急性非淋巴细胞白血病与HLA-DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例（６６７％）表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＋的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１、Ｍ５ａ有密切关系。ＨＬＡ－ＤＲ－组缓解机会大于ＨＬＡ－ＤＲ＋组（Ｐ＜００５），检测ＨＬＡ－ＤＲ抗原不仅有利于ＡＮＬＬ的诊断而且有助于判断预后。     

ICAM—1,HLA—ABC,HLA—DR在乙型肝炎肝细胞表达的意义

为进一步探讨ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＨＬＡ－ＤＲ,ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞损伤中的作用,利用标记的链菌素亲生物蛋白（ＬＳＡＢ）法对９８例乙型肝炎肝穿组织进行ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＨＬＡ０－ＤＲ,ＩＣＡＭ－１检测。结果显示ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞存在广泛表达,且与肝脏病变程度有关,ＨＬＡ－ＤＲ也有一定程度表达,其阳性率分别在８５．７％、８３．７％、２６．５％。阳性表达多位于肝细胞炎性病变或     

ICAM—1／LFA—1和HLA—DR在蕈样肉芽肿中的表达及其意义

目的：为探讨粘附分子在蕈样肉芽肿（ＭＦ）病理形成机制中的作用。方法：采用免疫组化技术，检测了１６例ＭＦ皮损部位ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１和ＨＬＡ－ＤＲ的表达。结果：ＩＡＣＭ－１／ＬＦＡ－１和ＨＬＡ－ＤＲ在ＭＦ表皮和／或毛囊上皮角朊细胞 不同程度的表达，其中ＩＣＡＭ－１的表达与ＭＦ亲表皮性明显相关。结论Ｌ：ＩＣＡＭ／１ＬＦＡ－１在ＭＦ亲表皮性形成过程中可能起着重要作用。     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA—DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ－ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康者血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究

目的：进一步探讨再生障碍性贫血（再障）的免疫发病机制，阐明细胞免疫、造血细胞因子在再障患者中发生变化的基础与临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用改良ＡＰＡＡＰ法及酶联免疫试剂盒，采用ＥＬＩＳＡ法对３８例再障患者及２０名正常人外周血Ｔ细胞亚群，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达以及外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平进行测定。结果：再障患者外周血ＣＤ４细胞减低、ＣＤ８细胞增高、ＣＤ４／ＣＤ８降低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。再障患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。相关分析发现Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关，而与ＩＦＮα呈负相关；ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４细胞呈负相关；ＴＮＦα与ＣＤ８细胞呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关；ＩＬ－８与ＣＤ８细胞及ＨＬＡ－ＤＲ呈正相关。结论：细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在再障发病中起一定的作用。     

白血病多药耐药基因表达与细胞表面分化抗原表达的关系

作者对３７例未治白血病同时检测多药耐药基因ｍＲＮＡ水平及细胞表面分化抗原，探讨两种标志表达的关系及意义。发现在急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中多药耐药基因表达增加与ＣＤ３４抗原表达相关，两种标志皆为阳性表达组（ＭＤＲ１＾＋／ＣＤ３４＾＋），化疗敏感性明显降低。结合文献报告所见，认为ＭＤＲ１＾＋／ＣＤ３４＾＋可做为ＡＮＬＬ化疗不敏感的预后指标。在急性淋巴细胞白血病中，多药耐药基因表达增加与ＣＤ３、     

活动性类风湿性关节炎患者免疫检测分析

本文对活动性类风湿性关节炎（ＲＡ）患者的部分细胞及体液免疫指标进行了检测分析。微量全血血流式细胞法检测结果表明，ＲＡ患者外周血ＣＤ３细胞变化不显著，而ＣＤ８及ＣＤ４细胞变化明显，存在不同类型多数患者ＣＤ８细胞明显高于正常；外周血淋巴细胞ＨＬＡ－ＤＲ及ＣＤ２５表达显著高于正常；关节液中也检出ＣＤ８细胞高于ＣＤ４细胞，且ＨＬＡ－ＤＲ高表达。ＥＬＩＳＡ法检测血清抗Ⅱ型胶原抗体、乳胶凝集法检测ＲＦ及免疫单     

多表位BCR—ABL融合基因的合成,克隆及表达研究

慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３     

抗bcl－2核酶在HL－60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用，开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）基因定向克隆于真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ，构成ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－６０细胞。用Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹，ＲＮＡ斑点杂交法观察ＲＺ基因在ＨＬ－６０细胞内表达，并通过电镜、流式细胞仪（ＦＣＭ），光镜和ＤＮＡ电泳观察ＲＺ对ＨＬ－６０细胞的影响。结果：①ＲＺ在转染ＨＬ－６０后７２小时得以表达，细胞内ｂｃｌ－２蛋白合成受到抑制。②在ＦＣＭ图谱上可见到明显的凋亡峰，形态观察ＲＺ处理的ＨＬ－６０细胞呈典型的凋亡形态。③足叶乙甙（促凋亡）敏感性试验表明，与未转染的细胞和转染空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的细胞相比，转染ｐＤＯＲ－ＲＺ的细胞ＤＮＡ电泳易出现梯状条带。结果说明ＲＺ基因通过逆转录病毒表达载体导入ＨＬ－６０细胞后可成功地表达并抑制ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的合成，并促进ＨＬ－６０细胞凋亡     

多发性骨髓瘤患者外周血B细胞激活状态及其对白细胞介素4的反应

用间接免疫荧光染色流式细胞仪分析技术，检测了２８例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者以及２０名健康对照者外周血Ｂ细胞（ＣＤ２０＾＋）以及Ｂ，Ｔ细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＾＋细胞比率。发现ＭＭ患者外周血中Ｂ细胞比率（９．３８±２．８３％）以及Ｂ，Ｔ细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＾＋细胞比率（２６．０４±６．８０％和１２．５０±４．２２％）明显低于对照组中Ｂ细胞的比率（１２．２０±２．９２％）及Ｂ，Ｔ细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＾＋细胞...     

溃疡性结肠炎结肠粘膜HLA—DR抗原表达

本文检测了６０例溃疡性结肠炎的３０例正常结肠粘膜上皮细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达。结果显示，３０例正常结肠粘膜上皮及腺体不表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，而６０例ＵＣ中有３２例结肠粘膜上皮和腺体不同程度表达该抗原。其中，４２例活动性ＵＣ中２９例表达，１８例非活动ＵＣ仅３例表达，同时发现ＵＣ结肠粘膜上皮表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原还与粘膜炎症程度成正比。结果提示，细胞免疫机制在ＵＣ的发病机理中起重要作用。     

严重型再生障碍性贫血患者骨髓和外周血 HLA-DR~ T 细胞的变化及其淋巴细胞造血抑制活性的研究

目的：进一步阐明免疫紊乱在严重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）发病中的作用。方法：对１３例初诊ＳＡＡ、７例抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）治疗后恢复期ＳＡＡ（ｒＳＡＡ）患者骨髓和外周血及对照组（包括９名骨髓对照和１１名外周血对照）的ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞进行检测，并对部分患者和对照组刺激的外周血去单核细胞的单个核细胞培养上清液（ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ）的造血活性进行检测。结果：初诊ＳＡＡ患者骨髓及外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者骨髓和外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞较初诊ＳＡＡ下降，但仍高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＳＡＡ患者骨髓内ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于外周血（Ｐ＜０．００１）；与对照组比较，初诊的ＳＡＡ患者外周血ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ具有显著的抑制作用（Ｐ＜０．００１），而ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用明显减弱。结论：ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞在ＳＡＡ的发病中可能发挥重要的作用。     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA－DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ一ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ一ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ一ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康各血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此法特异性强、重复性好（阳性血清ＣＶ为４．７％，阴性血清ＣＶ为０％），抗体涌度范围１：５～１：４０。     

溃疡性结肠炎结肠粘膜HLA－DR抗原表达

本文检测了６０例溃疡性结肠炎和３０例正常结肠粘膜上皮细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达。结果显示，３０例正常结肠粘膜上皮及腺体不表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原；而６０例ＵＣ中有３２例结肠粘膜上皮和腺体不同程度表达该抗原。其中，４２例活动性ＵＣ中２９例表达，１８例非活动性ＵＣ仅３例表达。同时发现ＵＣ结肠粘膜上皮表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原还与粘膜炎症程度成正比。结果提示，细胞免疫机制在ＵＣ的发病机理中起重要作用。     

免疫表型在急性髓细胞白血病中的预后价值

为探讨免疫表型在急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）中的预后价值，分析了５７例住院成人ＡＭＬ患者的初诊免疫表型与完全缓解（ＣＲ）率和ＣＲ期的关系。结果表明，各髓系抗原的表达率依次为ＣＤ１３＞ＣＤ３３＞ＳＩ６＞ＣＤ６５＞ＣＤ１５＞ＣＤ１１ｂ＞ＣＤ１４。干／祖细胞分化抗原ＣＤ３４的表达率为４２％，以Ｍ１和Ｍ５最高（８０％和８６％），Ｍ３则几乎不表达ＣＤ３４和ＨＬＡ－ＤＲ。淋系抗原ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ１０、ＣＤ１９和ＣＤ２２在部分ＡＭＬ中阳性。单参数统计分析显示，ＣＤ７＋、ＣＤ１１ｂ＋和ＣＤ３４＋的病例较阴性病例具有低ＣＲ率（Ｐ＜０．０５，＜０．０１，＜０．００５）和短ＣＲ期，表明免疫表型可以作为临床上判断ＡＭＬ预后的参考指标之一。     

HLA—DR基因反义RNA导入脐血干／祖细胞对HLA—DR抗原表达的影响

目的：探讨组织相容性抗原Ⅱ类（ＭＨＣ－Ⅱ）基因反义ＲＮＡ是否可调控脐血细胞ＭＨＣ－Ⅱ类基因的表达及降低脐血细胞的免疫原性和脐血细胞移植时发生移植物抗宿主反应（ＧＶＨＲ）的程度。方法：应用分子克隆技术构建了含人ＨＬＡ－ＤＲβ基因的逆转录病毒表达载体，经过狭缝杂交、电泳、酶切分析鉴定，获得了ＨＬＡ－ＤＲβ基因反义ＲＮＡ重组体，用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（脂质体）将重组体导入包装细胞ＰＡ３１７。结果：产重组病毒的细胞ＰＡ３１７的病毒滴度可达１×１０５ｃｆｕ／ｍｌ。用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）可从转染的脐血干细胞中扩增出ＤＲ－β基因ｃＤＮＡ，说明反义ＲＮＡ重组体目的基因已有效表达。用流式细胞仪测定转染的脐血细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原阳性细胞率为２８％（对照组为４５％），其抑制率为３８．２％。结论：导入脐血干细胞的ＨＬＡ－ＤＲ基因反义ＲＮＡ重组体成功地降低了其ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达程度，为临床上降低脐血移植的ＧＶＨＲ提供了理论依据和实验基础。     

骨髓增生异常综合征免疫表型的研究

目的评价免疫表型测定在骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）诊断及预后判断中的价值。方法应用一组单克隆抗体采用免疫荧光法对３２例ＭＤＳ患者骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）进行免疫表型检测。结果ＭＤＳ患者髓系抗原表达明显增高,淋巴细胞抗原表达相对减少,而且随ＭＤＳ恶化,ＦＡＢ亚型的抗原表达出现规律性变化,随ＲＡ／ＲＡＳ向ＲＡＥＢ再向ＲＡＢＥｔ转化,较早期的髓系抗原（如ＣＤ１３、ＣＤ３３）逐渐增加,较晚期出现的髓系抗原逐渐减少,同时伴有Ｔ淋巴细胞抗原表达减少;ＲＡ／ＲＡＳ阶段骨髓ＣＤ３４＋细胞与正常组相比无显著增高,ＲＡＥＢ和ＲＡＥＢｔ阶段ＣＤ３４＋细胞数明显增高;较早期骨髓细胞（即祖细胞）表面抗原ＣＤ３８、ＨＬＡＤＲ、ＣＤ９９Ｒ、ＣＤ９在ＭＤＳ表达明显增加。ＣＤ３４和其它早期抗原表达增高者,预后较差,易于转化为白血病。结论ＭＤＳ患者骨髓ＭＮＣ表面标记的检测有利于ＭＤＳ的诊断,也可协助预后判断。     

不同造血生长因子对脐血有核细胞体外扩增作用的实验研究

目的：探讨造血生长因子不同组合方式对脐血有核细胞的扩增作用以及脐血扩增后Ｔ淋巴细胞和ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞变化情况。方法：在脐血有核细胞体外培养体系中分别加入不同组合的细胞因子，观察细胞数、ＣＤ３４＋细胞、ＣＦＵ－ＧＭ、Ｔ４（ＣＤ４＋ＣＤ８－ＣＤ３＋）细胞、Ｔ８（ＣＤ４－ＣＤ８＋ＣＤ３＋）细胞以及ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞的变化。结果：脐血有核细胞在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的作用下扩增效果最佳。结论：脐血有核细胞在各种造血生长因子的协同作用下可以在体外扩增。脐血扩增后Ｔ４、Ｔ８细胞减少，可能会降低脐血移植急性ＧＶＨＤ发生，但ＨＬＡ－ＡＢ和ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数急剧上升，增加了免疫排斥的可能性。     

细胞免疫表型检测在急性髓系白血病诊断中的应用价值

用多种髓性单抗对１８３例初发急性髓系白血病患者进行了骨髓细胞免疫表型的检测。采用ＡＢＣ－ＡＰ法，单抗选用ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ３３、ＣＤ６８、ＭＰＯ、ＣＤ３４、ＨＬＡ－ＤＲ等。     

ICAM-1/LFA-1和HLA-DR在蕈样肉芽肿中的表达及其意义

目的：为探求粘附分子在蕈样肉芽肿（ ＭＦ） 病理形成机制中的作用。方法：采用免疫组化技术，检测了１６ 例ＭＦ皮损部位ＩＣＡＭ１／ＬＦＡ－ １ 和ＨＬＡＤＲ 的表达。结果：ＩＣＡＭ１／ＬＦＡ１ 和ＨＬＡＤＲ 在ＭＦ 表皮和／ 或毛囊上皮角朊细胞都有不同程度的表达，其中ＩＣＡＭ１ 的表达与ＭＦ 亲表皮性明显相关。结论：ＩＣＡＭ１／ＬＦＡ１ 在ＭＦ 亲表皮性形成过程中可能起着重要作用。