芪黄煎剂对大鼠胃切除后Peyer结淋巴细胞的影响

目的探讨芪黄煎剂对大鼠胃切除后Peyer结淋巴细胞的影响。方法将90只大鼠随机分为假手术组、模型组、芪黄煎剂组,每组30只。假手术组大鼠仅给予腹部正中切开后缝合,不行胃切除,手术后自由饮水进食,不给予肠内营养和芪黄煎剂;模型组大鼠行胃切除手术后给予肠内营养制剂能全素;芪黄煎剂组大鼠行胃切除手术后给予能全素和芪黄煎剂。疗程1周。疗程结束后,处死大鼠,分离出Peyer结及其内淋巴细胞,采用流式细胞仪检测αβT细胞抗原受体-白细胞分化抗原3阳性（αβT cell antigen receptor-cluster of differentia-tion 3 positive,αβTCR-CD3^＋）T细胞,白细胞分化抗原4阳性（cluster of differentiation 4 positive,CD4^＋）、白细胞分化抗原8阳性（cluster of differentiation 8 positive,CD8^＋）T细胞;免疫组织化学法检测免疫球蛋白A阳性（immunoglobulin A positive,IgA＋）B细胞。结果模型复制后1周,与假手术组比较,模型组Peyer结中αβTCR-CD3^＋、CD4^＋T细胞构成比和IgA＋B细胞数显著降低（P〈0.05,或P〈0.01）,模型组和芪黄煎剂组CD8^＋T细胞构成比无显著变化;与模型组比较,芪黄煎剂组Peyer结中αβTCR-CD3^＋、CD4^＋T细胞构成比和IgA＋B细胞数显著上升（P〈0.05,或P〈0.01）。结论芪黄煎剂能刺激Peyer结中T细胞的成熟、分化和增殖,并进一步促进Peyer结中B细胞的增殖和活化,有利于胃切除手术应激后肠道免疫屏障功能的调节和恢复。     

芪黄煎剂对胃切除大鼠肠淋巴细胞MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达的影响

目的 观察大鼠胃切除术后小肠内滴注芪黄煎剂对黏膜地址素细胞黏附分子-1（mucosal addressin cell adhension molecule-1,MAdCAM-1）与细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）及其mRNA表达的影响。方法 将60只SD大鼠分为3组,每组20只。假手术组大鼠仅行腹部皮肤切开后缝合手术,模型组大鼠胃切除后给予肠内营养液能全素,芪黄煎剂组大鼠胃切除后先给予芪黄煎剂再滴注营养液能全素。连续给药7 d后,采用免疫组织化学法检测MAdCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平,采用RT-PCR荧光定量法检测MAdCAM-1、ICAM-1mRNA相对表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠PP结中MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平均明显下降（P<0.05）;与假手术组比较,芪黄煎剂组大鼠PP结中MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。结论 芪黄煎剂能增加肠黏膜效应部位MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平,改善胃切除术后肠黏膜免疫屏障功能。     

芪黄煎剂对缺血-再灌注损伤肠黏膜上皮形态的影响

目的：观察健脾通里中药芪黄煎剂对缺血再灌注损伤大鼠肠上皮形态的影响。方法：将40只Wistar大鼠,随机分为正常组、缺血再灌注组（ischemia reperfusion,IR）、谷氨酰胺组、芪黄煎剂组,采用无创血管夹夹闭肠系膜上动脉45min,再灌注1h复制IR模型,谷氨酰胺组和芪黄煎剂组大鼠分别管饲谷氨酰胺和芪黄煎剂3d。取距回盲部2cm以上的小肠组织约5cm,经100ml／L甲醛固定,标本4μm切片后行苏木精伊红染色。分别对各组大鼠肠黏膜完整性予以Chiu氏评分;测定并比较各组肠绒毛高度、绒毛隐窝深度、肠黏膜厚度、绒毛面积。结果：①Chiu氏评分：正常组最低（0分）,IR组最高,芪黄煎剂组与谷氨酰胺组Chiu氏评分稍低,与I／R组比较,差异有显著性（P〈0．05）,芪黄煎剂组和谷氨酰胺比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。②正常组肠绒毛高度、隐窝深度和面积及肠黏膜厚度最大;与正常组比较,IR组上述指标显著减少;与IR组比较,芪黄煎剂组肠绒毛高度、隐窝深度和面积显著增加（P〈0．05）。结论：健脾通里中药芪黄煎剂对肠黏膜上皮IR损伤具有保护作用。     

健脾通里中药芪黄煎剂对胃切除大鼠肠黏膜生物屏障损伤的影响

目的 观察健脾通里中药芪黄煎剂对大鼠胃切除手术创伤后肠黏膜生物屏障损伤的保护作用及其机制。方法 将90只SD大鼠随机分成空白对照组,假手术组,肠内营养组,芪黄煎剂低、中、高剂量组,每组15只。采用胃切除术复制大鼠肠黏膜损伤模型。空白对照组和假手术组术后自由饮水进食,不给予肠内营养液和中药;肠内营养组术后注射肠内营养液;芪黄煎剂低、中、高剂量组分别按照每日5、10、15 g/kg剂量滴注中药。光学显微镜下观察各组大鼠肠上皮绒毛形态和结构,采用凝胶法检测大鼠体内内毒素含量,运用细菌培养技术对大鼠结肠内容物乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、肠球菌培养与计数。RT-PCR荧光定量检测紧密连接蛋白(zonula occluding-1,ZO-1)、封闭蛋白（claudin）、咬合蛋白（occludin）的mRNA表达水平。结果 芪黄煎剂能显著降低肠黏膜损伤大鼠门静脉、肠道和肠系膜淋巴结中内毒素水平（P＜0.05）,显著增加肠道双歧杆菌、乳酸菌、肠杆菌、肠球菌数量（P＜0.05）,显著降低肠黏膜损伤Chiu氏病理评分（P＜0.05）,显著上调小肠组织中ZO-1、claudin、occludin及其mRNA表达水平（P＜0.05）,且其效应呈现明显的剂量依赖性。结论 大鼠胃切除手术创伤可以引起肠道黏膜生物屏障的损伤,高剂量芪黄煎剂可以有效减轻肠黏膜损伤,更好地调节肠道菌群,提高肠黏膜机械屏障肠上皮细胞的ZO-1、claudin、occludin的蛋白表达水平,起到保护肠道黏膜屏障的作用。     

小肠黏膜固有层淋巴细胞的免疫学分析

目的 分析小肠黏膜固有层(LP)淋巴细胞特征,并探讨其意义.方法 分离脾脏和小肠LP细胞,流式细胞术检测各细胞亚群百分比及IL-10和IFN-γ产生细胞在CD4+T细胞中的比例.结果 小肠LP中存在许多T和B细胞,其中T细胞以CD4+细胞为主,且几乎都表达CD69;细胞内细胞因子分析表明,LP中含有更多产生IL-10的CD4+细胞;依据CD11c和CD11b表达不同,抗原提呈细胞可分为三个亚群:CD11chiCD11b-,CD11chiCD11b+,和CD11cintCD11b+.结论 小肠LP与脾脏细胞存在表型差异;小肠LP中存在更多活化型及产生IL-10的CD4+T细胞.     

一种改良小鼠肠道黏膜固有层淋巴细胞分离方法的建立

目的:探讨并改良肠道黏膜固有层淋巴细胞(LPL)分离方法。方法:参照Sanos等方法进行改进。用分离液和消化液处理肠组织片段后,通过100μm的尼龙滤网过滤,行零加减速密度梯度离心,观察分析细胞获得率、细胞活率和细胞纯度。结果:每只小鼠肠道LPL的获得量为(5.5±1.7)×106个,细胞活力>92%;细胞平均直径为(7.5±0.8)μm,细胞平均圆度为0.93±0.03,细胞结团率为(0.4±0.2)%;流式细胞仪检测细胞活率为(94.5±3.2)%,CD4+T细胞的含量为(72.5±5.2)%。结论:与国内外其他分离方法相比较,该方法简化、高效、稳定,且获取的LPL的细胞数量多、活率高、纯度高,可为肠道黏膜免疫的研究提供可靠的方法,值得推广。     

鼻咽黏膜上皮内淋巴细胞在鼻咽癌时的变化

目的：研究鼻咽黏膜上皮内淋巴细胞（mucosa intraepithelial lymphocyte,mIEL）在鼻咽癌时的变化,初步探讨局部上皮增生活跃程度对mIEL的影响。方法：（1）收集可见黏膜上皮的51例鼻咽慢性炎症（NPi）和90例鼻咽癌（NPC）石蜡标本。（2）在HE切片上计数黏膜上皮内淋巴细胞、癌巢内淋巴细胞,判定巢间淋巴细胞浸润程度。（3）对部分病例用CD3、CD4、CD8（Npi20例,NPC33例）和PCNA抗体（Npi48例,NPC80例）进行免疫组化染色。结果：（1）NPC组mIEL数量明显少于NPi组[（4.53±3.87）vs（6.33±7.20）,P=0.017],但其在NPC各期和有无淋巴结转移之间变化不明显（P〉0.05）。（2）NPC组mIEL与其巢内、癌巢间淋巴细胞数量（P=0.011,P=0.018）和组织中T细胞数量变化（P=0.037）均呈正相关。（3）NPC组黏膜上皮PCNA表达强度与mIEL数量变化呈正相关（P=0.007）。结论：（1）NPC组mIEL明显减少,但在其肿瘤进展过程中变化不显著;（2）NPC组mIEL变化与其组织中淋巴细胞浸润情况和T淋巴细胞变化一致;（3）NPC组mIEL数量随黏膜上皮增生活跃程度而增加。     

大鼠小肠、大肠上皮及固有层淋巴细胞的分布差异

目的　研究大鼠小肠 (十二指肠、空肠、回肠 )和大肠 (乙状结肠 )上皮内淋巴细胞 (IEL)、固有层内淋巴细胞 (LPL)分布特点。方法　通过免疫组化双重染色 ,标记肠绒毛基底膜 ,区分出上皮和固有层 ,然后分别对IEL和LPL计数 ,并进行统计学分析。结果　大鼠肠道各部分 (十二指肠、空肠、回肠、乙状结肠 )IEL数量依次递减 ;与此相反 ,LPL数量依次递增。而且它们的T细胞亚群 (CD3、CD4、CD8、TCRαβ、TCRγδ)数量也存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　通过双重染色标记出基底膜来计数IEL、LPL的方法非常精确 ,肠道各段的IEL、LPL可能在黏膜免疫应答中起着不同的生物学作用     

红芪多糖对氢化可的松所致免疫抑制模型小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的 :探讨红芪多糖对氢化可的松免疫抑制小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法 :采用皮下注射氢化可的松 0 .75mg/(只·d) ,制造免疫功能低下小鼠模型 ,灌胃给予 1 g/kg红芪多糖 ,免疫荧光法测小鼠外周血T淋巴细胞亚群水平。结果 :氢化可的松所致免疫抑制模型小鼠的免疫功能明显低于正常小鼠 ;与氢化可的松模型组比较 ,1g/kg红芪多糖能显著提高氢化可的松所致的CD3、CD4、CD4/CD8水平的下降。结论 :红芪多糖具有明显增强细胞免疫功能的作用 ,能提高免疫抑制小鼠的外周血T淋巴细胞亚群水平     

免疫大鼠肠道固有层内淋巴细胞的实验研究

目的研究口服伤寒杆茵后．大鼠小肠(十二指肠、空肠和回肠)和大肠(乙状结肠)固有层内淋巴细胞(LPL)的形态学特征及分布特点的变化。为探讨粘膜免疫的机制打下基础。方法采用免疫组化染色和透射电镜方法．对大鼠肠道固有层内淋巴细胞(LPL)表型进行分析。观察其形态特征。结果电镜观察：免疫后肠道淋巴细胞超微结构与对照组相比．有显著性差异；免疫组化观察：免疫后肠道各段LPL的各亚群数量明显增加．肠道各段LPL数量增加的情况有差异。结论1)服茵后．大鼠小肠和大肠上皮内淋巴细胞活性明显增强，是免疫反应细胞基础。2)LPL大量增加，进一步表明淋巴细胞在粘膜免疫中的重要作用。     

益气化生汤治疗胃黏膜肠上皮化生临床观察

目的：观察益气化生汤治疗胃黏膜肠上皮化生的临床疗效。方法：将180例胃黏膜肠上皮化生患者随机分为治疗组90例和对照组90例。治疗组予益气化生汤,对照组予泮托拉唑钠肠溶胶囊和铝碳酸镁片治疗,疗程为3个月。观察两组治疗前后的主要II盘床症状及肠上皮化生变化情况。结果：①治疗后,对照组患者的胃痞、胃胀、胃痛、嗳气和纳差明显改善（P〈0．05,P〈0．01）,治疗组患者的胃痞、胃胀、胃痛、泛酸、嗳气、嘈杂、乏力和纳差症状均明显改善（P〈0．01）,且治疗组胃痞、胃胀、胃痛、嗳气、乏力和纳差症状的改善优于对照组（P〈0．01）。②治疗后,两组患者肠上皮化生的情况均显著改善（P〈0．01）,且治疗组较对照组改善更加明显（P〈0．01）。③治疗后,治疗组和对照组肠上皮化生改善的有效率分别为75．6％和32．2％,治疗组优于对照组（P〈0．01）。结论：益气化生汤能有效逆转胃黏膜肠上皮化生,改善患者的临床症状。     

乌司他汀对肠手术创伤后肠黏膜屏障功能的影响分析

目的观察乌司他汀对肠手术患者术后肠黏膜屏障功能的影响。方法2010年1-12月本院普外科行肠手术患者80例,随机分为乌司他汀低剂量组和乌司他汀高剂量组各40例。手术前及手术后两组分别静脉滴注乌司他汀20万U／d和10万U／d。分别于手术前、手术后2、4天测定两组患者尿乳果糖与甘露醇的比值（L／M）、血浆谷氨酰胺（Gin）、外周血细菌DNA。结果两组患者术后L／M、Gin逐渐升高,外周血细菌DNA阳性率逐渐降低（P〈0．05）;两组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论乌司他汀通过改善肠道黏膜通透性、升高Gin,对肠手术患者肠黏膜屏障功能具有明显保护作用,对预防创伤引起的肠道细菌移位具有重要临床意义。     

大黄四君子汤对重症胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的：研究大黄四君子汤对重症胰腺炎（SAP）大鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法：采用胰管逆行注射牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型。60只大鼠随机分为空白对照组（A组）,SAP组（B组）,SAP＋肠外营养（TPN）组（C组）,SAP＋TPN＋谷氨酰胺（Gln）组（D组）,SAP＋肠内营养（EN）组（E组）,SAP＋TPN＋中药组（F组）;分别给予相应处理：肠内和肠外营养液等热卡为250kcal·kg^-1·d^-1,氮热卡比值为1：100,Gln浓度为2g／100ml,大黄四君子汤浓度为1g／ml。术后第5天处死大鼠,检测胰腺、空肠黏膜形态学变化,观察肝脾及肠系膜淋巴结细菌培养结果。结果：B、C组黏膜厚度、绒毛高度及隐窝深度较D、E、F组均明显降低（P〈0．01）;E组高于D、F组（P〈0．05）;D组与F组比较,无统计学差异（P〉0．05）。B、C组脏器细菌培养阳性率明显高于D、E、F组（P〈0．05）,以肠系膜淋巴结培养阳性率最高;检出细菌多数为革兰阴性肠道杆菌。结论：大黄四君子汤可减少SAP大鼠肠源性细菌移位,起到保护肠黏膜屏障的作用。     

大承气汤对不完全性肠梗阻大鼠血清中IL-1和IL-6及回盲部形态学的影响

目的探讨大承气汤对不完全性肠梗阻大鼠白介素-1（IL-1）和白介素-6（IL-6）及回盲部形态学的影响。方法将60只SD大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,假手术组,大承气汤高、中、低剂量组（以下简称高、中、低剂量组）。除空白对照组外,假手术组造成手术创伤,其余大鼠制备成不完全性肠梗阻模型,空白对照组、模型对照组、假手术组给予相同剂量的生理盐水灌胃,高、中、低剂量组分别以1.16、0.58、0.29 g/mL灌胃治疗。（1）运用酶联免疫法（ELISA）检测大鼠血清中IL-1、IL-6含量;（2）对大鼠回盲部进行HE染色并观察其形态学变化。结果（1）与模型对照组比较,高、中剂量组血清中IL-1、IL-6含量明显降低（P〈0.01）;（2）高、中、低剂量组与模型对照组大鼠回盲部黏膜损伤评分差异有统计学意义（P〈0.01）,高剂量组与中、低剂量组大鼠损伤评分比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论大承气汤降低不完全性肠梗阻血清IL-1以及IL-6含量,保护不完全性肠梗阻肠道上皮细胞,具有肠屏障保护功能。     

甲状腺激素对大鼠急性肝衰竭肠粘膜屏障功能的保护作用

目的探讨补充外源性甲状腺激素(thyroid hormone,TH)对急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)肠粘膜屏障的保护作用.方法 SD大鼠36只,随机分为3组:对照组(SO组)、急性肝衰竭组(AHF组)和治疗组(AHF+TH组).腹腔注射硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)制作AHF模型.15μg/kg的标准腹腔注射三碘甲状腺原氨酸(T3),取下腔静脉血检测TH水平,取小肠组织测二胺氧化酶(DAO)活性,取末段回肠行普通HE染色观察,并使用图像分析系统测量小肠绒毛长度.结果 AHF+TH组较AHF组小肠组织DAO活性升高(P<0.05),小肠绒毛长度升高(P<0.05),肠粘膜损伤程度降低(P<0.05).结论补充外源性TH对AHF时肠粘膜屏障有明显的保护作用.     

艾灸胃经穴对大鼠胃黏膜损伤的修复效应研究

目的:探讨艾灸胃经穴对大鼠急性胃黏膜损伤的保护及修复作用。方法:40只健康SD大鼠随机分成4组:正常组、模型组、艾灸胃经穴组、艾灸对照点组。采用水浸束缚法制作胃黏膜损伤大鼠模型,检测各组胃黏膜溃疡指数、溃疡面积和出血指数。结果:艾灸胃经穴组和艾灸对照点组的溃疡指数、出血指数及溃疡面积显著低于模型组,与其比较差异有显著性意义(P<0.05);并且艾灸胃经穴组与艾灸对照点组相比更低(P<0.05)。结论:艾灸胃经穴对大鼠急性胃黏膜损伤具有很好的修复作用。     

宫颈环形电切除术联合干扰素治疗宫颈上皮内瘤变的临床研究

目的：探讨LEEP刀联合干扰素治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床疗效。方法整群选取2011年2月—2015年10月该院收治的118例宫颈CINⅡ、Ⅲ级患者为研究对象,根据随机原则分为观察组和对照组。其中对照组(56例)采用单纯宫颈环形电切除术(LEEP刀)治疗,观察组(62例)在LEEP刀治疗前联合重组干扰素栓α-2b治疗治疗半年后比较两组患者的临床疗效以及免疫球蛋白和T细胞亚群水平。结果治疗结束后对照组总有效率低于观察组(P<0.05)。随访1年后对照组有4例复发,而观察组无复发病例。对照组术中出血量和平均愈合时间明显长与观察组(P<0.05)。此外,观察组患者血清中IgA、IgG和IgM含量以及CD4+T细胞比例均高于对照组,而CD8+T细胞比例低于对照组。结论宫颈环形电切除术结合干扰素治疗能有效改善CIN的临床疗效和免疫功能,是一种理想的治疗方法。