microRNA-21调节宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4的表达研究

目的探讨microRNA(miR)-21-反义寡核苷酸(ASODN)对宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4基因表达、细胞增殖与凋亡的影响。方法宫颈鳞癌SiHa细胞分3组,采用LipofectamineTM2000转染试剂,miR-21调控组转染miR-21抑制剂的ASODN,miR-21抑制剂阴性对照的ASODN,空白对照组不转染。Cell Titer和荧光TUNEL分别检测转染前后SiHa细胞增殖和凋亡的变化,流式细胞仪分析细胞周期,实时RT-PCR检测miR-21和PDCD4mRNA水平表达,Western blot检测靶蛋白PDCD4表达。结果 AS-miR-21组与阴性、空白对照组相比,SiHa细胞生长明显抑制,而阴性和空白对照组比较无明显差异;细胞凋亡率分别为(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%和(3.4±0.36)%;细胞周期结果显示AS-miR-21组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,与对照组间差异显著(P<0.05);实时RT-PCR结果显示,miR-21表达下降而PDCD4表达升高。Western blot检测结果显示,PDCD4表达AS-miR-21组明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论 AS-miR-21可有效抑制miR-21在宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达并上调PDCD4基因表达,发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。     

喉鳞癌组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达及临床意义

目的探讨喉鳞癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及其受体VEGFR-3的表达以及与喉癌病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法分别检测60例喉癌组织和32例癌旁组织中VEGF-C和VEGFR-3蛋白的表达情况,并分析二者表达强弱与喉鳞状细胞癌发生发展的相关关系。结果喉鳞癌组织中VEGF-C、VEGFR-3表达水平均显著高于相应癌旁组织(P0.05);VEGF-C和VEGFR-3的表达在不同喉癌的分化程度、有无淋巴结转移及不同临床分期组间均有统计学意义(P0.05),而不同性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小及临床分型组间差异均无统计学意义(P0.05)。结论 VEGF-C和VEGFR-3在喉癌的发展中起重要作用,二者的联合检测可作为喉癌是否有淋巴结转移及预后的预判指标。     

喉鳞癌中Galectin-3蛋白的表达及意义

目的检测Galectin-3蛋白在喉鳞癌中的表达,探讨其在喉鳞癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学法检测62例喉鳞癌组织、50例喉鳞状上皮不典型增生、50例喉鳞状上皮良性增生及42例正常喉鳞状上皮粘膜中Galectin-3的表达差别,并探讨其与临床病理特征的关系。结果 Galectin-3蛋白阳性表达主要定位于细胞浆,Galectin-3蛋白在正常喉粘膜、上皮良性增生、不典型增生及喉鳞癌中的表达阳性率呈增高趋势;Galectin-3蛋白的表达与肿物大小及有无甲状软骨累及密切相关。结论 Galectin-3蛋白在喉鳞癌组织中表达上调,Galectin-3蛋白可能在喉鳞癌癌变过程中起重要作用,术后检测可能对预判断预后有一定价值。     

骨桥蛋白与ras基因蛋白在喉鳞癌中表达意义及相关性

目的探讨骨桥蛋白（osteopontin,OPN）与ras基因蛋白在喉鳞癌组织中的表达意义及二者相关性。方法采用免疫组织化学染色方法检测42例喉癌组织（喉癌组）与25例癌旁组织或声带息肉组织（对照组）中OPN与ras基因蛋白的表达情况,分析其与临床病理学特征的关系。结果喉癌组OPN和ras基因蛋白阳性表达率分别为54．8％和73．8％,明显高于对照组（24．0％和48．0％）（P〈O．05）;喉癌组OPN阳性表达率在肿瘤T分期、分化程度及淋巴结转移上差异有统计学意义（P〈0．05）,在患者年龄、临床分期上差异无统计学意义（P〉0．05）;ras基因蛋白阳性表达率在肿瘤临床分期、淋巴结转移上差异有统计学意义（P〈0．05）,在患者年龄、T分期、分化程度上差异无统计学意义（P〉0．05）;OPN阳性表达与ras基因阳性表达呈正相关（r=0．329,P=0．033）。结论OPN和ras基因蛋白在喉癌的发生、发展中起重要作用,可能成为喉癌生物学特性及评价预后的重要标记物。     

喉鳞癌中HPV的免疫组化,原位杂交,PCR和间接原位PCR检测

目的 探讨ＨＰＶ与喉癌发生的关系。方法 采用免疫组化,原位杂交,ＰＣＲ和间接原位ＰＣＲ技术检测５０例喉鳞状细胞癌中的ＨＰＶ感染情况。结果 免疫组化衣壳抗原阳性６２例（１２％）,原位杂交阳性１３例（２６％）,ＰＣＲ阳性１０例（２０％）,原位ＰＣＲ阳性１７例（３４％）,综合上述方法阳性率为４２％（阳性２１例）。结论 ＨＰＶ感染与喉癌有着明显的关系,间接原位ＰＣＲ在检测ＨＰＶ感染时具有较高的敏感性,特异     

抑癌基因p53与喉鳞癌

p53基因是已知肿瘤抑癌基因和癌基因中变异频率最高的基因.近年的研究表明p53基因突变在喉鳞癌的发生发展过程中可能起着重要作用.有关喉癌中p53基因突变率各家的报道相差较大,约在28%～80%不等.目前关于应用银染PCR-SSCP技术及DNA直接测序方法研究喉鳞癌新鲜组织中p53基因的文献报道较少,参考现有文献,本文将p53基因的研究新进展及其与喉癌的关系做一综述.     

喉腺鳞癌伴神经内分泌分化1例

<正>患者女性,69岁。声音嘶哑,呼吸困难半年余。纤维喉镜示声门处有肿物附着并有弥漫新生物生长,表面不平。查体:颈部淋巴结肿大。取小块组织活检,冷冻切片诊断为恶性肿瘤,分类待免疫组化。后行全喉切除术,并行颈部淋巴结清扫。     

喉鳞癌中P53表达与意义

目的 :研究喉鳞癌中P5 3表达与意义。方法 :应用免疫组织化学方法 (Envision) ,检测 6 3例喉鳞癌、7例喉乳头状瘤、10例声带息肉组织中P5 3基因蛋白的表达。结果 :(1)P5 3在上述三种组织中表达率分别为 5 1%、2 8%、0 % ,差异有统计学意义(P <0 .0 1) ;(2 )P5 3表达与喉鳞癌病理组织分级及临床分期 (TNM )相关 ,P5 3阳性表达者 ,其肿瘤组织病理分级差 (P <0 .0 5 ) ,Ⅰ、Ⅱ期肿瘤阳性表达率低于Ⅲ、Ⅳ期 (P <0 .0 5 ) ;(3)P5 3阳性表达与颈淋巴结转移无关 (P >0 .0 5 )。结论 :P5 3在喉上皮中的表达与其恶性程度相关 ,P5 3表达者其预后可能不良。     

p63基因在喉鳞癌中表达的意义

目的：探讨p63基因在喉鳞癌中表达的意义。方法：采用免疫组化法检测30例喉癌组织中p63的表达,另选16例癌旁组织和〗4例声带息肉作为对照。结果：p63基因蛋白表达的阳性率在正常组织、癌旁组织及喉鳞癌组织中逐渐增高。其在喉癌中表达的阳性率在细胞不同分化程度中的差异有统计学意义,低分化鳞癌的表达强度高于高分化鳞癌;在不同年龄、性别、肿瘤原发部位、临床分期、有无颈淋巴结转移方面无显著差异。结论：（1）p63在喉鳞癌中呈过度表达,并且是喉鳞癌发生中的早期事件;（2）p63与喉鳞癌的分化程度有关;（3）p63基因的表达在喉鳞癌进展的过程中无变化。     

环氧合酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

[目的]探讨环氧合酶-2(COX-2)蛋白在喉癌中的表达及其临床意义,同时探讨其在喉乳头状瘤和声带息肉中的表达情况.[方法]采用免疫组化SP法检测38例喉鳞癌、7例喉乳头状瘤及10例声带息肉组织中COX-2蛋白的表达水平.[结果]COX-2蛋白在喉癌中的表达水平明显高于声带息肉(P＜0.01); 喉乳头状瘤中的表达明显高于声带息肉(P＜0.01);声带息肉中几乎未见COX-2表达.在喉癌组的组织分级中,COX-2蛋白在高分化组织中的表达明显高于中度分化(P＜0.01)和低分化(P＜0.01);在中度分化组织中的表达明显高于低分化(P＜0.01);COX-2蛋白在各临床分期、T分级、N分级、肿瘤部位及年龄中差异均无显著性(P＞0.05).[结论] ①COX-2蛋白与喉鳞状细胞癌的组织学分化程度密切相关;②COX-2蛋白在小儿喉乳头状瘤复发和成人乳头状瘤发生方面可能起到一定的作用.     

用噬菌体展示技术筛选喉癌细胞靶向肽的研究

目的筛选人源喉癌Hep-2细胞株特异结合的短肽,作为喉癌靶向治疗的载体。方法体外培养Hep-2细胞株作为靶细胞,人正常喉黏膜上皮细胞为吸附细胞;用噬菌体展示十二肽库进行3轮差减筛选,随机挑取10个噬菌体克隆进行测序;采用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法鉴定噬菌体与Hep-2细胞的结合活性;通过免疫荧光鉴定喉癌细胞特异性结合肽（F2）噬菌体阳性克隆与喉癌细胞结合的特异性。结果经过3轮筛选后,噬菌体在靶细胞Hep-2上出现明显富集;ELISA分析鉴定显示5个阳性克隆能与Hep-2细胞特异结合,其中F2噬菌体克隆对喉癌细胞的结合靶向性明显高于对照细胞（P〈0.05）;免疫荧光显色显示,F2能特异性地与喉癌细胞结合。结论利用噬菌体展示肽库技术,可以成功筛选到F2,其可能成为喉癌靶向治疗的载体。     

Survivin在喉鳞癌的表达及其临床意义

目的:探讨survivin在喉鳞癌(LSCC)组织中的表达及与喉鳞癌的生物学行为的关系。方法:应用原位分子杂交方法,检测survivin mRNA在47例喉鳞癌组织、癌旁组织及14例正常喉组织中的表达。结果:(1)Survivin在正常喉组织中不表达;在喉癌组织、癌旁组织中阳性表达率分别为59.6%(28/47)、25.5%(12/47),其差异有显著性(P<0.05);组织分化程度越低、TNM分期越晚、淋巴结转移率越高,则survivin mRNA表达越强(均P<0.05)。结论:Survivin可能成为LSCC基因治疗的新靶点;其高表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。     

超声对喉癌TNM分期中的应用价值

目的 探讨超声在喉癌TNM分期中的价值。 方法 对42例喉癌患者进行超声检查，并与手术及病理结果进行对照分析。 结果 超声对喉癌T分期的符合率为86％，判断颈部淋巴结转移的符合率为92％。本组病例无远处转移。 结论 超声可对喉癌的T分期作出较准确的判断，并能判断喉癌颈部淋巴结转移及转移淋巴结与颈部血管之间的关系，在喉癌TNM分期中具有重要的价值，可为临床制定治疗方案提供重要的依据。     

喉癌的CT诊断

目的:进一步提高喉癌CT诊断的正确性。材料和方法:回顾分析了40例经手术病理证实的喉癌的CT表现,声门上癌13例,声门癌20例,贯声门癌7例。结果:CT清晰地显示了喉部深浅结构。包括喉旁间隙,会厌前间隙,及声门下区全貌,亦能准确显示肿瘤的大小,位置、浸润范围.软骨侵犯和颈部转移淋巴结。结论:CT诊断明显提高了喉癌T分期的准确性,为保存喉功能手术的选择提供了重要依据,但研究还表明CT诊断喉癌尚有一定的局限性。     

人参皂带Rh2联合顺铂应用对人喉癌细胞Hep-2的作用

目的探讨人参皂甙Rh2与顺铂(Cisplatin,DDP)联合应用对喉癌细胞Hep-2的的作用。方法体外培养的喉癌细胞Hep-2分别加入终浓度为0.51、.0、2.0、5.0μg/ml的DDP、终浓度为10、20、30、40μg/ml的Rh2,以及终浓度为20μg/ml的Rh2分别联合终浓度为0.5、1.02、.0、5.0μg/ml的DDP,设空白对照组,待药物作用48小时后,分别用光学显微镜、MTT法、流式细胞仪(Flowcytometry,FCM)、荧光显微镜检测培养细胞的作用效果。结果光镜下可见正常喉癌细胞细胞生长密集,细胞呈梭型或多角型,细胞彼此之间相接触。在低剂量Rh2组和DDP组,可见细胞数量略减少,细胞形态无明显改变。在高剂量Rh2组和DDP组,细胞数量明显减少,可见细胞碎片。而低剂量Rh2和低剂量DDP联合应用后,可获得与高剂量Rh2组和DDP组相同的效果。MTT结果显示Rh2、DDP单独应用和联合应用都呈剂量依赖性增加抑制喉癌细胞的生长。低剂量Rh2和低剂量DDP联合应用,可明显抑制喉癌细胞生长。FCM显示Rh2和DDP单独应用,可诱导细胞凋亡,而联合应用可获得较单独应用更为明显的诱导细胞凋亡效应。吖啶橙染色显示各用药组均可见细胞胞膜出芽、染色质凝集、核片段化及凋亡小体等典型的细胞凋亡特征。结论人参皂甙Rh2及DDP均可诱导喉癌细胞凋亡,二者联合应用后,呈现出协同作用,可发挥更为明显的抗癌作用。     

喉癌术后匀浆鼻饲的效果观察及护理体会

喉癌术后由于肿瘤本身因素及手术联合放疗等会直接加剧患者的营养不良。本人在39例喉癌术后病人的鼻饲护理中，其中鼻饲匀浆21例，普通流质18例(对照组)。观察结果表明：匀浆组和对照组病人切口愈合无明显差异；匀浆组病人体重和氯平衡均优于对照组。提示匀浆鼻饲能有效改善喉癌术后病人的营养状况；做好膳食护理是提高护理质量的重要举措。     

喉部正常结构及喉癌的三维超声成像研究

目的探讨喉部三维超声成像的可行性及其在喉癌诊断中的价值。 方法对85例正常人进行喉部三维重建，所获图像由3人进行评议；对46例喉癌进行三维重建，并与术中所见比较，测得肿瘤血管指数（Ⅵ）与肿瘤N分期进行相关性分析。 结果被评为优良的三维图像分别为92．900、91．8％和90．600，不同评议者之间的评议结果有较好的一致性（Kappa值为0．833和0．794）；3例喉癌三维超声提供了二维超声所未能提示的空间信息；Ⅵ与N分期呈正相关（r=0．603，P〈0．001）。 结论三维超声可在喉部应用，三维立体图像对喉癌与毗邻组织结构的关系能提供更丰富的信息，Ⅵ有望成为预测喉癌淋巴结转移的重要参考因素。