p73基因在肝细胞癌中的表达及其临床意义

背景:p73基因是新发现的一种抑癌基因,其在肿瘤发生、发展中的作用尚不明确.目的:探讨p73基因在肝细胞癌中的表达、突变程度及其与临床预后的关系.方法:采用定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测35例肝细胞癌和配对癌旁组织,以及10例转移淋巴结和10例正常淋巴结组织中p73基因的表达;采用内含子PCR产物StyⅠ酶切分析法调查标本的杂合性;采用PCR-单链构象多态性(SSCP)检测p73基因的突变情况.结果:35例肝细胞癌组织中有26例p73 mRNA呈高表达,癌旁组织则呈低表达,两者表达率有显著差异(P＜0.01);20例中高分化癌组织中有13例p73 mRNA呈中高表达,15例低分化癌组织中有13例p73 mRNA呈中高表达,两者阳性率之间有显著差异(P＜0.01);18例Ⅰ～Ⅱ期肝细胞癌标本中有9例p73 mRNA呈中高表达,17例Ⅲ～Ⅳ期肝细胞癌标本中p73 mRNA均呈中高表达,两者阳性率之间有显著差异(P＜0.05).10例转移淋巴结组织中p73 mRNA均呈高表达,而10例正常淋巴结组织中均呈低表达,两者之间有显著差异(P＜0.01).12例杂合性肝细胞癌组织标本中,有10例p73基因存在G/C:A/T双等位基因表达,在癌旁组织中则均为G/C表达,未见A/T表达.肝细胞癌和癌旁组织中未见p73基因突变.结论:p73基因的表达与肝细胞癌的分化程度、临床分期和预后有关,突变可能不是p73基因起作用的主要方式.     

抑癌基因PTEN及p53在肝细胞肝癌中表达的免疫组化研究

为探讨肝细胞肝癌组织中抑癌基因PTEN及p53蛋白的表达情况及临床病理意义。应用免疫组织化学技术检测了41例肝细胞肝癌及其相应的癌旁组织中PTEN和p53蛋白的表达情况。41例癌旁组织PTEN全部阳性表达,肝细胞肝癌组织中PTEN阳性表达率39％,阳性信号显示于胞浆中。p53阳性表达率51％,PTEN蛋白在肝细胞肝癌组织中的阳性表达与组织分化程度明显相关,高分化癌的阳性率为73％,低分化癌阳性率27％。肝细胞肝癌细胞中存在较高比例的PTEN蛋白阴性表达,说明在肝细胞肝癌的发生发展中PTEN基因失活起着重要作用,它的阳性表达可能有一定的预后意义。     

KAll基因在肝硬化和肝细胞癌组织中的表达及其意义

目的研究转移抑制基因KAIl在肝硬化和肝细胞癌组织中的表达及该基因与肝细胞癌患者临床资料间的关系.方法采用Northern blot方法研究20例肝细胞癌组织、14例肝硬化组织和10例正常肝组织中KAll基因mRNA的表达水平,经mRNA的定量分析及统计处理判定KAIl基因与肝细胞癌患者临床特征的关系.结果肝硬化和肝细胞癌组织中KAll mRNA表达水平(0.113±0.110;0.139±0 078)显著低于正常肝组织中的表达(0.316±0.121),(P=0.0003;P=0.0000);肝硬化和肝细胞癌组织中KAll基因mRNA的表达无显著差异(p=0.4152);KAIlmRNA在不同分化程度的肝细胞癌组织中的表达无显著差异(P=0.8261),而Ⅲ期肝细胞癌组织中的KAll基因表达显著低于Ⅱ期的肝细胞癌组织(P=0.0221)结论转移抑制基因KAI1在肝硬化阶段亦有低表达;肝癌组织中KAI1基因的低表达与肝癌的转移有关.     

肝癌中细胞凋亡水平和p73基因转录表达的研究

目的　通过观察肝癌组织 ,对应癌旁组织和远癌肝组织中细胞凋亡及p73基因转录表达水平的变化 ,探讨细胞凋亡及p73基因转录表达水平与肝癌发生、发展的关系。方法　采用TUNEL及RT_PCR技术检测 3 2例乙肝相关肝癌癌组织、癌旁组织 ,以及良性肝脏疾病和对应正常肝组织细胞凋亡和p73mRNA的表达水平 ,并结合临床病理学资料进行统计学分析。结果　①肝癌癌组织中的凋亡指数明显高于癌旁组织和远癌组织 (P <0 0 1) ,细胞凋亡水平与肝癌组织学类型和P_TNM分期无明显关系 (P >0 0 5) ;②肝癌组织p73mRNA表达水平和表达率明显高于癌旁肺组织、远癌组织和肝良性病变组织 (P <0 0 1) ;③组织中凋亡指数的升高和p73基因转录表达水平的增加呈显著的正相关 (P <0 0 1)。结论　肝癌组织中存在细胞调亡水平的升高和p73基因的过度转录表达     

p73基因蛋白表达与老年人肺癌临床病理学特征及预后关系的探讨

目的探讨p73基因蛋白与老年人肺癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化SABC法检测了65例老年人肺癌组织中抑癌基因p73基因蛋白的表达,并与癌旁组织和正常肺组织对比,同时结合肺癌的临床病理学特征及预后进行分析。结果老年人肺癌组织中p73基因蛋白阳性表达率(477%)明显高于癌旁组织(92%)和正常肺组织(46%),P<005;不同年龄组、不同类型和不同分化程度肺癌组织中p73基因蛋白的阳性表达率差异无显著性(P>005);Ⅰ期和Ⅱ期老年人肺癌组织中p73基因蛋白阳性表达率(605%)明显高于Ⅲ期和Ⅳ期(227%),P<005;生存3年或以上的老年人肺癌组织中p73基因蛋白阳性表达率(722%)明显高于生存3年以下者(160%),P<005。结论老年人与非老年人肺癌在p73基因蛋白免疫组化染色表达中有共同性,与正常肺组织或癌旁组织相比明显增加,对于进一步探讨p73基因蛋白在肺癌发生发展中的表达及调节有参考价值;p73基因蛋白表达在各型肺癌发生、发展中可能具有普遍意义,可作为判断老年人肺癌生物学行为和预后的一个参考指标。     

乙肝相关性肝癌及癌旁组织p73基因表达及突变的研究

目的　探讨p73基因在人乙肝相关性肝癌组织中的表达及其意义。方法　采用RT PCR方法检测p73基因mRNA在癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达差异 ;采用SSCP检测方法比较分析p73基因在肝癌发生中的变异情况。结果　癌组织中p73基因mRNA的转录水平明显高于癌旁组织及正常组织 (P <0 0 5 ) ;然而 ,肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中p73基因PCR扩增片段的多态性是一致的 ,电泳未见异常条带 (P >0 0 5 )。结论　新近发现的肿瘤抑制基因p73基因在乙肝相关性肝癌组织中末见明显的基因突变 ,相反表达水平明显增高 ,可见 ,p73基因以一种高表达形式参与乙肝相关性肝癌的发生     

胃小细胞癌组织中PTEN和p73基因蛋白表达与预后的关系

目的 探讨胃小细胞癌组织中PTEN、p73基因蛋白表达与临床预后的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测58例胃小细胞癌患者癌组织中PTEN和p73基因蛋白的含量,并对5 8例病人进行术后随访.结果 PTEN在局部淋巴结转移组的低表达率明显高于局部淋巴结无转移组（P＜0.01）,且随着组织学分级的增高,浸润深度的加深, 其低表达率逐渐增高（P＜0.01）,PTEN低表达组的生存时间明显低于高表达组.p73在局部淋巴结转移组的高表达率明显高于无淋巴结转移组（P＜0.05）;随着组织分级的增高 ,浸润深度的加深,其表达率增高.p73低表达组的生存时间明显高于高表达组. 结论 PTEN基因的低表达、p73基因的高表达与胃小细胞癌的发生发展和临床预后存在一定的关系.     

抑癌基因p73、FHIT和PTEN蛋白表达与中老年人肺癌发生、发展的相关性研究

目的探讨抑癌基因p73、FHIT和PTEN与中老年人肺癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化SABC法检测抑癌基因p73、FHIT和PTEN蛋白在65例中老年人肺癌组织中的表达,并与癌旁组织和正常肺组织对比,同时结合肺癌的分期及预后进行分析。结果肺癌组织中p73蛋白阳性表达率明显高于正常肺组织和癌旁组织(P<0.05),而正常肺组织和癌旁组织中FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于肺癌组织(P<0.05);Ⅰ期和Ⅱ期肺癌组织中p73、FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于Ⅲ期和Ⅳ期(P<0.05);生存3年以上者肺癌组织中p73、FHIT和PTEN蛋白阳性表达率明显高于生存3年以下者(P<0.05)。结论p73基因表达可能参与了调控肺癌的发生过程,其存在并未阻止肺癌的进展,在肺癌中可能没有担当起主要的抑癌基因;肺癌组织中存在着FHIT和PTEN基因蛋白表达的显著缺失,FHIT和PTEN基因可能参与了调控肺癌的发生过程,在肺癌发生、发展中二者可能担当着重要抑癌基因的作用。p73、FHIT和PTEN基因蛋白表达缺失在中老年人肺癌的发生、发展中可能存在着普遍意义,三者可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的参考指标。     

p73基因mRNA表达与老年人肺癌临床病理学特征及预后关系的探讨

目的 探讨p73基因与老年人肺癌发生、发展的关系。方法 采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测65例老年人肺癌组织中p73基因mRNA的表达，并与癌旁组织和正常肺组织对比，结合肺癌的临床病理学特征及预后进行分析；同时采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP）技术检测肺癌与癌旁组织中p73基因的突变情况。结果 老年人肺癌组织中p73基因mRNA阳性表达率（78．5％）明显高于癌旁组织（18．5％）和正常肺组织（12．3％）（P〈0．05）；不同年龄组、不同类型和不同分化程度肺癌组织中p73基因mRNA的阳性表达率差异无显著性（P〉0．05）；Ⅰ期和Ⅱ期老年人肺癌组织中p73基因mRNA阳性表达率（90．7％）明显高于Ⅲ期和Ⅳ期（54．5％）（P〈0．05）；生存3年或以上的老年人肺癌组织中p73基因mRNA阳性表达率（91．7％）明显高于生存3年以下者（68．0％）（P〈0．05）。结论 p73基因表达可能参与了调控老年人肺癌发生的过程，但并不能阻止肺癌的进展，可能不是主要的抑癌基因；基因突变不是p73参与肺癌发生发展的主要形式；p73基因表达在各型肺癌发生、发展中可能具有普遍意义，可作为判断老年人肺癌生物学行为和预后的一个参考指标。     

HBx与p300CBP、Smad2蛋白在乙肝相关性肝细胞癌中的表达

目的探讨HBVx蛋白(HBV x protein,HBx)与p300CBP、Smad2蛋白在乙肝相关性肝细胞癌中表达的相关性。方法通过乙肝相关性肝细胞癌组织的病理标本和转染乙肝病毒(HBV)x基因的人肝细胞株两部分试验,分别检测HBx、Smyd2、p300/CBP的表达,分析HBx、Smyd2、p300/CBP之间表达的相关性。结果较之癌旁组织,肝癌组织中HBx的表达显著增高,Smyd2、p300/CBP的表达则显著下调,差异均有统计学意义,(均P0.05)。且经Pearson相关性分析,HBx与Smyd2和p300/CBP在乙肝相关性肝细胞癌中的表达具有较高的一致性(P0.05)。结论 HBx与p300CBP、Smad2蛋白在乙肝相关性肝细胞癌中的表达之间有一定相关性。     

原发性肝细胞癌组织Smad4、p21蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌组织Smad4和p21蛋白表达及其相关性.方法 采用免疫组化法检测60例原发性肝细胞癌组织及20例癌旁组织中Smad4、p21蛋白的表达,同时结合临床资料进行分析.结果 癌及癌旁组织中Smad4蛋白阳性表达率分别为36.7%、80.0%,p21蛋白阳性表达率分别为41.7%、70.0%,两种组织Smad4和p21蛋白表达差异均有统计学意义(P＜0.01,＜0.05).癌组织中Smad4蛋白表达与组织分级、肿瘤转移有关(P＜0.05).Smad4与p21蛋白的表达呈正相关(r=0.69,P＜0,01).结论 Smad4及p21蛋白在原发性肝细胞癌组织中表达均显著下降,并与肝癌生物学行为关系密切.     

中国北方人群p14~（ARF）启动子甲基化与原发性肝癌的临床相关性

目的通过对中国北方人群原发性肝癌p14ARF启动子甲基化的分析,探讨p14ARF基因启动子甲基化与原发性肝癌的临床相关性。方法通过甲基化特异性PCR（MSP）方法检测111例原发性肝癌组织和22例癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化状况,然后与肿瘤种类、病因、病理以及肿瘤分期等临床数据进行关联。结果肝细胞癌组织及癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化频率分别为33.7%（29/86）和5.0%（1/20）,二者差异有统计学意义（P=0.010）。肝细胞癌p14ARF基因的启动子甲基化频率在不同肿瘤分期显著相关（P=0.027）,而与肿瘤细胞分化程度以及是否感染HBV无关,肝内胆管细胞癌p14ARF基因启动子甲基化频率在不同肿瘤分期、有无HBV感染以及不同肿瘤细胞分化程度之间的差异均无统计学意义。结论肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化可能是p14ARF基因失活并影响TP53功能的方式之一,p14ARF基因启动子甲基化可能与肝细胞癌发生发展相关。     

膀胱移行细胞癌组织p73蛋白表达及细胞凋亡的临床研究

p73基因产物p73蛋白与p53蛋白在结构与功能上非常相似,它可作用于p53蛋白的靶基因而导致细胞凋亡。越来越多的研究表明,恶性肿瘤的发生系调控基因突变的积累,导致细胞增殖与凋亡的失衡所致。目前对膀胱移行细胞癌组织中p73蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系研究较少。本研究采用免疫组织化学法及TUNEL技术对膀胱移行细胞癌组织中的p73蛋白的表达及细胞凋亡水平进行了检测和分析。现报告如下。     

肝细胞癌组织中VEGF和p57~（kip2）的表达及意义

目的探讨肝细胞癌血管内皮生长因子（VEGF）和有丝分裂抑制因子（p57kip2）表达特征及其在肝细胞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化二步法检测63例肝癌组织、癌旁组织和20例良性肝病组织中VEGF和p57kip2表达。结果肝癌组织中VEGF及p57kip2表达均与癌组织分化程度无关;VEGF高表达者生存期明显短于低表达者,p57kip2高表达者存活期明显长于低表达者;P均〈0.05。p57kip2表达与VEGF表达呈负相关（rs＇=-0.272 5,P=0.030 7）。结论 VEGF和p57kip2可能参与了肝细胞癌生长过程的调控,与肝细胞癌的发生发展及自然病程有关。     

Plkl与p21~（WAF1/CIP1）在肝细胞癌中的表达

目的细胞周期抑制因子p21WAF1/CIP1（p21）可在转录水平抑制Polo-like kinase1（Plk1）基因的表达,本文旨在探讨Plk1和p21蛋白在肝细胞癌中的表达及相关性。方法应用Western Blot方法检测10对原发性肝细胞癌和癌旁组织中Plk1和p21蛋白的表达情况。通过将pFlex-p21表达质粒瞬时转染人肝癌细胞系HepG2细胞,进一步检测p21过表达对Plk1mRNA和蛋白表达的影响。结果 Plk1在10例肝癌组织中的表达均高于配对癌旁组织,p21蛋白在7对肝癌组织中的表达高于配对癌旁组织。HepG2细胞瞬时表达p21质粒后,Plk1的蛋白表达和mRNA水平均无变化（P〉0.05）。结论 Plk1和p21在肝细胞癌组织中的表达具有一定的肿瘤特异性。肝癌组织中p21蛋白过表达可能不具有抑制Plk1表达的作用,具体机制还有待于进一步研究。     

Plk1与p21WAF1/CIP1在肝细胞癌中的表达

目的 细胞周期抑制因子p21<'WAF1/CIP1>(p21)可在转录水平抑制Polo-like kinase1(Plk1)基因的表达,本文旨在探讨Plk1和p21蛋白在肝细胞癌中的表达及相关性.方法 应用Westem Blot方法检测10对原发性肝细胞癌和癌旁组织中Plk1和p21蛋白的表达情况.通过将pFlex-21表达质粒瞬时转染人肝癌细胞系HepG2细胞,进一步检测p21过表达对Plk1mRNA和蛋白表达的影响.结果 Plk1在10例肝癌组织中的表达均高于配对癌旁组织,p21蛋白在7对肝癌组织中的表达高于配对癌旁组织.HepG2细胞瞬时表达p21质粒后,Plk1的蛋白表达和mRNA水平均无变化(P>0.05).结论 Plk1和p21在肝细胞癌组织中的表达具有一定的肿瘤特异性.肝癌组织中p21蛋白过表达可能不具有抑制Plk1表达的作用,具体机制还有待于进一步研究.     

p73和p51基因在结直肠癌中的表达和意义

背景：p53基因是一种肿瘤抑制基因，其家族成员p73和p51在结构上与p53具有高度同源性，影响细胞转录和凋亡的功能与p53相似。目的：研究p73和p51基因在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡和肿瘤临床病理特征的关系，探讨两者在结直肠癌发生、发展中的可能作用。方法：以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测60例结直肠癌组织和相应癌旁组织中p73、p51mRNA表达，以原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡。结果：结直肠癌组织p73、p51AmRNA表达阳性率显著高于相应癌旁组织（p73：71．7％对5．0％，P〈0．01：p51A：46．7％对11．7％，P〈0．01）：p51B mRNA在结直肠癌组织与相应癌旁组织中的相对表达量无明显差异（0．7318±0．3628对0．6836±0．3516，P〉0．05）。p73、p51A mRNA表达阳性者肿瘤细胞凋亡指数分别显著低于p73、p51A mRNA表达阴性者（p73：3．2％±2．5％对5．5％±2．8％．P=0．003；p51A：2．6％±2．3％对4．9％±2．7％，P=0．001）。p73mRNA表达与结直肠癌的分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关（P〈0．05），p51A mRNA表达仅与淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论：结直肠癌中p73、p51A基因表达上调，两者可能通过抑制肿瘤细胞凋亡而参与了结直肠癌的发生、发展。p73过表达可能与结直肠癌预后不良有关。     

大肠癌及癌旁组织中p73基因的表达

大肠癌是常见的消化道肿瘤,是多因素、多阶段、多基因共同作用的结果。目前已证实关系密切的有K-ras,C-myc,p53,APC,DCC等。p73是新近发现的基因,与大肠癌关系尚不明确,我们通过检测大肠癌及癌旁组织中的P73表达,以期探讨p73基因在大肠癌发生发展中的作用。 1 材料和方法 1.1 材料大肠癌组织40例及相应远离癌灶5cm的非癌组织     

食管鳞癌组织p16基因调控区甲基化及其蛋白表达研究

目的探讨p16基因在食管癌变过程中表达缺失与其启动子区甲基化的关系。方法采用MSP免疫组化方法,检测环太行山地区45例食管鳞癌患者癌组织p16基因启动子区甲基化状态及蛋白表达情况。结果p16基因在癌组织中表达异常41例（91．1％）,间变组织中表达异常38例（84．4％）,发生纯合型甲基化的组织分别为33例（73．3％）（癌组织）和32例（71．1％）（间变组织）,而其周围正常组织26例（57．8％）均发生了p16启动子区的杂合型甲基化。p16基因纯合型甲基化与癌组织、间变组织、p16蛋白表达缺失相关（P〈0．05）。结论该地区食管癌组织p16基因在癌前病变中p16启动子区即发生了纯合型甲基化、食管癌变的早期事件。p16基因启动子区甲基化可单独影响p16蛋白的正常表达。     

胃癌及癌旁组织p73 基因的表达

p53基因是人类肿瘤中发生变异频率最高的抑癌基因,在多种肿瘤的生物学行为中具有重要的作用。p73基因是近来发现的p53基因家族中新成员,其产物与P53蛋白具有非常相似的结构和功能,被认为是一个候选的抑癌基因;目前国内外虽有少数对胃癌及癌旁组织中p73基因表达的研究,但意见极不一致。为了解该基因在胃癌发生发展中的作用,我们应用RT-PCR技术对胃癌、癌旁及正常组织标本中p73mRNA表达水平进行了分析。