粒细胞集落刺激因子(G-CSF)单用及G-CSF联合粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的动员效果.方法:52例健康供者分成G-CSF单用组(34例)及与GM-CSF合用组(18例),分别采用G-CSF(5 μg·kg-1·d-1)及G-CSF(3 μg·kg-1·d-1)+GM-CSF(2 μg·kg-1·d-1),连续皮下注射5～6 d动员,采集PBSC.动员前后动态检测外周血及采集物MNC、CD34+细胞、CFU-GM计数.52例血液病患者接受上述供体动员之PBSC并行异基因PBSC移植(Allo-PBSCT).结果:动员后CD34+细胞及CFU-GM分别较动员前增加10.83及8.7倍,并在第5～6天达到高峰;G-CSF单用及与GM-CSF合用均可有效动员CD34+细胞和CFU-GM,但合用较单用更有效(P<0.05);所有患者接受Allo-PBSCT后均满意获得造血重建;随访观察至今应用HGFs对健康供者无明显不良反应.结论:采用中小剂量G-CSF单用和与GM-CSF合用均能安全、有效动员健康供者PBSC,但以合用更为有效.     

单个核细胞绝对计数对恶性血液病患者自体外周血干细胞采集结果及时机选择的意义

目的探讨一种快速、简捷判断恶性血液病自体外周血干细胞最佳采集时机的方法。方法 37例次行自体外周血干细胞移植（auto-PBSCT）的不同类型恶性血液病患者,以化疗＋粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员,采集前进行外周血白细胞（WBC）、单个核细胞（MNC）比例测定及其绝对计数,以血细胞分离机进行外周血干细胞采集,应用流式细胞术（FCM）监测CD34＋细胞计数。结果采集产品的MNC中位数为1.76×108/kg,CD34＋细胞中位数为1.35×106/kg;MNC绝对计数是产品MNC和CD34＋细胞总量的唯一相关指标,而外周血WBC计数和MNC比例与采集产品MNC和CD34＋细胞总量无关。进一步分析提示MNC绝对计数达10×108/L单次采集效率提高,中位CD34＋细胞采集量达1×106/kg以上,可作为启动采集的阈值。结论外周血MNC的绝对计数能快速、简便地动态监测外周造血干细胞的变化,为外周血造血干细胞最佳采集时机的判断提供了一种快捷、经济的参考方法。     

HX—97方案对外周血造血干细胞动员,采集和移植后造血重建的 …

为提高外周血造血干细胞动员、采集、和移植后造血重建的效率,作者从１９９７年４月至１９９年６月;进行了２２例异基因或自体外周血造血干细胞移植,对外周血造血干细胞动员、采集和移植后造血重建方案（ＨＸ－９７方案）作了系统观察。ＨＸ－９７方案的主要内容是：①外周血造血干细胞动员,采用ｒｈＧ－ＣＳＦ３００μｇ／天,皮下注射,共６天,第６剂在干细胞采集有９０分钟用;②自体外周血造血干细胞动员采用大剂量化疗加造     

rhEPO和rhG-CSF对小鼠CD90~+细胞的动员作用

目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对小鼠外周血CD90+细胞的动员作用。方法:30只雄性昆明小鼠随机分为对照组、rhG-CSF组和rhEPO组。rhG-CSF 40μg.kg-1.d-1、rhEPO 250 IU.kg-1.d-1连续皮下注射5 d;对照组连续皮下注射生理盐水。每组均于最后一次注射后6 h收集外周血,计数有核细胞(ANC)和单个核细胞(MNC),流式细胞仪检测外周血ANC中CD90+、CD34+CD90+和CD90+CD34-细胞的比例。结果:应用rhG-CSF和rhEPO动员后,小鼠外周血中ANC和MNC的数量均较对照组增加(P<0.05),但rhG-CSF和rhEPO两组之间无差异(P>0.05)。流式细胞术检测显示rhEPO组外周血ANC中CD90+细胞比例为(56.49±9.06)%,较rhG-CSF组明显增加(P<0.05);而rhG-CSF组和对照组CD90+细胞占ANC的比例无明显差异(P>0.05)。rhEPO组的CD90+CD34-细胞比例增至(53.5±8.9)%,占CD90+细胞中绝大多数。结论:rhEPO和rhG-CSF均有较强的造血干细胞动员能力,但rhEPO对CD90+细胞的动员作用强于rhG-CSF,提示rhEPO对早期造血干细胞可能具有更强的动员作用。     

PERIPHERAL BLOOD CD34^＋ CELL MOBILIZATION IN 42 PATIENTS WITH SEVERE AUTOIMMUNE DISEASE

Objective To evaluate the feasibility and safety of peripheral CD34 cell mobilization in patients with severe autoimmune disease. Methods Forty-two patients underwent a total of 46 mobilizations by the regimen of cyclophosphamide 2-3 g/m2 recombinant human granulocyte colony stimulating factor (rhG-CSF) 5 μg·kg-1·d-1. The positive selection of CD34 cell was performed through the CliniMACS. Results In 8.1±2.3 days after administration of cyclophosphamide, the peripheral white blood cell and mononuclear cell (MNC) decreased to the lowest level. In 3.7±1.6 days after injection of rhG-CSF, the peripheral absolute MNC and CD34 cell counts were 0.95×109/L and 0.035×109/L, respectively. After 2.4±0.6 times of leukapheresis, there gained 4.46×108/kg of MNC and 5.26×106/kg of CD34 , respectively. After mobilization, the underlying diseases were ameliorated more or less. In systemic lupus erythematosus (SLE) patients, SLE Disease Activity Index (SLEDAI) decreased from a median of 17 to 3 (P<0.01). In rheumatic arthritis patients, an American College of Rheumatology criteria for 20%(ACR20) response was achieved in all five patients. Totally, 17.4% of patients whose absolute neutrophil count <0.5×109/L suffered infection, and 31.0% of patients had bone pain after the injection of rhG-CSF. Two patients suffered severe complications, one with acute renal failure and recovered by hemodialysis, the other died of thrombotic thrombocytopenic purpura. Failed mobilization occurred in three patients. Conclusions Sufficient CD34 cells can be mobilized by low dose of cyclophosphamide and rhG-CSF. CD34 cell mobilization for treatment of severe autoimmune disease not only is appropriate in both effectiveness and safety but ameliorates disease also.     

单倍型异基因造血干细胞移植治疗再障-阵发性睡眠性血红蛋白尿1例

目的分析单倍体造血干细胞移植治疗再生障碍性贫血一阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征（AA—PNH综合征）的方法。方法2011年3月本院1例确诊AA—PNH综合征3年余的患者,进行母亲的单倍体造血干细胞移植。移植物选择动员后骨髓加外周干细胞,并选择脐带间充质干细胞为第三方细胞。结果输注供者的单个核细胞总数和CD34^＋细胞数分别为10．8×10^8/kg和4．8×106／kg。中性粒细胞〉0．5×109／L和血小板〉20×10^9／L的时间分别为37d和58d。30d嵌合体为完全供者型,40d左右出现I度急性移植物抗宿主病,治疗后好转,未出现其他严重并发症。结论单倍体造血干细胞移植治疗AA—PNH综合征安全有效。     

自体外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病20例临床分析

目的观察自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）治疗恶性血液病的初期疗效。方法恶性血液病患者20例,其中急性白血病3例,浆细胞白血病1例,非霍奇金淋巴瘤8例,霍奇金淋巴瘤3例,多发性骨髓瘤5例。动员方案为米托蒽醌＋长春新碱＋激素＋依托波苷方案化疗（MOEP方案）＋粒细胞集落刺激因子。经3-6d采集,获得单个核细胞（MNC）中位数为（7.23±2.27）×108/kg,CD34＋细胞（4.37±2.72）×106/kg。结果所有患者移植后均重建造血。WBC〉2.0×109/L,PLT〉20×109/L,分别为（12.04±1.76）d,（16.55±2.31）d。4例在移植6个月内死于复发,其余16例均无病存活6-55个月。结论 APBSCT对恶性血液病是一种安全有效的治疗方法。     

rhG-CSF动员对外周血淋巴细胞亚群和CD34+细胞的影响

目的:动态观察自体外周血造血干细胞移植患者经rhG-CSF动员过程中外周血及外周血造血干细胞(PBPC)中淋巴细胞亚群和CD34 细胞的变化,指导临床选择最佳采集时机。方法:对大剂量化疗(HDC)联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的38例白血病和淋巴瘤患者,采用流式细胞术(FACS)测定其动员前后外周血及PBPC中的淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、NK、CD19和造血干细胞CD34细胞含量的变化,同时用甲基纤维素半固体培养基进行CFU-GM培养来评价干细胞克隆生成能力。结果:动员后外周血淋巴细胞亚群CD3、CD4细胞含量均低于动员前(P<0.01),而动员后外周血中的CD34细胞含量明显高于动员前(P(0.05)。动员后第5天CD34含量达到最高峰。PBPC中CD4、CD4/CD8明显低于外周血(P<0.005),其他淋巴细胞亚群含量与外周血比较无明显变化。动员后外周血中CD34 细胞明显高于动员后,动员后PBPC中CFU-GM生成明显高于外周血(P<0.05),CD4/CD8比值严重倒置,B细胞恢复较快。结论:大剂量化疗联合rhG-CSF动员会使外周血淋巴细胞亚群发生不同程度的变化并明显增加外周血造血干细胞含量。