增生性瘢痕中基质金属蛋白酶-1的代谢特点及研究进展

基质金属蛋白酶-1是胶原蛋白降解的关键酶,基质金属蛋白酶-1参与多种生理病理过程,其表达及活性受多种因素影响。本文就影响基质金属蛋白酶-1降解胶原的相关因素及增生性瘢痕基质金属蛋白酶-1代谢特点进行综述。     

β1转化生长因子对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌相关的基质金属蛋白酶的影响

目的探讨β1转化生长因子（TGF-β1）对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的调节作用,及TGF-β1与瘢痕的关系。方法培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞经TGF-β1处理,采用酶联免疫法（ELISA）测定瘢痕疙瘩成纤维细胞上清液中MMP-1、MMP-2和TIMP-1的水平。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1、MMP-2和TIMP-1的生成量显著高于正常皮肤（P〈0.01）;加TGF-β1处理后,瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1的分泌量显著降低（P〈0.01）,MMP-2的分泌量显著升高（P〈0.01）,而TIMP-1的分泌量无显著改变（P〉0.05）。结论培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞显示MMP-1、MMP-2和TIMP-1增加,TGF-β1在生成调节过程中起重要作用。     

转化生长因子-β1与表皮生长因子在成人增生性瘢痕中的表达及意义

目的:初步探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在成人增生性瘢痕发生中可能的作用,为临床防治提供一定的依据。方法:通过SP法定性和ELISA法定量检测TGF-β1和EGF在成人增生性瘢痕和成人正常皮肤中的表达情况。结果:TGF-β1、EGF在成人增生性瘢痕中呈高表达,二者在成人增生性瘢痕中表达水平呈正相关。结论:TGF-β1、EGF在成人增生性瘢痕中均呈高表达,TGF-β1和EGF在成人增生性瘢痕中的表达水平呈正相关,这为研究临床预防、治疗皮肤增生性瘢痕提供新思路。     

胸腺素β4对增生性瘢痕基质金属蛋白酶-2及9表达作用的影响

目的：研究胸腺素β4对人增生性瘢痕成纤维细胞中基质金属蛋白酶‐2（MMP‐2）和MMP‐9的表达影响,探讨胸腺素β4对增生性瘢痕的作用机制。方法2013年6～9月在南昌大学第一附属医院烧伤整形科手术切取的增生性瘢痕组织（烧伤后6个月内）,体外培养成纤维细胞,分为实验组（胸腺素浓度分别为0．05、0．1、1．0、5．0μg／mL）,对照组（不添加胸腺素β4）,采用反转录‐聚合酶链反应（RT‐PCR）以及蛋白免疫印迹法（Western blot）测定实验组和对照组的MMP‐2、MMP‐9表达变化。结果胸腺素β4作用后增生性瘢痕组织内MMP‐2、MMP‐9水平增加,分别以1．0μg／mL实验组和5．0μg／mL实验组作用最明显,与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论胸腺素β4能剂量依赖性促进MMP‐2、MMP‐9表达,可能是抑制增生性瘢痕的作用因素之一。     

积雪草苷对增生性瘢痕中肿瘤坏死因子αmRNA及Ⅰ型胶原表达的影响

目的 探讨积雪草苷(Asiaticoside)对人增生性瘢痕中肿瘤坏死因子α(Tumour Necrosis Factor alpha,TNF-α)mRNA及Ⅰ型胶原(Type I Collogen)表达的影响.方法 临床上收集烧伤后5-8个月增生性瘢痕标本18例,其中经积雪草苷治疗组和非积雪草苷治疗组各9例.采用原位杂交和免疫组织化学方法,分别检测增生性瘢痕中TNF-αmRNA及I型胶原的表达水平,并利用图象分析.结果 进行结果分析.结果 TNF-α mRNA在增生性瘢痕中主要表达于单核吞噬细胞胞浆,仅少部分表达于基底层细胞胞浆.经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中TNF-αmRNA表达明显增多,胞浆浓染,统计学上明显高于非积雪草苷治疗组TNF-α mRNA表达(P＜0.01).Ⅰ型胶原表达于增生性瘢痕中,经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中Ⅰ型胶原含量较少,排列整齐,与非积雪草苷治疗组有显著差异(P＜0.05).结论 积雪草苷能促进增生性瘢痕中TNF-α mRNA的表达,减少Ⅰ型胶原合成,达到减轻瘢痕增生的作用.     

转化生长因子β1及基质金属蛋白酶-2,9在糖性白内障晶状体上皮细胞的表达

目的 探讨转化生长因子β1（TGF-β）和基质金属蛋白酶-2，9（MMP-2，9）在糖性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。方法 采用免疫组织化学技术检测TGF-β1及MMP-2，9在糖性白内障（23例）和正常晶体状体（7例）上皮细胞中的表达。结果 TGF-β1与MMP-2，9在糖性白内障晶状体上皮中的阳性表达率显著高于正常晶状体（P〈0．01），且TGF-β1与MMP-2、MMP-9均为正相关。结论 TGF-β1介导的MMP-2，9表达的失衡，对糖性白内障晶状体前后囊膜下的纤维化发生、发展起重要作用。     

转化生长因子β_1在增生性瘢痕组织中的表达

目的 :探讨增生性瘢痕形成中的病因学及其机制。方法 :利用免疫组织化学方法检测转化生长因子 β1(TGF β1 )在增生性瘢痕组织中的表达。结果 :增生性瘢痕组织中TGF β1 的表达明显高于正常皮肤组织 (P <0 .0 5 ) ,差别具有显著性。结论 :TGF β1 的表达在瘢痕组织中明显强于正常皮肤组织 ;增生性瘢痕组织在形成过程中TGF β1 起着重要的调节作用 ,了解其作用机制为控制瘢痕的形成和治疗提供理论依据     

转化生长因子-β及其受体在不同时期增生性瘢痕组织中的表达

目的:检测转化生长因子-β(TGFβ1、TGFβ2)和受体(TGFβRⅠ、TGFβRⅡ)在增生性瘢痕组织中的表达特征,探讨其对增生性瘢痕形成的作用。方法:采用免疫组化染色方法检测TGFβ1、TGFβ2、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ在人正常皮肤组织及增生性瘢痕中的表达水平与定位。结果:在正常对照皮肤组织中,TGFβ1在基底细胞层呈弱阳性表达,在真皮成纤维细胞表达为阴性;TGFβ2在基底细胞层、棘细胞层下方、真皮层血管内皮细胞表达为阳性;TGFβRⅠ、TGFβRⅡ在表皮、毛囊上皮细胞、真皮层血管内皮细胞表达阳性,真皮成纤维细胞基本不表达。增生性瘢痕真皮组织中大量成纤维细胞的TGFβ1、TGFβ2、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ表达均为强阳性;而部分瘢痕病史超过1年的患者瘢痕真皮层中主要为胶原组织,成纤维细胞较少,成纤维细胞TGFβ1、TGFβ2表达为阴性,但TGFβRⅠ、TGFβRⅡ的表达则为强阳性。结论:转化生长因子-β和受体在增生性瘢痕组织早期形成中发挥重要的促进作用。     

肾透明细胞癌中转化生长因子-β1、基质金属蛋白酶表达的临床观察

目的探讨肾透明细胞癌中转化生长因子-β1、基质金属蛋白酶表达的临床价值。方法采用免疫组化sP法测定60例肾透明细胞癌（RCCC）及30例正常肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）和基质金属蛋白酶（MMP2）的表达。结果TGF-β1和MMP2在RCCC中的阳性表达率为81．6％和86．7％,明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。TGF-β1和MMP2表达RCCC病理分级、临床分期呈明显正相关（P〈O．01）。结论两者可作为反映RCCC生物学行为的指标,也可作为判断RCCC预后的分子指标。     

增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中c—fos mRNA、c-jun mRNA及MMP1、TIMP1表达的研究

目的 探讨增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA、c-jun mRNA及基质金属蛋白酶MMP1、基质金属蛋白酶抑制剂TIMP1与瘢痕增生之间的关系.方法 临床上收集32例深度烧伤后瘢痕标本,其中烧伤后4～10个月增生性瘢痕标本18例,烧伤后2～4年内萎缩性瘢痕标本14例.采用RT-PCR方法对上述瘢痕组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA进行半定量检测;采用免疫组化方法检测基质金属蛋白酶1（MMP1）、基质金属蛋白酶1抑制剂（TIMP1）表达情况,并利用图象分析方法进行结果分析.结果 增生性瘢痕中c-fos mRNA表达增高,与萎缩性瘢痕中c-fos mRNA表达有差异（P＜0.01）;c-jun mRNA表达在两组中表达无差异（P＞0.05）.基质金属蛋白酶1抑制剂（TIMP1）在增生性瘢痕中TIMP1表达减少,统计学上低于萎缩性瘢痕TIMP1表达（P＜0.01）;基质金属蛋白酶1（MMP1）在增生性瘢痕与萎缩性瘢痕中表达无差异（P＞0.05）.结论 增生性瘢痕中c-fos基因mRNA表达增高,有利于刺激MMP1对细胞外基质（ECM）的降解,对减轻瘢痕的增生有一定作用;增生性瘢痕中TIMP1表达降低,通过减少对MMP1的拮抗作用而达到减轻瘢痕增生的作用.     

PRK术后转化生长因子β1mRNA表达的实验研究

目的：探讨准分子激光角膜切削术（PRK）后转化生长因子β1（TGF－β1）在角膜伤口愈合和解膜雾状混浊发病机制中的作用。方法：将24只新西兰大白兔（24只眼）随机分为正常组（n＝4）和手术组(n=20)。手术组每只左眼行PRK术，术中采用准分子激光器，角膜中央激光去上皮，然后按－10.00D近视进行切削，分别于术后第7d,14d,28d和3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物，将角膜组织制成石蜡切片，应用原位杂交技术检测角膜缲TGF－β1mRNA的表达。结果：①从术后第7d开始，术眼均不同程度地发生了角膜haze，严重者可达3级，haze高峰约在术后第28d。②正常角膜上皮中TGF－β1mRNA有低水平表达，PRK术后第7d,14d和28d，角膜上皮TGF－β1mRNA表达明显增高。术后3月已开始降低；正常组角膜基质中未检测出TGF－β1mRNA，术后第7d,14,和28d，角膜基质中TGF－β1mRNA表达明显增高，术后3月已开始降低。结论：TGF－β1可能参与了PRK术后的伤口愈合，它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生。     

The expression of matrix metalloproteinases-9, transforming growth factor-β1 and transforming growth factor-β receptorⅠ in human atherosclerotic plaque and their relationship with plaque stability

Background Transforming growth factor-beta (TGF-β) and matrix metalloproteinases-9 (MMP-9) have been implicated in the pathogenesis of human atherosclerosis but their relationship during lesion progression are poorly understood. The objective of this study was to investigate the expression of MMP-9, TGF-β1 and TGF-β receptor Ⅰ (TβR-Ⅰ) in human atherosclerotic plaque and their relationship and plaque stability.Methods Specimens of human coronary artery atherosclerotic plaques were obtained from 41 patients undergoing coronary endarterectomy, and were paraffin embedded, sectioned at 4 μm intervals then stained with haematoxylin and eosin. They were divided into stable (with no or only little lipid core) and unstable plaque groups (with lipid core size＞40%): the immunohistochemical staining were performed for MMP-9,TGF-β1 and TβR-Ⅰ.Results The expression of MMP-9 in the unstable plaques was much higher than in the stable ones, but the expression of TGF-β1 was higher in the stable plaques. There was no similar significant difference for TβR-Ⅰ. Correlation analysis showed that there was a negative correlation between the expression of MMP-9 and TGF-β1 (r=-0.332, P=0.034 for average areal density; r=-0.373, P= 0.016 for average optical density).Conclusions There were close relationships between MMP-9, TGF-β1 and plaque stability. Enhanced production of MMP-9 may participate in the formation of unstable plaque, while TGF-β1 maybe an important stabilizing factor in preventing transition into an unstable plaque phenotype.     

PRK术后转化生长因子β1 mRNA表达的实验研究

目的探讨准分子激光角膜切削术(PRK)后转化生长因子β1 (TGF-β1)在角膜伤口愈合和角膜雾状混浊发病机制中的作用.方法将24只新西兰大白兔(24只眼)随机分为正常组(n=4)和手术组(n=20).手术组每只左眼行PRK术,术中采用准分子激光器,角膜中央激光去上皮,然后按-10.00 D近视进行切削,分别于术后第7d,14d,28d和3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物,将角膜组织制成石蜡切片,应用原位杂交技术检测角膜组织中TGF-β1mRNA的表达.结果①从术后第7 d开始,术眼均不同程度地发生了角膜haze,严重者可达3级,haze高峰约在术后第28 d.②正常角膜上皮中TGF-β1 mRNA有低水平表达,PRK术后第7d,14d和28d,角膜上皮TGF-β1mRNA表达明显增高,术后3月已开始降低;正常组角膜基质中未检测出TGF-β1mRNA,术后第7d,14d和28d,角膜基质中TGF-β1mRNA表达明显增高,术后3月己开始降低. 结论TGF-β1可能参与了PRK术后的伤口愈合,它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生.     

秋水仙碱对心肌组织中TGF-β_1的影响

目的 探讨秋水仙碱对压力负荷性大鼠心肌中转化生长因子β_1(TGF-β_1)的影响.方法 利用腹主动脉缩窄的方法 建立压力超负荷性心肌大鼠模型,放射免疫分析法测定局部心肌组织中血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平,RT-PCR法半定量TGF-β_1mRNA的表达变化,免疫组织化学法测定心肌TGF-β_1的表达,同时给予秋水仙碱8周,观察上述指标的变化.结果 与对照组相比,模型组AngⅡ、TGF-β_1 mRNA和TGF-β_1 表达明显增加(P<0.01),秋水仙碱能明显减少上述指标的表达.结论 秋水仙碱可以通过抑制压力负荷性心室重构大鼠RAAS和交感神经系统活性,减少神经内分泌因子AngⅡ生成,减少纤维化因子TGF-β_1的表达.     

瘢痕疙瘩和增殖性瘢痕角朊细胞VEGF的表达

目的：探讨瘢痕疙瘩和增殖性瘢痕中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及其意义。方法；应用免疫组织化学染色技术，以正常皮肤和正常瘢痕疙瘩和增殖性瘢痕中ＶＥＧＦ的表达。结果：瘢痕疙瘩和增殖性瘢痕角朊细胞均有大量ＶＥＧＦ表达，阳性细胞主要位于基底层，染色颗粒在细胞质内，真皮层少见阳性细胞。而正常皮肤和正常瘢痕中ＶＥＧＦ的表达均较弱，与颜痕疙瘩或增殖性瘢痕比较均有显著差异。结论：瘢痕疙和增殖性颜痕基义 的角     

Significance of changes in transforming growth factor-β mRNA levels in autogenous vein grafts

Background This study was designed to investigate changes in mRNA levels of transforming growth factor-β(TGF-β), collagen Ⅰ, and collagen Ⅲ in autogenous vein grafts. Methods Twenty-four New Zealand rabbits were randomly divided into 4 groups with 6 rabbits each. The external jugular veins of the New Zealand rabbits were harvested and grafted into the ipsilateral carotid artery. All rabbits were fed with a standard diet. After the operation, the rabbits were sacrificed at 1, 2, 3, or 4 weeks. TGF-β, collagen Ⅰ, and collagen Ⅲ mRNA levels in the venous grafts were measured by semiquantitative methods at every time point. The contralateral external jugular veins were also harvested and analyzed as controls. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase was used as an internal standard to normalize all samples for potential variations in mRNA content. In order to observe the expression of TGF-β protein, immunohistochemical SABC methods were used. Results One week postoperation, the mRNA level of TGF-β was upregulated to 1.73±0.19 in the vein graft and 1.21±0.16 in the control vein (P＜0.01). High mRNA levels were maintained until week 4 postoperation. The mRNA levels of collagen Ⅰ and collagen Ⅲ were also significantly increased to 2.18±0.21 versus 1.12±0.24 and 1.08±0.13 versus 0.83±0.12, respectively (P＜0.05). Immunohistochemical staining revealed a higher density of TGF-β expression in the vein grafts.Conclusions An uninterrupted increase in mRNA levels of TGF-β, collagen Ⅰ, and collagen Ⅲ is observed in autogenous vein grafts. This increase may be the major cause of intimal hyperplasia, sclerosis, and even graft failure.     

醛固酮对心脏成纤维细胞转化生长因子β1的影响

目的 探讨醛固酮对心脏成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取新生大鼠心脏成纤维细胞,应用ELISA、Western-Blot、RT-PCR的方法分别测定不同条件下心脏成纤维细胞培养液中TGF-β1水平和心脏成纤维细胞中的TGF-β1含量,以及TGF-β1 mRNA 的表达.结果 醛固酮(10-9、10-8和10-7 mol/L)可剂量依赖性地促进心脏成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达以及TGF-β1的合成和分泌,同时醛固酮(10-7 mol/L)以时间依赖的方式促进TGF-β1 mRNA的表达,在作用4h后表达开始增加,8 h达高峰.提前给予螺内酯(10-6 mol/L)能抑制醛固酮(10-7 mol/L)的上述作用.结论 醛固酮能促使心脏成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达以及TGF-β的合成和分泌,且此作用可能是通过盐皮质激素受体介导的.     

阿托伐他汀对心脏成纤维细胞转化生长因子-1表达的影响

目的:探讨阿托伐他汀对心脏成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)合成和分泌的影响.方法:将心脏成纤维细胞分6组培养:空白对照组,醛同酮组(培养液中加入醛固酮,终浓度为1×10-7 mol/L),阿托伐他汀预处理Ⅰ、Ⅱ及皿组(培养液中加入阿托伐他汀,终浓度分别为1×10-6、1×10-5及1×10-4 moL/L,24 h后加入醛同酮)及阿托伐他汀+甲羟戊酸组(培养液中加入阿托伐他汀,终浓度为1×10-4 moL/L,甲羟戊酸,终浓度为1×10-3mol/L,24 h后加入醛固酮).ELISA法测定培养液中 TGF-β1蛋白水平,RT-PCR和Western Blot法分别测定心脏成纤维细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白的表达.结果:6组心脏成纤维细胞TGF-β1 mRNA表达、蛋白合成和分泌水平差异均有统计学意义(F值分别为104.534,30.405和14.418,P均＜0.001).与空白对照组比较,醛固酮组和阿托伐他汀+甲羟戊酸组TGF-β1 mRNA表达量、TGF-β1蛋白表达和分泌水平增加(P均＜0.01);阿托伐他汀预处理组上述3个指标低于醛同酮组和阿托伐他汀+甲羟戊酸组(P均＜0.01).结论:阿托伐他汀可能通过甲羟戊酸代谢途径,抑制醛固酮诱导的心脏成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达以及TGF-β1蛋白的合成和分泌.     

转化生长因子—β对骺软骨细胞增殖周期的作用

采用鸡胚有无血清培养和流式细胞仪,对经转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）后的骺软骨细胞检测。结果显示：２４小时时,０．１１、０．３３和１．００ｎｇ实验组的细胞增殖指数（ＰＩ）均低于对照组,而３．００ｎｇ组则大于对照组（Ｐ〈０．００１）;９６小时时,各实验组ＰＩ均大于对照组,其中０．３３ｎｇ组ＰＩ最大（Ｐ〈０．００１）。上述结果表明,不同剂量和不同作用时间的ＴＧＦ－β对骺软骨细胞增殖周期均有较大的影响,