新生大鼠脑白质损害模型神经胶质细胞的凋亡及MK2、Nogo-B的表达研究

目的观察2日龄（P2）新生大鼠脑白质损害（WMD）后神经胶质细胞凋亡及丝裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶2（MK2）、Nogo-B的变化；探讨神经胶质细胞凋亡与MK2、Nogo-B变化的时相关系。方法制备新生鼠WMD模型，分别于WMD后30min、1h、4h、12h、1d、3d、7d、14d及21d处死大鼠，TUNEL法检测脑白质神经细胞凋亡，免疫组化（SP）法检测Nogo-B蛋白的表达，原位杂交（POD法）检测MK2 mRNA表达。结果WMD组大鼠凋亡指数在缺氧缺血4h、12h、1d、3d、7d组与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；WMD后1h MK2 mRNA在脑室周围白质及胼胝体区表达上调，并于损伤后3d达到高峰。Nogo-B在WMD后12h表达增加，3d达高峰，在12h、1d、3d、7d的表达与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MK2、Nogo-B在新生大鼠脑白质损害时表达增高，提示其参与了脑白质损害。     

电针对老年痴呆大鼠学习记忆和蛋白激酶C的影响

目的探讨电针对老年痴呆大鼠学习记忆功能和蛋白激酶C影响的作用机制。方法成年Wistar雄性大鼠随机分为正常纽、模型对照组、模型纽、西药纽、电针纽,每纽12只。链脲霉素（STZ）注射法造大鼠AD模型．电针治疗三个疗程。Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,免疫组化检测海马CA1区PKC蛋白表达。结果定位航行试验显示,平均逃避潜伏期比较,AD模型组明显长于正常组、模型对照组,治疗后西药组、电针组有显著提高（P〈0．01）,空间探索试验显示模型组跨平台次数少于正常组、模型对照组,治疗后西药组、电针组有显著提高（P〈0．01）。结论电针能够显著增强痴呆大鼠学习记忆功能,并且能提高海马蛋白激酶C（PKC）活性。     

小脑顶核电刺激对AD模型大鼠学习记忆能力及海马bcl-2、Bax表达影响

目的：研究淀粉样β蛋白（Aβ1-40）对大鼠空间学习记忆能力及海马区Bax和bcl-2的表达的影响及小脑顶核电刺激（Fastigial nucleus stimulation,FNS）的干预作用。方法：将Aβ1-40微量注射至大鼠右侧海马,制作大鼠AD动物模型。分别予电刺激小脑顶核、齿状核。28d后进行水迷宫试验,观察各组大鼠空间学习记忆功能改变。免疫组化法检测各组海马CA1区bcl-2、Bax蛋白表达。结果：阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）组与假手术组（SC）比较,每天隐匿平台逃避潜伏期均明显增长（P〈0．05）,海马bcl-2阳性细胞光密度明显减少（P〈0．05）,Bax阳性细胞光密度明显增高（P〈0．05）;小脑顶核电刺激（FNS）组与AD组比较,空间学习记忆能力明显改善（P〈0．05）,海马bcl-2阳性细胞光密度明显增高（P〈0．05）,Bax阳性细胞光密度明显减少（P〈0．05）,齿状核刺激（DNS）组无此作用。结论：FNS可部分改善Aβ1-40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,可能是通过促进bcl-2表达和降低Bax表达抑制海马神经细胞凋亡。     

P53、Noxa在血管性痴呆大鼠海马CA1区中表达及意义

目的观测P53、Noxa在血管性痴呆大鼠海马CA1区表达,探讨血管性痴呆的发病机制。方法经Morris水迷宫筛选出学习记忆能力处于正常值范围的雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组和模型组（各12只）,采用双侧颈总动脉结扎法制备血管性痴呆大鼠模型,手术后2个月用Morris水迷宫观测各组大鼠在空间学习记忆方面的变化,HE染色观察各组大鼠海马CA1区锥体细胞形态学变化,免疫荧光染色检测P53、Noxa在海马CA1区锥体细胞的表达。结果模型组大鼠相对假手术组大鼠平均逃避潜伏期延长（P〈0．01）,空间记忆能力减退（P〈0．01）,海马CA1区神经细胞凋亡明显,P53、Noxa在海马CA1区表达的阳性细胞数明显升高（P〈0．05）,且直线相关分析显示Noxa的表达与P53的表达呈正相关（P〈0．01）。结论海马CA1区P53和Noxa的表达升高在血管性痴呆发病机制中起重要作用。     

银杏内酯和胰岛素对拟AD模型大鼠学习记忆的影响

目的：建立拟AD大鼠模型，研究银杏内酯和胰岛素对拟AD模型大鼠学习记忆的影响。方法：采用冈田酸（OA）海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型，分为银杏内酯组，胰岛素组。银杏内酯组腹腔注射银杏内酯，胰岛素组侧脑室微量注射速效基因合成人胰岛素，分别设对照组。冈田酸末次注射2周后水迷宫行为学试验检测其学习记忆，Bielschowsky染色观察海马CA1区老年斑（SP）和神经原纤维缠结（NFT）。结果：拟AD模型组定向航行试验于第2天开始平均逃避潜伏期与对照组比较明显延长（P〈0．05或P〈0．01），空间探索试验原站台象限活动时间明显缩短（P〈0．01）；与拟AD模型组比较，银杏内酯组及胰岛素组平均逃避潜伏期明显缩短（P〈0．05或P〈0．01），原站台象限活动时间明显延长（P〈0．01）。Bielschowsky染色观察对照组大鼠海马CA1区未见明显改变，拟AD模型组大鼠海马CA1区形成NFT，细胞外有SP；银杏内酯组和胰岛素组大鼠海马CA1区少见或未见SP或NFT。结论：银杏内酯腹腔注射或胰岛素微量侧脑室注射均可减少拟AD模型大鼠海马CA1区SP和NFT的形成，减轻OA对大鼠海马的病理损害，显著改善拟AD模型大鼠学习记忆功能。     

糖尿病脑病海马神经元凋亡的实验研究

目的 检测糖尿病大鼠学习与记忆成绩及海马神经元凋亡情况，探讨糖尿病对学习与记忆影响的机制。方法 Wistar大鼠共24只，随机分成2组，对照组12只，糖尿病组12只，糖尿病组用链脲服佐菌素（STZ）制模，满12周后，用Y-迷宫检测大鼠学习与记忆成绩，处死动物取脑，应用TUNEL法、HE染色及图像分析技术对大鼠海马进行观察。结果 糖尿病组大鼠学习成绩降低（P〈0．05），海马神经元数目较正常组减少（P〈0．05），并出现TUNEL法阳性细胞。结论 海马神经元凋亡可能是糖尿病大鼠学习与记忆障碍的机制之一．     

尼莫地平对癫痫大鼠海马Ca^2＋浓度及Ca^2＋/钙调蛋白依赖性蛋白激酶K表达的影响

目的探讨尼莫地平（nimodipin，NIM）对戊四氮（pentylenetetrazol，PrZ）点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力及海马细胞内游离Ca^2＋浓度（[Ca^2＋]）、Ca^2＋／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ。（calcium／calmodulin—dependent protein kinase Ⅱn，CaMKⅡα）蛋白表达的影响。方法将动物分为正常对照组、PTZ组和NIM＋PTZ组，采用P佗慢性点燃癫痫模型，应用Mor—ris水迷宫观察各组大鼠空间学习记忆能力，运用流式细胞仪检测海马细胞内[Ca^2＋]．变化，Western blot方法测定CaMKⅡα蛋白的表达。结果PTZ组大鼠空间学习记忆能力受损，其海马细胞内[Ca^2＋]．明显升高（P〈0．05），CaMKⅡα蛋白水平较正常对照组减少（P〈0．05）；与PrZ组比较，NIM＋PrZ组大鼠空间学习记忆能力好转，其海马细胞内[Ca^2＋]．下降（P〈0．05），CaMKⅡα蛋白水平升高（P〈0．05）。结论PTZ点燃癫痫大鼠海马存在钙超载及CaMKⅡα的表达异常，由此引起大鼠空间学习记忆能力受损；NIM可以降低细胞内[Ca^2＋]．，提高CaMKⅡα的表达，改善癫痫大鼠的学习记忆能力。     

脂多糖诱导的阿尔茨海默病炎症模型的建立

目的：通过侧脑室注射脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）建立阿尔茨海默病（Alzhei mer’s disease,AD）炎症模型。方法：18只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组,先进行八臂迷宫训练,训练成功后,模型组大鼠侧脑室注射脂多糖,对照组大鼠侧脑室注射等量生理盐水,2周后进行八臂迷宫测试分析大鼠的记忆能力,之后处死大鼠,进行HE染色观察和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）免疫组化观察。结果：模型组大鼠的记忆能力明显减退,总记忆错误（TE）、参考记忆错误（RME）、工作记忆错误（WME）均明显增多,与对照组相比,P〈0.01;模型组海马出现神经元损伤;模型组大鼠海马内GFAP、TNF-α表达明显强于对照组,P〈0.01。结论：大鼠侧脑室注射LPS能够比较成功地复制AD炎症模型。     

脑灵汤对AD模型大鼠行为学及海马内APP mRNA表达的影响

目的：观察脑灵汤对Alzheimer病（AD）模型大鼠行为学及脑内海马部位β-淀粉样前体蛋白（APP）mRNA影响。方法：以D-半乳糖腹部注射合并铝盐皮下注射制作AD大鼠模型，行γ电迷宫实验检测学习记忆能力及RT-PCR法观察大鼠脑内海马APP mRNA的变化。结果：脑灵汤治疗30d后大鼠学习记忆能力较模型组和对照组明显增强（P〈0．05）；大鼠脑内海马部位APP基因mRNA表达的水平亦较模型组和对照组明显降低（P〈0．05）。结论：脑灵汤抑制和下调APP mRNA表达的水平，减少海马结构中β-淀粉样蛋白的沉积，是改善模型大鼠学习记忆的作用机制之一。     

大豆异黄酮对AD大鼠海马Apo—E4的影响

目的：探讨大豆异黄酮（SIF）对AD大鼠海马Apo—E4的影响。方法：采用Aβ双侧海马注射建立阿尔茨海默病（AD）大鼠模型,分组后给予不同剂量大豆异黄酮,Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的变化,HE染色观察大鼠海马组织形态结构变化,ELISA法测定海马组织Apo-E4含量。结果：大豆异黄酮可改善AD大鼠的学习记忆能力（P〈0．01）,减少海马神经元丢失,显著性降低Apo-E4含量（P〈0．01）。结论：大豆异黄酮可能通过降低AD大鼠海马Apo—E4的含量改善AD大鼠学习记忆能力。     

辛伐他汀对AD大鼠模型β-分泌酶活性及Aβ表达的影响

目的探讨辛伐他汀对Aβ1-40诱导阿尔茨海默病（AD）大鼠模型学习记忆能力、海马β-分泌酶活性及Aβ表达的影响。方法选用健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组,对照组、模型组、低、高剂量辛伐他汀组。除对照组双侧海马CA1区注射1μl生理盐水外,其余各组给予等容积聚集态Aβ1-40建立AD模型,并且各组按规定剂量灌胃4周。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力;ELISA法测定海马组织匀浆中β-分泌酶的活性;免疫组化法观察各组海马Aβ的表达。结果低、高剂量辛伐他汀组能改善AD大鼠学习记忆能力（P〈0.01）,降低β-分泌酶活性（P〈0.01）,减少海马Aβ的表达（P〈0.01）,而低、高剂量辛伐他汀组二者相比无明显差异。结论辛伐他汀可改善AD大鼠模型学习记忆能力,可能与降低β-分泌酶活性、减少Aβ生成有关。     

钙调神经磷酸酶抑制剂对Aβ1－42所致阿尔茨海默病大鼠学习记忆及细胞凋亡的影响

目的：探讨钙调神经磷酸酶抑制剂对β-淀粉样蛋白（Aβ1－42）所致阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆及海马区细胞凋亡的影响及可能作用机制。方法36只SD大鼠随机分为AD模型组、FK506组及对照组,每组12只。 AD模型组和FK506组采用Aβ1－42海马注射建立AD大鼠模型,FK506组以钙调神经磷酸酶抑制剂他克莫司（ FK506）干预。用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,原位末端凋亡法（TUNEL）检测凋亡细胞,实时定量PCR（RT-PCR）、免疫组化检测海马区促凋亡蛋白（Bad）、细胞凋亡蛋白酶-3（Caspase-3）的表达。结果与对照组相比,AD模型组大鼠学习记忆能力明显减退（P＜0．01）,海马CA1区神经元细胞凋亡率增高（ P＜0．05）,而FK506可改善AD大鼠的学习记忆能力,并能减少海马CA1区神经元细胞凋亡率（P＜0．05）;Bad基因转录及其蛋白表达在AD模型组与FK506组中无明显差异（P＞0．05）,而FK506可显著减少AD大鼠海马区Caspase-3的表达（P＜0．05）。结论抑制钙调神经磷酸酶激活可改善AD大鼠的学习记忆能力。 AD的发病机制可能为,活化的钙调神经磷酸酶可能通过介导Bad去磷酸化而激活Caspase-3,最终导致细胞凋亡。钙调神经磷酸酶抑制剂可通过阻断该途径来治疗AD。     

何首乌对Aβ1-40诱导的AD大鼠海马线粒体膜流动性及COX活性的影响

目的：探讨何首乌对AD模型大鼠线粒体膜流动性和COX活性的影响。方法：45只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组（n=15）。大鼠海马内注射Aβ1-40建立AD模型。Y-型迷宫实验检测AD模型大鼠的学习记忆能力。运用荧光光度计和紫外分光光度仪分别检测海马线粒体膜的黏滞系数和细胞色素氧化酶（COX）活性。结果：与对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力的下降（P〈0.01）,模型组大鼠海马线粒体膜的黏滞系数增高（P〈0.01）,细胞色素氧化酶活性明显减低（P〈0.01）;与AD模型组比较,治疗组大鼠线粒体膜的黏滞系数降低（P〈0.05）,细胞色素氧化酶活性明显增高（P〈0.05）。结论：何首乌可改善AD模型大鼠海马线粒体膜流动性,提高其细胞色素氧化酶活性。     

戊四氮点燃癫痫大鼠海马Ca^2＋浓度及CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ的表达

目的 探讨戊四氮（pentylenetetrazol,PTZ）点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力及海马细胞内游离Ca2＋浓度（[Ca2＋] i）、Ca2＋/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIα （ calcium / calmodulin-dependent protein kinase IIα, CaMKIIα） mRNA的表达.方法 动物分为正常对照组和PTZ组,采用PTZ慢性点燃癫痫模型,应用Morris水迷宫观察2组大鼠空间学习记忆能力,运用流式细胞仪检测海马细胞内[Ca2＋]i浓度变化,反转录多聚酶链反应方法测定海马CaMKIIα mRNA的表达.结果 PTZ组大鼠空间学习记忆能力受损,其海马细胞内[Ca2＋]i浓度明显升高（P〈0.05）,CaMKIIα mRNA表达水平明显降低（P〈0.05）.结论 PTZ点燃癫痫大鼠海马存在钙超载及CaMKIIα的表达异常,由此引起空间学习记忆受损.     

Ref-1在阿尔茨海默病大鼠海马CA1区表达的研究

目的：探讨Ref-1在阿尔茨海默病（AD）大鼠发病中的变化及其可能机制。方法：采用Aβ25-35单次侧脑室注射诱导AD大鼠模型，Y迷宫测定大鼠行为学变化，免疫组化法检测建模后4d、7d和14d时痴呆组、对照组大鼠海马CA1区Ref-1的表达。结果：①Aβ注射7d、14d后，痴呆组大鼠达到学习标准的训练次数、错误次数和全天总反应时间较对照组均明显增加（P〈0．05）。②痴呆组Aβ注射4d起，海马CA1区Ref-1表达开始增高（P〈0．01），随着观察时点的延长，这种表达进一步增高（P〈0．01）。结论：大鼠侧脑室注射Aβ7d可成功诱导AD大鼠模型；Ref-1的上调早于大鼠记忆障碍的发生，Ref-1可能参与了AD的发生发展。     

低氧诱导因子-1α、促红细胞生成素在血管性痴呆大鼠海马的表达

目的 观察低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和促红细胞生成素（EPO）在大鼠血管性痴呆（VD）形成过程中的动态表达规律,探讨VD发生的可能机制。方法 采用大鼠双侧颈总动脉永久性阻断法（2-VO）建立VD动物模型,应用Y型水迷宫实验测定动物的学习记忆能力,采用免疫组化法检测大鼠海马CA1区HIF-1α和EPO蛋白的表达．结果 ①随缺血时间的延长,痴呆组大鼠学习记忆能力进行性下降（P〈0．05）;②痴呆组大鼠海马CA1区HIF-1α、EPO的表达于缺血1周时最明显,此后缓慢下降,但与假手术组比较仍处于较高水平（P〈0．01）;③痴呆组大鼠两蛋白表达与学习记忆能力呈高度正相关（P〈0．01）。结论 HIF-1α和EPO参与了VD的发生发展过程,并可能在此过程中通过HIF—UEPO缺氧信号转导途径发挥了保护作用。     

IL-1β和IL-6致痫对大鼠脑内PKAcβ的影响

目的 研究白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）致痫与脑内信号分子proteinkinase Acβ（PKAcβ）的关系。方法 将实验大鼠随机分为4组：生理盐水组、IL-1β组、IL-6组、地塞米松组。行侧脑室注射相应试剂60min后观察大鼠行为学变化，并用SABC法显示各组大鼠大脑皮质及海马区PKAcβ的免疫反应变化。结果 IL-1β组、IL-6组大鼠均有明显的痫性发作，且海马PKAcβ的免疫反应均明显强于对照组，差异具有显著性意义（P〈0．05）；地塞米松组大鼠呈抑制状态，且其脑内PKAcβ表达较对照组下降，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论 在IL-1β、IL-6的致痫活动中，PKAcβ参与了其细胞内信号转导过程。     

银杏酮酯对衰老模型大鼠学习记忆及海马细胞因子的影响

目的：观察银杏酮酯（GBE50）对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆障碍及海马细胞因子含量的影响，探讨银杏提取物改善学习记忆障碍的机制。方法：将SD大鼠随机分成3组：正常组、模型组和银杏酮酯组。采用腹腔注射D-半乳糖的方法建立衰老大鼠模型；GBE50组在造模第21天开始按150mg／kg给予GBE50灌胃，每天1次，持续21d；正常组和模型组灌等量的含1％CMC—Na的蒸馏水。治疗结束后采用Morris水迷宫观察大鼠行为学变化以及放射免疫分析方法检测各组大鼠海马IL-1β、IL-6和TNF-α的含量。结果：与正常组比较，模型组逃避潜伏期明显延长，距离百分比明显减少（P〈0．05，P〈0．01）；而与模型组比较，GBE50组逃避潜伏期显著缩短。距离百分比明显增大（P〈0．05，P〈0．01）。与正常组比较，模型组大鼠海马IL-1β和TNF-α含量显著增高，IL-6含量明显降低（P〈0．05，P〈0．01）：而与模型组比较，GBE50组大鼠海马IL-1β含量明显降低，IL-6含量显著升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论：GBE50对由D-半乳糖所致衰老大鼠学习记忆障碍具有改善作用，同时对海马IL-1β、IL-6含量均有不同程度的调节作用，GBE50改善记忆障碍作用可能与抑制D-半乳糖引发的中枢神经系统免疫炎性反应有关。     

参归益智方对阿尔茨海默病大鼠海马组织VEGF、p-p38 MAPK表达的影响

目的观察参归益智方对阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)大鼠行为学障碍的改善作用并探究其作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为空白组,模型组,参归益智方低、高剂量组,每组10只。采用β淀粉样蛋白1-42双侧注射大鼠海马区诱导AD模型,通过Morris水迷宫检测AD大鼠行为学改变,采用Western blotting检测大鼠海马组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)的表达水平。结果给药4周末,参归益智方能够剂量依赖地降低AD大鼠Morris水迷宫试验的逃避潜伏期(P0.05),显著提高穿越平台次数(P0.05),剂量依赖地提高AD大鼠海马VEGF表达水平,显著降低AD大鼠海马p-p38MAPK表达水平。结论参归益智方改善AD大鼠行为学障碍的作用与其提高海马区VEGF表达,降低p-p38MAPK表达有关。     

复合型AD大鼠模型脑组织、血清及牙周组织中部分炎症因子的表达

目的初步探讨β-淀粉样蛋白1-42（Aβ1—42）及D-半乳糖（D—gal）联合构建的复合型阿尔茨海默病（AD）模型中枢神经、血清及牙周组织的炎症因子的表达。方法采用24只2月龄雄性SD大鼠,共分2组,腹腔注射及侧脑室注射生理盐水的对照组,腹腔注射D—gal联合侧脑室注射A13—42建立的复合型AD模型组。Moms水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,HE染色观察神经元数量和形态变化,ELISA方法检测脑组织各部分（皮质、海马）、血清及牙周组织中炎症因子（CRP,IL-1,IL-6,TNF-α。结果与对照组相比,复合型AD模型组大鼠海马、皮质中神经元形态皱缩,数量减少;CRP,IL-1,IL-6,TNF-α表达水平升高,血清和牙周组织中的CRP,IL-1,IL-6,TNF-α表达水平也升高〈0．01）。结论建立复合型AD模型,可较全面地模拟中枢神经炎症;牙周炎症可能参与了AD的发病进程。