ERK通路对PHA诱导人外周血单个核细胞中USP22基因表达的影响

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)对植物血凝素(PHA)诱导人外周血单个核细胞USP22基因表达的调控作用.方法 不同浓度PHA刺激人外周血淋巴细胞,Western blot检测ERK1/2的磷酸化水平及USP22蛋白表达;ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059预处理细胞,Western blot和RT-PCR分别检测PHA诱导的USP22蛋白及mRNA的表达.结果 Western blot显示受PHA刺激后,人外周血单个核细胞USP22和p-ERK1/2蛋白的表达水平均高于对照组;而p-ERK1/2抑制剂阻断ERK磷酸化水平,进而下调USP22蛋白及mRNA表达水平.结论ERK1/2信号通路参与PHA对人外周血单个核细胞USP22基因的转录激活.     

慢性肝炎患者外周血单个核细胞Fas抗原及T淋巴细胞亚群的检测意义

[目的 ]探讨Fas抗原系统和T淋巴细胞亚群在慢性肝炎发病机制中的作用及意义。 [方法 ]提取患者外周血单个核细胞 ,应用流式细胞术检测Fas抗原、CD3 、CD4 、CD8 ,进行统计学方差分析。共检测 2 5例慢性肝炎患者 ,其中慢性乙型肝炎 (CHB)患者 1 6例 ,脂肪性肝炎患者 9例。[结果 ]2 5例慢性肝炎患者总的Fas抗原及 1 6例慢性乙型肝炎和 9例脂肪肝患者的Fas抗原阳性率分别为 (4 7.35± 6 .1 4 ) %、(4 8.31± 6 .6 8) %和 (4 7.1 9± 8.71 ) % ,明显高于对照组 (2 5 .0±7.0 7) % ,P均 <0 .0 1 ,有显著性差异。各组慢性肝病之间Fas抗原含量无显著性差异。对T淋巴细胞亚群的分析 ,慢性乙型肝炎组CD3 与对照组呈显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,其余均无差异。 [结论 ]慢性肝炎患者 ,包括CHB及脂肪性肝炎 ,外周血单个核细胞Fas抗原表达明显增高 ,同时外周血T淋巴细胞数量 (CD3 )有明显下降     

芦荟多糖对肝癌细胞及外周血单个核细胞作用的研究

目的：探讨芦荟多糖抑制肝癌细胞生长的作用机制。方法：采用四氮唑盐法（MTT）法检测不同浓度的芦荟多糖对体外培养的原发性肝癌细胞（PHCC）与自体外周血单个核细胞（PBMC）生长的影响。结果：芦荟多糖可不同程度地抑制肝癌细胞的生长，促进外周血单个核细胞的生长，并且呈浓度依赖性。结论：芦荟多糖可提高机体的免疫力以达到抑制肿瘤生长的作用，并在一定程度上可直接抑制体外肿瘤细胞的生长。     

蝉拟青霉多糖对人外周血单个核细胞及白血病细胞株U937、K562增殖的调节作用

目的:研究蝉拟青霉总多糖对人外周血单个核细胞抗肿瘤活性的促进作用及其可能对肿瘤细胞株U937、K562的直接抑制作用.方法:用水提取蝉拟青霉菌丝体总多糖,以MTT法测定不同浓度总多糖对人外周血单个核细胞及白血病细胞株U937、K562增殖的影响,ELISA法测定多糖作用44 h后,外周血单个核细胞培养上清液中hTNF-α、hIFN-γ的含量.结果:一定浓度的蝉拟青霉多糖能使外周血单个核细胞的增殖率升高,较高浓度多糖能抑制白血病细胞株U937、K562的增殖,同时蝉拟青霉多糖能提高外周血单个核细胞表达hTNF-α、hIFN-γ.结论:蝉拟青霉多糖可能具有直接抑制U937、K562的增殖作用;能提高外周血单个核细胞的增殖能力,使其分泌hTNF-α、hIFN-γ升高,从而可能促进外周血单个核细胞的杀肿瘤活性.     

催乳素对体外单独培养的Graves病外周血单个核细胞活化及增殖影响的研究

目的 :研究催乳素 (PRL)对体外单独培养的Graves病 (GD)外周血单个核细胞的活化及增殖有无直接影响。方法 :提取 12例GD患者和 8例正常健康对照的外周血单个核细胞 ,单用含不同浓度羊催乳素或植物血凝素的培养液进行体外培养。并利用流式细胞技术等测定其表面CD2 5的表达 (反映活化状态 )或细胞内DNA含量以计算增殖指数 (反映增殖状态 )。结果 :GD患者和正常人的外周血单个核细胞经 12 .5 10 0 0ng/ml羊催乳素作用后 ,其CD4+ CD2 5 + 细胞百分率、CD8+ CD2 5 + 细胞百分率及增殖指数均无明显变化 (P均 >0 .0 5 )。所设阳性对照植物血凝素 (5 μg/ml)能直接刺激这两种来源的单个核细胞发生活化、增殖 ,使上述各项指标均显著增高 (P均<0 .0 1)。结论 :催乳素不能刺激体外单独培养的GD外周血单个核细胞发生活化及增殖     

老年肺结核患者外周血单个核细胞白细胞介素6分泌水平的研究

IL-6是由多种细胞分泌的细胞因子,具有十分广泛的生物学活性,观测其分泌水平变化,为老年肺结核病情监测及免疫状况探讨提供了参考指标。对象:61例肺结核患者均系长春市结核病院及门诊病人,老年组29例,男18例,女11例,年龄60-70岁,平均64．2岁。其中进展期17例,好转期12例;轻中度病变9例     

卡维地洛对人外周血单个核细胞在脂多糖刺激下细胞因子表达及NF-κB活性的影响

目的观察不同剂量卡维地洛对培养的健康人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PB-MC）在脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激下分泌细胞因子（TNF-α、IL-1、IL-6）的变化,并测定单个核细胞核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）活化程度,探讨卡维地洛的心血管保护作用,为卡维地洛的临床应用提供理论依据。方法抽取15例健康体检者空腹肘静脉血各5ml,分离单个核细胞,在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基悬浮细胞。应用放射免疫法测定培养上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平,并将单个核细胞离心涂片并固定后测定NF-κB细胞率。结果不同剂量卡维地洛对人PBMC IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌及NF-κB活化均有不同程度抑制作用。外周血单个核细胞NF-κB阳性细胞率与培养上清液中细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平有显著正相关。结论卡维地洛能有效降低外周血单个核细胞在脂多糖刺激下细胞因子水平及NF-κB的活化,其作用具有剂量依赖性。卡维地洛降低细胞因子水平,可能是通过抑制NF-κB这一途径来实现的。这可能是其心脏保护作用机制之一。     

CpG ODN增强人外周血单个核细胞对淋巴瘤细胞系Jurket杀伤活性的实验研究

目的 探讨合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG ODN)体外刺激人外周血单个核细胞(PBMC)的活性,以及活化后的PBMC对肿瘤细胞的杀伤作用.方法 采用MTT法,ELISA法检测CpG ODN对人外周血单个核细胞(PBMC)的增殖活性以及活化后的PBMC对Jurkat细胞的杀伤活性.结果 CpG ODN组,植物血球凝集素(PHA)组及CpG ODN+PHA组较空白对照组能明显促进PBMC的增殖和干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)的分泌,杀伤活性明显增高(P<0.05);CpG ODN组比PHA组明显促进PBMC的增殖和IFN - γ、IL-12的分泌,且杀伤活性明显增高(P<0.05) ;CpG ODN+PHA组在促进PBMC的增殖和IFN - γ、IL-12的分泌和对Jurkat细胞杀伤活性上明显高于其他组(P<0.05).结论 CpG ODN 具有免疫增强作用,能提高PBMC对肿瘤细胞Jurkat的杀伤作用.     

厄贝沙坦及辛伐他汀对高血压病患者外周血单个核细胞炎症因子释放的影响

目的:探讨用血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂阻断血管紧张素Ⅱ的生物效应后高血压患者外周血单个核细胞炎症因子释放的变化以及他汀类药物短期治疗对高血压患者外周血单个核细胞炎症因子释放的作用。方法:将33例高血压患者随机分3组,A组常规治疗,B组使用厄贝沙坦(75m g/d),C组在常规治疗的基础上加用辛伐他汀(20m g/d)。治疗2周后检测外周血单个核细胞上清白细胞介素-1β的浓度及其刺激的肝细胞C-反应蛋白分泌的量。结果:①3组高血压患者血压降低幅度无统计学差异。②治疗前后3组高血压患者外周血单个核细胞白细胞介素-1β自发分泌无统计学差异。③与A组比较:B组治疗前后脂多糖(LPS)刺激的外周血单个核细胞白细胞介素-1β分泌量下降趋势较明显,且有统计学差异。C组治疗前后脂多糖刺激的外周血单个核细胞白细胞介素-1β分泌量下降趋势较明显,且存在统计学差异。④治疗前后3组高血压患者外周血单个核细胞培养上清诱导的C-反应蛋白的分泌无明显变化(P>0.05)。结论:血管紧张素Ⅱ可能与高血压患者外周血单个核细胞的炎症激活有关,血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂和他汀类药物治疗可部分逆转外周血单个核细胞的激活,且与降压和降脂作用无关。     

CpG ODN活化外周血单个核细胞对淋巴瘤HUT-78细胞杀伤作用的研究

目的 探讨CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)在肿瘤免疫治疗中的作用.方法 将CpG ODN刺激体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC),ELISA法检测其分泌细胞因子白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(INF-γ)的表达, MTT法检测CpG ODN作用后的PBMC对淋巴瘤细胞株HUT-78细胞杀伤活性.结果 与对照组相比,经CpG ODN作用后的PBMC对HUT-78细胞杀伤活性显著提高(P＜0.05),同时CpG ODN能明显促进PBMC分泌细胞因子IL-12、INF-γ(P＜0.05).结论 CpG ODN可增强PBMC介导的抗淋巴瘤细胞的作用,其杀伤活性与分泌细胞因子有关. Abstract： Objective To study the immunotherapy role of CpG ODN(CpGoligodeoxynucleotide) on tumor.Methods After treated with synthetic CpG ODN for 48 hours, the inhibiting effect of PBMC on HUT-78 cells were detected by MTT method.The secretions of TNF-γ and IL-12 from PBMC determined using ELISA method.Results The PBMC treated with CpG ODN enhanced their antitumor effect on HUT-78 cells and increased the secretion levels of TNF-γ and IL-12.Conclusions CpG ODN increases the cytotoxicity of PBMC on HUT-78 cells in vitro, as well as facilitates the IL-12 and TNF-γ secretion.     

沙利度胺对类风湿关节炎滑膜细胞及外周血单个核细胞分泌肿瘤坏死因子-α和血管内皮生长因子的影响及机制研究

目的:观察沙利度胺(THD)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的抑制作用及其对FLS和外周血单个核细胞(PBMCs)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响,初步探讨THD治疗RA的可能机制。方法:分离RA患者FLS进行体外培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测分别加入10、50、100、200μg/ml的THD对FLS增殖的影响,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测50、100、200μg/ml的THD分别对FLS及PBMCs进行干预24、48 h后分泌VEGF和TNF-α的变化。结果:THD在50～500μg/ml浓度范围内对FLS增殖有抑制作用。与对照组比较,不同浓度(50、100、200μg/ml)不同作用时间(分别干预24、48 h)的THD对FLS和PBMCs分泌TNF-α及VEGF均有抑制作用(均P<0.05)。结论:THD可能通过抑制RA患者FLS的增殖,抑制FLS及PBMCs分泌VEGF、TNF-α,从而抑制新生血管的形成,减轻炎症反应,起到治疗RA的作用。