慢性阻塞性肺疾病患者血清高迁移率族蛋白B1和纤维蛋白原的检测及意义

目的探讨血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和血浆纤维蛋白原(Fbg)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者病程中的变化及临床意义。方法选择COPD急性加重患者30例为COPD组,另选28例健康志愿者为对照组,抽取COPD组急性加重期(AECOPD)、稳定期患者及对照组志愿者清晨空腹肘静脉血3份各2 mL,分别用于检测血清HMGB1、Fbg、白细胞计数(WBC)及中性粒细胞百分比(NEU%),血清HMGB1浓度检测采用酶联免疫吸附法。结果 COPD组稳定期患者血清HMGB1水平较对照组健康志愿者明显增高,两者相比差异有统计学意义[(4.97±0.95)μg/L vs(2.89±0.65)μg/L,P<0.01];急性加重期患者HMGB1水平增高更加显著[(8.01±0.85)μg/L vs(4.97±0.95)μg/L,P<0.01]。COPD组稳定期患者血浆Fbg水平明显高于对照健康志愿者组[(3.09±0.61)g/L vs(2.51±0.75)g/L,P<0.01];急性加重期患者水平较稳定期增高更加显著[(4.04±0.68)g/L vs(3.09±0.61)g/L,P<0.01]。直线相关分析显示AECOPD患者血清HMGB1与Fbg、NEU%水平均呈显著正相关(r=0.579,P<0.01;r=0.692,P<0.01);Fbg与NEU%呈显著正相关(r=0.502,P<0.01)。结论 COPD患者血清HMGB1与Fbg水平升高,HMGB1和Fbg可能作为炎症因子在AECOPD发病机制中起重要作用。     

血清HMGB1水平与慢性阻塞性肺疾病关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病患者血清高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)水平与慢性阻塞性肺疾病的相关性。方法选取我院2015年1月~2016年5月收治的慢性阻塞性肺疾病(chronic ob structive pulmonary disease,COPD)患者共计73例,为COPD组。另选取73例健康研究对象为对照组。通过用力呼气量占用力肺活量比值(FEV_1/FVC%)、用力呼气量(FEV_1)占预计值%评价两组研究对象的肺功能;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测两组研究对象血清HMGB1水平并进行比较,分析血清HMGB1水平与肺功能的相关性。结果对照组FEV_1/FVC%、FEV_1占预计值%显著高于COPD患者组,差异有统计学意义(P0.01);对照组血清HMGB1水平均值为1.75μg/L,COPD患者组为3.84μg/L,COPD患者血清HMGB1水平显著高于对照组,两组数值比较,差异有高度统计学意义(P0.01);COPD患者血清HMGB1水平与FEV_1/FVC%和FEV_1占预计值%均呈负相关关系,差异有高度统计学意义(P0.01)。结论 COPD患者血清HMGB1水平显著升高,且与肺功能呈负相关,提示血清HMGB1水平与慢性阻塞性肺疾病严重程度相关,对于疾病严重程度的判断具有一定的提示意义。     

高迁移率族蛋白B1在免疫应答中作用的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种DNA结合蛋白,在细胞外有细胞因子功能,能启动免疫反应,引起细胞炎性效应。生理状态下,HMGB1有核结合蛋白的作用,释放进入细胞间隙后,则表现出晚期炎性因子作用。HMGB1的识别及跨膜信号转导需要一系列分子的参与,其受体主要是晚期糖基化终产物、Toll样受体等。HMGB1作为一个内源性分子,促进免疫反应和组织内稳态。     

慢性阻塞性肺疾病患者支气管肺泡灌洗液中HMGB1的表达及意义

目的：通过测定慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者的支气管肺泡灌洗液（BALF）中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的含量并分析 HMGB1和气流受限的关系,初步探讨 HMGB1在COPD发病机制中的作用。方法将研究对象分为COPD组（COPD稳定期20例）和对照组（上气道咳嗽综合征20例）,均行支气管镜检查并行支气管肺泡灌洗术,检测并比较两组BALF中的细胞总数、中性粒细胞百分比;用ELISA法测定并比较两组 HMGB1、白细胞介素‐1β（IL‐1β）及肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）的含量,分析COPD组 HMGB1和IL‐1β、TNF‐α间的关系及 HMGB1和肺功能（FEV1％预计值）的关系。结果在BALF中,COPD组细胞总数、中性粒细胞百分比高于对照组（P＜0．01）;COPD组HMGB1、IL‐1β、TNF‐α的含量高于对照组（P＜0．01、P＜0．05、P＜0．01）,COPD组 HMGB1的含量和IL‐1β、TNF‐α呈正相关（r＝0．79,P＜0．01及 r＝0．48,P＜0．05）;COPD组 HMGB1和肺功能值（吸入支气管舒张剂后FEV1％预计值）呈负相关（r＝－0．70,P＜0．01）。结论 HMGB1参与和促进COPD气道炎症的发生、发展,BALF中HMGB1水平和COPD严重程度相关。     

高迁移率族蛋白B1诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响。方法分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经不同浓度的HMGB1(10、100、1000、10000ng/ml)作用24h,或以10000ng/ml的HMGB1作用不同时间(6、12、24、48h)后,以连接素Ⅴ/放线菌素D双染法,采用流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜检测巨噬细胞凋亡情况。结果经不同浓度的HMGB1刺激24h,其中10000ng/ml组HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的作用最强,为(39.84±5.98)%,与对照组(4.49±1.72)%比较,差异具有显著性(P<0.01)。以10000ng/ml的HMGB1作用巨噬细胞不同时间,其中24h组凋亡率发生最高,为(38.30±6.95)%,显著高于对照组(P<0.01)。结论HMGB1可诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡。     

高迁移率族蛋白B1 在类风湿关节炎中的 表达水平研究

目的 探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在类风湿关节炎中的表达。方法 选取2017 年5 月- 2018 年5 月在吉林大学第一医院行关节置换术或滑膜清理术的类风湿关节炎患者49 例作为研究组;另选取 该院同期行手术治疗的骨关节炎患者30 例作为对照组。所有研究对象入院后第3 天清晨空腹采集外周静脉 血,分离血清,采用酶联免疫吸附法测定HMGB1 含量;取保存的所有研究对象的病损关节滑膜组织石蜡病 理切片标本,采用链霉菌抗生物素蛋白- 过氧化物酶连结（SP）法检测HMGB1 的表达。结果 研究组血清 HMGB1 水平高于对照组（P <0.05）。研究组HMGB1 阳性表达率高于对照组（P <0.05）。研究组SP 法染色 评分高于对照组（P <0.05）。结论 HMGB1 在类风湿关节炎中高表达,其可能在类风湿关节炎组织损伤发生、 发展中发挥重要作用,可作为类风湿关节炎辅助诊断指标之一。     

大鼠高迁移率族蛋白 B1表达水平与 COPD 肺动脉平滑肌细胞合成分泌干扰素-γ的关系

目的：肺动脉高压与慢性阻塞性肺疾病（ chronic obstructive pulmonary disease , COPD）密切相关。研究COPD继发肺动脉高压的机制,探讨COPD模型大鼠远端肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells , PASMCs）高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1, HMGB1）表达水平与其合成分泌干扰素-γ（interferon-γ, IFN-γ）的相关性及临床意义。方法建立COPD大鼠模型,原代培养PASMCs并鉴定,检测香烟烟雾提取物（CSE）及脂多糖（LPS）诱导下PASMCs合成分泌细胞因子的功能,实验分组：对照组、CSE组、LPS组、CSE＋LPS组,同时4组另设瓶并分别加入1∶1000抗HMGB1抗体0．2 mL培养作为干预组;分别于培养12、24、48、72 h后,采用Western blot检测各组PASMCs中HMGB1蛋白表达变化,ELISA检测细胞培养上清液HMGB1、IFN-γ浓度,并进行相关分析。结果光镜下见细胞呈长梭形或“峰、谷”状生长,α-actin免疫组化染色及细胞免疫荧光鉴定为PASMCs;Western blot及ELISA法检测结果显示,4实验组组间培养12 h后HMGB1表达水平及细胞上清液HMGB1、IFN-γ,两两比较差异均有统计学意义（P＜0．05）;HMGB1蛋白表达水平与IFN-γ浓度变化呈正相关（r＝0．91）;加入抗HMGB1抗体干预培养12 h后,干预组IFN-γ浓度均较对应实验组减弱（P＜0．05）;同组内,于细胞培养12、24、48、72 h,Western blot及ELISA法检测结果差异均无统计学意义（ P＞0．05）。结论 HMGB1表达水平与COPD模型大鼠远端PASMCs合成分泌IFN-γ呈正相关,抗HMGB1抗体为临床治疗COPD、抑制其全身炎症反应提供了新的干预靶点。     

高迁移率族蛋白B1在儿童呼吸系统疾病中的作用及研究进展

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)是一种广泛表达于真核细胞内的非组蛋白核蛋白,不仅在细胞内起作用,在细胞外也发挥着重要作用,参与多种疾病的病理生理过程,尤其在炎症反应中有着重要的地位.大量研究发现,HM GB1参与儿童呼吸系统疾病,与疾病的严重程度、预后等密切相关,故本...     

高迁移率族蛋白B1在妇科恶性肿瘤中的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种广泛存在于人体各种细胞中的核蛋白,它参与基因的转录、DNA修复、细胞的增殖、侵袭、凋亡及分化等生物学行为。本文就近年来HMGB1在妇科恶性肿瘤发生、发展、早期诊断、治疗和预后中的研究进展进行综述。     

慢性阻塞性肺疾病患者和肽素、高迁移率族蛋白1水平变化及其临床意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病患者(COPD)中和肽素(Copeptin)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平变化及其临床意义。方法72例COPD患者,按病情分为轻度组(n=15)、中度组(n=28)、重度组(n=29)。分析各组患者Copeptin、HMGB1水平变化。结果随着病情由轻到重,患者血清Copeptin、HMGB1、白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平和肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白水平依次均显著升高。重度组患者住院天数均长于轻度、中度组。急性加重期患者血清Copeptin水平与住院天数呈正相关。结论COPD 患者的严重程度和Copeptin及HMGB1表达水平呈正相关, Copeptin及HMGB1表达水平均可作为临床上评价COPD 的严重程度的生物学指标。     

调控高迁移组蛋白1诱导大鼠肺泡巨噬细胞表达诱生型一氧化氮合酶的信号通路

目的观察细胞外信号调节激酶(ERK)、p38分裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK)及核因子-κB(NF-κB)在高迁移组蛋白1(HMGB1)诱导大鼠肺泡巨噬细胞表达诱生型一氧化氮合酶(iNOS)中的作用。方法体外培养的大鼠原代肺泡巨噬细胞(PRAMs)分别与ERK抑制剂PD98059、p38MAPK抑制剂SB203580和NF-κB抑制剂PDTC,以及PD98059联合SB203580共孵育2h后,培养基中分别加入重组人HMGB1作用6h。采用逆转录聚合酶链式反应检测培养细胞中iNOSmRNA表达,用Greiss法测定培养上清中NO2-/NO3-的含量。结果PD98059、SB203580和PDTC均可显著下调HMGB1诱导PRAMs表达iNOSmRNA和产生NO(P<0·05)。联合使用PD98059和SB203580可增强抑制iNOSmRNA表达和NO产生(P<0·05)。结论信号分子ERK、p38MAPK和NF-κB均参与了HMGB1诱导大鼠肺泡巨噬细胞表达iNOS和产生NO。     

高迁移率组蛋白B1在感染致急性肺损伤小鼠中作用的研究

目的 观察高迁移率组蛋白B1(HMGB1)在感染导致急性肺损伤(ALI)中的致炎作用。方法 内毒素气管内注射建立感染致ALI小鼠模型,观察ALI病变过程中肺组织HMGB1、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、髓过氧化物酶(MPO)含量和肺泡膜通透性的变化,比较抗-HMGB1抗体干预治疗前后小鼠肺内MPO含量、肺泡膜通透性和肺组织病理学的改变。结果 感染致ALI小鼠肺组织HMGB1浓度于模型建立后16 h升高,24 h达高峰,48 h仍显著高于对照组。模型建立后4 h肺组织IL-1β和TNFα浓度显著升高,随后的16 h到48 h降低,与对照组相比无显著差异。MPO水平于模型建立后4 h达峰值[(55.0±3.6)U/g肺组织]。模型建立后16 h肺内伊文兰显著升高,于24 h达高峰[(19.7±1.7)g/mL肺组织]。应用抗-HMGB1抗体可以显著降低肺内MPO浓度[抗体应用前(55.0±3.6)U/g肺组织、抗体应用后(21.4±3.5)pg/mL/mg肺组织]、减轻肺内伊文兰舍量和肺组织病理损伤。结论 HMGB1具有重要的促炎作用,介导感染致ALI的迟发性炎症反应。     

血清高迁移率族蛋白1水平与皮肌炎/多肌炎的关系

目的 检测皮肌炎/ 多肌炎(PM/DM) 患者血清中高迁移率族蛋白1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1) 的水平,探讨其在PM/DM 中的发病机制及诊断价值.方法 选取47 例明确诊断PM/DM 的患者,41 例系统性红斑狼疮(SLE) 患者,及其他风湿免疫性疾病患者37 例,同时选取健康志愿者50 例,采用ELISA 方法检测各组血清中HMGB1水平,分析其与PM/DM 及其他风湿免疫性疾病的相关性.结果 血清HMGB1 在PM/DM 及SLE 患者中水平明显高于健康对照组(分别为22.65ng/ml、16.76ng/ml 及7.24ng/ml)(P<0.01),在PM/DM 患者中的表达明显高于SLE 及其他风湿免疫性疾病组(分别为22.65ng/ml、16.76ng/ml 及12.39ng/ml)(P<0.05),Logistic 回归分析显示,HMGB1 与PM/DM 具有显著相关性.结论 PM/DM 患者血清HMGB1 水平明显升高,提示HMGB1 可能作为促炎因子在PM/DM 的发病中起重要作用,HMGB1或可做为诊断PM/DM 的辅助检查之一.     

过氧化氢诱导支气管上皮细胞高迁移率族蛋白1主动释放

目的研究过氧化氢(H2O2)对正常人支气管上皮细胞(HBE)HMGB1表达、移位和释放的影响。方法四唑盐(MTT)法检测不同浓度H2O2对支气管上皮细胞活力的影响;蛋白免疫印迹方法分别检测H2O2刺激HBE胞核,胞浆以及细胞培养上清中HMGB1浓度。免疫荧光观察HBE的HMGB1的定位和H2O2刺激后对HBE HMGB1的移位的影响。结果 125μmmol/L刺激对HBE活力无影响,而250μmmol/L会导致细胞活力下降(与对照组组比较,P<0.05),但是不引起细胞死亡,400μmmol/L(与对照组比较,P=0.000)导致HBE死亡。在浓度依赖性实验,与对照组比较12.5、125、250μmmol/L H2O2刺激HBE 24 h后培养上清HMGB1水平显著增加;在时间依赖性实验中与对照组比较,125μmmol/L H2O2刺激HBE 12、24 h后细胞上清中的HMGB1显著升高(P<0.05);12.5μmmol/L H2O2刺激HBE 24 h后,HBE胞浆蛋白明显增加,胞核蛋白减少。而免疫荧光检测示HMGB1高丰度分布正常HBE的细胞核内,少量分布于细胞浆,125μmmol/L H2O2刺激HBE 12 h,HMGB1明显从HBE胞核向胞浆转位;125μmmol/L H2O2刺激HBE 24 h后观察到HMGB1移位分布到胞膜上。结论 H2O2可以显著诱导支气管上皮细胞HMGB1的表达、转位和释放,提示HMGB1可能参与了哮喘,COPD等慢性炎症疾病气道的氧化应激过程。     

Changes of High Mobility Group box 1 in Serum of Pig Acute Hepatic Failure Model and Significance

The role of the high mobility group box 1 （HMGB-1） in acute hepatic failure and the effect of artificial liver support system treatment on HMGB-1 level were investigated. Pig models of acute hepatic failure were induced by D-galactosamine and randomly divided into two groups with or without artificial liver support system treatment. Tumor necrosis factor-α （TNF-α） and interleukin-1β （IL-1β） levels were detected by the enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）, the expression of HMGB-1 by Western blot, and serum levels of HMGB-1, liver function and hepatic pathology were observed after artificial liver support system treatment. The levels of TNF-α and IL-1β were increased and reached the peak at 24th h in the acute hepatic failure group, then quickly decreased. The serum level of HMGB-1 was increased at 24th h in the acute hepatic failure group and reached the peak at 48th h, then kept a stable high level. Significant liver injury appeared at 24th h and was continuously getting worse in the pig models of acute hepatic failure. In contrast, the liver injury was significantly alleviated and serum level of HMGB-1 was significantly decreased in the group treated with artificial liver support system （P〈0.05）. It was suggested that HMGB-1 may participate in the inflammatory response and liver injury in the late stage of the acute liver failure. Artificial liver support system treatment can reduce serum HMGB-1 level and relieve liver pathological damage.     

支气管哮喘小鼠模型肺组织和肺泡灌洗液高迁移率族蛋白B1的表达及地塞米松的干预作用

目的 探讨支气管哮喘小鼠模型肺组织和肺泡灌洗液的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达变化及地塞米松的干预作用.方法 18只雌性Balb/C小鼠,随机分成3组,分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,鸡卵白蛋白(OVA)组,OVA/地塞米松治疗组;制作支气管哮喘模型;全身体积描记法检测小鼠气道反应性,支气管肺泡灌洗液(BALD作细胞分类计数,酶联免疫吸附试验(EUSA)测定BALF上清中HMGB1含量,左肺行苏木精-伊红(HE)染色,蛋白免疫印迹方法检测右肺组织HMGB1表达.结果 1、成功制作支气管哮喘模型.2、BALF中HMGB1含量变化:OVA组肺泡灌洗液中HMGB1含量(6.31±4.05ng/ml)显著高于对照组(2.59±0.73ng/ml)(P=0.017);与OVA组比较,OVA/地塞米松组(3.39±0.50ng/ml)小鼠支气管肺泡灌洗液HMGB1含量无显著降低(P=0.052).3、肺组织HMGB1的表达情况:OVA组小鼠肺组织HMGB1相对表达量(HMGB1/TUBULIN)(2.08±0.87)显著高于对照组(0.93±0.18)(P<0.05);与OVA组比较,OVA/地塞米松组小鼠肺脏HMGB1表达量(1.15±0.48)无显著减低(P=0.133).结论 HMGB1在支气管哮喘小鼠的肺组织和支气管肺泡灌洗液中表达明显增加,但地塞米松无明显拮抗效果.提示HMGB1可能是哮喘防治的新靶点.     

高迁移率族蛋白-1在小鼠狼疮性肾炎中的表达

目的:研究新型细胞因子高迁移率族蛋白-1(HMGB-1)在小鼠狼疮性肾炎中的表达情况,探讨其可能的作用机制。方法:对肾组织进行常规病理检查、免疫病理检查和超微结构检查,以评价小鼠肾脏病理学损害程度;用酶联免疫吸附剂测定法检测鼠血清抗双链DNA(dsDNA)抗体滴度;用逆转录-聚合酶链反应法检测小鼠肾脏高迁移率族蛋白-1和单核细胞趋化因子-1表达水平。结果:MRL/lpr小鼠血清抗dsDNA抗体的滴度随着年龄的增加而上升,明显高于同龄C57BL/6J小鼠;随着年龄的增加,MRL/lpr小鼠肾脏组织病理损害加重,主要表现为急性和亚急性增生性肾小球肾炎;MRL/lpr小鼠肾脏中,HMGB-1 mRNA的表达明显高于同龄C57BL/6J小鼠,和MCP-1mRNA的表达量成正相关。结论:异常升高的HMGB-1可能参与MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎形成。     

活体人主动脉组织高迁移率族蛋白B1的表达及其与动脉粥样硬化发病机制的关系

目的 探讨活体人主动脉组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的表达与动脉粥样硬化发病机制的关系。方法 36例冠状动脉旁路移植术（CABG）主动脉打孔时废弃的主动脉组织为研究组,12名活体肾移植供体者的动脉组织为对照组。两组患者的样本均应用免疫组化法检测动脉组织HMGB1表达;研究组患者术前测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、脂蛋白(a)［Lp(a)］、载脂蛋白AⅠ（ApoAⅠ）、载脂蛋白B（ApoB）、高敏C-反应蛋白（hs-CRP）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）水平;采用冠状动脉造影、颈动脉超声检测冠状动脉及颈动脉的病变。结果 研究组主动脉组织HMGB1显著表达,而对照组动脉组织HMGB1无表达。研究组患者血清TC、TG、LDL-C、Lp(a)、ApoB、non-HDL-C、VLDL-C、hs-CRP测定值较参考值显著升高（P均＜0.01）,而血清HDL-C、ApoAⅠ、TBIL、DBIL、IBIL测定值较参考值明显降低（P均＜0.01）;冠状动脉重度狭窄发生率为86.1%;颈动脉超声检测显示内膜中层厚度均＞1.2mm。结论 活体人主动脉组织HMGB1表达显著,表明动脉粥样硬化炎性反应明显;利用CABG主动脉打孔时废弃的主动脉组织为样本,为研究动脉粥样硬化发病机制及干预靶点提供了新的方法和途径。     

清火败毒饮对巨噬细胞高迁移率族蛋白1表达的影响

目的：观察中药清火败毒饮方（qinghuobaiduyin,QHBDY）对晚期炎症因子高迁移率族蛋白1（high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1）在RAW264.7巨噬细胞中表达的影响,以了解其抗炎症反应的细胞内源性保护机制。方法：以RAW264.7巨噬细胞为研究对象,通过正常SD大鼠血清、烧伤SD大鼠血清和中药QHBDY治疗后SD大鼠血清干预细胞,应用RT-PCR技术检测细胞中HMGB1表达。结果：正常SD大鼠血清干预RAW264.7巨噬细胞后,HMGB1 mRNA的表达量与正常RAW264.7巨噬细胞中HMGB1表达量差异无统计学意义（P＞0.05）;应用烧伤SD大鼠血清干预RAW264.7巨噬细胞,HMGB1的表达量在干预3 h增高后又降为低水平表达,至18 h后急剧增加,于36 h达到高峰,至48 h仍维持高水平表达;应用中药QHBDY治疗后SD大鼠血清干预RAW264.7巨噬细胞,HMGB1的表达量在干预3 h增高后又降为低水平表达,于24 h出现缓慢增加,但较烧伤SD大鼠血清干预组低,两组差别具有统计学意义（P＜0.05）。结论：烧伤血清能引起HMGB1在RAW264.7中的高表达;中药QHBDY治疗后SD大鼠血清能降低RAW264.7中HMGB1的表达