组织因子凝血酶受体和血栓调节蛋白在重度脓毒症诱导ALI／ARDS大鼠肺组织细胞中的表达北大核心CSCD

目的探讨重度脓毒症诱导的ALI/ARDS大鼠肺组织细胞组织因子（TF）、凝血酶受体（TR）和血栓调节蛋白（TM）的表达。方法应用盲肠结扎穿孔（CLP）加生理盐水灌洗法制作重度脓毒症诱导的ALI／ARDS大鼠,以PaO2／FiO2≤300作为ALI/ARDS大鼠纳入标准,随机分为假手术组、ALI／ARDS组。制模成功后1、2、3h处死大鼠,取肺组织称质量制备组织匀浆,ELISA方法测定TF、TR和TM的表达。结果①TF表达：ALI/ARDS组灌洗后1、2、3h分别为（206363±8178）pg／mL、（148186±6383）pg／mL、（170889±7180）pg／mL,较假手术组[（55956±271）pg／mL、（53269±473）pg/mL、（54175±416）pg/mL]明显升高（P〈0．05）。②TR表达：ALI/ARDS组灌洗后1、2、3h分别为（1．657±0．063）ng／mL、（1．180±0．074）ng／mL、（1．497±0．087）ng／mL,较假手术组[（0．266±0．046）ng/mL、（0．273±0．048）ng／mL、（0．258±0．050）ng／mL]明显升高（P〈0．01）。③TM表达：ALI/ARDS组灌洗后1、2、3h分别为（16960±179）ng/mL、（10372±300）ng／mL、（12287±189）ng／mL,较假手术组[（567±21）ng／mL、（774±35）ng／mL、（695±43）ng/mL]明显升高（P〈0．05）。ALI／ARDS组组内各时点参数比较差异无统计学意义,但呈现灌洗后1h急性应激性升高、2h后下降、3h后再次上升的趋势。结论重度脓毒症诱导的ALI/ARDS大鼠肺组织在高表达TF和TR等促凝血因子的同时,也高表达具有辅助抗凝和增加纤溶功能的TM。     

乌司他丁加甲基泼尼松龙对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺微血管通透性的保护

目的:探讨联合应用乌司他丁和甲基泼尼松龙对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠急性肺损伤(acute lung iniury,ALI)肺微血管通透性的保护作用.方法:舌下静脉注射LPS(5 mg/kg)建立大鼠ALI模型;将120只Wistar大鼠,随机分成5组:正常组(10 mL/kg)、LPS组(10 mL/kg)、甲基泼尼松龙组(20 mg/kg)、乌司他丁组(10万U/kg)、联合治疗组[甲基泼尼松龙+乌司他丁组(15 mg/kg+10万U/kg)],给药后于2、6、12、24 h分批处死大鼠.对比观察给药2、6、12、24 h后肺微血管通透性、肺含水量变化.结果:与正常组比较,LPS组、甲基泼尼松龙组、乌司他丁组和联合治疗组各时间点的肺微血管通透性、肺含水量均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05):甲基泼尼松龙组、乌司他丁组、联合治疗组与LPS组比较肺微血管通透性及肺含水量,差异有统计学意义(P＜0.05):联合治疗组与甲基泼尼松龙组、乌司他丁组比较肺微血管通透性及肺含水量,在6 h、12 h时间点差异有统计学意义(P＜0.05).结论:乌司他丁和甲基泼尼松龙均可降低LPS所致ALI大鼠肺微血管通透性和肺含水量,但二者联合使用治疗效果更好.     

辛伐他汀联合间充质干细胞治疗急性肺损伤效果研究

目的探讨联合应用间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和辛伐他汀对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的治疗作用。方法 SD大鼠50只随机分为空白组、对照组、MSCs组、辛伐他汀组和联合组,每组10只。对照组、MSCs组、辛伐他汀组和联合组大鼠静脉注射0.1 mL/kg油酸/酒精混合溶液诱导ALI模型,空白组大鼠静脉注射0.1mL/kg酒精。造模4h时,空白组和对照组大鼠经胃管注入0.5mL生理盐水,静脉注射500μL PBS缓冲液;MSCs组大鼠经胃管注入0.5mL生理盐水,静脉注射500μL含2×106 MSCs的PBS缓冲液;辛伐他汀组大鼠经胃管注入含12mg/kg辛伐他汀生理盐水,静脉注射500μL PBS缓冲液;联合组大鼠经胃管注入含12mg/kg辛伐他汀生理盐水,静脉注射500μL含2×106 MSCs的PBS缓冲液。造模24h时各组大鼠重复操作1次。造模48h后检测各组大鼠pa(O2),采用ELISA方法检测血浆肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-10水平,取肺组织行组织病理学检查,比较各组肺损伤评分和肺组织湿/干比。结果联合组大鼠血浆肿瘤坏死因子-α[(1 109.57±142.33)ng/L)]和白细胞介素-6[(326.05±47.61)ng/L]水平、肺组织损伤评分(10.27±3.85)和湿/干比重(3.29±1.05)明显低于MSCs组[(1 356.05±200.98)ng/L、(378.65±40.27)ng/L、11.88±4.03、3.77±1.01]、对照组[(2 318.42±389.17)ng/L、(438.31±62.50)ng/L、13.41±3.19、4.40±1.31]和辛伐他汀组[(2 059.87±428.91)ng/L、(424.78±78.15)ng/L、13.25±3.60、4.27±1.23](P0.01),MSCs组低于对照组和辛伐他汀组(P0.05),对照组与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P0.05);联合组大鼠白细胞介素-10水平[(96.11±15.39)ng/L]和pa(O2)[(7.34±1.69)kPa]明显高于MSCs组[(80.92±16.70)ng/L、(6.51±1.16)kPa]、对照组[(56.97±16.20)ng/L、(5.54±1.59)kPa]与辛伐他汀组[(62.48±10.19)ng/L、(5.62±1.24)kPa](P0.01),MSCs组高于对照组和辛伐他汀组(P0.05),对照组与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论静脉应用MSCs对ALI有明显治疗作用,MSCs与辛伐他汀联合应用在大鼠ALI模型中通过平衡炎症因子、稳定肺组织结构等途径起治疗作用。     

脓毒症大鼠肺组织c-FLIP的变化及乌司他丁对c-FLIP的影响

目的 观察脓毒症大鼠的肺组织中c-FLIP的变化情况,并探讨乌司他丁对c-FLIP水平的影响.方法 将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机(随机数字法)分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)及乌司他丁治疗组(UTI组),每组10只.Sham组不结扎穿刺盲肠,余同CLP组;CLP组采用肓肠结扎并穿刺法造模;UTI组造模后立即经阴茎静脉注射乌司他丁注射液(50000 U/kg).12 h后处死大鼠并采取肺组织,光镜下观察形态学变化;Western-Blot法检测c-FLIP蛋白表达,RT-PCR法检测c-FLIP基因表达.应用SPSS 11.5进行统计学分析,多组比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 脓毒症组光镜下肺泡腔内中性粒细胞和大量红细胞渗出,c-FLIP蛋白和基因表达较假手术组显著降低(P＜0.05);用乌司他丁治疗后,光镜下病理改变减轻,c-FLIP蛋白和基因表达较脓毒症组显著升高(P＜0.05).结论 脓毒症中c-FLIP在肺组织中的表达下降,提示肺组织的细胞凋亡增加.乌司他丁能上调脓毒症大鼠肺组织中c-FLIP的表达.     

乌司他丁对内毒素致大鼠急性肺损伤时血清超敏C-反应蛋白和降钙素原的影响

目的探讨乌司他丁对内毒素所致的大鼠急性肺损伤时血清超敏C-反应蛋白和降钙素原的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,体重250～300g,分为对照组(n=10)、内毒素组(n=10)、治疗组(n=10)。内毒素组给予内毒素5mg/kg,治疗组同时给予内毒素5mg/kg和乌司他丁100000U/kg,对照组给予等量生理盐水。分别于制模后即刻、1h、3h、6h后测定血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和降钙素原(PCT),取肺组织光镜下的组织病理形态。结果光镜下可见对照组肺组织学正常,内毒素组肺间质明显增宽,大量炎性细胞浸润,肺泡腔内可见红细胞及炎性细胞,而乌司他丁治疗组上述病理表现明显减轻。三组大鼠制模后即刻、1h、3h、6h,血清hs-CRP和PCT水平增高,内毒素组分别为(35.2±12.4)mg/L和(5.75±1.31)μmol/L,高于对照组的(12.6±4.5)mg/L和(0.48±0.24)μmol/L,治疗组为(26.9±11.2)mg/L和(3.08±1.02)μmol/L,低于内毒素组。结论 hs-CRP和PCT可提示病情严重程度。乌司他丁明显降低肺组织的炎症反应,减轻肺组织的损害,对内毒素...     

乌司他丁联合纳洛酮治疗急性心肌梗死合并心源性休克的效果观察

目的 观察乌司他丁联合纳洛酮对急性心肌梗死(AMI)合并心源性休克患者的临床治疗效果.方法 80例AMI合并心源性休克患者随机分为常规治疗组19例、乌司他丁组20例、纳洛酮组21例、乌司他丁联合纳洛酮组20例.检测患者入院及治疗1周后心肌肌钙蛋白I (cTnI)、脑钠肽(BNP)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的浓度;同时观察休克恢复时间、住院天数及28 d病死率.比较各组患者上述指标间的差异.结果 4组患者治疗后cTnI[常规治疗组(2.06±0.15) ng/L、乌司他丁组(1.59±0.16) ng/L、纳洛酮组(1.97±0.14) ng/L、乌司他丁联合纳洛酮组(1.04±0.17)ng/L]、BNP[常规治疗组(261.07±71.43) ng/L、乌司他丁组(203.46±65.73) ng/L、纳洛酮组(252.96±68.85) ng/L、乌司他丁联合纳洛酮组(143.21±56.94) ng/L]、TNF-α[常规治疗组(31.21±12.32) ng/L、乌司他丁组(20.39±11.08) ng/L、纳洛酮组(28.98±11.76) ng/L、乌司他丁联合纳洛酮组(13.42±8.93)ng/L]、IL-6[常规治疗组(80.46±27.15) ng/L、乌司他丁组(59.84±20.72) ng/L、纳洛酮组(76.15±26.45)ng/L、乌司他丁联合纳洛酮组(37.58±11.14) ng/L]的浓度较治疗前均下降(P均＜0.01),其中乌司他丁联合纳洛酮组各指标下降幅度大于常规治疗组、乌司他丁组和纳洛酮组(P均＜0.01).乌司他丁联合纳洛酮组休克恢复时间(7.16±1.52)d、住院时间(15.03±3.23)d及28 d病死率(41.62％)明显低于乌司他丁组[(8.05±1.81)d、(18.93±3.97)d、50.74％]、纳洛酮组[(8.74±1.98)d、(19.21±3.94)d、52.31％]和常规治疗组[(11.43±2.40)d、(22.64±4.18)d、61.20％],差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 乌司他丁联合纳洛酮能有效减轻AMI合并心源性休克患者的心肌损伤及炎症反应,促进循环功能恢复并改善其预后.     

血必净注射液减轻脓毒症诱导的小鼠急性肺损伤的作用及机制

目的 研究血必净注射液调控自噬对脓毒症诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及机制.方法 将80只BALB/c雄性小鼠随机分为对照组、模型组、血必净组、血必净+3-甲基腺苷(3-methyladenosine,3-MA)组,每组各20只.对照组进行假手术,后3组采用盲肠穿孔术建立脓毒症ALI模型,血必净组给予10 mL/kg血必净注射液腹腔注射,血必净+3-MA组给予10 mL/kg血必净注射液及10 mg/kg自噬抑制剂3-MA腹腔注射.观察4组小鼠造模后72h的累积生存率并检测肺组织病理改变、肺湿重/干重比、炎症因子[肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18]含量、自噬小体数目、自噬基因[微管相关蛋白轻链3 (microtubule-associated protein light chain3,LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1]的蛋白表达水平.结果 对照组72 h累积生存率为100％,肺湿重/干重比为3.89±0.85,TNF-α、IL-1β、IL-18含量分别为(0.83±0.14) ng/mg、 (0.74±0.15) ng/mg、 (84.51±13.25) pg/mg,自噬小体数目为(0.41±0.09)个/视野,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1分别为0.20±0.04、0.17±0.03.模型组小鼠肺组织出现典型的ALI病理改变,72 h累积生存率(50％)低于对照组(P＜0.0S),肺湿重/干重比(6.77±0.94),TNF-α、IL-1β、IL-18含量[(3.15±0.76)ng/mg、(2.88±0.62) ng/mg、 (274.62±45.58) pg/mg],自噬小体数目[(3.14±0.55)个/视野],以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平(0.69±0.09、0.35±0.06)均高于对照组(P＜0.05).血必净组小鼠肺组织ALI病理改变减轻,72 h累积生存率(75％)高于模型组(P＜0.05),自噬小体数目[(5.77±0.75)个/视野]及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平(0.98±0.13、0.62±0.08)高于模型组(P＜0.05),肺湿重/干重比(4.23±0.76)及TNF-α、IL-1β、IL-18含量[(1.52±0.32) ng/mg、 (1.29±0.30) ng/mg、 (121.36±26.51) pg/mg]低于模型组(P＜0.05).血必净+3-MA组小鼠肺组织ALI病理改变加重,72 h累积生存率(55％)低于血必净组(P＜0.05),自噬小体数目[(0.78±0.16)个/视野]及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平(0.37±0.05、0.32±0.05)低于血必净组(P＜0.05),肺湿重/干重比(6.31±0.91)及TNF-α、IL-1β、IL-18含量[(2.88±0.56) ng/mg、 (2.41±0.58) ng/mg、 (252.35±37.65) pg/mg]高于血必净组(P＜0.05).结论 血必净注射液能够减轻脓毒症诱导的小鼠ALI,激活自噬是与之相关的分子机制.     

乌司他丁对小鼠全氟异丁烯吸入性肺损伤的作用

目的观察乌司他丁对全氟异丁烯吸入性急性肺损伤的防治效果。方法 采用小鼠全氟异丁烯全身暴露动态染毒系统对实验小鼠进行染毒,观察不同剂量的乌司他丁于全氟异丁烯暴露后不同时间尾静脉注射给药的存活率、肺系数(湿肺体比、干肺体比、肺含水量、肺湿干比)。结果在全氟异丁烯暴露后不同时间(1、2、4、8h)经尾静脉注射给药不同剂量乌司他丁(40万、80万U/kg),除于暴露后4和8h乌司他丁40万U/kg组观察到湿肺体比和肺湿干比给药组较对照组明显下降(P均<0.05)外,不论是肺系数还是中毒小鼠存活率观察,均未观察到乌司他丁对全氟异丁烯染毒小鼠明显的治疗作用(P均>0.05)。结论在本项研究的实验条件下,未观察到乌司他丁对全氟异丁烯吸入性急性肺损伤具有治疗作用。     

乌司他丁对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制研究

目的研究乌司他丁对脂多糖诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法将52只大鼠分为乌司他丁组和对照组,每组26只。两组大鼠腹腔注射脂多糖溶液(10 mg/kg)以制备脓毒症模型,分别于建模前18 h和3 h,乌司他丁组大鼠给予乌司他丁(100 000 U/kg),对照组注射等量生理盐水。于造模成功后0.5、2、4、12、24、72 h各时间点采血检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10及肺泡灌洗液蛋白浓度,并通过光学显微镜观察肺组织病理学改变。结果两组大鼠血浆TNF-α、IL-6、IL-10及肺泡灌洗液总蛋白浓度各时间点比较,差异均有统计学意义(F=5.899,P=0.040;F=7.932,P=0.029;F=18.450,P=0.005;F=6.467,P=0.038),且与对照组相比较,乌司他丁组在0.5、2、4、12、24、72 h各时间点的血浆TNF-α[(21.6±3.8)ng/L vs.(14.8±2.5)ng/L,(69.2±3.2)ng/L vs.(48.8±3.9)ng/L,(74.8±6.9)ng/L vs.(56.3±4.2)ng/L,(120.2±43.8)ng/L vs.(106.4±65.8)ng/L,(190.2±30.4)ng/L vs.(119.8±28.9)ng/L,(159.7±10.5)ng/L vs.(112.3±10.2)ng/L]、IL-6[(145±6)ng/L vs.(119±5)ng/L,(344±19)ng/L vs.(225±22)ng/L,(458±36)ng/L vs.(273±28)ng/L,(949±64)ng/L vs.(328±27)ng/L,(841±61)ng/L vs.(306±6)ng/L,(899±35)ng/L vs.(278±16)ng/L]及肺泡灌洗液总蛋白浓度[(320±8)mg/L vs.(290±17)mg/L,(400±7)mg/L vs.(336±9)mg/L,(536±10)mg/L vs.(492±14)mg/L,(806±10)mg/L vs.(608±17)mg/L,(781±17)mg/L vs.(579±16)mg/L,(662±24)mg/L vs.(505±9)mg/L]均明显降低(P均0.05),而血浆IL-10浓度[(5.7±0.8)ng/L vs.(11.7±0.9)ng/L,(17.2±1.6)ng/L vs.(31.9±2.6)ng/L,(22.3±2.1)ng/L vs.(54.7±4.8)ng/L,(42.3±4.9)ng/L vs.(80.7±1.9)ng/L,(29.7±1.4)ng/L vs.(69.4±3.4)ng/L,(21.4±2.9)ng/L vs.(74.3±5.5)ng/L]均明显升高(P均0.05)。对照组大鼠肺泡间隔增厚,间质充血水肿,炎性细胞浸润,肺泡塌陷,而乌司他丁组大鼠上述病理学改变明显减轻。结论乌司他丁是通过下调TNF-α、IL-6,上调IL-10水平,从而抑制炎症细胞在肺部的浸润以及肺组织中蛋白酶的表达来保护脂多糖诱导的脓毒症大鼠急性肺损伤。     

乌司他丁对脓毒症小鼠调节性T细胞凋亡及细胞因子分泌的影响

目的观察乌司他丁对脓毒症小鼠调节性T细胞(Treg)凋亡及细胞因子分泌的影响。方法将60只小鼠分为假手术组、模型组和乌司他丁组,每组20只。采用盲肠结扎穿孔方法制备脓毒症大鼠模型,假手术组除不结扎和穿刺盲肠外,其余手术步骤相同,乌司他丁组小鼠术后30 min尾静脉给药100 000 U/kg。采用流式细胞仪检测各组小鼠CD4+CD25+Treg的凋亡率,采用酶联免疫吸附试验检测各组小鼠白细胞介素2(IL-2)、IL-4、干扰素γ的水平。结果假手术组、模型组和乌司他丁组小鼠CD4+CD25+Treg细胞的凋亡率比较,差异有统计学意义[(20.1±1.0)%、(10.9±0.8)%、(13.7±0.8)%,F=10.236,P=0.030],且乌司他丁组小鼠显著低于假手术组,而高于模型组(P均0.05)。同时,与假手术组比较,模型组与乌司他丁组IL-2[(352±76)、(172±59)、(249±64)ng/L]和干扰素γ[(177±25)、(56±14)、(109±18)ng/L]均显著下降,而IL-4显著升高[(46±15)、(328±81)、(242±62)ng/L],且与模型组比较,乌司他丁组IL-2和干扰素γ均明显升高,而IL-4明显降低(P均0.05)。结论乌司他丁可诱导脓毒症小鼠Treg细胞凋亡,上调IL-2和干扰素γ,降低IL-4水平。     

糖尿病足患者血浆活化蛋白C抵抗、蛋白C和蛋白S活性的测定

目的探讨PC、PS活性的变化在糖尿病足形成中的作用和临床意义,以及APCR与糖尿病足形成的关系。方法采用Dahlback法对50例健康成年人(对照组)及60例糖尿病足患者(DF1、DF2组)进行APCR阳性率测定,同时测定受检者蛋白C(PC,)和蛋白S(PS)。结果糖尿病足(DF)患者血浆PC/PS活性下降与对照组有显著性差异。结论血浆PC/PS活性检测对糖尿病足患者的诊断、估计预后和疗效观察有参考价值,且APCR阳性者有动脉血栓发生的倾向。     

上海地区人群抗凝蛋白C基因突变和多态性研究

目的研究上海地区人群抗凝蛋白C(PC)活性的正常范围和PC基因突变及多态性的分布;研究活化蛋白C抵抗(APC-R)的分布及其与相应已知基因突变的关系。方法采用发色底物法检测867例上海健康人PC活性,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测PC抗原,采用凝血法检测APC-R,采用聚合酶链反应(PCR)扩增PC基因所有外显子及其侧翼序列和5′、3′非翻译区,采用直接测序法检测所有扩增片段。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测APC-R相关多态性。结果 PC活性和APC-R的正常范围分别为67%～147%和114.7～195.2S。不同性别研究对象PC和APC-R测定结果间差异有统计学意义(P<0.05)。PC活性随年龄增长而增加(P<0.01)。在对10例PC活性降低标本的基因检测中发现2个基因突变,即Ala121Thr(G3406A)和Pro247Ser(C8454T)。据此,计算出上海地区健康人群PC基因突变的频率为0.23%。在对15例APC-R阳性标本的检测中未发现FV多态性位点(FV Arg306Thr、Arg306Gly、Arg506Gln、His1299Arg和Ile359Thr)和PT G20210A。结论 PC基因突变的频率为0.23%;APC-R与已知的FV多态性位点无关;PC基因突变Ala121Thr和Pro247Ser可能是中国人易栓症的危险因素。     

血小板内蛋白激酶C活化诱导血小板发生凋亡

蛋白激酶C （Protein Kinase C,PKC）在血小板信号转导和粘附、聚集、释放等多种生理功能的发挥中均起到重要的作用.目前报道,PKC通过激活去整合素金属蛋白酶（ADAM） 10或ADAM17诱导血小板膜表面糖蛋白受体发生酶切,对血小板活化后产生负调控作用.那么PKC活化是否可诱导血小板凋亡进而负调控血小板功能,目前还不清楚.本研究目的是探讨血小板内PKC活化对血小板凋亡的影响.取健康志愿者外周静脉血并分离血小板.选择PKC特异性激活剂和抑制剂,并设置不同的时间梯度和浓度梯度,与洗涤血小板共同孵育,应用流式细胞术和Western blot等技术,检测PKC激活剂和抑制剂对血小板线粒体膜电位（△（Ψ）m）、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase）和磷脂酰丝氨酸（PS）的影响.实验结果表明,PKC激活剂呈时间依赖性诱导血小板发生△（Ψ）m去极化;PKC激活剂呈浓度依赖性地诱导血小板内caspase-3活化裂解,而PKC抑制剂则不能诱导血小板发生△（Ψ）m去极化和PS暴露的变化.结论：血小板内PKC活化后,可以通过影响线粒体功能和激活Caspase-3而诱导血小板凋亡,提示PKC可能参与调控活化血小板的凋亡过程,本研究结果对探明血小板活化的负调控功能及PKC活化相关疾病的发病机理具有意义.     

Protein C pathway in sepsis

The goals of this chapter are to provide a brief review of the biology of the protein C pathway and some of the features of the pathway that make it uniquely positioned to control microvascular coagulation and control the acute inflammatory response. Activated protein C works as an antithrombotic agent by inactivating factors Va and VIIIa. It is particularly effective at preventing microvascular thrombosis. Platelets may provide a margin of safety for activated protein C as an antithrombotic. Approximately 25% of the factor V/Va in plasma is contained within the platelet and hence resistant to time dependent inactivation by activated protein C. In addition, factor Va bound to the platelet surface is relatively resistant to inactivation by activated protein C. Activated protein C also facilitates clot lysis by inhibiting plasminogen activator inhibitor 1, a process that is accelerated markedly by vitronectin. Inflammatory cytokines like tumor necrosis factor &#102 (TNF &#102 ) and interleukin1 &#103 (IL-1 &#103 ) downregulate two key components of the protein C activation complex, thrombomodulin and the endothelial cell protein C receptor resulting in decreased protein C activation. Activated protein C in turn has been shown in several animal models and in vitro to inhibit TNF elaboration in response to endotoxin. This inhibition appears to be due to diminished nuclear factor &#115 B (NF &#115 B) expression and nuclear translocation. Activated protein C has been shown to reduce the rate of death due to severe sepsis. This reduction may be due to both the anticoagulant effects as demonstrated by a reduction in D-dimer and inflammatory effects as demonstrated by a reduction in interleukin 6.     

免疫亲和层析法纯化蛋白C

研制一种蛋白 C(PC)的特异单克隆抗体(McAb),它可以识别在钙离子存在与否的条件下呈现不同构象的 PC 抗原,将其偶联至 Sepharose 4B 凝胶上,组成亲和层析柱。凝胶上的 McAb 能连接无钙离子血浆中的 PC,这种免疫纯化法一步即可达到12000倍的纯化。PC 成品的比活性为180～230U/mg,在非还原的 SDS-PAGE 图谱上呈现两条带(α-PC 和β-PC),在还原的 SDS-PAGE 图谱上呈现5条带(α-SC-PC,β-SC-PC,α-HC,β-HC 和 LC)。     

血浆蛋白C及蛋白S在肺栓塞患者血清中的表达及意义

目的：测定肺栓塞患者血浆蛋白C及蛋白S的表达,探讨其联合检测在临床中的意义。方法：肺栓塞患者132例为观察组,体检正常成人132例为正常组,均检测血清中血浆蛋白C及蛋白S的表达,分析其不同预后与血浆蛋白C及S的差异及二者间的相关性。结果：与正常组比较,观察组患者血清中血浆蛋白C及蛋白S均呈明显低表达,其中死亡病例更低于好转病例,好转病例明显低于治愈病例（P〈0.05,0.01）;线性相关分析,血清中血浆蛋白C与蛋白S的表达呈正相关。结论：血浆蛋白C及蛋白S在肺栓塞患者血清中均呈低表达,且与预后有关,早期检测血浆蛋白C及蛋白S可能对判断肺栓塞的病情及指导治疗有重要价值。     

血小板中蛋白激酶C活性在急性冠脉综合征患者体内的变化

测定50例不稳定型心绞痛（UA），50例ST段抬高急性心肌梗死（AMI）患者及50例正常人（NC）的血小板胞膜、胞浆蛋白激酶C（PKC）活性。结果显示：UA和AMI组血小板胞膜中的PKC显著高于NC组（P〈0．01），而UA组高于AMI组（P〈O．05）UA和AMI组血小板胞浆中PKC活性显著低于NC组（P〈0．01），而UA组低于AMI组（P〈0．05）。提示PKC可能与急性冠脉综合症（ACS）的发生和发展有关。     

蛇毒蛋白C激活剂实验条件及稳定性的探讨

目的探讨可能影响蛇毒蛋白C激活剂作用的实验条件和该试剂的稳定性。方法分别采用APTT法和CBS02.46底物法，检测蛇毒蛋白C激活荆在不同实验条件下的抗凝活性及酰胺酶活性。结果蛇毒蛋白c激活剂的最适pH值为6．0～7．0，最适温度为37～40℃，肝素、枸橼酸钠等抗凝剂及Na^ 、K^ 、EDTA等不影响其活性，SDS则显著抑制其生物学活性。该试剂溶液剂型在室温下或4℃中4w内效价无变化，冻干剂型则在2y内效价无明显变化。结论蛇毒蛋白C激活剂是一种效价较高、稳定性较好，影响因素少的蛋白C活化试剂。     

Protein C as an early biomarker to distinguish pneumonia from sepsis

Purpose

Patients with pneumonia often are unrecognized as also having sepsis. We evaluated protein C, as a potential biomarker, to differentiate between patients with pneumonia and sepsis.

Materials and Methods

A retrospective chart review was performed for all protein C tests over a 14-month period (January 11, 2007, to March 10, 2008) at an 8-hospital system with 1706 total beds. Charts were screened for the discharge diagnoses of sepsis, severe sepsis, septic shock, bacteremia, and pneumonia. Protein C levels were compared between patients with sepsis and pneumonia, and at time intervals of 0 to 12 hours, 12 to 24 hours, 24 to 48 hours, and more than 48 hours after diagnosis.

Results

One thousand forty-seven protein C levels were obtained in 980 patients. Thirty-two protein C levels met the inclusion and exclusion criteria for the sepsis group, and 34 for the pneumonia group. Overall, the mean protein C levels were significantly less in patients with sepsis at 59.2% (95% confidence interval [CI], 49.5%-68.9%) compared with patients with pneumonia at 108.9% (95% CI, 95.6%-122.3%; P < .001). In addition, levels within each of the time intervals were also significantly lower in the sepsis group.

Conclusions

In this study, protein C levels performed well in differentiating between patients with sepsis or pneumonia in the early period after diagnosis.     

C反应蛋白基因多态性与原发性高血压病的关系

目的：研究C反应蛋白（CRP）基因的3个单核苷酸多态性（SNP）位点（rs1205r、s1130864、及rs1800947）与原发性高血压病的相关性。方法：采用TaqMan荧光定量PCR技术,对中国上海地区712例高血压病患者和672名正常血压者进行基因分型、分析单位点和单倍型与高血压及表型的相关性。结果：未发现CRP基因的3个SNP位点的基因型和等位基因频率在原发性高血压病组（EH）和正常血压者对照组（NT）之间存在显著差异（P〉0.05）。CRP基因rs1205（T/C）基因位点和rs1130864（G/A）基因位点经过连锁不平衡分析,D’值〈0.85,进行单倍型分析显示,单倍型C-A分布频率在EH组和NT组中有显著差异[NT比EH：0.064比0.040,优势比（OR）=0.617,95%可信区间（CI）：0.429~0.887,P=0.009],并且经过FDR校正后仍具有显著差异。未发现高血压病患者中不同单倍型之间血压、体质量指数和血清超敏CRP存在显著差异。结论：CRP基因3个SNP单点与原发性高血压病无明显相关性,单倍型CA可能与高血压保护作用有关。