SEB活化的人外周血T细胞CD25,CD69的表达

本文用超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导外周血淋巴细胞增殖。结果显示出微量超抗原能诱导外周血淋巴细胞的增殖,大量的增殖反应发生在SEB刺激后的第5天,增殖的细胞是CD4~+T细胞,它们由刺激前的27％增加到42％。外周血活化的T细胞不依赖外源性IL-2:大量内源性IL-2的存在抑制T细胞的增殖反应。伴随CD4~+T细胞的增殖,CD25和CD69分子表达明显增加。提示SEB能改变外周血T细胞表面的分子表达。     

超抗原

超抗原在刺激T细胞时,需要辅助细胞MHCⅡ类分子的结合,但不是MHC限制.超抗原与MHCⅡ类分子的复合体作用于T细胞TCRVβ的某个片段,而不是抗原特异识别部位.故可激活较大量T细胞.超抗原可能与自身免疫病等的发病机理有密切关系.     

链球菌M蛋白超抗原对人T细胞的非辅助细胞依赖性刺激作用

近年来,被称为超抗原(Superantig-en)的一个新的抗原家族引起人们的极大关注。这个家族的代表性成员有:各型葡萄球菌肠毒素,关节炎支原体分泌的蛋白以及小鼠的Mls 抗原系统等。本文作者最近通过鉴定证实,链球菌的M 蛋白也属于一种超抗原。其与上述超抗原的区别是只能刺激人的T 细胞。根据许多文献报道,这些超抗原的特征是,其对T 细胞的刺激依赖于抗原提呈细胞(APC)的存在,并认为超抗原与APC 上MHCⅡ类分子的结合是T 细胞识别的先决条件。     

基于超抗原的肿瘤基因治疗研究进展

超抗原是一些细菌的外毒素和病毒编码的蛋白质分子 ,它的一端与抗原提呈细胞上的主要组织相容性复合体Ⅱ类分子相结合 ,另一端识别TCR的Vβ片段 ,不需加工处理 ,能激活比普通抗原更多的T细胞。超抗原抗肿瘤的机制包括T细胞的直接杀伤作用和细胞因子的作用。基于超抗原的肿瘤基因治疗模式有单用单克隆抗体片段导向的超抗原抗肿瘤、超抗原基因转染抗肿瘤、超抗原基因联合其他基因抗肿瘤和膜锚定超抗原瘤苗抗肿瘤。基于超抗原的肿瘤基因治疗是一种新的肿瘤生物治疗模式 ,将为肿瘤的治疗带来新的希望     

肝素抑制T细胞活化及机制研究

目的:长期临床实践及动物实验研究发现肝素具有一定抗炎作用,本文旨在阐明其机制是否与抑制T细胞活化过程,以及影响T细胞与抗原递呈细胞间的免疫突触的形成有关.方法:本研究通过氚掺入法检测肝素对T细胞活化增殖的影响,包括丝裂原ConA,超抗原SEA作为刺激剂,此外还有特异性抗原肽;加入外源性Ⅱ-2检测肝素抑制T细胞活化与Ⅱ-2作用的关系.流式细胞术检测T细胞活化表面标志CD62L的变化;肝素干预下T细胞与抗原递呈细胞间的相互作用,以及T细胞肌动蛋白的聚集情况.结果:在肝素干预下,ConA活化T细胞增殖明显降低并体现出剂量依赖关系,另外SEA、混合淋巴细胞反应以及特异性抗原肽刺激T细胞的增殖也不同程度受到肝素的抑制,外源性Ⅱ-2不能挽救被抑制的T细胞.流式细胞检测结果提示肝素干预组T细胞上CD62L表达明显高于对照组.肝素不影响T细胞与抗原递呈细胞之间的作用,也不影响T细胞骨架重排,即免疫突触的形成.结论:肝素抑制T细胞活化及增殖,可能是其抗炎机制的一部分,但并非通过影响T细胞与抗原递呈细胞之间的作用或T细胞活化过程中骨架重排及突触形成.     

超抗原对TCR Vβ组分具有不依赖于MHC-Ⅱ类分子的特异性

超抗原与TCR的特异性Vβ组分相结合,激活所有带有Vβ组分的T细胞。超抗原对T的刺激作用有赖于MHC-Ⅱ类分子阳性APC的存在。本文拟探讨超抗原是否必须借助MHC-Ⅱ类分子或能够直接被TCR组分所识别。作者以前的研究表明,链球菌超抗原(pep M5)对T细胞的刺激需要APC的辅助,当加入PMA和细胞因子或交联     

记忆CD8+T细胞亚群在感染和肿瘤免疫应答中的作用

在初次免疫应答的过程中,当抗原被清除以后,大多数效应T细胞凋亡,只有少数细胞存活并分化成稳定、长寿的记忆细胞。与初始T细胞相比,当再次接触同一抗原时,记忆T细胞能够介导快速、强烈、有效的免疫应答[1-3]。记忆细胞高表达抗凋亡分子并以非抗原依赖的方式增殖来维持记忆细胞     

T细胞分别调节不同B细胞亚群介导的反应

现已知道,T细胞参与许多由抗原活化B细胞的调节反应,例如,大多数类型的T依赖性抗原诱导的抗体形成反应需要辅助性T细胞(T_H)的辅助。对于依赖T_H细胞的不同B细胞亚群的活化已知有两种途径。一种是Lyb5-B细胞的活化需受MHC约束     

超抗原SEA对CD4~+T细胞TCR V_β链的取用格局

用超抗原葡萄球菌肠毒素A (SEA )在体内或体外刺激C57BL/ 6小鼠 2种不同的TCRVβ链T细胞亚群 (Vβ3+ CD4+ 、Vβ1 1 + CD4+ T细胞 ) ,观察二者对超抗原的免疫应答。结果显示 :体内初次刺激后 ,2种T细胞亚群在刺激后第 2天都发生增殖 ,随后均逐渐下降至对照水平。但第 2次用同样剂量刺激后 ,Vβ3+ CD4+ T细胞群对SEA的再次刺激表现出增殖 ,而Vβ1 1 + CD4+ T细胞群对SEA再次刺激则表现出免疫无能。体外初次、再次刺激也分别获得与体内实验相同的结果。表明超抗原SEA可选择性地取用Vβ3+ CD4+ T细胞群并对其发生增殖 ,即超抗原SEA对CD4+ T细胞TCRVβ链的取用格局各有不同。     

超抗原SEA诱导T细胞失能体外实验模型的建立

目的 建立超抗原诱导T细胞失能的体外实验模型。方法 SEA刺激人外周血淋巴细胞,再加入外源性的rIL-2维持,建立短期SEA反应性T细胞系;进行Ficoll-Hypaque密度梯度离心获取经SEA多次刺激过SEA反应性T细胞;加入处理过的PBMC作APCs,建立超抗原SEA诱导T细胞的化组和失能组。结果 SEA和rIL-2共同作用可得到静息SEA反应性T细胞系;SEA反复刺激使T细胞处于一低反应状态,与活化组相比,其DNA合成能力明显下降,IL－2分泌显著减少,静息一段时间后,其增殖能力慢慢恢复。结论 超抗原SEA多次刺激诱导SEA反应性T细胞处于失能状态。     

超抗原SEB激活诱导CD4~+T细胞凋亡模型的建立

目的为了探讨超抗原活化诱导 CD4+ T淋巴细胞凋亡分子机理及其信号传导途径 ,有必要建立超抗原活化诱导 CD4+ T细胞凋亡模型。方法采用电镜观察细胞凋亡的形态学特征 ,借助流式细胞仪 PI染色观察细胞凋亡的光散射特征及亚二倍体核型峰特征 ,琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡的 DNA片段化图谱 ,最后采用改进的二苯胺 (DPA)法定量分析细胞凋亡 DNA片段化百分率。结果 4μg/ m L SEB刺激静息的 SEB应答 CD4+ T细胞 12 h后 ,电镜下观察呈现典型的凋亡形态学特征 ;流式细胞仪 PI染色分析表明 ,在二倍体峰的左侧出现亚二倍体核型峰典型凋亡特征 ,在光散射图谱上呈现低于正常细胞的前向散射和高于正常细胞的侧向散射 ;琼脂糖凝胶电泳分析呈现典型的凋亡 DNA梯状图谱 ;DNA片段化百分率分析表明 ,超抗原 SEB活化诱导 CD4+ T细胞凋亡率的升高具有时间依赖性 ,添加 Fas- Ig融合蛋白能够特异性抑制凋亡 DNA片段化百分率的升高。结论超抗原 SEB活化诱导 CD4+ T细胞凋亡模型的建立 ,为进一步深入探讨超抗原活化诱导 T细胞死亡的分子机理和信号通路奠定了坚实基础     

调节性T细胞及其在自身免疫性疾病治疗中的应用

近年来调控免疫反应的调节性/抑制性T细胞成为免疫抑制治疗的研究焦点。调节性T细胞包括自然产生的CD4 CD25 T细胞(Trn)、Tr1、Tr2/Th3、类Trn、CD8 CD28-TS等。通常Trn和类Trn诱导非特异性细胞接触依赖的免疫抑制,Tr1和Tr2/Th3诱导抗原特异性的细胞因子依赖的免疫抑制,CD8 CD28-TS是一个独特的MHCⅠ类分子限制性亚群。调节性T细胞亚群在自身免疫性疾病治疗中具有广阔的应用前景,诱生抗原特异性调节性T细胞为自身免疫性疾病的治疗开辟了新途径。     

超抗原SEA诱导T细胞无能的作用机制探讨

目的 探讨超抗原诱导T细胞无能的分子机制。方法 采用ELISA的FACS，分别检测超抗原对诱导T细胞无能的过程中，IL－2，IL－10的产生和IL－2Rα链（CD25）的表达，并以^3H-TdR掺入法，测定无能T细胞对rhIL-2,PMA及ionomycin的应答能力，而L－10的产生则逐渐升高；CD25的表达与活化组相比较无显著差异。rhIL-2的加入可恢复T细胞增殖。PMA单独作用能诱导无能T细胞的部分增殖能力，但PMA＋ionomycin则能更大程度地恢复T细胞的增殖。结论 超抗原SEA对T细胞无能的诱导，可能与降低IL－2的水平和升高IL－10的水平有关。超抗原SEA的反复刺激对T细胞无能的诱导，可能是干扰了TCR信号途径的近端事件，导致Ras/MAPK途径和Ca/calcineurin途径受阻，而使IL－2基因不能转录所致。     

鼠弓形体感染的去胸腺、照射和骨髓重建小鼠IgG对IgM无抑制作用

胸腺衍生细胞(T-细胞)调节依赖胸腺和非依赖胸腺抗原的抗体反应。人们认为IgG的产生比IgM更依赖于胸腺。并且在一定条件下,依赖胸腺的抗原在去T细胞动物引起的抗体主要是IgM。另一方面,已知IgG抗体能抑制,IgM反应。这种反馈抑制取决于IgG的FC部分以及它的特异性和亲合力。但精确的机制不知道。过去的一篇报告曾指示,在T细胞存在的情况下,IgG对无毒株鼠弓形体感染小鼠建立传染后免疫起主要作用。因此,在T细     

自身识别和白细胞间介素-2在免疫调节、自身免疫和肿瘤中的作用

免疫系统依赖细胞间联系和协同作用中的自身识别使免疫系统有效地发挥作用。免疫反应基因的产物Ia抗原大概是被识别的自身决定簇的重要位点。Ia抗原主要存在于非T细胞上,它可刺激T细胞分化为具有辅助功能的细胞以及具有抑制功能的细胞,并产生各种因子,包括白细胞间介素2(Interleukin 2,IL 2),即T细胞生长因子(T Cell growth factor)。这种因子与其     

T－B细胞协作研究的重大突破——滤泡辅助性T细胞的发现，一个新的CD^4＋效应T细胞亚群

二十世纪60年代,Claman和Miller等[1,2]分别采用照射或胸腺切除的小鼠模型,同时过继转移正常小鼠骨髓细胞和胸腺细胞,或过继转移胸腺细胞或胸导管淋巴细胞,才能产生针对羊红细胞抗体,发现了B细胞对某些抗原(后称为T细胞依赖抗原)刺激产生抗体必须要有T细胞的辅助.     

CTLA-4与超抗原对SEA诱导T细胞无能的关联研究

在建立超抗原SEA诱导T细胞无能的体外模型基础上 ,观察了无能T细胞受SEA刺激时共刺激分子CD2 8和CTLA 4的表达。结果发现 ,与活化组相比 ,在SEA加入后的不同时相点无能T细胞上CD2 8的表达都是正常的 ,而CTLA 4分子在SEA加入的第 60小时细胞表面有高水平的表达。这些结果表明 ,超抗原SEA诱导的这种无能状态与CTLA 4所介导的抑制作用增强有关     

T细胞上MHC Ⅰ类抗原受体可抑制超抗原依赖细胞介导的细胞毒作用（文摘）

Ｔ细胞上ＭＨＣⅠ类抗原受体可抑制超抗原依赖细胞介导的细胞毒作用（文摘）［美／ＰｈｉｌｌｉｐｓＪＨ…／／Ｓｃｉｅｎｃｅ１９９５；２６８：４０３］超抗原是一组直接与抗原提呈细胞（ＡＰＣ）上ＭＨＣⅡ类分子的外侧暴露表面和Ｔ细胞上ＴＣＲβ链的可变区结合，在体...     

人穿孔素基因真核表达载体的构建与表达分析

早在十多年前,人们就发现肿瘤特异性杀伤细胞（Tumor-specific cytolytie T lymphocytes,CTL）含有很多颗粒,当CTL细胞的T细胞受体与靶细胞的MHC抗原结合后,通过Ca^2＋依赖途径使颗粒极化并向外释放,     

超抗原SEB和SEC诱导的树突状细胞对T细胞的影响

目的：阐明超抗原葡萄球菌肠毒素B（SEB）和葡萄球菌肠毒素C（SEC）诱导树突状细胞(dendritic cells，DC)促进T细胞活化、增殖、分泌及其对肝癌HcaF细胞的杀伤作用。 方法： 以SEB或SEC诱导DC刺激T细胞，免疫组化染色检测DC表达S-100蛋白；流式细胞术检测DC表达I-Eκ和CD80分子水平，检测T细胞受刺激后CD69的表达、IL-2和TNF-α的生成；用MTT法检测T细胞增殖及其对HcaF细胞的杀伤效应。 结果： 体外试验表明，DC高表达S-100蛋白，SEB或SEC诱导的DC高表达I-Eκ和CD80分子；SEB或SEC能诱导DC促进T细胞活化，其浓度以100 μg/L时作用最强；SEB或SEC能诱导DC促进T细胞增殖、大量分泌IL-2和TNF-α, 被激活的T细胞对HcaF细胞的杀伤率高达83.2%±12.8%，明显优于肿瘤抗原诱导的DC所激活的T细胞对HcaF细胞的杀伤作用；SEB与SEC的诱导作用无明显差异。 结论： 超抗原SEB或SEC能诱导DC显著增强T细胞活化、增殖、分泌和杀伤肿瘤细胞，并优于肿瘤抗原的诱导作用，SEB和SEC的作用相似，为超抗原SEB或SEC与DC联合应用于临床肿瘤的治疗提供了证据。