bcl-2反义核酸提高γ线对恶性淋巴瘤细胞凋亡的作用

目的研究bcl-2反义核酸能否增加^60Coγ线对恶性淋巴瘤细胞凋亡的作用。方法采用细胞染色方法观察细胞凋亡的形态，原位末端标记法检测凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞的DNA含量和bcl-2蛋白的表达。结果1～8Gyγ线和10～40μmol/L bcl-2基因反义核酸均能抑制B淋巴瘤细胞株Raji细胞生长，诱导细胞凋亡。流式细胞仪检测亚G1期细胞增多，bcl-2蛋白表达降低，呈现时间剂量依赖效应，联合应用比单独应用抑制作用显著。结论bcl-2反义核酸能够增加^60Coγ线对恶性淋巴瘤细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷对恶性淋巴瘤细胞株凋亡的研究

目的 研究不同浓度的三氧化二砷对恶性淋巴瘤细胞株的影响。方法 采用细胞染色方法观察细胞凋亡的形态,原位末端标记法（TUNEL)检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞的DNA含量的形态,原位末端标记法（TUNEL）检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞的DNA含量和bcl－2蛋白的表达。结果 0．5μmol/L-2.0μmol/L三氧化二砷抑制B淋巴瘤细胞株Raji细胞生长,出现细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测Raji细胞亚C1期细胞明显增多,bcl－2蛋白的表达明显降低,呈现剂量时间依赖效应。0．5μmol／L－4．0μmol／L三氧化二砷对T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞无明显作用。结论 三氧化二砷抑制恶性B淋巴瘤细胞生长和促进细胞凋亡的作用。     

bcl-2基因反义寡核苷酸增强放射线诱导Raji细胞凋亡的研究

目的研究bcl-2基因反义寡核苷酸作用淋巴瘤细胞株Raji后,放射线对细胞凋亡的影响.方法bcl-2基因反义寡核苷酸作用Raji细胞后,台盼蓝拒染法计数活细胞;免疫荧光标记观测细胞Bcl-2蛋白水平;用姬姆萨染色和碘化丙啶染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡.结果bcl-2基因反义寡核苷酸与放射线联合作用Raji细胞,显著抑制细胞的生长,并呈时间依赖性,活细胞数分别与单用放射线组及无义寡核苷酸联合放射线组相比,统计学上有显著性差异(P＜0.05).bcl-2基因反义寡核苷酸与放射线联合作用于Raji细胞后显著抑制bcl-2蛋白表达,蛋白水平分别与单用放射线组或无义寡核苷酸联用放射线组比较,差异有显著性(P＜0.05).bcl-2基因反义寡核苷酸与放射线同时作用于Raji细胞后,姬姆萨染色可见凋亡细胞,通过流式细胞仪检测的细胞凋亡率显著增加,分别与单用放射线组或无义寡核苷酸联用放射线组相比,具有显著性差异,P＜0.05.结论bcl-2反义寡核苷酸能增强放射线诱导Raji细胞凋亡.     

脂质体转染bcl-2反义寡核苷酸诱导Raji细胞凋亡的研究

目的:通过脂质体分别转染bcl-2两个靶点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2)及G3139,观察bcl-2反义寡核苷酸对淋巴瘤细胞株Raji凋亡的影响.方法:采用MTT法检测药物的半数抑制率(IC50);免疫荧光标记观察细胞bcl-2蛋白水平;用姬姆萨染色和流式细胞仪观察细胞凋亡.结果:MTT测定显示:ASODN1、ASODN2组IC50值分别与G3139组进行比较无显著差异,P＞0.05.5μmol/L ASODN1、ASODN2作用于Raji细胞72h后,姬姆萨染色均可见凋亡细胞.5μmol/L ASODN1、ASODN2和C3139作用于Raji细胞后,bcl-2蛋白阳性率均明显下降,细胞凋亡率均明显增加,P<0.05,但ASODN1、ASODN2组分别与G3139组进行比较无显著差异,P＞0.05.5μmol/L无义寡核苷酸对Raji细胞的生长活性、bcl-2蛋白水平及细胞凋亡率均无明显影响,P>0.05.结论:针对bcl-2两个靶点的反义寡核苷酸能特异性促进Raji细胞的凋亡,并且与G3139具有近似的反义效应.     

复方中药诱导Burkitt′s淋巴瘤Raji细胞凋亡作用的研究

目的：研究复方中药对Burkitt′s淋巴瘤细胞株Raji细胞的影响，并探讨其机制。方法：采用MTT法检测细胞毒作用，利用Wright-Gimesa染色法，Hoechst 33342荧光染色等手段观察凋亡细胞的形态结构变化，应用透射电镜技术和流式细胞分光光度术进行凋亡定性定量观察，并探讨凋亡抑制基因bcl-2蛋白表达。结果：复方中药对Raji细胞具有明显的生长抑制作用。共同孵育一段时间后，细胞呈现典型的凋亡形态学变化。流式细胞仪分析表明复方中药能使Raji细胞发生凋亡，凋亡率呈现对浓度和时间的依赖性，并发现复方中药使Raji细胞bcl-2基因的表达下调。结论：复方中药能诱导Raji细胞发生凋亡，其作用机制与bcl-2基因表达的下调有关。     

复方中药诱导Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞凋亡作用的研究

目的：研究复方中药对Burkitt’s淋巴瘤细胞株Raji细胞的影响，并探讨其机制。方法：采用MTT法检测细胞毒作用，利用Wright-Gimesa染色法，Hoechst 33342荧光染色等手段观察凋亡细胞的形态结构变化，应用透射电镜技术和流式细胞分光光度术进行凋亡定性定量观察，并探讨凋亡抑制基因bcl-2蛋白表达。结果：复方中药对Raji细胞具有明显的生长抑制作用。共同孵育一段时间后，细胞呈现典型的凋亡形态学变化。流式细胞仪分析表明复方中药能使Raji细胞发生凋亡，凋亡率呈现对浓度和时间的依赖性，井发现复方中药使Raji细胞bcl-2基因的表达下调。结论：复方中药能诱导Raji细胞发生凋亡，其作用机制与bcl-2基因表达的下调有关。     

Bcl-2反义寡核苷酸诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：探讨bcl-2反义寡核苷酸诱导ＨＬ－６０细胞的凋亡。方法：将人工合成的bcl-2反义寡聚脱氧苷酸片段与ＨＬ－６０,细胞共培养,在作用的第０天、３天、５天通过免疫组化法（ＡＰＡＡＰ法）检测细胞内bcl-2蛋白表达水平的变化,通过流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果：bcl-2反这寡核苷酸可下调ＨＬ－６０细胞内bcl-2的蛋白表达水平,其作用与其浓度和时间呈正相关,同时可诱导细胞凋亡,而bcl-2反义寡核苷酸及对照无此作用。     

bcl-2反义寡核苷酸增强足叶乙苷诱导原代白血病细胞凋亡的研究

目的：研究bcl-2的反义寡核苷酸对足叶乙苷(VP(16)诱导原代培养的急性白血病(AL)细胞凋亡的影响。方法：用细胞计数法观察细胞的生存情况；用免疫荧光标记法通过流式细胞仪观测细胞bcl-2蛋白水平；用形态学观察及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：靶向bcl-2 mRNA翻译起始区与靶向蛋白编码区的两个反义寡核苷酸分别与VP(16)联合作用AL细胞48 h，细胞的生存受到明显的抑制，分别同无关寡核苷酸(NS-ODN)联合VP(16)组、单用VP(16)组进行比较，差异有显著性(P＜0.05)。这两个不同靶点的反义寡核苷酸分别与VP(16)联用，均能明显下调AL细胞bcl-2蛋白的表达，并且联合作用AL细胞48 h的凋亡细胞百分率分别与NS-ODN联合VP(16)组、单用VP(16)组进行比较，差异有显著性(P＜0.05)。结论：针对bcl-2 mRNA翻译起始区和蛋白编码区两个靶点的反义寡核苷酸能增强VP(16)诱导急性白血病细胞的凋亡。     

hTERT基因反义核酸对顺铂诱导Raji细胞凋亡的影响

目的利用人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的反义寡核苷酸(ASODN)抑制Raji细胞端粒酶活性后,探讨顺铂对Raji细胞凋亡的影响.方法采用苔盼蓝拒染法观察hTERT ASODN与顺铂联合作用对Raji细胞系生长的影响;姬姆萨染色法观察凋亡细胞的形态变化;琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪分析细胞凋亡.结果hTERT ASODN作用于Raji细胞24 h再加入顺铂,对细胞抑制明显增强(P＜0.05).加入顺铂作用后48 h,细胞出现典型的凋亡形态学改变,经琼脂糖凝胶电泳即可见到DNA梯形条带.凋亡细胞百分率(25.24±1.58)%,与正义寡核苷酸与顺铂联合作用组、单用顺铂作用组比较有显著性差异(P＜0.01).结论hTERT基因反义寡核苷酸能促进顺铂诱导Raji细胞凋亡.     

蝎毒对白血病Raji细胞株的生长抑制和诱导凋亡作用的研究

目的：采用人类B淋巴细胞株Raji细胞作为实验模型，用东亚钳蝎毒（BMK）作为干预手段，观察其对Raji细胞的生长抑制和凋亡诱导作用，并探讨其作用机制。方法：MTT法，Wright-Gimesa染色法，Hoechst 33342和PI荧光染色，透射电镜技术和流式细胞分光光度术。结果：BMK（12．5mg/L-200.0mg/L)可明显地抑制Raji细胞生长和诱导细胞凋亡（P＜0．05，P＜0．01），并且其作用强度在一定范围内呈现对浓度和时间的依赖性。流式细胞仪分析显示BMK能下调Raji细胞bcl-2蛋白表达。结论：BMK能抑制Raji细胞生长和诱导细胞凋亡，其作用机制可能与bcl-2蛋白表达的下降有关。