玉屏风散不同提取物抑制迟发型超敏反应的特点

目的:应用代表迟发型超敏反应的小鼠变应性接触性皮炎模型及体外脾细胞IFN-γ、IL-4的分泌,考察玉屏风散醇提液和乙酸乙酯萃取物抑制迟发型超敏反应的不同特点。方法:用二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠变应性接触性皮炎,考察玉屏风散提取物诱导相和效应相分别给药的干预作用;用ELISA法检测ConA刺激的脾细胞IFN-γ、IL-4的分泌水平。结果:玉屏风散醇提液在诱导相和效应相给药均能减轻小鼠耳肿胀度,改善耳组织病理学改变,体外显著抑制ConA诱导的脾细胞IFN-γ、IL-4的分泌;乙酸乙酯萃取物效应相给药显著减轻小鼠耳肿胀度,改善耳组织病理变化,在诱导相则影响不明显,显著抑制ConA诱导的IFN-γ分泌,一定程度促进IL-4分泌。结论:玉屏风散醇提液和乙酸乙酯萃取物抑制迟发型超敏反应具有不同的特点,且与对T细胞的不同影响有关。     

黄连解毒汤不同提取部位及相关单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用研究

目的:研究黄连解毒汤不同提取部位及小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法:建立体外脾T、B淋巴细胞模型,运用MTT比色法分析比较黄连解毒汤的不同提取部位及其主要化学成分与丝裂原(ConA、LPS)共同作用时对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果黄连解毒汤全方水提部位(H2O部位)、醇提总部位(EtOH部位)、二氯甲烷萃取部位(CH2Cl2部位)和正丁醇萃取部位(n-Bu部位)对未活化或LPS和ConA诱导的脾T、B淋巴细胞具有不同程度的促进或抑制作用。小檗碱、黄芩苷(10μM)能促进未活化小鼠脾淋巴细胞增殖,而栀子苷、芦丁(50μM)对未活化小鼠脾淋巴细胞的增殖作用不明显。对于脂多糖(LPS)或刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞,小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁均能抑制其增殖。结论:黄连解毒汤不同提取部位及其中主要化学成分小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁对T、B淋巴细胞均有不同程度的增殖作用。     

小鼠脾淋巴细胞模型在中药复方免疫活性物质筛选中的应用研究

目的:观察四物汤等6个方剂不同提取物对小鼠离体脾淋巴细胞转化增殖能力的影响,探讨小鼠脾淋巴细胞模型在中药复方免疫活性成分筛选中的应用.方法:制备四物汤、四君子汤、六味地黄汤、玉屏风散、桂枝汤、龙胆泻肝汤等6个方荆的水提物、水提醇沉物、醇提物,选择其没有明显细胞毒性的浓度范围,在96孔板中分别与小鼠正常的和经PMW诱导的小鼠脾淋巴细胞共同孵育,以MTT法检测细胞转化增殖情况.结果:四物汤上述三种提取物、四君子汤与六味地黄汤水提物和水提醇沉物、龙胆泻肝汤水提物能明显增强经PMW诱导的小鼠脾淋巴细胞转化增殖能力(P<0.05或P<0.01);桂枝汤醇提物能明显押制经PMW诱导的小鼠脾淋巴细胞转化增殖能力(P<0.01);仅有四物汤水提物能明显增强小鼠正常脾淋巴细胞转化增殖能力(P<0,01),其活性明显较PMW诱导组低(P<0.01).上述方荆刺激淋巴细胞转化增殖的效应具有提取物和浓度的差异性.结论:在中药复方免疫活性物质的筛选中,丝裂原刺激下的小鼠脾淋巴细胞模型作用稳定,应用时注意选择没有明显细胞毒性的药物浓度.     

当归醇沉物对体外小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖的影响

体外试验中,采用ＭＴＴ比色法测定当归醇沉物对小鼠脾及胸腺淋巴细胞增殖功能的影响,结果显示,０．１６～２．５０ｍｇ／ｍＬ范围内的当归醇沉物能单独或协同ＣｏｎＡ／ＬＰＳ发挥促进小鼠脾脏及胸腺Ｔ,Ｂ淋巴细胞增殖的作用,当归醇沉物尚可对氢化泼尼松（ＨＰ）对ＣｏｎＡ诱导的脾脏及胸腺Ｔ淋巴细胞的增殖反应的抑制作用。     

化瘀止痛方有效部位对子宫腺肌病细胞增殖及Bcl-2、Bax表达的影响

目的 观察化瘀止痛方有效部位对子宫腺肌病细胞增殖活性及凋亡基因Bcl-2、Bax的影响.方法 采用胶原酶消化法培养子宫腺肌病病灶细胞,MTT法检测细胞的增殖活力,免疫细胞化学方法检测细胞Bcl-2、Bax表达的变化.结果 不同浓度的化瘀止痛方醇提物、水提醇沉液、水提醇沉物及挥发油均能显著降低子宫腺肌病病灶细胞的增殖活力及Bcl-2表达,且呈浓度依赖关系(P＜0.05);化瘀止痛方水提醇沉物高浓度组及挥发油高浓度组Bax的表达呈显著上升,差异有统计学意义(P＜0.05),化瘀止痛方其他提取部位组Bax表达上升不明显,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 通过各提取部位组抑制子宫腺肌病病灶细胞的增殖活性,诱导其凋亡而使子宫腺肌病病灶自然缩小或消退,可能是化瘀止痛方治疗子宫腺肌病的主要机理之一,其中挥发油组作用最强.     

复方昆明山海棠颗粒对小鼠淋巴细胞体外增殖活化影响的研究

目的：研究复方昆明山海棠颗粒（composite tripterygium hypoglaucum hutch，CTHH）对小鼠脾淋巴细胞增殖、活化标志CD69和CD25及细胞因子IL-4及γ-IFN的影响，为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据。方法：无菌分离小鼠脾淋巴细胞，加入不同浓度的复方昆明山海棠颗粒溶液，MTT法检测ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖；流式细胞仪检测活化标志CD69及CD25；酶联免疫法检测细胞因子IL-4及γ-IFN。结果：CTHH对脾淋巴细胞增殖活化及分泌均有抑制作用。     

玉米须降血糖活性部位的筛选研究

目的筛选中药玉米颂降血糖的活性部位。方法对玉米须进行提取分离,得到水提取物、60％乙醇提取物、水提醇沉物、正丁醇萃取物及水提醇沉上清液5个部位,以这5个部位分别灌胃给予四氧嘧啶造模的高血糖小鼠,观察它们对高血糖小鼠血糖的影响。结果玉米须水提物、60％乙醇提物和水提醇沉物均有降低高血糖小鼠血糖的作用,其中以水提醇沉物的降血糖作用趋势最明显;止丁醇萃取物组和水提醇沉上清液组对高血糖小鼠血糖值无影响（与模型组比较,P〉0．05）。结论吉林产玉米须中降血糖的滔性部位为多糖类成分。     

过山枫抑制T细胞增殖及诱导T细胞凋亡活性部位的研究

目的:通过体外T淋巴细胞增殖实验筛选过山枫抗炎作用的活性部位;对确定的活性部位进一步探讨对T淋巴细胞凋亡的影响。方法:对过山枫乙醇提取物进行分离提取,采用体外小鼠脾淋巴细胞增殖实验,检测过山枫不同提取部位对小鼠脾细胞增殖的影响,从中筛选出对小鼠脾细胞增殖有抑制作用的活性部位。采用流式细胞技术观察活性部位对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响。结果:过山枫不同极性部位及从过山枫乙酸乙酯部位(GSF-A)分离得到3个组分对体外培养的T淋巴细胞增殖均有不同程度的抑制作用;GSF-A 3个活性部位对T淋巴细胞凋亡有显著促进作用。结论:过山枫不同极性部位均具有抗炎活性,且GSF-A的活性显著;从GSF-A部位中分离得到的3个部位均具有抗炎活性;过山枫对T淋巴细胞增殖的抑制及诱导凋亡的作用一致,提示诱导凋亡是过山枫抑制T淋巴细胞增殖的机制之一。     

冬凌草多糖RPPSIIa的分离纯化及其性质研究

目的从冬凌草Rabdosia rubescens中提取分离获得多糖组分RPPSIIa,并分析其结构性质和探讨免疫活性,为冬凌草临床应用与进一步开发利用提供参考。方法主要采用水提醇沉透析得冬凌草多糖,经分级醇沉,Sephdex G-100凝胶色谱柱纯化得RPPSIIa,应用HPLC、IR、LC、UV等方法对冬凌草多糖进行组成结构分析及理化性质研究,通过MTT比色法观察该组分在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果冬凌草多糖RPPSIIa为均一组分,其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖,二者比为7︰93,RPPSIIa具有典型的多糖吸收峰,其结构中存在α-型糖苷键;RPPSIIa在5～100μg/mL能有效刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,5、50μg/mL均能有效增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖反应。结论多糖RPPSIIa是由冬凌草中提取的均一葡聚糖,具有较强的免疫生物活性。     

昆明山海棠片对小鼠淋巴细胞体外增殖活化影响的研究

目的：研究昆明山海棠片对小鼠脾淋巴细胞增殖、活化标志CD69和CD25及细胞因子IL-4及IFN-γ的影响。方法：无菌分离小鼠脾淋巴细胞,加入不同浓度的昆明山海棠溶液,MTT法检测刀豆蛋白A刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖;流式细胞仪检测活化标志CD69及CD25;酶联免疫法检测细胞因子IL-4及IFN-γ。结果：昆明山海棠片对脾淋巴细胞增殖活化及分泌均有抑制作用。     

滋肾宁神方提取工艺安神药效筛选研究

目的:筛选滋肾宁神方的提取工艺。方法:通过小鼠自主活动实验及睡眠实验,对水提、醇提、水提醇沉、部分水提部分醇提等4种不同提取工艺进行筛选。结果:水提醇沉工艺提取物可显著减少小鼠自主活动,明显延长阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡;水提工艺提取物可明显延长阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间。4种工艺提取物均可提高小鼠入睡率,其中水提醇沉工艺提取物对小鼠入睡率的提高最显著。结论:选择水提醇沉工艺为滋肾宁神方的提取工艺。     

解毒活血滋阴方免疫抑制作用有效部位的筛选研究

目的分离并筛选解毒活血滋阴方对系统性红斑狼疮免疫抑制作用的有效部位。方法制备解毒活血滋阴方水溶性部位、乙醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、乙醇部位的提取物。在体内研究中,采用小鼠迟发型超敏反应模型和鸡红细胞诱导的小鼠血清溶血素生成模型,观察解毒活血滋阴方不同提取部位对细胞免疫和体液免疫的影响;体外研究检测解毒活血滋阴方不同提取部位对Con A及LPS诱导的小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。结果解毒活血滋阴方水溶性部位和乙酸乙酯部位能够明显减轻小鼠迟发型超敏反应小鼠耳肿胀、降低小鼠的脾指数和胸腺指数,对鸡红细胞诱导的小鼠血清溶血素生成具有抑制作用。同时解毒活血滋阴方水溶性部位和乙酸乙酯部位各剂量组均可抑制T、B淋巴细胞增殖,且呈一定剂量依赖性。结论解毒活血滋阴方治疗系统性红斑狼疮免疫抑制作用的有效部位可能是水溶性部位和乙酸乙酯部位。     

粗叶悬钩子根多糖的提取纯化与抗肿瘤作用研究

目的使用水提醇沉法探究粗叶悬钩子根多糖的最佳提取条件;采用Sevage法、TCA法对多糖进行纯化;探究粗叶悬钩子根多糖对MCF-7细胞增殖的影响。方法使用水提醇沉法,进行正交试验,最终确定提取的最佳提取温度、提取时间、提取料液比;采用Sevage法、TCA法对所提的多糖进行去蛋白纯化处理;使用MTT法探究粗叶悬钩子根多糖对MCF-7细胞增殖的影响。结果研究表明粗叶悬钩子根多糖的最佳提取条件为温度90℃,时间2h,料液比1∶15。纯化过程中使用Sevage法、TCA法,多糖含量下降,推测提取产物可能为糖蛋白;MTT结果则表明粗叶悬钩子根多糖对MCF-7细胞增殖有良好的抑制作用。结论水提醇沉法成功确定了粗叶悬钩子多糖的提取条件;纯化结果表明提取物可能是一种糖蛋白;粗叶悬钩子多糖对MCF-7细胞增殖有良好的抑制作用。     

疏风饮对变应性接触性皮炎小鼠脾指数、胸腺指数及IFN-γ与IL-4分泌的影响

[目的]研究疏风饮对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的影响。[方法]利用DNCB诱导建立小鼠变应性接触性皮炎模型,观察疏风饮对小鼠脾指数与胸腺指数的影响,ELISA检测各组小鼠血清中γ-干扰素(IFN-γ)与白细胞介素-4(IL-4)的含量。[结果]疏风饮对DNCB所致的ACD小鼠的脾指数与胸腺指数的升高有抑制作用,降低小鼠血清中IFN-γ的含量,提高IL-4的含量。[结论]疏风饮对DNCB诱导的小鼠变应性接触性皮炎的抑制作用及其机制与调节细胞因子的分泌有关。     

人参炔醇抑制实验性迟发型超敏反应

目的:考察人参炔醇(PAN)对实验性迟发型超敏反应的影响及可能作用途径。方法:应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)造成小鼠变态反应性接触性皮炎(ACD)模型,考察PAN诱导相给药对耳廓肿胀的影响,并进行病理组织学检查;MTT法检测PAN对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响。ELISA方法检测ConA刺激的脾细胞培养上清IFN-γ水平。结果:PAN10 mg.kg-1诱导相给药可明显抑制小鼠耳肿胀;病理组织学结果显示PAN可减轻模型小鼠局部水肿及血管扩张,减少淋巴细胞浸润;PAN对ConA诱导的T细胞增殖有明显的抑制作用,而对静息状态的脾细胞未观察到显著影响;PAN10μmol.L-1起明显抑制体外ConA刺激脾细胞的IFN-γ分泌,且作用在早期(6 h)即已呈现。结论:PAN对实验性迟发型超敏反应有显著的抑制作用,该作用可能与抑制T细胞增殖和IFN-γ的分泌有关。     

女贞子不同炮制品的抗脂质过氧化作用研究

通过测定女贞子（Fructusligustrilucidi）的不同提取液及其不同炮制品的水提液对大鼠离体肝脏脂质过氧化产物（MDA）的抑制情况，结果发现：女贞子的水提液抗氧化作用好于水提醇沉液；其不同炮制品对MDA的抑制率，均高于生品；低浓度时（0.5mg／ml）以盐蒸品的抑制作用为最强；高浓度（1．0mg／ml）时各炮制品的抑制率相对比较接近，都有较强的抗脂质过氧化作用，只女贞子生品的水提醇沉液较弱。     

结血蒿醇提物对小鼠脾细胞增殖和活化的抑制作用

目的：观察藏药结血蒿75%乙醇提取物对体外丝裂原刀豆蛋白A（Concanavalin A,ConA）刺激的小鼠脾细胞活化和增殖的抑制作用.方法：用Con A刺激小鼠脾细胞,分别用四甲基偶氮唑盐染色法（MTT 法）,流式细胞术等方法观察结血蒿醇提物对细胞增殖和活化的作用.结果：结血蒿醇提物对体外Con A刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化均有显著的抑制,作用呈剂量依赖性.结论：结血蒿醇提物可抑制C0n A刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化,提示其具有免疫抑制活性.     

柿叶提取物对黑素细胞增殖和酪氨酸酶活性的影响

目的：筛选柿叶中对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性有明显抑制作用的部位。方法：柿叶70％乙醇提取后萃取得到不同的提取物;MTT法观察各提取物对小鼠B-16黑素瘤细胞增殖的影响,采用多巴氧化法研究柿叶提取物对黑素细胞酪氨酸酶活性的影响。结果：MTT法结果表明柿叶水提物和醇提物对黑素细胞的增殖均有抑制作用,且呈量效关系;70％醇提物的半数抑制浓度最低,与阳性对照相当;三氯甲烷和醋酸乙酯部分合并后对酪氨酸酶活性抑制作用明显。结论：本研究为柿叶的临床应用和进一步开发提供了一定的科学依据。     

秦七风湿方水提液和醇提液对巨噬细胞功能的影响

目的:研究秦七风湿方水提液和醇提液对巨噬细胞RAW264.7增殖和分泌一氧化氮(NO)的影响。方法:采用水煎煮和乙醇超声分别制备秦七风湿方水提液和醇提液,通过HPLC测定水提液和醇提液指标性成分含量;利用CCK-8研究水提液和醇提液对RAW264.7增殖的影响;通过Greiss法测定水提液和醇提液对巨噬细胞分泌NO的影响。结果:含量测定发现醇提液的指标性成分含量高于水提液,说明不同提取溶剂所得秦七风湿方指标性成分具有差异;水提液和醇提液对RAW264.7增殖的影响呈现浓度依赖性,具有促进和抑制的作用;水提液和醇提液对LPS诱导的巨噬细胞分泌NO具有显著的抑制作用。结论:通过研究发现秦七风湿方水提液和醇提液对RAW264.7增殖和分泌NO均具有一定的影响,呈现浓度依赖性,并且初步证实了水提液和醇提液均具有一定的抗炎活性,为将其发展为治疗RA的临床新药提供理论参考。     

白术和黄芪不同提取部位对小肠上皮细胞增殖的影响

目的观察白术和黄芪的不同提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)增殖的影响。方法以系统溶剂分离法分别提取白术和黄芪的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、醇沉上清液和多糖部位;另将白术和黄芪以乙醇提取,D101大孔树脂吸附法得到40%和70%乙醇洗脱部位。MTT法检测白术和黄芪正丁醇部位、醇沉上清液、多糖部位、40%和70%醇洗脱液对IEC-6细胞增殖的作用。结果初步发现黄芪正丁醇部位、醇沉上清部位、糖复合物、40%和70%醇洗脱部位加药24h能促进细胞增殖;白术40%乙醇洗脱液部位加药24h能促进细胞增殖,白术正丁醇部位、糖复合物、40%和70%乙醇洗脱液部位加药48h能促进细胞增殖。结论白术和黄芪正丁醇部位、多糖部位、40%和70%醇洗脱液在加药后不同时间对IEC-6细胞有不同程度的促进增殖作用;采用系统溶剂分离法和大孔树脂吸附法提取白术和黄芪不同部位,可以用于细胞增殖实验,为进一步开展白术和黄芪在细胞水平上的药理研究提供参考。