三七中十八种游离氨基酸的柱前衍生化-HPLC法测定

建立了柱前衍生化-HPLC法同时测定三七中的18种游离氨基酸.以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,以乙腈-0.05 mol/L乙酸钠缓冲液为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm.结果显示三七根中的游离氨基酸以精氨酸、丙氨酸和脯氨酸为主,约占18种游离氨基酸总量的80%.18种氨基酸的平均回收率为96.5%～103.4%,RSD均小于3%.     

柱前衍生化HPLC法测定百多宁注射液中的脂肪酸含量

目的建立以HPLC法测定百多宁注射液中脂肪酸含量的方法。方法采用无水硫酸钠破乳方法分离百多宁注射液中的油相。以 2 ,4′ 二溴苯乙酮为衍生化试剂 ,18-冠 - 6醚为相转移催化剂 ,采用C8反相柱 ,以乙腈 -水 (V∶V =75∶2 5 )为流动相等度洗脱 ,正十七烷酸为内标 ,一次基线分离 4种脂肪酸。结果亚油酸在 4 6～ 30 7ng内、软脂酸在 2 7 2～ 181 0ng内、油酸在 14 4～96 0ng 内、硬脂酸在 9 7～ 6 5 1ng内质量与相对峰面积线性关系良好 ,相关系数分别为 0 9997、0 9999、0 9995、0 9996。平均回收率分别为 98 2 %、97 5 %、99 8%、10 2 3% ,RSD分别为2 6 %、3 0 %、1 2 %、2 4 %。结论方法重现性好、定量准确 ,可作为百多宁注射液中脂肪酸测定的定量方法     

柱前衍生化-HPLC法测定复方新斯的明眼用凝胶中牛磺酸的含量

目的：建立复方新斯的明眼用凝胶中牛磺酸的含量测定方法。方法：样品液经2,4-二硝基氟苯柱前衍生化后,采用高效液相色谱法。色谱柱为Eclipse XDB-C18（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（30：70）,检测波长为360nm。结果：牛磺酸的线性范围为4．92～98．40μg·ml^-1（r=0．9999,n=5）。平均回收率为96．95％,RSD为1．16％（n=9）。结论：本方法简便快速、专属性好、重复性好。     

PITC柱前衍生化法测定保健食品中牛磺酸的含量

目的 建立液相色谱法测定保健食品中牛磺酸含量的方法.方法 采用C18色谱柱,以异硫氰酸苯酯(PITC)做为柱前衍生化试剂,以醋酸钠缓冲液-乙腈-水体系为流动相,流速为1.0mL·min-1,在254nm波长处检测.结果 牛磺酸在0.28～0.95μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9998),液体、固体保健食品的平均回收率均为95.6％,RSD分别为1.5％和0.8％(n=6).结论 该方法结果准确,稳定可靠,重复性好.     

柱前衍生化-HPLC法测定患者体内丙戊酸钠的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠血药浓度。方法血清用环己烷提取,以环已烷羧酸为内标,2-溴苯乙酮为衍生化试剂,用高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度。采用Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(82∶18);检测波长为248 nm;流速为1.0 ml.min-1;柱温:30℃。结果血清中丙戊酸钠线性范围为12.5～150mg.L-1,平均回收率98.74%,日内RSD<5%。结论该法快速、灵敏、准确,适用于临床常规监测需要。     

柱前衍生HPLC法测定薏苡仁油中的脂肪酸含量

目的:建立以高相液相色谱法测定药用植物油——薏苡仁油中的脂肪酸的方法。方法:以2,4’-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,采用HiQ sil C8(250 mm×4 mm,5μm)反相柱,波长254 nm。以乙腈-水(85:15)为流动相等度洗脱,柱温30℃,设定流速为1.5 mL·min-1。正十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸。结果:亚油酸的线性范围为0.026-0.387μg,软脂酸的线性范围为0.014-0.207μg,油酸线性范围为0.027-0.404μg,硬脂酸的线性范围为0.011-0.160μg,相关系数均为0.9999。平均回收率分别为100.4％,102.2％,99.4％,104.5％,RSD分别为1.0％,1.9％,0.7％,2.4％。结论:本方法重现性好,定量准确,可作为薏苡仁油中脂肪酸测定的定量方法。     

15种氨基酸注射液HPLC DABS柱前衍生法测定

采用ＤＡＢＳ柱前衍生化，对１５种氨基酸进行ＨＰＬＣ含量测定，方法简便，衍生产物ＤＡＢＳ－氨基酸稳定，过量的ＤＡＢＳ水解产物对氨基酸定量测定无干扰，分析周期短，１５种氨基酸的回收率在９８．８７％～１００．７９％，ＲＳＤ为０．２９％～０．８３％。     

柱前衍生化HPLC法分析沙参多糖中单糖组成

目的建立北沙参多糖中单糖的组成和含量的检测方法。方法以三氟乙酸水解沙参多糖,水解产物加入衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)生成衍生化产物,采用RP-HPLC法,色谱柱:C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:体积分数为19%的乙腈溶液-醋酸铵缓冲液(醋酸铵-冰醋酸,pH5.5,体积比为100∶1),等度洗脱,流速:1.0 mL.min-1,检测器:紫外检测器,检测波长:250 nm,柱温:35℃。结果沙参多糖由D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-(+)-阿拉伯糖等8种单糖(有2种未鉴定出的单糖)组成。D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-(+)-阿拉伯糖的线性分别为4~80μmol.L-1(r=0.999 0)、12~240μmol.L-1(r=0.999 0)、5.6~1.12×103μmol.L-1(r=0.999 4)、1.54×103~30.80×103μmol.L-1(r=0.999 0)、80.0~1.6×103μmol.L-1(r=0.999 0)、64.00~1.28×103μmo.lL-1(r=0.9992);平均加样回收率分别为94.0%、88.5%、93.9%、95.9%、89.2%、90.8%。含量分别为0.22%、0.61%、8.55%、72.88%、4.79%、2.71%。结论该方法可以准确的测定出北沙参多糖中含有的各种单糖和含量。     

PMP柱前衍生化-HPLC法分析不同生长年限黄芪中6种单糖的含量

目的:分析并比较不同生长年限黄芪中6种单糖的含量.方法:取来自3个产地的2～4年生黄芪药材,经水提醇沉、Sevage除蛋白后制得黄芪多糖;将上述多糖经三氟乙酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化后,采用高效液相色谱法测定其中甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等6种单糖的含量.以Symmetry...     

柱前衍生HPLC法测定阿仑膦酸钠骨化三醇片中阿仑膦酸钠的含量

目的建立阿仑膦酸钠骨化三醇片中阿仑膦酸钠的含量测定方法。方法用0.1%FMOC的乙腈溶液进行柱前衍生,色谱柱填料为苯乙烯-二乙烯苯共聚物（Hamilton PRP-1柱适用）;流动相为乙腈-甲醇-0.05mol/L磷酸氢二钠和0.05mol/L枸橼酸钠混合液（用磷酸调pH8.0）（20∶5∶75）;检测波长266nm。结果阿仑膦酸钠（以阿仑膦酸计）在5～15μg/ml的浓度范围内有良好的线性关系（r=0.99998,n=5）;平均回收率为100.8%,RSD=1.1%（n=9）。结论该方法稳定,准确度、精密度高,重复性好,可用于阿仑膦酸钠骨化三醇片中阿仑膦酸钠的含量测定。     

2,5-Dimethyl-1H-pyrrole-3,4-dicarbaldehyde as a precolumn derivatization reagent for HPLC/UV detection of amino acids

The use of 2,5-dimethyl-1H-pyrrole-3,4-dicarbaldehyde as a precolumn derivatization reagent for HPLC analysis of amino acids is proposed. The compound reacts under mild conditions (10 min at ambient temperature) with primary amino groups. The derivatization conditions to obtain quantitative reaction were optimised by considering different parameters (temperature, pH and reagent concentration) using l-Val as the model compound. The synthesized l-Val derivative was characterized by ¹H NMR and UV. The derivatives of 19 amino acids were separated by reversed-phase HPLC and detected at λ = 320 nm. The method was applied successfully to the qualitative and quantitative analysis of commercial polyamino acid preparations.     

文冠果果壳中脂肪酸成分的研究

目的研究我国特有的药用植物文冠果的果壳中脂肪酸成分.方法采用气相色谱质谱联用技术.结果确定21种脂肪酸的结构和含量.结论其中有8种脂肪酸在该植物中为首次报道.     

柱前衍生化-HPLC法同时测定注射用沙棘籽油中脂肪酸的含量

目的建立沙棘籽油中脂肪酸的HPLC测定法。方法以2,4′-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠醚-6为相转移催化剂,采用Kromasil C8反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长254 nm,以甲醇-乙腈-水(体积比60∶30∶10)为流动相等度洗脱,柱温为室温,流速为1.0 mL.min-1。十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸,建立注射用沙棘籽油的脂肪酸含量测定的方法。结果α-亚麻酸的线性范围为2.02~20.22 ng,相关系数为0.999 1;亚油酸的线性范围为2.90~20.90 ng,相关系数为0.999 1;棕榈酸的线性范围为1.27~12.67 ng,相关系数为0.999 0;油酸的线性范围为1.92~19.16 ng,相关系数为0.999 0;硬脂酸的线性范围为0.30~3.04 ng,相关系数为0.999 1。α-亚麻酸、亚油酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸的平均回收率分别为106.07%、104.13%、100.81%、99.43%、95.62%,RSD分别为2.64%、2.42%、3.14%、1.18%、2.24%(n=9)。结论本方法重现性好,定量准确,可作为注射用沙棘籽油中脂肪酸测定的定量方法 ,用于沙棘籽油的质量控制。     

反相高效液相色谱-柱前衍生法测定人血清中丙戊酸浓度

目的 建立人血清中丙戊酸浓度测定方法。方法 将血清酸化,用乙醚提取,以环己烷羧酸为内标,α-溴苯乙酮为衍生化试剂,采用高效液相色谱法测定。色谱柱:Eclipse Plus C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-水(70:30),检测波长:248 nm,流速:1.0 ml/min。结果 血清中丙戊酸浓度线性范围为8.65~173 μg/ml,平均回收率>99.27%,日内和日间RSD<5%。结论 本法快速、简便、准确,适合于临床血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定文冠木各部位中杨梅树皮素和槲皮素的含量

应用高效液相色谱法测定文冠木各部位中杨梅树皮素和槲皮素的含量 ,色谱柱采用SUNTEKAccusiLC 18柱 ,流动相为甲醇∶水∶磷酸 (4 0∶6 0∶0 4,V∶V∶V) ,柱温为 40℃ .回收率分别为 10 1 3 %和 94 9% ,RSD分别为 1 4%和 3 5 %     

柱前衍生高效液相色谱法测定门冬氨酸的含量

目的建立测定门冬氨酸含量的异硫氰酸苯酯柱前衍生化方法。方法采用高效液相色谱法测定门冬氨酸的含量。色谱柱为Phe—nomenexGeminiC18柱（250mmX4．6mm,5μm）,流动相A为12．5mmol／L磷酸钠溶液（用磷酸调pH至6．8）、B为乙腈-水（80：20）,梯度洗脱,流速为1．0mL／min,检测波长为254nm。结果门冬氨酸质量浓度在50．0～800．0μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9998）,平均回收率为99．18％,RSD=1．74％（n=9）。结论该方法准确、专属性强,稳定且无干扰,可用于门冬氨酸的含量测定。     

柱前衍生高效液相色谱法测定知母中菝葜皂苷元的含量

目的建立用苯甲酰氯与菝葜皂苷元进行柱前衍生化反应,以HPLC-UV法测定知母药材中菝葜皂苷元的含量。方法采用Agilent C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比99∶1),检测波长为230 nm,流速为1.1 mL.min-1,柱温为33℃。结果菝葜皂苷元质量浓度在0.20~4.00 g.L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为98.3%(n=9),RSD为2.1%。结论本法可用于菝葜皂苷元的定量分析。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定2-去氧葡萄糖的含量

目的建立柱前衍生化高效液相色谱法测定2-去氧葡萄糖(2-DG)含量的方法。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)为柱前衍生化试剂,将2-DG在碱性条件下衍生化后直接进样测定。分离柱为HypersilODS2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为100 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH 5.5)-乙腈(78∶22),流速1.0 mL·min-1,波长249 nm。结果 2-DG在19.68~393.6μg·mL-1浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997);其定量限(S/N=10)和最低检出限(S/N=3)分别为7.8和3.1 ng;平均回收率为101.21%,RSD 0.63%。结论该方法简便实用、检测灵敏度高、测定结果准确,适用于2-DG的质量控制。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度

目的:建立一种异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱同时测定人血浆中10种氨基酸的方法。方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,Venusil-AA柱为分析柱,柱温40℃,采用二元梯度洗脱,254 nm波长处检测。结果:氨基酸血浆浓度在15.6~250μmol/L时,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸血浆浓度的线性相关系数,均大于0.99;10种氨基酸的加样回收率在96.3%~103.4%;日间和日内变异系数均在4.8%以下。应用该方法对小儿血浆中氨基酸含量进行了测定,取得了满意的结果。结论:该法简便、稳定,并且分离效果好,可用于人血浆中氨基酸浓度的检测。