内皮抑素联合放射治疗对A549细胞生长及HIF-1表达的影响

背景与目的 已有研究表明,放射治疗会诱导肿瘤细胞高表达HIF-1.本研究通过联合使用放射治疗和endostatin联合处理肿瘤细胞,研究这两种治疗方法在体外对人肺腺癌细胞A549周期及HIF-1的影响和机制.方法 流式细胞仪分析内皮抑素对A549细胞增殖周期的影响.联合内皮抑素(ES)和放射治疗(RT)处理肺腺癌细胞A549,四唑氮蓝法(MTT)检测处理前后细胞生长抑制率的变化,酶联免疫吸附法(Elisa)检测处理前后细胞中HIF-1的表达情况.结果 内皮抑素对A549细胞具有细胞周期阻滞作用,可将其阻滞于G2/M期和S期.各种处理方法对肺腺癌细胞A549的生长抑制作用随时间的增加而加强,其中联合应用放射治疗与内皮抑素治疗对肺腺癌细胞A549的生长抑制作用更为明显.联合放射治疗和内皮抑素处理肺腺癌A549细胞,可以使该细胞系HIF-1的含量较单用放射治疗少.结论 内皮抑素联合放射治疗对抑制人肺腺癌A549细胞的生长具有协同作用,这种协同作用可能来源于:内皮抑素可以使A549细胞阻滞于G2/M期及S期,从而抑制A549细胞的增殖;内皮抑素可以抑制肿瘤细胞本身具有的以及放射后诱导的HIF-1的产生,HIF-1是肿瘤细胞耐受放化疗的因素之一,因此提高放射治疗的疗效.     

重组人血管内皮抑素对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响

目的：探讨重组人血管内皮抑素（恩度）对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测恩度对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测肺腺癌A549细胞的凋亡率,比较各浓度药物对肺腺癌A549细胞的诱导凋亡作用。结果：恩度可以抑制肺腺癌A549细胞的生长,且呈时间剂量依赖性。恩度可以诱导肺腺癌A549细胞的凋亡,随浓度增加、作用时间的延长,凋亡率增加,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．001）。结论：恩度对肺腺癌A549细胞的生长具有明显的抑制作用,主要通过诱导肺腺癌A549细胞的凋亡引起。     

内皮抑素对NSCLC细胞系中VEGF受体2表达的影响及其放射增敏效应机制研究

目的 研究内皮抑素对NSCLC细胞(人肺腺癌A549细胞、人肺鳞癌Calu-1细胞)中VEGF受体2(VEGFR₂)表达影响,并探索其放射增敏效应的可能机制。方法 CCK8法检测内皮抑素对细胞增殖抑制作用,计算24 h的20%药物抑制浓度(IC₂₀);采用RT-PCR及蛋白印迹法检测各组VEGFR₂、相关信号通路及HIF-1α mRNA与蛋白表达变化;克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,流式细胞术检测凋亡及周期分布。多样本均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用两样本均数t检验。结果 经内皮抑素处理后,Calu-1细胞增殖活力明显下降(F=50.36,P<0.01),IC₂₀=296.5 μg/ml;VEGFR₂和HIF-1αmRNA与蛋白表达水平均受抑制(F=25.43、10.44,P值均<0.05);同时Akt、ERK1/2和p38的蛋白磷酸化水平均减低(F=2.89、0.24、1.09,P值均<0.05);其放射增敏比为1.38;凋亡率、G₂+M期阻滞增加(F=44.15、104.24,P值均<0.01)。此外,与Calu-1细胞相比,内皮抑素对A549细胞放射增敏比为1.09。结论 内皮抑素能促进VEGFR₂高表达Calu-1细胞凋亡并能增强放射敏感性,对低表达的A549细胞效果有限。     

Aurora A反义寡核苷酸对人肺癌细胞系A549细胞生长与细胞周期的影响

目的：探讨Aurora A基因表达的下调对肺癌细胞生长和细胞周期分布的影响。方法：用脂质体瞬时转染法介导Aurora A反义硫代磷酸寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides,ASODN）处理肺腺癌A549细胞,RT-PCR及Western-blot方法检测Aurora A mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布的变化,四氮唑盐法（MTT）检测转染前后细胞生长抑制率变化。结果：Aurora A反义寡核苷酸作用于A549细胞后,细胞的生长抑制率在一定范围内呈剂量和时间依赖性,其中48h的IC50值约为300nmol/L,在此浓度和时间下,Aurora A反义寡核苷酸可明显降低Aurora A mRNA和蛋白的表达,且细胞周期阻滞于G2/M期和S期。结论：下调Aurora A表达可抑制肺腺癌细胞系A549的增殖,同时导致细胞阻滞于G2/M期及S期。     

沉默Toll样受体4表达对肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的 探讨Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）对肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响。方法 体外化学合成针对TLR4的小干扰RNA（TLR4-siRNA）,通过脂质体介导转染人肺腺癌A549细胞。采用Real-time PCR和流式细胞仪检测分析干扰后A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达情况。另外,采用流式细胞仪检测分析干扰72 h后细胞凋亡率和细胞周期的变化。结果 与对照组比较,转染TLR4-siRNA后,A549细胞中TLR4 mRNA及蛋白的表达显著下降（P<0.05）,细胞的凋亡率明显增加[（1.73 ± 0.32）% vs.（7.40 ± 0.75）%（P<0.01）],细胞周期出现G0/G1期停滞[（48.21 ± 1.15）%vs.（66.26 ± 2.45）%（P<0.05）],同时S期细胞比例明显减少[（34.25 ± 1.46）% vs.（22.63 ± 3.39）%（P<0.05）]。结论 TLR4-siRNA能有效沉默A549细胞中TLR4的表达,在促进细胞凋亡的同时能够影响细胞周期分布从而抑制肿瘤细胞的生长,特异性干预TLR4基因的表达有望成为治疗肺癌的一种新手段。     

肺腺癌穿膜蛋白 125 通过高甲基化介导 NF-κB 信号通路的激活降低对 地西他滨的敏感性

目的：探讨穿膜蛋白125（transmembrane protein125,TMEM125）在肺腺癌组织与A549细胞中的表达,以及影响细胞的增殖和侵袭能力的分子机制。方法：从癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据库收集肺腺癌数据包,下载临床信息及基因表达谱数据。分析 TMEM125在肺腺癌组织中的表达及其与患者总生存期的相关性。构建 TMEM125过表达 A549细胞株,以CCK-8法、细胞划痕实验检测TMEM125过表达对肿瘤细胞的增殖和迁移能力的影响;流式细胞术检测TMEM125过表达对A549细胞的细胞周期和凋亡的影响。WB检测TMEM125过表达对下游NF-κB信号通路、凋亡蛋白的影响;免疫共沉淀法（co-immunoprecipitation,Co-IP）检 测 TMEM125 与 NF- κB 抑 制 因 子 结 合 Ras 样 2（NF- κB inhibitor interacting Ras-like 2,NKIRAS2）的相互作用。利用TNFα（10 ng/ml）处理TMEM125过表达A549细胞,CKK-8、流式细胞术及WB检测其对细胞增殖、凋亡以及NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。去甲基化试剂地西他滨处理A549细胞,qPCR和WB检测TMEM125基因和蛋白的表达。结果：TMEM125 mRNA在肺腺癌组织中表达水平显著低于正常组织（P<0.001）,启动子甲基化水平显著高于正常组织（P<0.001）,并且低、中表达患者总生存期显著低于高表达患者（P<0.001）。过表达TMEM125抑制了A549细胞的增殖和迁移（P<0.01）,增加细胞 G2/M 期,促进细胞凋亡（P<0.01）;过表达 TMEM125 与 NKIRAS2 相互作用,显著抑制 NF-κB 的活性（P<0.01）;地西他滨处理 A549 细胞可促进 TMEM125 表达并且抑制细胞增殖（P<0.01）。结论：启动子高甲基化水平降低了TMEM125基因表达,导致其抑制NF-κB活性功能和抑制细胞增殖的作用下降,并且降低了细胞对地西他滨的敏感性。     

JAK2/STAT3信号通路对A549细胞株中HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达的影响

目的：研究人肺腺癌细胞A549细胞中JAK2/STAT3信号通路对HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达的影响。方法：AG490处理在氧含量正常及缺氧条件下（CoCl2200μmol/L）48h后Westernblot法测定A549细胞中HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达变化（分组为对照组、AG49050μmol/L、AG490100μmol/L、CoCl2、CoCl2＋AG49050μmol/L和CoCl2＋AG490100μmol/L组）。IL-6（3.85nmol/L）处理A549细胞24h后,检测细胞中STAT3、p-STAT3、HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达变化（分组为对照组,IL-6组）。结果：JAK2特异性抑制剂AG490作用48h后,相对于对照组AG490能够下调HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达,且呈浓度依赖性;随浓度的升高,抑制作用更明显。缺氧条件下（CoCl2200μmol/L）能够上调HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达。AG490也能够下调CoCl2诱导的HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达,且呈浓度依赖性,随浓度的升高,抑制作用更显著。IL-6能够上调HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达。结论：在人肺腺癌细胞A549细胞中,缺氧可上调HIF-1α和VEGF蛋白表达。JAK2/STAT3信号通路对HIF-1α和VEGF蛋白的表达具有调节作用。     

低浓度表柔比星对肺腺癌A549细胞增殖及调控的影响

目的:探讨低浓度表柔比星对肺腺癌A549细胞增殖及调控的影响。方法:应用Western-blot及RT-PCR方法检测低浓度表柔比星处理后的肺腺癌A549细胞中caspases-3、p21、RARα、nm23、bcl-2、cy-clinD3表达的变化,及MTT法检测细胞的增殖抑制情况。结果:低浓度表柔比星处理后的肺腺癌A549细胞中caspases-3、p21、RARα、nm23表达增强,bcl-2、cyclinD3表达减弱,细胞出现明显的增殖抑制。结论:低浓度表柔比星能够使肺腺癌A549细胞增殖、周期调控等方面发生变化,使肿瘤细胞总体上向良性转化。     

褪黑素对肺癌A549细胞诱导的血管内皮细胞增殖的影响

目的探讨褪黑素在体外共培养条件下对肺腺癌A549细胞诱导血管内皮细胞增殖的影响及相关机制。方法建立肺腺癌A549细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVECS）ECV-304共培养模型,实验共分成四组：Con组(对照组),nM组(褪黑素终浓度1 nM/L),μM组(褪黑素终浓度1 μM/L),mM组(褪黑素终浓度1 mM/L)。采用BrdU法观察不同浓度褪黑素对血管内皮细胞（ECV-304）增殖的影响,细胞迁移实验观察褪黑素对血管内皮细胞活力的抑制作用,ELISA法检测褪黑素对肺腺癌细胞VEGF蛋白表达的影响。结果低浓度的MLT(1 nM/L)对HUVECs增殖无明显影响,但高浓度 MLT(1 mM/L)明显抑制HUVECs增殖,并有浓度依赖倾向; 高浓度的褪黑素明显降低肺腺癌A549细胞培养液中VEGF的表达。 结论高浓度的褪黑素可以抑制肺腺癌细胞诱导的血管内皮细胞的增殖及迁移,其作用机制可能与褪黑素抑制肺腺癌细胞VEGF的表达有关。     

蛋白激酶A活性升高对人肺腺癌A549细胞株增殖的影响

目的 探讨蛋白激酶A(PKA)活性升高对人肺腺癌A549细胞株增殖的影响.方法 用20、40、80μmol/L PKA活性激动剂Forskolin诱导A549细胞后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测Forskolin作用下A549细胞增殖的变化;用流式细胞仪检测Forskolin作用下细胞周期分布的变化.结果 在Forskolin作用下,PKA活性升高使A549细胞的增殖显著下降(P<0.05);在40μmoL/L Forsko-lin作用A549细胞24 h后,流式细胞仪检测实验组G0/G1期细胞(82.14±1.18)%,S期细胞(5.45±0.22)%,G2/M期细胞(12.33±1.21)%;对照组G0/G1期细胞(64.50±2.18)%,S期细胞(8.54±0.45)%,G2/M期细胞(26.31±1.08)%,两组间比较差异有统计学意义(G1期P<0.05,S期P<0.05,G2期P<0.05).结论 PKA活性升高能够显著降低人肺腺癌A549细胞株的活力,使其处于G1期阻滞,细胞增殖受到明显抑制.     

重组人血管内皮抑制素对肺微血管内皮细胞增殖及其周期分布的影响

目的：探讨重组人血管内皮抑制素（恩度）对肺微血管内皮细胞增殖的影响及机制。方法：以人非小细胞肺癌细胞系Ａ５４９和人肺微血管内皮细胞系ＨＰＭＥＣ建立非接触式共培养血管模型,并在此模型上应用ＭＴＴ方法研究肿瘤血管内皮细胞的增殖,以流式细胞仪检测血管内皮细胞的周期分布,以ＲＴ-ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测血管内皮细胞的ｃｙｃｌｉｎＤ１转录水平和蛋白表达水平的变化。结果：恩度能明显抑制共培养模型下血管内皮细胞的增殖,并呈剂量依赖性;肿瘤内皮细胞Ｇ０／Ｇ１细胞数增多,Ｓ期细胞显著减少;转录和蛋白检测水平ｃｙｃｌｉｎＤ１呈剂量依赖性下调。结论：恩度能抑制肿瘤血管内皮细胞增殖,且这一作用与抑制ｃｙｃｌｉｎＤ１表达,使肿瘤血管内皮细胞滞留于Ｇ０／Ｇ１期有关。     

肺癌组织中HIF-1α的表达及低氧条件下A459细胞miR-15a的表达

目的:研究肺癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达以及A549肺癌细胞在常氧和低氧条件下miR-15a的表达。方法:取30例肺癌患者的石蜡切片组织样本(其中有肺癌的组织及其相对应正常肺组织）,进行苏木精-伊红染色和免疫组化染色来观察肺癌组织和正常肺组织HIF-1α染色的强弱程度。将A549细胞分别在培养条件为37℃、5％CO2的常氧条件下和培养条件为37℃、5％CO2、1％O2的低氧条件下培养48h 后通过实时荧光定量PCR技术来检测miR-15a的表达。结果:HIF-1α主要在肺癌细胞胞核及细胞质中表达,呈棕黄色颗粒状,有明显的异质性,肿瘤间质细胞也可见少量表达。癌旁正常的肺组织无 HIF-1α的表达。在30例肺癌组织中,有8例HIF-1α表达为（-）,7例表达为（+）,9例表达为（++）,6例表达为（+++）,阳性率为73%。miR-15a在正常氧条件下培养的A549细胞中相对表达量为1.82546±1.62784,在低氧条件下培养的A549细胞相对表达量为0.17598±0.11046。MiR-15a在低氧条件下培养的A549细胞中表达量低于在常氧条件下培养的A549细胞中的表达量。结论:肺癌组织中HIF-1α高表达,而正常肺组织中无HIF-1α的表达。表明肺癌中存在着缺氧微环境。在低氧状态下培养48h的肺癌A549细胞与常氧状态下培养48h的A549细胞比较,miR-15a的表达是明显下调的,表明在缺氧时肿瘤细胞中miR-15a的表达是下调的,也提示miR-15a可能作为一个肺癌早期筛查、早期诊断的生物学标志物,并为肺癌靶向治疗提供线索。     

低氧环境下肺腺癌A549细胞对顺铂化疗抵抗的实验研究

目的:探讨低氧对肺癌A549细胞顺铂化疗抵抗作用,并分析可能机制.方法:将A549细胞分为常氧、常氧顺铂、低氧、低氧顺铂组.在常氧顺铂组和低氧顺铂组,加入不同浓度顺铂(10、40、80、100、200 μmol/L)后,采用CCK8法测定半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)和抑制率.流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡率.RT-PCR和Western Blot检测各组缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)的转录和蛋白表达变化.结果:常氧顺铂组IC50为25.82nmol/L,低氧顺铂组为39.98 nmol/L,常氧顺铂组和低氧顺铂组之间各个浓度顺铂抑制率有统计学差异(P＜0.05).低氧顺铂组的细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞较常氧顺铂组减少.RT-PCR和Western Blot显示,低氧组HIF-1α、VEGF、ERCC1转录和表达水平较常氧组明显上升(P＜0.01),顺铂作用后表达均下降,在常氧顺铂组和低氧顺铂组之间有显著差异性(P＜0.01).相关分析显示HIF-1α、VEGF、ERCC1之间有显著正相关关系(P＜0.01).结论:低氧诱导A549细胞对顺铂化疗抵抗,与低氧激活HIF-1α、VEGF及ERCC1高表达有关.     

HIF-1α基因沉默对人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响

目的观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因沉默对肺癌的抑瘤效应和survivin表达的影响。方法将实验用肺腺癌A549细胞分为空白对照组、无意义序列转染组和实验组,接种裸鼠,建立裸鼠荷瘤模型,观测HIF-1α-MiRNA对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用和对survivin表达的影响。采用免疫组化SP法,检测HIF-1α和survivin蛋白在裸鼠移植瘤中的表达。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测HIF-1α和survivin mRNA的表达。采用原位末端标记（TUNEL）法检测肿瘤组织中细胞凋亡。结果实验组裸鼠肿瘤的生长速度较空白对照组、无意义序列转染组明显减慢（P〈0.05）。接种60 d后处死裸鼠,实验组裸鼠的肿瘤重量为（0.59±0.28）g,明显轻于空白对照组[（1.90±0.18）g]和无意义序列转染组[（1.66±0.24）g,P〈0.01]。实验组肿瘤组织中HIF-1αmRNA和蛋白的相对表达量分别为（0.45±0.04）%和（24.56±5.83）%,survivin mRNA和蛋白的相对表达量分别为（0.32±0.02）%和（29.08±3.99）%,均明显低于空白对照组、无意义序列转染组（P均〈0.05）。但实验组肿瘤组织中凋亡细胞的数量显著高于对照组。结论以HIF-1α为靶点的基因治疗,可能通过下调靶基因survivin的表达促进肺癌细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长的作用。     

PEDF下调 HIF-1α表达抑制缺氧状态下NSCLC细胞增殖、迁移的作用机制

目的:研究色素上皮衍生因子（PEDF）对缺氧状态下非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法:体外培养NSCLC细胞A549,氯化钴（CoCl2）100 μmol/L 模拟缺氧环境。实验分为4组:正常对照组（A组）、氯化钴干预组（B组）、氯化钴＋PEDF 50 ng/ml干预组（C 组）及氯化钴＋PEDF 200 ng/ml干预组（D组）。MTT检测各组细胞增殖能力,进行划痕实验,在光镜下观察实验组和对照组细胞的移行情况;进行Transwell小室侵袭实验,计算细胞穿透数;进行ELISA法检测各组细胞培养液上清中HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平。结果:细胞增殖能力:B组较A组增加,C组较B组降低,D组较C组降低,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;细胞迁移能力:B组较A组增加,C组较B组降低,D组较C组降低,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;细胞穿透数:B组较A组增多,C组较B组减少,D组较C组减少,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;HIF-1α和VEGF的表达水平:B组较A组升高,C组较B组下降,D组较C组下降,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:肺癌A549细胞在缺氧环境较常氧具有更强的增殖力和移行能力;可以分泌HIF-1α,HIF-1α对VEGF的表达有一定的促进作用。PEDF对缺氧状态下A549细胞高表达的VEGF具有一定抑制作用,且该抑制作用可能与PEDF调控HIF-1α有关。     

c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:免疫组化和qRT-PCR检测胃癌组织及其癌旁组织中c-Myc的表达;qRT-PCR和Western blot检测人胃黏膜细胞GES-1和人胃癌细胞HGC-27、AGS、SGC-7901中c-Myc的表达;HGC-27细胞转染siRNA-NC和siRNA-c-Myc。48 h后,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测细胞低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、CXC亚家族受体4（cysteine X cysteine receptor 4,CXCR4）和基质细胞衍生因子（stromal cell derived factor-1,SDF-1）蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中c-Myc mRNA表达和免疫组化评分升高（P＜0.05）。与GES-1组相比,HGC-27组、SGC-7901组和AGS组中c-Myc mRNA和蛋白表达均升高（P＜0.05）。与siRNA-NC组相比,siRNA-c-Myc组细胞在24 h、48 h和72 h增殖能力减弱（P＜0.05）,G0/G1期细胞比例升高（P＜0.05）,G2/M和S期细胞比例降低（P＜0.05）,迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P＜0.05）,HIF-1α、CXCR4和SDF-1蛋白表达降低（P＜0.05）。结论:敲低c-Myc可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期阻滞,该作用可能是通过抑制HIF-1α/CXCR4通路实现的。     

HIF-1α抑制剂YC-1对人骨肉瘤细胞Saos2和U2-OS增殖和凋亡的影响

目的:应用缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）抑制剂YC-1处理人骨肉瘤细胞Saos2和U2-OS，观察不同药物浓度对人骨肉瘤细胞系Saos2和U2-OS细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响及其机制。方法:人骨肉瘤细胞系Saos2和U2-OS分对照组和实验组。对照组细胞1%氧气浓度低氧培养，实验组细胞施加HIF-1α抑制剂YC-1干预，设浓度梯度。CCK-8法检测不同药物浓度对Saos2和U2-OS细胞活力及增殖的影响；流式细胞术检测YC-1对Saos2和U2-OS细胞周期和凋亡的影响；Western blot对FXR1、G3BP1、APAF1、Cleaved Caspase-3蛋白的表达进行相对定量分析。结果:CCK-8检测结果显示，YC-1对人骨肉瘤Saos2和U2-OS细胞有显著的增殖抑制作用，且呈明显的剂量依赖效应。不同浓度的YC-1处理细胞后，均可使各处理组G1期细胞增多，S期细胞减少，且呈剂量依赖效应(P＜0.05)。不同浓度的YC-1处理细胞后，与对照组相比，各实验组FXR1、G3BP1、APAF1蛋白表达显著下降(P＜0.05)，而Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增高(P＜0.05)。结论:YC-1可以将人骨肉瘤细胞株Saos2和U2-OS细胞阻滞于G1期，影响细胞周期进程，抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。HIF-1α对人骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响可能是通过上调FXR1、G3BP1、APAF1的表达而实现，而YC-1抑制了HIF-1α的表达从而使Cleaved Caspase-3的表达增高诱导细胞凋亡。HIF-1α及FXR1、G3BP1、APAF1、Cleaved Caspase-3有望成为骨肉瘤治疗的新靶标。