延胡索总碱对6种人源胃癌细胞株的体外增殖抑制作用

[目的]研究延胡索总生物碱对6种人胃癌细胞系的增殖抑制作用及其对细胞凋亡和细胞周期的影响。[方法]应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察延胡索总碱对6种人胃癌细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测延胡索总碱作用后MKN-28细胞周期变化及细胞凋亡率。[结果]延胡索总碱对6种人胃癌细胞均有显著的增殖抑制作用,尤其以对AGS、MKN-28细胞的抑制作用为著,且呈剂量-效应关系;25、100μg／ml延胡索总碱作用于MKN28细胞24h后,细胞凋亡率分别为17．2％、32．3％,差异有统计学意义（P〈0．05）;25μg／ml延胡索总碱可将细胞阻滞在S期,而100μg／ml延胡索总碱对MKN-28细胞周期无明显影响。[结论]延胡索总碱对多种胃癌细胞有显著的增殖抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞有关。     

基于Akt/eNOS通路探讨延胡索乙素对缺氧/复氧诱导的心脏微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 探讨延胡索乙素对缺氧(H)/复氧(R)诱导的大鼠心脏微血管内皮细胞(CMECs)损伤的影响及其机制。方法 实验分为正常对照组、模型组、溶媒对照组、延胡索乙素低剂量组、延胡索乙素中剂量组、延胡索乙素高剂量组、延胡索乙素高剂量+蛋白激酶B(Akt)抑制剂组。按试剂盒要求检测CMECs乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,流式细胞术检测CMECs凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blotting)检测CMECs中Akt、磷酸化(p)-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-eNOS、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3、活化的Caspase-3(C-Caspase-3)蛋白水平。结果 当延胡索乙素浓度为80μg/mL时,H/R大鼠CMECs存活率最高。与正常对照组相比,模型组CMECs LDH、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、Caspase-3活性、CMECs凋亡率、Ba...     

颅痛定对心血管系统的多重效应

颅痛定的化学名为左旋四氢巴马汀(L—Tetre—hydropalmatine,L—THP),是从中药延胡索提取出来的延胡索乙素的左旋体,属镇痛药,同时具有一定的镇静催眠作用,临床上主要用于治疗各种疼痛和失眠,近年来的研究发现颅痛定对心血管系统有着多重效应,引起了临床医生的广泛关注,现将其研究进展综述如     

多指标综合评价艾滋病口腔含漱液的提取工艺

目的：优选爱口含漱液的提取工艺,保证制剂质量。方法以三因素（加水量、提取时间和提取次数）为考察因素,按三个指标（盐酸小檗碱含量、总多糖含量和浸膏率）采用综合评价方法考查爱口含漱液的最佳提取工艺。结果该制剂最佳提取工艺为加水量6倍,提取时间30 min,提取3次。结论优选最佳提取工艺方案可行,稳定性好,能有效保证制剂质量。     

延胡索治疗心血管疾病的研究进展

心血管疾病是多数国家发病率和死亡率高的主要原因之一。延胡索为罂粟科药用植物,具有活血行气止痛的功能,在临床中长期广泛应用于心血管疾病的治疗。延胡索的活性成分及制剂具有改善血液流变学、促进血液循环、舒张血管、抗动脉粥样硬化、抗心肌缺血及再灌注损伤、抗心律失常、降血压、心肌保护和抗血栓形成等多种药理作用。综述延胡索及延胡索活性成分在心血管疾病治疗方面的研究进展,旨在为延胡索相关新药和心血管疾病治疗新方法的进一步研究和开发提供依据。     

“延胡索-冰片”药对抗小鼠心肌缺血的作用

目的探讨"延胡索-冰片"药对抗异丙肾上腺素(ISO)诱导小鼠心肌缺血性损伤的保护作用。方法将C57BL/6小鼠分成7组,适应性饲养后进行灌胃给药,空白对照组及模型组均给予等容量蒸馏水灌胃,给药组按实验设计的剂量进行灌胃给药,1次/d,连续10 d。给药第8天起,除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射ISO(0.01 g/kg),1次/d至实验结束。采用生化分析仪测定各组小鼠血清过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,通过苏木素-伊红(HE)染色检测各组小鼠心肌组织学变化。结果与空白对照组比较,模型组小鼠血清CAT、SOD、NO水平明显下降而MDA水平显著提高(P<0.05);与模型组比较,延胡索-冰片"药对12.5 mg/kg和50.0 mg/kg体重给药组血清CAT水平显著提高(P<0.05),12.5 mg/kg、25.0 mg/kg和50.0 mg/kg体重给药组血清SOD水平显著提高(P<0.05),"延胡索-冰片"药对各剂量组血清NO、MDA水平差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果表明,空白对照组小鼠心肌纤维排列整齐,心肌间质未见炎细胞浸润。模型组小鼠心肌可见境界清楚的灶状坏死,部分坏死灶融合形成片状,坏死灶内心肌细胞溶解,坏死组织周围可见心肌纤维变性,心肌细胞间质水肿,坏死灶内及周围较多炎细胞浸润。"延胡索-冰片"药对组心肌组织肌纤维变性、坏死、水肿程度明显降低。结论 "延胡索-冰片"药对对ISO致小鼠急性心肌缺血具有明显保护作用,可使心肌组织肌纤维变性、坏死、水肿程度明显降低。     

江西巴蜗牛活性成分提取方法的比较研究

目的比较江西巴蜗牛生物活性成分不同提取方法间的差异,以求找到一种简单、可行和有效的提取方法。方法分别利用碱提法、酶提法及碱加酶法提取,并用Sevage法脱蛋白,苯酚—硫酸法比色测定天螺多糖总糖含量。结果三种方法均得到白色颗粒状结晶物质,其中碱加酶提法的得率(0.32%)和总糖含量(80.8%)最高。结论碱加酶法是一种可行、方便和有效的提取方法。     

正交设计法优化赤灵芝中碱溶性纯化多糖的提取工艺

以赤灵芝为原料提取碱溶性多糖,考察了提取时间、提取温度、液料比、Na OH浓度及提取次数对碱溶性多糖提取率的影响,并采用正交设计试验,确定了赤灵芝中碱溶性多糖最佳提取工艺参数,即提取时间2 h,提取温度60℃,液料比15 m L/g,Na OH质量浓度5%以及提取次数3次。验证性试验中实际测得碱溶性多糖平均提取率为10.98%,证明该优化工艺稳定可靠,切实可行。     

五味子乙素对人胃癌细胞株MGC-803凋亡的影响

目的观察五味子乙素诱导人胃癌细胞株MGC-803凋亡作用。方法用10、50、100、200μmol/L浓度五味子乙素作用胃癌细胞株48 h,倒置显微镜下观察细胞增殖情况;MTT法检测五味子乙素对细胞增殖的抑制作用;电镜观察、判定凋亡细胞;凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果倒置显微镜下,随着五味子乙素作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降;MTT法亦检测到上述结果;当五味子乙素作用浓度是100μmol/L时,可检测到明显的凋亡细胞。结论高浓度的五味子乙素可剂量依赖性地诱导胃癌细胞株MGC-803细胞的凋亡。     

薄层-紫外分光光度法对克泻灵胶囊总生物碱中槐果碱含量测定的效果分析

目的测定克泻灵胶囊总生物碱中槐果碱的含量。方法以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲醇(7∶3∶3∶0.5)为展开剂,在氨水饱和的碱性环境中,于硅胶GF_(254)薄层板上分离槐果碱。荧光下定位,采用紫外分光光度法进行含量测定。结果槐果碱在2.16～10.8μg/ml(r=0.9999)范围内线性关系良好,提取回收效率为98.2%,RSD为0.57%(n=5)。结论本法测定结果可靠、准确、重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

浅表性胃炎与功能性消化不良的关系研究

目的:探讨浅表性胃炎与功能性消化不良的关系。方法:在丽水市6所市、县级医院消化科胃病就诊者1002例中,选择经胃镜、活检病理及尿素酶检查幽门螺杆菌(Hp)均阴性的门诊或住院病人360例成年人,随机分成两组。采用随机、交叉、对照的方法,给予(1)甲方案(甲→乙):雷尼替丁150mg,早晚各1次,施维舒50mg,每日3次。2月复查记录症状、胃镜及病理。停药待复发记录临床症状,予乙方案交叉治疗2月复查。(2)乙方案(乙→甲):西沙比利10mg,每日3次,多虑平25mg,每晚1次,多酶片3片,每日3次。2月复查记录症状、胃镜及病理。停药待复发予甲方案交叉治疗,2月复查记录症状、胃镜及病理。结果:(1)甲、乙方案治疗前后症状明显改善。P<0.05。(2)乙、甲方案疗效对比有明显差异:乙总有效率90％,甲总有效率74。6％,x~2=4.25,P<0.05。甲→乙130例,总有效率(交叉后)86.1％;乙→甲40例,总有效率60％。总有效率对比具有明显差异,x~2=0.035,P<0.05。(3)甲→乙总有效率提高11.5％,乙→甲总有效率下降30％。结论:(1)甲、乙方案均有效。(2)乙方案明显优于甲方案。(3)说明临床上诊断为浅表性胃炎的疾病可能部分是功能性消化不良。     

盐酸小檗碱对AchE抑制作用的实验研究

目的:体外观察盐酸小檗碱对大鼠脑组织和血清中乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的抑制作用.方法:采用现代分子模拟技术,体外模拟以盐酸小檗碱为代表的5种生物碱(配体)与AchE(受体)相互分于对接效应与差异性;大鼠腹主动脉取血后断头处死,制备脑组织匀浆,采用双缩脲法测定脑组织匀浆中总蛋白含量,用酶法检测AchE活性,采用生物学...     

复方五味子素B及其成分体外抑制胃癌细胞的增殖

目的:筛选复方五味子素组方最佳配比,比较复方五味子素B及其成分对胃癌细胞的增殖抑制作用.方法:采用L_4(2~3)正交设计的方法筛选药物的最佳配比.用MTT的方法观察组方及其成分对胃癌细胞的增殖抑制作用.空白对照组加培养液;阴性对照和阳性对照组分别加DMSO和5-氟尿嘧啶(5-FU).结果:高浓度五味子乙素(100 mg/L)、低浓度芦荟大黄素(50 mg/L)、低浓度黄芪多糖(50 mg/L)组方为复方五味子素B的药物最佳配比.同阴性对照组(0.427±0.018)相比,五味子乙素低浓度(0.296±0.011)和高浓度组(0.260±0.012)、芦荟大黄素低浓度(0.376±0.017)和高浓度组(0.334±0.013),复方五味素B组(0.162±0.007)在波长490 nm处的吸光度A值均显著性降低(P<0.01);增殖抑制率结果显示,五味子乙素低浓度(26.26%±4.65%)和高浓度组(39.11%±5.13%),芦荟大黄素高浓度组(21.78%±3.67%),复方五味素B组(52.06%±9.87%)抑制率均明显增高.结论:合理的中药有效成分组方可能有效提高单纯中药有效成分的作用,将中药有效成分合理组方可能是开发现代化复方中药的有效方法和途径之一.     

灯盏乙素与芍药苷联用通过激活 sonic hedgehog 通路保护永久性脑缺血大鼠

目的：探讨灯盏乙素与芍药苷联用对永久性脑缺血大鼠的保护作用及其可能机制。方法48只成年S D大鼠随机分为假手术组、缺血组、灯盏乙素+芍药苷组和环巴胺组,每组12只。采用线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞模型。环巴胺组在缺血前15 min腹腔注射sonic hedgehog （SHH）信号通路特异性阻滞剂环巴胺6 mg/kg,其余各组在同一时间腹腔注射等体积生理盐水;灯盏乙素+芍药苷组与环巴胺组在缺血后0 h和6 h分别腹腔注射灯盏乙素20 m g/kg+芍药苷30 m g/kg ,其余各组腹腔注射等体积生理盐水。缺血后24 h进行神经功能缺损评分,然后断头取脑,利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色检测脑梗死体积,分别应用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测缺血皮质SHH、Patched-1和Gli-1 mRNA和蛋白表达水平。结果缺血组、灯盏乙素+芍药苷组和环巴胺组神经功能缺损评分分别为（3.33±0.52）分、（1.50±0.55）分和（3.67±0.52）分。灯盏乙素+芍药苷组神经功能缺损评分显著低于缺血组（P＜0.05）,而环巴胺组神经功能缺损评分显著高于灯盏乙素+芍药苷组（ P＜0.05）。缺血组、灯盏乙素+芍药苷组和环巴胺组梗死体积百分比分别为（31.77±1.19）％、（22.94±2.65）％和（35.53±0.20）％。灯盏乙素+芍药苷组梗死体积显著小于缺血组（P＜0.05）,而环巴胺组梗死体积显著大于灯盏乙素+芍药苷组（P＜0.05）。缺血组、灯盏乙素+芍药苷组和环巴胺组SHH、Patched-1和Gli-1 mRNA和蛋白表达水平均显著高于假手术组（ P均＜0.05）。灯盏乙素+芍药苷组SHH、Patched-1和Gli-1 mRNA和蛋白表达水平均显著高于缺血组（P均＜0.05）,而环巴胺组Gli-1 mRNA和蛋白表达水平均显著低于灯盏乙素+芍药苷组（P均＜0.05）。结论灯盏乙素与芍药苷联用对大鼠局灶性脑缺血损伤具有一定的保护作用,其机制与SHH通路激活有关。     

小鼠心肌组织3种总RNA提取方法比较

目的:探索一种高效的心肌组织总RNA提取方法,对以后总RNA提取工作进行指导。方法:取小鼠心肌组织,分别采用剪刀剪碎法(剪碎法)、研钵加液氮研磨法(研磨法)、离心柱法(过柱法)对小鼠心肌组织进行总RNA提取,紫外分光光度计定量,聚丙烯酰胺凝胶电泳初步定性。结果与结论:研磨法提取出的总RNA量大,质量可靠,较适合于日常总RNA提取;剪碎法对于一些实验条件较差的地区仍然是一种可取的方法;过柱法对于小量心肌组织的提取较为适合。3种方法均能提取出总RNA。     

小鼠β防御素-6基因的克隆和鉴定

提取大肠杆菌内毒素腹腔注射后小鼠肺组织的总RNA，反转录为cDNA作为模板，采用聚合酶链反应（PCR）方法克隆小鼠β防御素-6基因。获得预期大小的PCR产物，经序列鉴定证实为小鼠口防御素-6基因。本实验为深入探讨小鼠β防御素-6的作用机制提供可能。     

芩丹胶囊质量标准的研究

目的 建立芩丹胶囊的质量标准,并进一步明确其内含有效成分,探讨其降压机制.方法 采用薄层色谱法对芩丹胶囊中地龙、川芎、桑寄生进行鉴别,采用高效液相色谱法测定丹参素钠、黄芩苷、盐酸小檗碱、钩藤碱、盐酸水苏碱含量.结果 薄层色谱斑点清晰,分离良好.丹参素、黄芩苷、盐酸小檗碱、钩藤碱、盐酸水苏碱的含量分别为0.669 mg/g,19.11 mg/g,4.3 mg/g,0.126 mg/g,30.1 mg/g.结论 本方法可作为芩丹胶囊的质量控制方法,其内含有多种已被证实有明确降压效果的成分.     

小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素表达的影响

目的观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞内脂素（visfatin）表达的影响和探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的机制。方法采用RT—PCR法检测不同浓度小檗碱和不同作用时间后，3T3-L1脂肪细胞内脂素mRNA的表达，并以Western印迹方法检测其蛋白水平的表达。结果0～10μmol／L小檗碱剂量依赖性地增加内脂素mRNA的表达，其中10μmol／L时最明显，是空白对照组的4．96倍，其后随着小檗碱浓度的进一步增加，内脂素mRNA的表达反而降低；10μmol／L的小檗碱作用3h后内脂素mRNA的表达开始明显增强，至作用12h时表达增强最明显，是基础组的4．57倍，随着作用时间的延长内脂素mRNA的表达虽然有所下降，但到48h时内脂素mRNA的表达仍比空白对照组明显增高；5、10、20μmol／L的小檗碱均可使内脂素蛋白的表达增加1．13、2．46、2．34倍，与空白对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论在一定浓度范围内小檗碱可剂量和时间依赖性地促进离体脂肪细胞内脂素mRNA及蛋白表达。小檗碱对内脂素表达的调节作用可能是其改善机体胰岛素抵抗、降低血糖的机制之一。     

延胡索乙素对大鼠下肢缺血再灌注损伤的影响及作用机制研究

目的 探讨延胡索乙素（THP）对大鼠下肢缺血再灌注（I/R）损伤的影响及作用机制。方法 24只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、I/R组、THP组,每组8只。THP组每天分别按THP 60 mg/kg剂量连续灌胃1周,对照组、I/R组予等量0.9%氯化钠溶液连续灌胃1周。除对照组外,其余2组均构建大鼠下肢I/R模型。I/R 24 h后处死大鼠,采集血清和下肢骨骼肌组织样本;观察并比较3组大鼠下肢骨骼肌组织病理学改变;比较血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、肌酸激酶（CK）水平,以及骨骼肌组织丙二醛（MDA）含量和TNF-α、IL-1β蛋白表达水平。结果 与I/R组比较,THP组大鼠下肢I/R 24 h后骨骼肌组织肿胀明显减轻,炎症细胞浸润减少。I/R组大鼠下肢I/R 24 h后骨骼肌组织MDA含量和TNF-α、IL-1β蛋白表达水平以及血清TNF-α、IL-1β、CK水平均明显高于对照组（均P<0.05）,THP组均明显低于I/R组（均P<0.05）。结论 THP通过抑制炎症反应减轻大鼠下肢I/R损伤,具有抗大鼠下肢I/R损伤的保护作用。     

抑制素在人肝癌细胞SMMC-7721和Huh-7中的表达及其编码序列扩增

目的检测抑制素在人肝癌细胞SMMC-7721及Huh-7中的基因表达,扩增抑制素全长编码序列。方法分别提取肝癌细胞SMMC-7721及Huh-7细胞总RNA,逆转录合成cDNA。使用Real time PCR,以GAPDH为内参检测抑制素的mRNA表达情况。采用RT-PCR方法扩增抑制素全长编码序列。结果 Real time PCR结果显示,SMMC-7721和Huh-7肝癌细胞株中均有抑制素的表达,且SMMC-7721细胞中抑制素表达量是Huh-7细胞中的6.652倍。RT-PCR方法扩增得到约835 bp的抑制素全长编码序列,条带特异,无非特异性扩增。结论人肝癌细胞株SMMC-7721中抑制素的表达量较高。