急性白血病细胞中原癌基因c－myc的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ在急性白血病中的表达及意义。方法应用免疫印渍及免疫细胞化学染色技术检测ｃ－ｍｙｃ原癌基因在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中的表达，以ＨＬ６０细胞作为阳性对照，正常人外周血淋巴细胞作为阴性对照，参照Ｇｒｅｉｌ等（１９８９）所建立的方法对ｃ－ｍｙｃ在急性白血病细胞中的表达进行定量，并对实验数据进行ｔ检验及相关分析。结果ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中均有表达，阳性率分别为５０％和６３％，ＡＬＬ和ＡＮＬＬ病人白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中的表达水平并不一样，部分病人同一病例在不同白血病细胞上ｃ－ｍｙｃ蛋白分布和表达不同。ＡＬＬ和ＡＮＬＬ白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关（分别ｒ＝０．８８，Ｐ＜０．０１，及ｒ＝０．８，Ｐ＜０．０１），和患者年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数均无相关性。结论ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中表达差异无显著性，急性白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达与患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关。ｃ－ｍｙｃ表达高的患者，治疗效果较差。ｃ－ｍｙｃ在急性白血     

急性白血病患者骨髓细胞体外培养及其临床意义

作者报告了４８例急性白血病患者的骨髓髓系白血病细胞集落（ＡＭＬＣＦＵ）和粒－单核细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵ）体外培养的结果。结果表明，急非淋白血病治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数比缓解组高，而ＧＭ－ＣＦＵ比缓解组低，差异显著。观察１４例急非淋白血病患者治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数与预后的关系，发现ＡＭＬ－ＣＦＵ丛／集比值具有判断预后的价值，ＡＭＬ－ＣＦＵ数与此无关。本文还提出，ＡＭＬ－ＣＦＵ培养用于微小残余白血病的诊     

急性白血病患者骨髓细胞体外培养及其临床意义

作者报告了４８例急性白血病患者的骨髓髓系白血病细胞集落（ＡＭＬ－ＣＦＵ）和粒－单核细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵ）体外培养的结果。结果表明，急非淋白血病治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数比缓解组高，而ＧＭ－ＣＦＵ比缓解组低，差异显著。观察１４例急非淋白血病患者治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数与预后的关系，发现ＡＭＬ－ＣＦＵ丛／集比值具有判断预后的价值，ＡＭＬ－ＣＦＵ数与此无关。本文还提出，ＡＭＬ－ＣＦＵ培养用于微小残余白血病的诊断必须结合形态观察。     

髓系过氧化物酶基因表达对急性白血病分型的意义

目的：比较基因分型和免疫分型在急性白血病（ＡＬ）诊断分型中的意义。方法：用光敏生物素标记髓系过氧化物酶（ＭＰＯ）ｃＤＮＡ探针,以链亲和素－胶体金细胞原位杂交（ＩＳＨ－ＳＡＧ）研究了５４例ＡＬ ＭＰＯｍＲＮＡ基因表达,并同时分析了ＡＬ的免疫表型。结果：１３例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）有１例表达ＭＰＯ基因;所有髓系均不同程度的表达ＭＰＯ基因,３例急性髓系白血病（ＡＭＬ）－Ｍｏ均表达ＭＰＯ基因。结论：ＭＰＯｍＲＮＡ敏感性强,对确认ＡＭＬ－Ｍｏ有重要意义,将基因分型和免疫分型结合分析,对ＡＬ更精确的诊断分型有重要意义。     

P—170蛋白过度表达与髓细胞性白血病预后的关系

为探讨髓细胞性白血病（ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）患者Ｐ－１７０ 白过度表达与预后的关系。用免疫组-伦ＬＳＡＢ法（ｌａｂｅｌｌｅｄ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎ ａｓｓａｙ）检测６６例急性性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅ欤铮椋? ｌｅｕｋｅｍｉａ,ＡＭＬ）及２０例慢性髓细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ,ＣｍＬ）患者外周血单个核细胞的Ｐ－１７０蛋白表     

Quox—1基因在人类白血病骨髓细胞中的表达

Ｑｕｏｘ－１是从５ｄ胚岭鹌鹑的ｃＤＮＡ文中克隆的同源盒基因,属于Ｃｌａｓｓ １ Ｈｏｘ基因家族的特别成员,至今未分离出其人类同源基因。用免疫细胞化学技术（ＳＰ法）检测了４２例人白血病患者骨髓细胞的Ｑｕｏｘ－１表达,结果发现１０例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）全部阳性,染色部位在细胞核,而在慢性髓性白血病（ＣＭＬ）、慢性淋巴细胞性白血病（ＣＬＬ）,急性髓细胞白血病（ＡＭＬ,包括Ｍ１￣Ｍ７）中表达低甚     

白血病患者外周血白细胞介素2膜受体的表达

目的为探讨白血病患者外周血单个核细胞（ＰＭＮＣ）上白细胞介素２膜受体（ｍＩＬ－２Ｒ）的表达及临床价值。方法采用流式细胞仪对１４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ），２６例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ），１９例有骨髓异常增生综合症病史的ＡＭＬ（ＭＤＳ－ＡＭＬ）及２６例慢粒急变（ＣＭＬ·ＢＣ）患者的ＰＭＮＣ上ｍＩＬ－２Ｒ的表达进行了检测。结果ＭＤＳ－ＡＭＬ及慢粒急粒变患者ｍＩＬ－２Ｒ的表达明显高于ＡＭＬ（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。慢粒急淋变患者ｍＩＬ－２Ｒ的表达明显高于ＡＬＬ（Ｐ＜０．０５）。ｍＩＬ－２Ｒ阳性ＡＭＬ及ＡＬＬ患者对化疗反应性较差。结论ｍＩＬ－２Ｒ的表达可能为ＭＤＳ－ＡＭＬ，ＣＭＬ·ＢＣ的一个特征，并可作为估计ＡＭＬ、ＡＬＬ疗效的一项指标     

P-170蛋白过度表达与髓细胞性白血病预后的关系

为探讨髓细胞性白血病（ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ）患者Ｐ－１７０ 蛋白过度表达与预后的关系,用免疫组化ＬＳＡＢ法（ｌａｂｅｌｌｅｄ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎ ａｓｓａｙ）检测６６ 例急性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ,ＡＭＬ）及２０ 例慢性髓细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ, ＣＭＬ）患者外周血单个核细胞的Ｐ－１７０ 蛋白表达。结果表明,初治组ＡＭＬ患者Ｐ－１７０ 表达率为２６．５％ （９／３４）;难治／复发组为６８．４％ （１３／１９）,比初治组明显增高（Ｐ＜ ０．００５）;完全缓解组为２３．１％ （３／１３）,与初治组差异无显著性。诱导化疗Ｐ－１７０＋ 者完全缓解（ＣＲ）率为２２．２％ （７／９）,Ｐ－１７０－ 者为８０％ （２０／２５）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．００３６）。ＣＭＬ慢性或加速期８ 例患者无１ 例Ｐ－１７０ 表达,急变期患者Ｐ－１７０ 表达率为５０％ （６／１２）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．０４２）。提示Ｐ－１７０ 蛋白过度表达是髓细胞性白血病化疗耐药和不良预后的标志     

急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因c—myc的表达

研究急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达及临床意义。方法采用蛋白质免疫印渍和单克隆抗体免疫细胞化学染色方法检测３０例ＡＮＬＬ细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达。结果１９例表达阳性，阳性率为６３％。ＡＮＬＬ中白血病细胞的阳性细胞百分率为２９％－９６％，ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中表达水平不一样；ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关，和患者年龄，性别，外周血白细胞计数。     

急性髓细胞白血病伴骨髓三系细胞增生异常与骨髓增生异常 …

目的 探讨急性髓细胞白血病伴骨髓三系细胞增生异常（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）与骨髓增生异常综合征转化的急性髓细胞白血病（ＡＭＬ／ＭＤＳ）间的差异。方法 对１０３例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）及８９例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）进行血常规、骨髓像形态学观测和临床分析,检出１３例ＡＭＬ／ＴＭＤＳ和１０例ＡＭＬ／ＭＤＳ进行对照研究。结论 ＡＭＬ／ＴＭＤＳ是ＡＭＬ的一种亚型。     

IFN-α及其联合GMCSF对CML患者骨髓细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 :探讨IFN α及IFN α联合GM CSF调节慢性期慢性粒细胞白血病 (CML CP)患者骨髓单个核细胞(MNCs) bcr abl,bcl 2 和 c myc基因表达的影响。方法 :淋巴细胞分离液离心富集 14例CML CP患者骨髓MNCs,经干扰素 α(IFN α)及IFN α联合粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)培养 2 4h后 ,采用相对定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)及扩增片段光密度扫描分析bcr abl,bcl 2 ,c myc及β actin 基因表达水平 ,配对t检验统计分析组间差异。结果 :IFN α(2 0 0U·ml-1)及IFN α(2 0 0U·ml-1)联合GM CSF(10ng·ml-1)均显著抑制bcr abl基因表达 ;IFN α部分抑制 c myc及 bcl 2 基因表达 ;GM CSF在IFN α作用的基础上部分促进 bcr abl及 c myc基因表达和显著抑制 bcl 2 基因表达。结论 :IFN α及IFN α联合GM CSF均可抑制抗凋亡基因bcr abl和bcl 2基因表达 ,并调节c myc基因表达水平。通过促进细胞凋亡而抑制恶性克隆增长是IFN α或IFN α联合GM CSF治疗CML的可能作用机制。     

Cyr61基因与慢性粒细胞白血病的相关性研究

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中富半胱氨酸61基因（Cyr61）的表达水平及其临床意义。方法应用半定量RT PCR和免疫组化技术分别检测38例CML患者和10例正常对照者（正常对照组）骨髓单个核细胞中Cyr61mRNA和蛋白水平的表达情况,CML患者中慢性期20例（慢性期组）,加速期11例（加速期组）,急变期7例（急变期组）。结果38例CML患者中,慢性期组、加速期组、急变期组Cyr61mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.05)。Cyr61基因在加速期及急变期的表达高于慢性期(P<0．05),Cyr61基因在加速期和急变期的表达虽升高,但两者差异无统计学意义(P>0．05)。Cyr61蛋白在CML中的表达明显高于正常对照组,CML加速期和急变期中Cyr61蛋白的表达高于慢性期（P均<0．05）。结论Cyr61基因参与了CML的发生、发展过程,且与CML的急变有关,可作为预示CML急变的实验依据。     

自体树突状细胞用于慢性粒细胞白血病骨髓净化的初步研究

目的 考察慢性粒细胞白血病（CML）树突状细胞（DC）刺激自体骨髓T细胞,清除白血病细胞的作用。方法 采用3例CML病人（2例慢性期和1例急变期）外周血,分离单个核细胞（PBMNC）,经塑料贴壁后在含自体血浆、重组人白介素4（rhIL－4)、重组人粒－单集落刺激因子（rhGM－CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNFα）的RPMI－1640培养液。37℃CO2孵箱培养10天,或用免疫磁珠从PBMNC分离DC,在含自体血浆、rhGMCSF和rhTNFα的RPMI1640培养液培养3天,收获的细胞即DC加到含rhIL－2的Dexter骨髓长期培养体系,置37℃,5％CO2孵箱培养7天,观察前后骨髓细胞的免疫表型和P210阳性细胞比例。结果 从CML病人外周血获得的DC大多数表达P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210阳性细胞减少,但在急性期病例,体系中P210细胞明显增加。结论 CML病人的DC表达P210,能刺激自体骨髓中T细胞增生,在慢性期病人,这些自体DC活化的骨髓T细胞有清除白血病细胞的作用。     

黄连解毒汤通过抑制血红素加氧酶-1发挥逆转慢性粒细胞白血病加速期的作用

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDT)对慢性粒细胞白血病(CML)加速期的治疗作用,以及HLJDT及其主要活性成份之一的黄芩素对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法:通过对1例CML的患者口服HLJDT治疗6个月的观察,外周血检查和骨髓穿刺分析治疗前后外周血象和骨髓象的变化;流式细胞术分析HLJDT和黄芩素对CML细胞系K562的活细胞计数的影响;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测患者骨髓单个核细胞HO-1基因的表达;蛋白印记检测经黄芩素处理后K562细胞HO-1蛋白的表达水平。结果:口服HLJDT对CML加速期的治疗有效,可明显降低骨髓和外周血原始粒细胞和早幼粒细胞数,使疾病重新回复到慢性期;并且在体内能降低肿瘤细胞HO-1基因的表达,在体外,HLJDT能抑制K562细胞的增殖,且其主要成份黄芩素亦有相同作用,并且下调HO-1蛋白的表达。结论:HLJDT具有治疗CML加速期的作用,其机理与抑制HO-1基因和蛋白的表达有关;因此,HLJDT具有潜在的临床应用价值。     

甲磺酸伊马替尼治疗3例Ph阳性慢性髓性白血病达细胞遗传学缓解后的疾病转化

目的:观察Ph阳性慢性髓性白血病(Philadelphia chromosome-positive chronic myelogenous leukemia, Ph CML)患者在甲磺酸伊马替尼治疗达细胞遗传学缓解后的疾病进展. 方法:对3例伊马替尼单药治疗有效的Ph CML患者,包括第1次慢性期(例1)、第2次慢性期(例2)和加速期(例3)各1例,在治疗前及持续治疗后定期监测其血液学和细胞遗传学(G显带方法)变化. 结果:例1、例2和例3分别在伊马替尼治疗4个月、3个月和6个月时获得完全细胞遗传学缓解(complete cytogenetic remission, CCyR),但在随后的12个月、6个月和0个月(即服药的第16个月、9个月和6个月)时,分别发生了急性淋巴细胞白血病、急性髓性白血病和皮肤软组织髓外急变,同期骨髓染色体检查显示:例1和例3未检出Ph 细胞,呈完全正常核型,例2 Ph 细胞仅占20%. 结论:伊马替尼治疗Ph CML获得CCyR后,患者仍可发生Ph阴性(Philadelphia chromosome-negative, Ph-)或Ph-为主的急性白血病或髓外急变.     

慢性粒细胞性白血病P-gp和Bcl-2表达及与病情进展的关系

目的 对多药耐药基因mdr-1基因产物P-糖蛋白(P-gp)和抑凋亡基因Bel-2产物Bel-2蛋白及与慢性粒细胞性白血病(CML)病情之间的关系进行分析。方法 用流式细胞仪检测慢粒白血病患者Pogp和Bel-2蛋白的表达，并分析其与CML病情的关系。结果 CML加速期／急变期Bel-2阳性率(77．78％)明显高于慢性期(41．17％)，有显著性差异(P＜0．05)；在加速期／急变期P-gp阳性率(44．44％)高于慢性期(29．14％)，但无显著差异(P＞0．05)。结论 Bel-2参与CML急变过程，高表达的Bc1-2可作为预示CML急变的实验依据。     

慢性粒细胞白血病端粒酶活性检测的临床意义

目的 探讨端粒酶活性检测对慢性粒细胞白血病（CML）的临床意义。方法 选取20例慢性期和10例急性转化期（加速期或急变期）的CMI,病例,以良性血液病病人和正常人作对照,采用改良TRAP一银染法及亚利恩凝胶成像系统分析检测其骨髓标本内的端粒酶活性水平并随访。结果 良性血液病端粒酶阴性或低水平表达;CMI。慢性期端粒酶活性中等增高（F=36．38,q=5．84,P〈0．01）,阳性率达35％（7／20）;急性转化期时端粒酶活性较慢性期显著升高（q=12．06,P〈0．01）,阳性率达80％（8／10）。端粒酶活性水平与CML预后相关,活性高者往往预后较差。结论 端粒酶活性与CML的发生发展密切相关。端粒酶活性检测可以作为CML诊断、病程监测及预后判断的一个有用的生物学指标。     

类高雪氏细胞在慢性粒细胞白血病中的意义

目的：探讨慢性粒细胞白血病（CML）骨髓中出现类高雪氏细胞的意义。方法：利用形态学及细胞化学染色检查94例CML患者和63例类白血病反应患者的骨髓涂片;检测49例CML患者骨髓的Ph染色体;分析94例CML患者出现急变期或加速期的情况。结果：94例CML患者的骨髓涂片中有29例找到类高雪氏细胞,而类白血病反应患者的骨髓涂片中未找到类高雪氏细胞;CML患者Ph染色体的阳性率为91．8％（45／49）;65例无类高雪氏细胞的CML有21例处于急变期或加速期（急性期17例,加速期4例）,而9例有类高雪氏细胞的CML有2例发生急变,两组间有显著差异（P＜0．01）。结论：类高雪氏细胞的出现对CML的诊断及预后有重要价值。     

慢性粒细胞白血病骨髓细胞的SFRP2基因启动子高甲基化

目的 研究慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)骨髓细胞SFRP2基因启动子甲基化状态,探讨SFRP2基因启动子甲基化在CML发病机制中的作用.方法 分别采用RT-PCR、甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测CML细胞系K562细胞...