冬凌草抗菌活性成分研究

目的：研究冬凌草的抗菌活性成分。方法：利用纸片扩散法（K-B 法）进行抗菌活性成分筛选;采用色谱法对活性部位进行分离,并运用波谱技术鉴定结构。结果：从冬凌草乙酸乙酯部位分离鉴定了6 个化合物：冬凌草甲素（1）、迷迭香酸（2）、咖啡酸（3）、水杨酸（4）、阿魏酸（5）和香草酸（6）。冬凌草甲素对金黄色葡萄球菌（SA）、耐甲氧西林葡萄球菌（MRSA）、β-内酰胺酶阳性的金黄色葡萄球菌（ESBLs-SA）均有一定的抗菌活性,且抗菌活性最强（MIC 为3.125、6.25、6.25 μg·disc-1）,但仍弱于阳性对照小檗碱（MIC 值均为0.156 μg·disc-1）。阿魏酸对SA 和MRSA 有一定的抗菌活性（MIC 为50 和50 μg·disc-1）,水杨酸仅对SA 有抗菌活性（MIC 为50 μg·disc-1）。结论：冬凌草甲素、阿魏酸和水杨酸是冬凌草的主要抗菌活性成分。     

HPLC法测定冬凌草药材中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量

目的:建立冬凌草中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量测定方法,为冬凌草质量标准的研究提供科学依据。方法:采用高效液相色谱法测定不同产地冬凌草及不同部位中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。色谱条件为Phen-omsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱;甲醇-0.3%磷酸水溶液(40∶60)为流动相;冬凌草甲素、迷迭香酸的检测波长分别为238 nm、329 nm。结果:冬凌草甲素、迷迭香酸的平均加样回收率分别为97.1%、99.3%,RSD分别为2.8%、2.9%。结论:本方法精密度高,分离度良好,可用于测定冬凌草中冬凌草甲素和迷迭香酸的含量。     

HPLC切换波长法同时测定冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素含量

目的建立冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素的含量测定方法,为冬凌草片质量标准的研究提供科学依据.方法采用高效液相色谱切换波长法同时测定冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素的含量.色谱条件为phenomsil C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)柱,流动相甲醇-0.3%磷酸水溶液(4060);检测波长前21 min为329 nm,21 min后为238 nm.结果此方法线性良好,迷迭香酸和冬凌草甲素的平均加样回收率分别为97.8%,96.7%;RSD分别为1.9%.2.3%.结论本方法精密度高,分离度良好,可用于测定冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素的含量.     

冬凌草组织培养物中主要次生代谢产物积累动态的研究

冬凌草Rabdosia rubescens(Henmsl.)Hara为唇形科香茶菜属多年生植物。许多学者对冬凌草化学成分、药理作用及临床疗效进行了研究,发现其中主要抗癌、抗菌活性成分为二萜类化合物(冬凌草甲素、冬凌草乙素)和多酚类化合物迷迭香酸,并对其作了较深入的研究[1-3]。萜类物质积累与     

冬凌草甲素衍生物的制备和评价

目的 为研究冬凌草甲素的构效关系,对冬凌草甲素进行结构修饰,合成其衍生物,并评价其细胞毒活性.方法 经常规提取分离得到冬凌草甲素(Ⅰ);通过氧化和酰基化,制备冬凌草甲素衍生物,所获产物采用NMR和MS确证结构;采用MTT法观察衍生物的细胞毒活性.结果 制备了6个冬凌草甲素的衍生物,分别为14-乙酰基冬凌草甲素(Ⅱ)、1,14-二乙酰基冬凌草甲素(Ⅲ)、14一对甲苯磺酰基冬凌草甲素(Ⅳ)、1-氧代冬凌草甲素(Ⅴ),14-乙酰基-1-氧代冬凌草甲素(Ⅵ)、14-对甲苯磺酰基-1-氧代冬凌草甲素(Ⅶ),其中化合物Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ为3个新化合物.初步药理实验表明部分衍生物细胞毒活性高于冬凌草甲素.结论 首次评价了1-氧代冬凌草甲素衍生物的细胞毒活性,其活性高于冬凌草甲素.     

民族药文王一支笔不同药用部位止血作用的筛选研究

目的:探讨文王一支笔不同药用部位(花序、花茎、根茎)水煎液的止血作用。方法:将实验动物随机分为空白对照组,云南白药组,文王一支笔根茎、花茎、花序三个不同部位给药组(每个部位再分为高、低剂量组),连续给药5d后,采用断尾法测定小鼠出血时间,毛细管法测定小鼠凝血时间,且测定大鼠血浆复钙时间。结果:与空白组比较,云南白药组、文王一支笔花序和花茎高低剂量组出血时间、凝血时间与血浆复钙时间均明显缩短(P<0.05或P<0.01);文王一支笔根茎的作用不显著。结论:文王一支笔花序和花茎水煎液均有较好的止血、促凝血作用,根茎的作用次之。     

光质对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物的影响

目的 研究不同光质对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物积累的影响.方法 将再生植株置于不同光质的培养箱中,观察不同光质下再生植株的生长情况,并测定其中的次生代谢产物(冬凌草甲素、迷迭香酸)的含量.结果 绿光最有利于冬凌草再生植株生长及其体内冬凌草甲素和迷迭香酸的积累,其次为白光;红光对于冬凌草再生植株的生长及次生代谢产物的积累均不利.结论 不同光质对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物(冬凌草甲素和迷迭香酸)积累均有很大影响.     

荆芥穗炭及其有效部位对大鼠凝血系统影响的实验研究

目的:考察荆芥穗炭及其有效部位对大鼠凝血系统的影响,筛选荆芥穗炭的止血活性部位并初步探讨其止血作用的机理。方法:以SD大鼠为研究对象,观察荆芥穗炭及其提取部位对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(FIB)的影响。结果:荆芥穗炭品组、荆芥穗炭品鞣质组均可缩短实验动物凝血酶原时间(PT)(P<0.01、P<0.05)、活化部分凝血活酶时间(APTT)(P<0.05、P<0.05)、凝血酶时间(TT)(P<0.05、P<0.05),同时均能提高血浆中纤维蛋白原(FIB)的含量(P<0.05、P<0.05),荆芥穗炭品乙酸乙酯组能缩短实验动物活化部分凝血活酶时间(APTT)(P<0.05),荆芥穗生品则无明显影响(P>0.05)。结论:荆芥穗炭品及其鞣质部位通过影响实验动物的内、外源性凝血途径的共同发挥其止血作用,荆芥穗炭品乙酸乙酯提取物通过影响内源性凝血系统发挥止血作用。     

火棘提取物对血液凝固的影响

本实验对火棘浸膏和火棘浸膏的不同极性段进行了小鼠玻片法测凝血时间、体外血浆复钙时间和凝血酶原时间的研究,结果表明火棘浸灌胃给药可显著缩短小鼠的玻片凝血时间（P＜0．05）,体外给药可明显缩短血浆复钙时间（P＜0．01）和血浆血酶原时间（P＜0．01,P＜0．50）;而火棘浸膏的不同极性段中,氯仿相灌胃人药后缩短小鼠的玻片凝血时间（P＜0．01）及体外给药缩短血浆复钙时间（P＜0．01）和血浆凝血酶原时间（P＜0．01）作用最为显著,其次是乙酸乙酯相（P＜0．01,P＜0．05）,而石油醚相（P＞0．05）无此作用,由此可筛选出火棘凝血活性部位在氯仿和乙酸乙酯相,石油醚相无凝血活性。     

瓮安产冬凌草化学成分的研究

目的:研究瓮安产冬凌草的化学成分。方法:用硅胶柱色谱进行分离纯化,根据理化性质、光谱数据及与标准品对照等方法鉴定化合物的结构。结果:从冬凌草甲醇提取物中分离鉴定了5个化合物。结论:从冬凌草甲醇提取物中分离到的5个化合物,分别为熊果酸(1),β-谷甾醇(2),贵州冬凌草甲素(3),卢氏冬凌草甲素(4),卢氏冬凌草乙素(5)。     

Box-Behnken效应面法结合微遗传算法优化夏枯草的提取工艺

目的:优化夏枯草中迷迭香酸的超声提取工艺,确定工艺参数的最优范围。方法:以乙醇体积分数、液固比、提取时间为考察因素,迷迭香酸提取率为评价指标,采用Box-Behnken效应面法进行试验设计并建立数学模型,采用微遗传算法对该模型进行优化,得到提取工艺参数最优范围。结果:夏枯草中迷迭香酸的最佳提取工艺为超声功率200 W,超声频率53k Hz,乙醇体积分数(50.03±1.21)%,液固比(48.28±2.27)m L·g~(-1),提取时间(47.34±1.43)min。迷迭香酸提取率0.301%。结论:Box-Behnken效应面法和微遗传算法联用时优化的迷迭香酸工艺提取率高,能得到具有浮动范围且不影响提取率、容易在生产中实现的工艺参数,可为中药提取工艺的研究提供参考。     

黄连水煎液中固体微粒对小檗碱在体肠吸收特性的影响研究

目的考察黄连水煎液中不同固体微粒组分对有效成分小檗碱在体肠吸收的影响。方法以高速离心法去除黄连水煎液中较大粒径固体微粒;以大孔弱碱性阴离子交换树脂对上清液中固体微粒进一步分离;以大鼠在体肠吸收模型评价黄连水煎液中固体微粒对小檗碱肠吸收特性的影响。结果小檗碱在小肠各肠段均有吸收,空肠段吸收最好,吸收速率常数(Ka)和有效渗透系数(Peff)分别为(3.587 9±0.005 2)×10-4/s和(4.529 4±0.009 7)×10-5 cm/s;黄连水煎液经高速离心分离和离子交换色谱柱分离后,得到粒径相近、电位差异较大的微粒P1[粒径(272.7±25.2)nm,电位(-6.85±0.16)m V]和P2[粒径(264.8±21.4)nm,电位(-18.20±0.71)m V];在体肠循环灌注实验表明,微粒P1可显著提高小檗碱的在体肠吸收[Ka为(5.853 6±0.970 1)×10-4/s、Peff为(8.082 4±1.004 2)×10-5 cm/s]。结论黄连水煎液中固体微粒可以显著增加小檗碱的肠吸收,其中微粒表面电位可能是微粒影响小檗碱肠吸收的因素之一。     

冬凌草1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶(DXR)基因克隆与分析

目的:为研究冬凌草二萜类合成的相关基因,在冬凌草转录组信息数据的基础之上,以冬凌草无菌苗为研究材料,克隆冬凌草二萜类合成的关键酶1-脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶(l-deoxy-D-lxyluloses-phosphatereduetoisomerase,DXR)基因。方法:采用逆转录PCR技术克隆冬凌草DXR基因,实时荧光定量PCR法分析其组织表达模式。结果:DXR c DNA基因全长1 500 bp,DXR基因开放阅读框为1 422 bp,编码473个氨基酸组成的蛋白质序列,理论相对分子质量为51.39 k Da,等电点为6.09,是一种亲水性蛋白。DXR在茎中表达量相对较高,在愈伤组织中表达量最低。结论:研究结果为深入研究冬凌草DXR酶的活性和功能及为冬凌草二萜类化合物的生物合成机制、优良基因挖掘奠定基础。     

莱菔子提取液中萝卜苷的大鼠肠吸收特性考察

目的:考察莱菔子水提液中萝卜苷在大鼠小肠的吸收特性。方法:采用大鼠在体单向肠灌流法考察不同药物质量浓度(0.02,0.05,0.1 g·mL-1)对萝卜苷肠吸收特性的影响,计算吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)。采用HPLC测定萝卜苷含量,流动相0.1%磷酸溶液-乙腈(87∶13),检测波长225 nm。结果:萝卜苷在pH 5.12的K-R试液中稳定性最好。不同质量浓度的莱菔子水提液中萝卜苷在大鼠小肠的Ka分别为(7.750±1.744)×10-3,(7.204±1.045)×10-3,(7.148±0.837)×10-3min-1,Papp分别为(1.519±0.507)×10-3,(1.504±0.617)×10-3,(1.592±0.345)×10-3cm·min-1,均无显著性变化。结论:萝卜苷为易吸收成分,在大鼠小肠中的吸收机制为被动扩散。     

注射用双黄连粉针在大鼠体内的药代动力学分析

目的： 建立HPLC同时测定绿原酸、连翘酯苷A和黄芩苷的血药浓度,探析注射用双黄连粉针中3种成分在大鼠体内的药代动力学特征。方法： 采用HPLC同时测定绿原酸、连翘酯苷A和黄芩苷含量,以葛根素为内标,流动相乙腈（A）-0.1%磷酸（B）梯度洗脱（0~10 min,10%~20% A;10~35 min,20%~35% A;35~40 min,35% A;40~40.5 min,35%~10% A;40.5~55 min,10% A）,绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷和葛根素的检测波长分别为328,328,277,249 nm。结果： 绿原酸和连翘酯苷A在0.2~20 mg·L^-1、黄芩苷在2.0~300 mg·L^-1线性关系良好（r>0.999 4）;日内和日间精密度的RSD均<13.6%,低、中、高3个质量浓度样品的方法回收率在88.3%~109.3%,提取回收率均>80.8%。绿原酸、连翘酯苷A和黄芩苷的主要药动学参数AUC_0-t分别为（8.406±1.175）,（9.696±2.349）,（145.35±22.02） mg·h·L^-1;MRT_0-t依次为（0.619±0.105）,（0.634±0.115）,（0.456±0.068） h;t1/2 Z分别为（0.532±0.064）,（0.732±0.357）,（0.542±0.175） h;Vz分别为（0.384±0.050）,（0.673±0.422）,（0.324±0.072） L·kg^-1;CL_Z分别为（0.504±0.067）,（0.634±0.150）,（0.426±0.066） L·h^-1·kg^-1。结论： 该方法灵敏、简便、准确,适用于大鼠血浆中绿原酸、连翘酯苷A和黄芩苷的测定及注射用双黄连粉针的药代动力学研究。     

不同剂量人参茎叶总皂苷对阿司匹林大鼠体内药动学的影响

[目的]研究不同浓度人参茎叶总皂苷对阿司匹林在大鼠体内代谢物水杨酸药动学的影响。[方法] 30只SD大鼠随机均分为阿司匹林单用组,低、中、高剂量人参茎叶总皂苷与阿司匹林单次联用组,中剂量阿司匹林与人参茎叶总皂苷长期联用组,通过灌胃给药后,分别于灌胃后0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8、10 h经眼眶取血0.5 mL,采用HPLC-UV分析检测大鼠血浆中阿司匹林代谢物--水杨酸的血药浓度,并通过DAS3.0软件的非房室模型计算水杨酸的药代动力学参数,比较各组之间的参数。[结果]与阿司匹林单用组相比,低剂量(20 mg/kg)和中剂量(40 mg/kg)的人参茎叶总皂苷对阿司匹林在大鼠体内药动学无显著影响,但高剂量(80 mg/kg)的人参茎叶总皂苷与阿司匹林联用后,水杨酸在体内的C_(max)以及AUC_((0-t))显著增加,V与CL显著降低(P0.05);长期服用中剂量人参茎叶总皂苷,亦可显著增加水杨酸在体内的C_(max)以及AUC_((0-t))。[结论]在一定剂量范围(40~80 mg/kg)内,人参茎叶总皂苷可以增加阿司匹林在体内的血药浓度,增加其生物利用度,且存在一定的剂量相关性和时间相关性。     

冬凌草滴丸与复方冬凌草含片治疗复发性口腔溃疡疗效对比

目的:观察冬凌草滴丸和复方冬凌草含片对复发性口腔溃疡患者的治疗效果。方法:选取本院口腔科2013年6月—2014年12月收治的复发性口腔溃疡患者82例作为研究对象,随机分为对照组40例和观察组42例。观察组予以冬凌草滴丸口服治疗,同时服用复方冬凌草含片模拟剂;而对照组则口服复方冬凌草含片,同时服用冬凌草滴丸模拟剂。治疗6 d后,对两组患者各临床症状的量化指标以及治疗效果进行评估。结果:治疗6 d后,两组患者的总积分均明显降低,与治疗前相比差异极其显著(P0.01),观察组患者总积分的改善程度虽相对对照组稍为明显,但组间差异不显著(P0.05);观察组有效率为90.5%,稍高于对照组的87.5%,但两组间的差异无统计学意义(P0.05)。结论:冬凌草滴丸和复方冬凌草含片均能有效改善复发性口腔溃疡患者的各项症状,且疗效接近。     

丹红注射液联合西药治疗呼吸衰竭

目的:探讨丹红注射液联合西药治疗呼吸衰竭临床疗效。方法:对本院收治的80例呼吸衰竭患者资料进行分析,根据不同治疗方案将患者分为对照组和实验组各40例,对照组采用西药治疗,实验组在对照组治疗的基础上联合丹红注射液治疗,比较两组疗效及血浆黏度,血浆乳酸,动脉血氧分压(Pa O2),动脉血氧饱和度(Sa O2),动脉血二氧化碳分压(Pa CO2)等指标。结果:实验组95%患者疗效确切,高于对照组(85%)(P0.05);实验组95%对治疗方案满意,高于对照组(65%)(P0.01);实验组红细胞聚集指数为(1.35±0.10),血浆黏度为(4.18±0.25)m Pa·s,红细胞比容为(0.41±0.07),纤维蛋白原为(3.14±1.20)g·L-1,低于对照组(P0.05);实验组p H指标为(7.47±0.07),Pa O2指标为(75.77±8.32)mm Hg,高于对照组(P0.05);实验组Pa CO2指标为(46.49±4.54)mm Hg,低于对照组(P0.05);实验组治疗后6 min步行距离为(372.5±57.3)m,长于对照组(P0.05);实验组不良反应发生率为7.5%,显著低于对照组(不良反应发生率为17.5%)(P0.05)。结论:呼吸衰竭发病率较高,临床上采用丹红注射液联合西药治疗理想,值得推广使用。     

透骨消痛胶囊单次与多次给药对大鼠体内药代动力学行为的影响

目的:开展透骨消痛胶囊单次和多次给药后大鼠体内药代动力学研究,探讨不同给药方式时血药浓度与药动学相关参数的关联性,为中药复方的临床合理用药提供参考。方法:将120只SD大鼠随机分为单次给药组和多次给药组,灌胃透骨消痛胶囊后,根据吸光度与波长曲线下面积(吸波面积)和总固体整体成分的总浓度成正比的特点,采用吸波面积法测定该胶囊中整体药物成分的含量。血药浓度数据用DAS 2.0药动学软件处理,按房室模型拟合并求算单次给药组的药动学参数和多次给药组的稳态血药浓度。结果:透骨消痛胶囊单次给药后,药峰浓度(Cmax)(10.200±0.586)mg·L-1,达峰时间(tmax)(0.515±0.054)h,消除半衰期(t1/2)(1.318±0.049)h,药时曲线下面积(AUC0-24 h)(13.054±0.422)mg·h·L-1;多次给药6 d后血药浓度达稳态,稳态血药浓度(Cav),波动度(DF),稳态药-时曲线下面积(AUCss)分别为(4.073±0.282)mg·L-1,1.166±0.175,(48.878±1.931)mg·h·L-1。结论:透骨消痛胶囊多次给药后整体药物成分的血药浓度变化处于较好的稳态过程,与单次给药的体内行为较一致,说明该制剂临床剂量的确定较为合理。     

肉苁蓉不同提取部位改善肾阳虚大鼠性能力的影响

目的:观察肉苁蓉不同提取部位对氢化可的松致肾阳虚模型大鼠性能力的影响。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、阳虚模型组、肉苁蓉总寡糖组、肉苁蓉总多糖组、肉苁蓉苯乙醇总苷组。连续14 d肌肉注射氢化可的松制备肾阳虚动物模型,给药组按肉苁蓉生药量2.3 g·kg-1对应给予肉苁蓉总寡糖103.82 mg·kg-1,肉苁蓉总多糖115.64 mg·kg-1,肉苁蓉苯乙醇总苷201.48 mg·kg-1水溶液,每日1次。14 d后测定各组大鼠的勃起潜伏期,交配能力各指标(包括捕捉潜伏期、捕捉次数、射精潜伏期、射精次数、捕捉率、射精率等),脏器湿重及精浆果糖含量,血浆环磷酸腺苷(c AMP)/环磷酸乌苷(c GMP)值,血清激素睾酮(T),雌二醇(E2),促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH)及促性腺激素释放激素(GnRH)水平,观察睾丸病理形态变化。结果:肉苁蓉不同提取部位对肾阳虚大鼠的勃起功能、交配能力、脏器湿重及精浆果糖含量,血浆c AMP/c GMP值,血清激素水平,睾丸病理形态变化均有作用。其中肉苁蓉苯乙醇总苷提取物能够显著缩短大鼠的勃起潜伏期(P0.05)及捕捉潜伏期(P0.01),显著增加捕捉次数(P0.01),睾丸(P0.05),精囊腺(P0.01)湿重及精浆果糖含量(P0.05),显著升高血浆c AMP/c GMP值(P0.01)及血清T(P0.01),FHS(P0.01),GnRH(P0.05)水平,显著降低血清E2(P0.05),LH(P0.05)水平,显著改善睾丸病理形态。结论:肉苁蓉不同提取部位可通过调控氢化可的松致肾阳虚大鼠模型的激素水平不同程度提高其性能力,其中苯乙醇总苷可显著改善肾阳虚大鼠性能力相关指标。