原位末端标记法检测双歧杆菌的完整肽聚糖诱导实验性大肠癌的凋亡

完整肽多糖（Ｗｈｏｌｅｐｅｐｔｉｄｏｇｌｙｃａｎ，ＷＰＧ）是双歧杆菌细胞壁的最主要成分，在体内能抑制多种肿瘤的发生与发展，但其抑瘤机制尚未完全阐明［１］．ＷＰＧ对肿瘤细胞凋亡的影响尚未见报道．本文以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型，用原位末端标记法（Ｉｎｓｉｔｕｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，ＩＳＥＬ）观察了大肠癌移植瘤凋亡细胞的分布及其数量，旨在探讨它的抑瘤机制．１　材料和方法１．１　材料　ＢＡＬＢ／ｃ（ｎｕ／ｎｕ）６～８周龄，♀，体重约１８ｇ～２２ｇ，购于本校实验动物中心，并饲养于其ＳＰＦ级动物室．ｄＮＴ…     

HLA-DR-DQ连锁基因单倍体与成人缓慢进展型和速发型1型糖尿病的相关性研究

目的探讨ＨＬＡＤＲＤＱ连锁基因单倍体与成人缓慢进展型１型糖尿病（ＳＰＩＤＤＭ）和速发型１型糖尿病（ＦＰＩＤＤＭ）的相关性。方法利用ＰＣＲ／ＳＳＰ技术检测了５２例ＳＰＩＤＤＭ患者、３０例ＦＰＩＤＤＭ患者和１３０例正常人的ＨＬＡＤＲＤＱ连锁基因频率。结果①ＨＬＡＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０２０１和ＤＱＡ１０５０１ＤＱＢ１０２０１连锁基因单倍体与ＳＰＩＤＤＭ（Ｐｃ＜０．００１）和ＦＰＩＤＤＭ（Ｐｃ＜０．００１）均呈显著正相关；②ＨＬＡＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０３０１和ＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０６０２连锁基因单倍体与ＳＰＩＤＤＭ呈显著正相关（Ｐｃ＜０．００１）；③ＨＬＡＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０３０２，ＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０３０３及ＤＲＢ１０３０１ＤＱＡ１０３０１ＤＱＢ１０２０１连锁基因单倍体与ＦＰＩＤＤＭ呈显著正相关（前二者Ｐｃ＜０．０１，后者Ｐｃ＜０．００１）。结论ＳＰＩＤＤＭ和ＦＰＩＤＤＭ虽然均为自身免疫性糖尿病，但其ＨＬＡ表型并不完全相同，不同的ＨＬＡ表型可能是决定患者起病方式及病情发展不同的因素之一。     

原发性肝癌患者外周血中甲胎蛋白mRNA的意义

目的由于ＰＣＲ技术的应用,血循环中癌细胞的检测近有很大进展．本文用ＲＴＰＣＲ检测肝癌（ＨＣＣ）和其他慢性肝病患者外周血中ＡＦＰｍＲＮＡ,藉以反映ＨＣＣ细胞的存在,并与其他血清标记物比较．方法ＨＣＣ患者２２例,肝硬变和慢性乙型肝炎患者各１０例,健康成人受试者（对照）５例．取患者和对照的外周血,分离单核细胞,提取总ＲＮＡ并作电泳鉴定,用合成的两对引物进行巢式ＲＴＰＣＲ扩增ＡＦＰｍＲＮＡ,同时分析血清ＡＦＰ和乙肝标记物．结果ＡＦＰｍＲＮＡ在１３例ＨＣＣ（５９１％）,２例肝硬变（２００％）患者外周血中测到,其余标本均为阴性．ＡＦＰｍＲＮＡ阳性的１３例患者肿瘤均大于５ｃｍ,为晚期患者．在该１３例患者中仅有６例（４６１％）在血清中测到ＡＦＰ,但有１２例（９２３％）ＨＢｓＡｇ,抗ＨＢｅ,抗ＨＢｃ全阳性,而ＡＦＰｍＲＮＡ阴性的５例该３标记物全阴性．结论ＲＴＰＣＲ扩增ＡＦＰｍＲＮＡ是检测ＨＣＣ和肝硬变患者循环肝癌细胞的敏感方法．患者外周血中的ＡＦＰｍＲＮＡ有可能作为肿瘤转移和复发的标记对ＨＣＣ诊断、随访观察和疗效评定有较大临床意义．     

病毒性肝病患者庚型肝炎病毒感染状况研究

为了解庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在各型病毒性肝病中的感染状况,我们对１０５５例病毒性肝病患者开展了相应研究．１　材料和方法１．１　材料　各型病毒性肝病患者１０５５例,系１９９６０６／１９９９０２的住院患者．其中ＨＧＶ感染者１７９例,男１２８例,女５１例,年龄２７岁±３岁．临床及血清病原学分型诊断标准按１９９５年５月北京会议修订的诊断标准．１．２　方法　抗ＨＡＶＩｇＭ,ＨＢＶＭ（ＨＢｓＡｇ,ＨＢｓＡｂ,ＨＢｅＡｇ,ＨＢｅＡｂ,ＨＢｃＡｂ及ＩｇＨＢｃＡｂ）,抗ＨＣＶ,抗ＨＤＶ及抗ＨＥＶＩｇＭ…     

抗恶性疟原虫有性期单克隆抗体的制备和鉴定

以培养的恶性疟原虫ＮＦ５４（３Ｄ７）株配子体蛋白抽提液及我国云南现场采集的恶性疟原虫细胞骨架分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取免疫小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，以ＩＦＡ法筛选出８株抗恶性疟原虫有性期ＭｃＡｂ杂交瘤细胞株。经免疫球蛋白类别鉴定，６株为ＩｇＧ１（Ｍ２Ａ１０Ｃ９、Ｍ２Ｃ１Ｂ８、Ｍ４Ｃ７Ｂ１０、Ｍ４Ｇ１２Ｃ１、Ｍ５Ｂ７Ｅ６和Ｍ６Ｅ１Ｇ１１），２株为ＩｇＭ（Ｍ４Ｄ７Ｆ７和Ｍ６Ｆ４Ｄ６）。其中３株ＭｃＡｂｓ（Ｍ４Ｃ７Ｂ１０、Ｍ４Ｄ７Ｆ７和Ｍ６Ｅ１Ｇ１１）的靶抗原定位于配子体以及大滋养体和裂殖体期无性体原虫；其余５株仅定位于配子体。经Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹试验，ＭｃＡｂ所识别的蛋白区带各异（１６－１２０ｋＤ），与已发现的有性期特异性抗原相比较，３２ｋＤ抗原国内外尚未报道。各株ＭｃＡｂ与猴疟（Ｐ．ｃｙｎｏｍｏｌｇｉ）红内期、鸡疟（Ｐ．ｇａｌｉｎａｃｅｕｍ）子孢子和杜氏利什曼原虫前鞭毛体均无交叉反应。     

血小板活化因子对体外培养肝细胞的作用

血小板活化因子（ｐｌａｔｅｌｅｔａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＰＡＦ）是一具有广泛生物活性的脂质递质,与内毒素有着密切的关系,后者对肝脏的损害较为明确［１］．新近我们研究发现ＰＡＦ在各型病毒性肝炎中特别是重症肝炎患者显著增高,与肝细胞坏死程度及血中内毒素水平呈正相关,提示ＰＡＦ参与了内毒素介导的肝脏损害［２］．但ＰＡＦ对体外肝脏细胞是否有损害作用目前尚未见报道．１　材料和方法１．１　材料　胶原酶、链酶蛋白酶、ＰＡＦ标准品、内毒素（ＬＰＳ,Ｏ１１１：Ｂ４）为Ｓｉｇｍａ公司产品,ＲＰＭＩ１６４０…     

二丙酸倍氯米松吸入治疗慢性喘息型支气管炎52例分析

为了探讨二丙酸倍氯米松（ＢＤＰ）吸入是否可改善慢性喘息型支气管炎（慢喘支）患者的肺通气功能，随机选取５２例慢喘支患者，加用ＢＤＰ２００～６００μｇ每天气道内吸入，连续使用１个月。治疗前和疗程结束时检查肺通气功能和动脉血气分析。结果：治疗后患者临床症状改善，总有效率（临床控制＋显效）４６２％，治疗前ＦＥＶ１（１秒钟用力呼气量）、ＰＥＦ（最大呼气流量）、ＦＶＣ（最大肺活量）分别为（０８７±０．４４）Ｌ、（２．０７±１．１０）Ｌ／ｓ、（１．５０±０．６５）Ｌ，治疗后分别为（１．０７±０．５３）Ｌ、（２．８６±１．１３）Ｌ／ｓ、（１．６８±０．６５）Ｌ，治疗前Ｐａｃｏ２为（６．０８±１．６９）ｋＰａ，治疗后Ｐａｃｏ２为（５．３７±１．１０）ｋＰａ，Ｐ值均＜００１。口腔真菌感染略增加（Ｐ＞００５），未见全身性副作用。说明低剂量ＢＤＰ气道内雾化吸入可改善慢喘支患者的通气功能。     

特异性抗肝癌噬菌体单链抗体库的构建及鉴定

噬菌体单链抗体（ＳｃＦｖ）弥补了传统ＭｃＡｂ制备繁琐、抗原性强、穿透力弱等不足,为ＨＣＣ临床和基础研究提供新的手段。我们用基因工程技术和噬菌体表面呈现技术构建和筛选特异性抗ＨＣＣ噬菌体ＳｃＦｖ库。 １．材料与方法：（１）抗ＨＣＣ噬菌体ＳｃＦｖ库的构建：应用ＨＣＣ细胞常规免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,从其脾脏提取ｔＲＮＡ并纯化ｍＲＮＡ,逆转录合成ｃＤＮＡ,ＰＣＲ扩增抗体轻链和重链可变区,应用ｌｉｎｋｅｒ－（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３装配ＳｃＦＶ基因,在其５’端和３’端分别引入内切酶ＳｆｉＩ和ＮｏｔＩ酶切位点,连接…     

EGF受体和转化生长因子α mRNA在人大肠癌组织的表达意义

目的研究表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）及转化生长因子α（ＴＧＦα）在人大肠癌三组不同组织中的表达，探讨其在大肠癌发生发展中的作用．方法分别取１４例大肠癌患者癌瘤组织、癌旁２ｃｍ及１０ｃｍ之全层肠管，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法分别检测ＥＧＦＲ和ＴＧＦαｍＲＮＡ表达．结果大肠癌三组１４例不同组织中均有ＥＧＦＲ和ＴＧＦαｍＲＮＡ不同程度表达，以癌旁组织中表达为最强，同一病例比较，癌远侧组织中表达呈减弱趋势．癌远侧组织中，３例Ａ，Ｂ两期杂交信号明显弱于其他例Ｃ，Ｄ期信号．结论ＥＧＦＲ，ＴＧＦα在大肠癌发生发展中起重要作用，其ｍＲＮＡ表达与Ｄｕｋｅｓ分期相关，可望作为大肠癌恶性程度的指标．其在癌远侧组织中表达减弱的趋势提示是否可作为肿瘤手术切缘的评估指标，尚有待进一步的研究．     

螺旋CT诊断结肠癌30例

结肠癌是消化道常见恶性肿瘤，其检查手段目前仍以钡灌肠及纤维结肠镜（ｆｉｂｅｒｏｐｔｉｃｃｏｌｏｎｏｓｃｏｐｙ，ＦＣ）为主．我院１９９８０８以来，对３０例结肠癌患者进行了螺旋ＣＴ扫描，并与钡灌肠、ＦＣ及手术病理所见对比，旨在探讨螺旋ＣＴ对结肠癌的临床应用价值．１　材料和方法１．１　材料　结肠癌患者３０例（男２２例，女８例），平均年龄５８－１岁（４８岁～７７岁）．临床症状：腹痛、腹胀２１例，便血１５例，大便习惯改变７例，贫血９例，腹部包块９例，乏力、消瘦２８例．钡灌肠２３例，ＦＣ２６例，全部病例均…     

间质性肺疾病支气管肺泡灌洗液中性粒细胞趋化因子和肿瘤坏死因子水平及其临床意义

目的探讨间质性肺疾病（ＩＬＤ）时中性粒细胞趋化因子（ＮＣＦ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）与ＩＬＤ活动性的关系。方法用膜滤过和放射免疫法检测１１例结节病、７例特发性肺间质纤维化（ＩＰＦ）患者和８名健康者血清及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＮＣＦ活性及ＴＮＦα水平。结果７例ＩＰＦ患者ＢＡＬＦ中ＮＣＦ、ＴＮＦα分别为２０３±４４ｃｅｌｓ／１０ＨＰ、１１７±２９ｎｇ／Ｌ，明显高于８名对照组（８３±４５ｃｅｌｓ／１０ＨＰ、６５±１４ｎｇ／Ｌ、Ｐ＜０．０１）；１１例结节病患者ＢＡＬＦ中ＮＣＦ、ＴＮＦα分别为１８６±５０ｃｅｌｓ／１０ＨＰ、１２±３ｎｇ／Ｌ，明显高于８名对照组（Ｐ＜０．０１）。ＩＰＦ组ＢＡＬＦ中ＮＣＦ、ＴＮＦα均与中性粒细胞百分比呈正相关（ＮＣＦ：ｒ＝０．８９，Ｐ＜０．０１，ＴＮＦα：ｒ＝０．８６，Ｐ＜０．０５），结节病组ＢＡＬＦ中ＮＣＦ、ＴＮＦα均与淋巴细胞百分比呈正相关（ＮＣＦ：ｒ＝０．７８，Ｐ＜０．０１；ＴＮＦα：ｒ＝０．７３，Ｐ＜０．０１）。结论ＩＰＦ和结节病患者ＢＡＬＦ中ＮＣＦ、ＴＮＦα水平可做为肺泡炎活动性的标志     

冠状动脉旁路移植术后发生心房颤动的相关因素分析

目的：分析国人冠状动脉旁路移植（ＣＡＢＧ）术后心房颤动（ＡＦ）的高危因素。　　方法：回顾我院近３ 年在体外循环下进行ＣＡＢＧ术患者６８６ 例,对可能与术后ＡＦ发生有关的诸因素进行卡方检验和Ｌｏｇｉｓｔｉｃ多因素回归分析,以找出与ＣＡＢＧ术后ＡＦ发生相关的高危因素。　　结果：６８６例患者中,１４０ 例（２０．４％ ）并发了ＣＡＢＧ术后ＡＦ。ＡＦ的发生与年龄,术前ＡＦ史及术前心房早搏关系密切（Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归Ｐ＝ ０．００３,０．００１,０．０４６）。而与性别,心肌梗塞,体外循环时间,阻断时间,术前术后射血分数等诸因素无关（卡方检验及Ｌｏｇｉｓｔｉｃ Ｐ＞ ０．０５）。　　结论：ＡＦ同样是国人ＣＡＢＧ术后常见并发症。高龄、术前ＡＦ史及术前心房早搏是其高危因素     

乙型肝炎病毒X蛋白对NFкB启动子和增强子反式激活作用

应用杆状病毒穿梭质粒载体与ＨＢＶＸ表达质粒共转染ＨｅＰＧ２细胞,研究ＨＢＶＸ蛋白对杆状病毒载体中的ＮＦкＢ启动子和增强子反式激活作用,作为进一步杆状病毒载体应用研究的基础。 １．材料与方法：（１）为构建ＮＦкＢ启动子和增强子驱动的氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）报告基因质粒,合成寡核苷酸引物 Ｆ１含ＮＦкＢ启动子、增强子序列（３０ ｂｐ）及 ＣＡＴ启动于 ５’末端序列（２０ｂｐ）,引物 Ｆ２含 ＣＡＴ基因 ３’端序列,以ｐｃＤＮＡ ３．１／ＣＡＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）质粒为模板, ＰＣＲ扩增获得ＮＦкＢ启动子…     

C-erbB-2基因产物及PCNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义

本文用免疫组织化学的方法，联合检测大肠癌患者的ｃｅｒｂＢ２基因产物和ＰＣＮＡ的表达，旨在探讨其在大肠癌患者的表达特点及其在疾病诊断、分期及预后判断方面的应用价值．１材料和方法１．１材料６４例大肠癌患者中男３６例，女２８例，年龄３１岁～６７岁，平均...     

血清a-L-岩藻糖苷酶对原发性肝癌的诊断价值

１９８０年Ｄｅｕｇｎｉｅｒｅｔａｌ［１］首先发现肝癌患者血清ＡＦＵ活性明显高于正常人，为诊断原发性肝癌（ＰＨＣ）提供了新的指标．现将我们进行ＡＦＵ（ａＬ岩藻糖苷酶）活性检测的结果报告如下．１材料和方法１．１材料共观察１５７例，包括①正常对照组２１...     

炎症性肠病患者树突状细胞的免疫功能研究

研究炎症性肠病（ＩＢＤ）患者外周血树突状细胞（ＤＣ）的免疫功能,探讨ＤＣ免疫功能变化在ＩＢＤ发生中的作用。方法：以健康成人（ｎ＝１０）作为对照,自ＩＢＤ患者（ｎ＝１１）外周血中分离和纯化ＤＣ及Ｔ细胞,按间接免疫荧光法通过流式细胞仪检测ＤＣ表面ＨＬＡ－ＤＲ及Ｂ７－１的表达水平,检测ＤＣ诱导自体混合Ｔ淋巴细胞增殖反应的能力。结果：ＩＢＤ患者 ＤＣ表面 ＨＬＡ－ＤＲ、 Ｂ７－１的表达水平及 ＤＣ诱导自体混合 Ｔ淋巴细胞增殖的能力（１９．６ＶＯＦ±１．３ＶＯＦ,１８．７ＶＯＦ±１．６ＶＯＦ,１２３１０ｃｐｍ±１４６ｃｐｍ）明显高于对照组（１３．６ＶＯＦ±１．２ＶＯＦ,１２．８ＶＯＦ±１．４ＶＯＦ,Ｐ＜０．０５,８６６０ｃｐｍ±１２０ｃｐｍ,Ｐ＜０．０１）。结论： ＩＢＤ患者ＤＣ免疫功能亢进。提示ＤＣ免疫功能亢进可能与ＩＢＤ的发生及发展相关。     

慢性病毒性肝炎CD44/CD54及Fas/FasL表达的意义

细胞粘附分子及Ｆａｓ／ＦａｓＬ与病毒性肝炎的关系研究国外已有较多报道［１－６］,而国内研究尚较少［７,８］．我们采用免疫组化技术对３３例慢性乙型肝炎和１５例丙型肝炎组织中粘附分子ＣＤ４４和ＣＤ５４及Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达进行原位观察,以探讨它们间的关系及在乙肝病毒和丙肝病毒致肝细胞慢性损伤中的作用．１　材料和方法１．１　材料　选自我院肝活检标本,经组织学和免疫组化证实慢性病毒性（ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＣＶＮＳ５Ａｇ阳性）４０例,其中乙型肝炎３３例,慢性活动性肝炎１９例（简称慢活肝）;慢性迁…     

c-myc和p53在大肠腺瘤与大肠癌中的表达

目的探讨癌基因ｃｍｙｃ和ｐ５３在大肠腺瘤和大肠癌中的表达情况，及与临床病理特征的关系．方法采用免疫组化ＡＢＣ法，检测３９例大肠癌和３７例大肠腺瘤的ｃｍｙｃ表达，及６３例大肠癌和４０例大肠腺瘤的ｐ５３表达情况．结果大肠腺瘤３７例的ｃｍｙｃ阳性表达为６２２％（２３／３７），大肠癌３９例的ｃｍｙｃ阳性表达为８２１％（３２／３９）．而ｐ５３在大肠腺瘤和大肠癌的阳性表达则为４５０％（１８／４０）和８４１％（５３／６３）．ｃｍｙｃ和ｐ５３在大肠腺瘤和大肠癌中的表达均有显著的统计学意义（Ｐ＜００１）．但两个癌基因的表达均不相关于临床病理特征．结论ｃｍｙｃ与ｐ５３的异常表达大肠癌的演变过程中均有增加，而且两者起协作作用     

5-FC/CD 系统对荷大肠癌裸鼠肿瘤的杀伤效应

目的研究ｃｄ基因对大肠肿瘤的特异杀伤作用，探索自杀基因靶向治疗大肠癌的有效途径．方法逆转录病毒感染法将Ｇ１ｃｅａｃｄＮａ及ｐｃｄ２分别转导入高分泌ＣＥＡ的大肠癌细胞Ｌｏｖｏ中，再分别接种到裸鼠皮下．成瘤后腹腔给予５ＦＣ（５００ｍｇ／ｋｇ）治疗，观察肿瘤重量的变化及病理学特点．结果含Ｇ１ｃｅａｃｄＮａ及ｐｃｄ２逆转录病毒载体的病毒滴度分别为：１３×１０７及２１×１０８ＣＦＵ／Ｌ．所有转基因成功并接种动物均成瘤．腹腔给予５ＦＣ治疗后发现，转由ＣＥＡ基因顺式转录调控序列（ＴＲＳ）驱动ｃｄ基因的组织特异性重组逆转录病毒载体Ｇ１ｃｅａｃｄＮａ的肿瘤对５ＦＣ的敏感性明显高于转非ｃｅａ调控ｃｄ基因的肿瘤，治疗结束后肿瘤重量分别为３１ｍｇ±８ｍｇ及１１３ｍｇ±２３ｍｇ（Ｐ＜００１）．结论本实验提示ｃｅａ转录调控序列可控制ｃｄ基因在ＣＥＡ阳性的大肠癌组织中高效表达，进而在前药５ＦＣ的作用下发挥选择性杀伤肿瘤的作用     

熊脱氧胆酸促进肝脏部分切除后肝细胞再生

目的 探讨熊脱氧胆酸（ｕｒｓｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃ ａｃｉｄ，ＵＤＣＡ）对胆道梗阻肝脏部分切除（ＰＨ）后肝细胞再生的影响。方法Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为正常７０％肝部分切除组（Ｎ－ＰＨ）、胆道梗阻２周７０％ＰＨ组（ＢＤＯ－ＰＨ）、ＢＤＯ—ＰＨ ＵＤＣＡ治疗组及ＢＤＯ—ＰＨ生理盐水治疗组。观察肝组织学改变，检测７０％ＰＨ后肝细胞ＢｒｄＵ标记、肝内肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体Ｍｅｔ ｍＲＮＡ表达。结果 ＵＤＣＡ治疗能促进胆道梗阻后肝功能好转并减轻肝组织学病变；ＵＤＣＡ治疗组大鼠７０％ＰＨ后肝内ＨＧＦ／Ｍｅｔ ｍＲＮＡ高峰表达值均高于ＢＤＯ—ＰＨ组（Ｐ ＜ ０．０５），肝细胞 ＢｒｄＵ高峰标记指数（５９．３９±１０．８２）％高于 ＢＤＯ—ＰＨ组肝细胞 ＢｒｄＵ高峰标记指数（３６．２２±８．３７％（ｔ＝４．１４９，Ｐ＜０．０１），而与Ｎ－ＰＮ组肝细胞ＢｒｄＵ高峰标记指数（６８．６４±１１．２６％）％相比差异无显著性（ｔ＝１．４５１，Ｐ＞０．０５）。结论 ＵＤＣＡ通过缓解胆道梗阻后肝组织损害并上调７０％ＰＨ后肝内ＨＧＦ／Ｍｅｔ ｍＲＮＡ表达，从而促进胆道梗阻肝脏部分切除后肝细胞再生。